2024年4月1日发(作者：费飞荷)
人教(2019)生物选择性必修三(学案+练习)
微生物的选择培养和计数
1．微生物的选择培养
(1)选择培养基：将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类
微生物生长的培养基。
(2)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌
液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。
①系列稀释操作
系列稀释：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应离火焰1～2 cm。
操作过程如下：
②涂布平板操作
序号
1
2
3
4
将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼
烧，待酒精燃尽后，冷却8～10 s
用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基
表面。涂布时可转动培养皿，使菌液涂
布均匀
将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中
图示 操作
取0.1 mL菌液，滴加到培养基表面
③培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37 ℃的恒
温培养箱中培养1～2 d。
2．微生物的数量测定
1/15
(1)稀释涂布平板法
①计数原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，
来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品
中大约含有多少活菌。
②计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计
数。
③计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落
数为30～300、适于计数的平板。在同一稀释度下，至少应对3个平板进行重复
计数，然后求出平均值。
④统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连
在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计结果一般用菌落数表示。
(2)显微镜直接计数法
①计数原理：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、
计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。
②优点：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。
③缺点：统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。
3．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1．利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数。
2．培养分解尿素的细菌，培养基的pH会增大。
( × )
( √ )
3．筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源，且为液体培养基。
( × )
4．利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数。
( × )
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2024年4月1日发(作者：费飞荷)
人教(2019)生物选择性必修三(学案+练习)
微生物的选择培养和计数
1．微生物的选择培养
(1)选择培养基：将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类
微生物生长的培养基。
(2)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌
液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。
①系列稀释操作
系列稀释：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应离火焰1～2 cm。
操作过程如下：
②涂布平板操作
序号
1
2
3
4
将沾有少量酒精的涂布器在火焰上灼
烧，待酒精燃尽后，冷却8～10 s
用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基
表面。涂布时可转动培养皿，使菌液涂
布均匀
将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中
图示 操作
取0.1 mL菌液，滴加到培养基表面
③培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37 ℃的恒
温培养箱中培养1～2 d。
2．微生物的数量测定
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(1)稀释涂布平板法
①计数原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，
来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品
中大约含有多少活菌。
②计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计
数。
③计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落
数为30～300、适于计数的平板。在同一稀释度下，至少应对3个平板进行重复
计数，然后求出平均值。
④统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为当两个或多个细胞连
在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计结果一般用菌落数表示。
(2)显微镜直接计数法
①计数原理：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、
计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。
②优点：是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。
③缺点：统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。
3．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1．利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数。
2．培养分解尿素的细菌，培养基的pH会增大。
( × )
( √ )
3．筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源，且为液体培养基。
( × )
4．利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数。
( × )
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