2024年3月29日发(作者：强丽华)
人的外周血淋巴细胞培养及染色体制片方法、染色体组型分析
人的外周血淋巴细胞培养及染色体制片方法、染色体组型分析
一、实验背景
1、Carnoy固定液：
固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能
够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。单纯的固定液一般难以达到这些要求，因此
在实验中使用两种混合的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称其为
卡诺氏固定液。Carnoy固定液（甲醇∶冰乙酸=3∶1）每次使用前需临时配制，长时间放
置影响固定效果，固定时间15min至24h，冰箱、室温均可。必要时可改变甲醇和冰乙
酸的比例，冰乙酸比例增加，利于细胞膨胀、染色体铺展，但易导致细胞破裂、染色体散
失。
2、低渗液（hypotonic solution）
低渗液是指渗透压和离子强度均低于正常细胞生理条件的溶液，渗透压低于组织液，
与外周血混在一起时，水分迅速进入细胞，使其膨胀，甚至破裂，获得分散良好的染色体
分裂象。常见的低渗液：水、低渗的柠檬酸钠或氯化钠、甘油磷酸钾（0.65mol/L）、氯
化钾（0.075mol/L）等。低渗效果取决于低渗液的化学组成、低渗的温度和处理时间。
低渗处理是凭借反渗透作用使细胞膨胀染色体铺展，同时可使黏附于染色体的核仁物质散
开，以便能在一个平面上观察所有染色体形态。实验室中一般选用0.075mol/L KCl为低
渗液，其优点有：①染色体轮廓清楚，可染色性强，染色时间短。②用于显带染色时能充
分显示带型特点。低渗处理为37℃，25～30min，以预实验条件为准。
2、肝素
N-硫酸和艾杜糖醛酸含量较多的一种糖胺聚糖，由D-β-葡糖醛酸(或L-α-艾杜糖醛
酸)和N-乙酰氨基葡糖形成重复二糖单位组成的多糖。肝素是一种抗凝剂，是由二种多糖
交替连接而成的多聚体，在体内外都有抗凝血作用。
2、PHA
植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一种有丝分裂原，主要用于激活免疫细胞—淋
巴细胞。是一种干扰素诱导剂，不仅可以刺激机体产生白介素-2和干扰素；还可以刺激机
体产生非特异性抗体。由于其较难提纯，且成本极高，所以一直以来仅在实验室中作为刺
激淋巴细胞增殖的试剂。
3、青霉素和链霉素
青霉素：青霉素是抗菌素的一种，是指从青霉菌培养液中提制的分子中含有青霉烷、
能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是第一种能够治疗
人类疾病的抗生素。
链霉素对许多革兰阴性杆菌有抗菌作用。链霉素对葡萄球菌属及其他革兰阳性球菌的
作用差。链霉素的作用在PH值为7.8时最强，PH值降至6或6以下时则大大减弱。四
环素作用机制为药物能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位置结合，抑制肽链的增长
和影响细菌蛋白质的合成。
2024年3月29日发(作者：强丽华)
人的外周血淋巴细胞培养及染色体制片方法、染色体组型分析
人的外周血淋巴细胞培养及染色体制片方法、染色体组型分析
一、实验背景
1、Carnoy固定液：
固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能
够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。单纯的固定液一般难以达到这些要求，因此
在实验中使用两种混合的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称其为
卡诺氏固定液。Carnoy固定液（甲醇∶冰乙酸=3∶1）每次使用前需临时配制，长时间放
置影响固定效果，固定时间15min至24h，冰箱、室温均可。必要时可改变甲醇和冰乙
酸的比例，冰乙酸比例增加，利于细胞膨胀、染色体铺展，但易导致细胞破裂、染色体散
失。
2、低渗液（hypotonic solution）
低渗液是指渗透压和离子强度均低于正常细胞生理条件的溶液，渗透压低于组织液，
与外周血混在一起时，水分迅速进入细胞，使其膨胀，甚至破裂，获得分散良好的染色体
分裂象。常见的低渗液：水、低渗的柠檬酸钠或氯化钠、甘油磷酸钾（0.65mol/L）、氯
化钾（0.075mol/L）等。低渗效果取决于低渗液的化学组成、低渗的温度和处理时间。
低渗处理是凭借反渗透作用使细胞膨胀染色体铺展，同时可使黏附于染色体的核仁物质散
开，以便能在一个平面上观察所有染色体形态。实验室中一般选用0.075mol/L KCl为低
渗液，其优点有：①染色体轮廓清楚，可染色性强，染色时间短。②用于显带染色时能充
分显示带型特点。低渗处理为37℃，25～30min，以预实验条件为准。
2、肝素
N-硫酸和艾杜糖醛酸含量较多的一种糖胺聚糖，由D-β-葡糖醛酸(或L-α-艾杜糖醛
酸)和N-乙酰氨基葡糖形成重复二糖单位组成的多糖。肝素是一种抗凝剂，是由二种多糖
交替连接而成的多聚体，在体内外都有抗凝血作用。
2、PHA
植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一种有丝分裂原，主要用于激活免疫细胞—淋
巴细胞。是一种干扰素诱导剂，不仅可以刺激机体产生白介素-2和干扰素；还可以刺激机
体产生非特异性抗体。由于其较难提纯，且成本极高，所以一直以来仅在实验室中作为刺
激淋巴细胞增殖的试剂。
3、青霉素和链霉素
青霉素：青霉素是抗菌素的一种，是指从青霉菌培养液中提制的分子中含有青霉烷、
能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是第一种能够治疗
人类疾病的抗生素。
链霉素对许多革兰阴性杆菌有抗菌作用。链霉素对葡萄球菌属及其他革兰阳性球菌的
作用差。链霉素的作用在PH值为7.8时最强，PH值降至6或6以下时则大大减弱。四
环素作用机制为药物能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位置结合，抑制肽链的增长
和影响细菌蛋白质的合成。