2024年4月5日发(作者：呼启颜)
dnbseq t7测序原理
一、概述
DNBSEQ T7测序是一种高通量测序技术，采用DNA Nanoball (DNB)
技术和T7扩增技术，能够在短时间内高效地测序大量的DNA样本。
本文将详细介绍DNBSEQ T7测序的原理。
二、DNA Nanoball（DNB）技术
1. DNB制备
DNB制备是DNBSEQ T7测序的关键步骤之一。首先，将待测样本
DNA进行随机断裂，并进行端修复和A尾化处理；然后，将A尾化
后的DNA片段与引物结合并进行PCR扩增；最后，将PCR产物与荧
光染料标记的核酸探针混合，在微米级别下形成球形纳米颗粒，即为
DNA Nanoball（DNB）。
2. DNB放置
制备好的DNB需要放置在芯片上进行测序。芯片上有数百万个微小孔
洞，每个孔洞中仅容纳一个DNB。这些孔洞被称为“坑”，而每个
“坑”中的DNB被称为“岛”。
3. DNB读取
当荧光染料标记的核酸探针与放置在芯片上的DNB结合时，荧光信号
被激发并读取。这个过程被称为“读取”，并由高通量测序仪完成。
三、T7扩增技术
1. T7 RNA聚合酶
T7 RNA聚合酶是一种酶，能够在DNA模板的T7启动子上进行特异
性识别和结合，并在该位置引导RNA链的合成。这个过程被称为“转
录”。
2. T7扩增
在T7 RNA聚合酶的作用下，RNA链不断地从DNA模板上生长，形
成RNA-DNA杂交物。然后，RNase H酶切割RNA链，使DNA模
板暴露出来。接着，T7 RNA聚合酶再次结合并开始新的转录过程。
这个循环过程可以反复进行，形成大量的RNA-DNA杂交物。
四、DNBSEQ T7测序原理
1. DNA片段连接
首先，在DNBSEQ T7测序中，将待测样本DNA随机断裂，并进行
端修复和A尾化处理后，将其与引物结合并进行PCR扩增。这个过程
会将DNA片段连接起来，并生成大量的PCR产物。
2. DNB制备
接着，在DNB制备步骤中，将PCR产物与荧光染料标记的核酸探针
混合，形成球形纳米颗粒，即为DNA Nanoball（DNB）。DNB中包
含许多DNA片段，每个片段的序列都是PCR扩增后的结果。
3. DNB放置
制备好的DNB需要放置在芯片上进行测序。芯片上有数百万个微小孔
洞，每个孔洞中仅容纳一个DNB。这些孔洞被称为“坑”，而每个
“坑”中的DNB被称为“岛”。
4. T7扩增
在T7扩增步骤中，将T7 RNA聚合酶和引物加入到DNB中。T7
RNA聚合酶会在DNA模板的T7启动子上进行特异性识别和结合，
并在该位置引导RNA链的合成。RNA链不断地从DNA模板上生长，
形成RNA-DNA杂交物。然后，RNase H酶切割RNA链，使DNA
模板暴露出来。接着，T7 RNA聚合酶再次结合并开始新的转录过程。
这个循环过程可以反复进行，形成大量的RNA-DNA杂交物。
5. 读取
当荧光染料标记的核酸探针与放置在芯片上的DNB结合时，荧光信号
被激发并读取。这个过程被称为“读取”，并由高通量测序仪完成。
每个“岛”上的DNA片段都会被读取，并生成对应的测序数据。
五、总结
DNBSEQ T7测序是一种高通量测序技术，采用DNA Nanoball (DNB)
技术和T7扩增技术，能够在短时间内高效地测序大量的DNA样本。
在DNBSEQ T7测序中，将待测样本DNA随机断裂，并进行端修复
和A尾化处理后，将其与引物结合并进行PCR扩增。然后，将PCR
产物与荧光染料标记的核酸探针混合，在微米级别下形成球形纳米颗
粒，即为DNA Nanoball（DNB）。DNB中包含许多DNA片段，每
个片段的序列都是PCR扩增后的结果。在T7扩增步骤中，将T7
RNA聚合酶和引物加入到DNB中。T7 RNA聚合酶会在DNA模板的
T7启动子上进行特异性识别和结合，并在该位置引导RNA链的合成。
这个循环过程可以反复进行，形成大量的RNA-DNA杂交物。最后，
在读取步骤中，荧光染料标记的核酸探针与放置在芯片上的DNB结合
时，荧光信号被激发并读取。每个“岛”上的DNA片段都会被读取，
并生成对应的测序数据。
