2024年4月2日发(作者：愚碧玉)
.
实验基本步骤
提取细胞蛋白
↓
BCA定量
↓
制备蛋白胶（SDS-PAGE胶）
↓
.
蛋白样品变性
↓
电泳
↓
转膜
↓
封闭
↓
一抗
↓
TBST洗涤
↓
二抗
↓
TBST洗涤
↓
显影
↓
结果分析
.
试剂配制
磷酸盐缓冲溶液1L
磷酸二氢钾 0.24g
磷酸氢二钠 1.44g
氯化钠 8g
氯化钾 0.2g
加入500ml纯水，调PH=7.2
定容至1L,高压蒸汽灭菌
（PBS+0.05%吐温-20）
500mlPBS+0.25ml吐温-20
3.电转液500ml
Tris 1.5g
甘氨酸 7.2g
400ml水溶解
加入100ml甲醇，置于4℃冰箱预冷
4.电泳液（1X）
10x稀释，50ml10x电泳液+450ml纯水
（TBS+0.05%吐温-20）
50mlTBS+450ml纯水+0.25ml吐温-20
7.封闭液
TBST1X+5%奶粉
40ml封闭液=40mlTBST+2g奶粉，40℃预热
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2024年4月2日发(作者：愚碧玉)
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实验基本步骤
提取细胞蛋白
↓
BCA定量
↓
制备蛋白胶（SDS-PAGE胶）
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蛋白样品变性
↓
电泳
↓
转膜
↓
封闭
↓
一抗
↓
TBST洗涤
↓
二抗
↓
TBST洗涤
↓
显影
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结果分析
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试剂配制
磷酸盐缓冲溶液1L
磷酸二氢钾 0.24g
磷酸氢二钠 1.44g
氯化钠 8g
氯化钾 0.2g
加入500ml纯水，调PH=7.2
定容至1L,高压蒸汽灭菌
（PBS+0.05%吐温-20）
500mlPBS+0.25ml吐温-20
3.电转液500ml
Tris 1.5g
甘氨酸 7.2g
400ml水溶解
加入100ml甲醇，置于4℃冰箱预冷
4.电泳液（1X）
10x稀释，50ml10x电泳液+450ml纯水
（TBS+0.05%吐温-20）
50mlTBS+450ml纯水+0.25ml吐温-20
7.封闭液
TBST1X+5%奶粉
40ml封闭液=40mlTBST+2g奶粉，40℃预热
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