2024年4月5日发(作者：呼启颜)
dnbseq t7测序原理
一、概述
DNBSEQ T7测序是一种高通量测序技术，采用DNA Nanoball (DNB)
技术和T7扩增技术，能够在短时间内高效地测序大量的DNA样本。
本文将详细介绍DNBSEQ T7测序的原理。
二、DNA Nanoball（DNB）技术
1. DNB制备
DNB制备是DNBSEQ T7测序的关键步骤之一。首先，将待测样本
DNA进行随机断裂，并进行端修复和A尾化处理；然后，将A尾化
后的DNA片段与引物结合并进行PCR扩增；最后，将PCR产物与荧
光染料标记的核酸探针混合，在微米级别下形成球形纳米颗粒，即为
DNA Nanoball（DNB）。
2. DNB放置
制备好的DNB需要放置在芯片上进行测序。芯片上有数百万个微小孔
洞，每个孔洞中仅容纳一个DNB。这些孔洞被称为“坑”，而每个
“坑”中的DNB被称为“岛”。
3. DNB读取
当荧光染料标记的核酸探针与放置在芯片上的DNB结合时，荧光信号
被激发并读取。这个过程被称为“读取”，并由高通量测序仪完成。
三、T7扩增技术
1. T7 RNA聚合酶
T7 RNA聚合酶是一种酶，能够在DNA模板的T7启动子上进行特异
性识别和结合，并在该位置引导RNA链的合成。这个过程被称为“转
录”。
2. T7扩增
在T7 RNA聚合酶的作用下，RNA链不断地从DNA模板上生长，形
成RNA-DNA杂交物。然后，RNase H酶切割RNA链，使DNA模
板暴露出来。接着，T7 RNA聚合酶再次结合并开始新的转录过程。
这个循环过程可以反复进行，形成大量的RNA-DNA杂交物。
四、DNBSEQ T7测序原理
1. DNA片段连接
首先，在DNBSEQ T7测序中，将待测样本DNA随机断裂，并进行
端修复和A尾化处理后，将其与引物结合并进行PCR扩增。这个过程
会将DNA片段连接起来，并生成大量的PCR产物。
2. DNB制备
接着，在DNB制备步骤中，将PCR产物与荧光染料标记的核酸探针
混合，形成球形纳米颗粒，即为DNA Nanoball（DNB）。DNB中包
含许多DNA片段，每个片段的序列都是PCR扩增后的结果。
3. DNB放置
制备好的DNB需要放置在芯片上进行测序。芯片上有数百万个微小孔
洞，每个孔洞中仅容纳一个DNB。这些孔洞被称为“坑”，而每个
“坑”中的DNB被称为“岛”。
4. T7扩增
在T7扩增步骤中，将T7 RNA聚合酶和引物加入到DNB中。T7
RNA聚合酶会在DNA模板的T7启动子上进行特异性识别和结合，
并在该位置引导RNA链的合成。RNA链不断地从DNA模板上生长，
形成RNA-DNA杂交物。然后，RNase H酶切割RNA链，使DNA
模板暴露出来。接着，T7 RNA聚合酶再次结合并开始新的转录过程。
这个循环过程可以反复进行，形成大量的RNA-DNA杂交物。
5. 读取
当荧光染料标记的核酸探针与放置在芯片上的DNB结合时，荧光信号
被激发并读取。这个过程被称为“读取”，并由高通量测序仪完成。
每个“岛”上的DNA片段都会被读取，并生成对应的测序数据。
五、总结
DNBSEQ T7测序是一种高通量测序技术，采用DNA Nanoball (DNB)
技术和T7扩增技术，能够在短时间内高效地测序大量的DNA样本。
在DNBSEQ T7测序中，将待测样本DNA随机断裂，并进行端修复
和A尾化处理后，将其与引物结合并进行PCR扩增。然后，将PCR
产物与荧光染料标记的核酸探针混合，在微米级别下形成球形纳米颗
粒，即为DNA Nanoball（DNB）。DNB中包含许多DNA片段，每
个片段的序列都是PCR扩增后的结果。在T7扩增步骤中，将T7
RNA聚合酶和引物加入到DNB中。T7 RNA聚合酶会在DNA模板的
T7启动子上进行特异性识别和结合，并在该位置引导RNA链的合成。
这个循环过程可以反复进行，形成大量的RNA-DNA杂交物。最后，
在读取步骤中，荧光染料标记的核酸探针与放置在芯片上的DNB结合
时，荧光信号被激发并读取。每个“岛”上的DNA片段都会被读取，
并生成对应的测序数据。