2024年4月6日发(作者：析广)
钼锑抗法测定磷含量
1实验原理
用钼锑抗分光光度法测定磷。在一定酸度和锑离子存在的情况下，磷酸根
与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，它在常温下可迅速被抗坏血酸还原为钼蓝，
在700nm波长下测定。实验的适宜酸度为0.28~0.38mol·
1
H
2
SO
4
，适宜温度为
20~60℃，显色时间为30~60min，可稳定24小时，含磷5x10
6
~2x10
4
%范围内
符合线性关系。其有效范围为0.01mg/L—0.6mg/L。
2实验
2.1仪器：1000ml容量瓶、100ml容量瓶、试管若干、最大量程分别为5ml、
1ml、0.2ml的移液枪、分光光度计；
2.2药品：98%硫酸、抗坏血酸、钼酸铵（(NH
4
）
6
Mo
7
O
24
·4H
2
O)、酒石酸锑
钾（KSbC
4
H
4
O
7
·
H
1/2
O）
2.3试剂配制
（1）1+1硫酸：浓硫酸与蒸馏水的体积比为1:1混匀；
（2）10%抗坏血酸溶液：100g/L 维生素C的一种，棕色瓶，4℃可保存几
周，若溶液颜色发黄，则弃去；
（3）钼酸盐溶液：13g钼酸铵（(NH
4
）
6
Mo
7
O
24
·4H
2
O)溶于100mL蒸馏水，
0.35g酒石酸锑钾（KSbC
4
H
4
O
7
·
H
1/2
O）溶于100mL蒸馏水。在不断
搅拌的情况下把钼酸铵徐徐加到300mL1+1硫酸中，加酒石酸锑钾溶
液混匀。棕色瓶，4℃可保存2个月以上；
（4）磷酸盐储备溶液：110℃干燥2h的磷酸二氢钾0.2197g溶于水，移入
1000mL容量瓶中，家5mL1+1硫酸，定容至1000mL。此时浓度为
50μg/mL。（以P计）
（5）磷酸盐工作液：吸取磷酸盐储备液4.0ml并用蒸馏水定容至100ml（此
时溶液中磷含量（以P计）为2μg/ml）；
3实验步骤
3.1标准曲线
取10支10mL比色管，按下列表格加入试剂显色，并测定吸光值A
700
编号
0 1 2 3 4 5 6
磷酸盐工作液/ml
0 1 2 3 4 5 6
蒸馏水定容至10ml
10%抗坏血酸溶液/ml
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
钼酸盐溶液/ml
0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
摇匀，静置15min
10ml溶液中磷酸盐浓
度（以P计）/(μg/ml)
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
A
700
0.013 0.047 0.080 0.119 0.156 0.183 0.224
A= A
700
- A
700
（0） —
0.034 0.067 0.106 0.143 0.170 0.211
以1~6的数据作标准曲线，横坐标为配制成溶液磷酸盐浓度（μg/ml），纵
坐标为A
（此图为3月30日数据）
3.2水样的测量
从各个经预处理的水样中取0.1ml（必要时可以用稀释后水样代替记
下稀释的倍数D）至10ml比色管中，依次加入0.5ml10%抗坏血酸溶液
和0.4ml钼酸盐溶液显色后以蒸馏水为参比水样进行调零，依次测量吸光
值A
700
，各值减去空白试验（即标准曲线0号管的吸光值）即为校正值A
（此全过程应与标准曲线同时操作）；
编号
水样/ml
10%抗坏血酸溶液/ml
钼酸盐溶液/ml
A
700
A= A
700
- A
700
（0）
样品中磷酸盐浓度（以
P计）/(μg/ml)
—
0
0.5
0.4
0.5
0.4
0
0
A
0.1
B
0.1
0.5
0.4
C
0.1
0.5
0.4
D
0.1
0.5
0.4
E
0.1
0.5
0.4
…
…
…
…
…
…
…
蒸馏水定容至10ml
摇匀，静置15min
3.3水中磷的浓度按下式计算：
ρ(P)= [10×(A-a)/(b×V) ]
×D
式中：
ρ(P)——原水样中氨氮的浓度，mg/L，以P 计；
A——试样校正后的吸光值；
b——标准曲线的斜率；
a——标准曲线的截距；
V——所取试样的体积，ml；
D——稀释倍数（水样未经稀释时此值为1）；
4 注意事项
该方法可用的测定范围非常狭窄，注意稀释样品即可；
注意钼酸盐溶液溶剂是高浓度硫酸溶液，小心腐蚀。
2024年4月6日发(作者：析广)
钼锑抗法测定磷含量
1实验原理
用钼锑抗分光光度法测定磷。在一定酸度和锑离子存在的情况下，磷酸根
与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，它在常温下可迅速被抗坏血酸还原为钼蓝，
在700nm波长下测定。实验的适宜酸度为0.28~0.38mol·
1
H
2
SO
4
，适宜温度为
20~60℃，显色时间为30~60min，可稳定24小时，含磷5x10
6
~2x10
4
%范围内
符合线性关系。其有效范围为0.01mg/L—0.6mg/L。
2实验
2.1仪器：1000ml容量瓶、100ml容量瓶、试管若干、最大量程分别为5ml、
1ml、0.2ml的移液枪、分光光度计；
2.2药品：98%硫酸、抗坏血酸、钼酸铵（(NH
4
）
6
Mo
7
O
24
·4H
2
O)、酒石酸锑
钾（KSbC
4
H
4
O
7
·
H
1/2
O）
2.3试剂配制
（1）1+1硫酸：浓硫酸与蒸馏水的体积比为1:1混匀；
（2）10%抗坏血酸溶液：100g/L 维生素C的一种，棕色瓶，4℃可保存几
周，若溶液颜色发黄，则弃去；
（3）钼酸盐溶液：13g钼酸铵（(NH
4
）
6
Mo
7
O
24
·4H
2
O)溶于100mL蒸馏水，
0.35g酒石酸锑钾（KSbC
4
H
4
O
7
·
H
1/2
O）溶于100mL蒸馏水。在不断
搅拌的情况下把钼酸铵徐徐加到300mL1+1硫酸中，加酒石酸锑钾溶
液混匀。棕色瓶，4℃可保存2个月以上；
（4）磷酸盐储备溶液：110℃干燥2h的磷酸二氢钾0.2197g溶于水，移入
1000mL容量瓶中，家5mL1+1硫酸，定容至1000mL。此时浓度为
50μg/mL。（以P计）
（5）磷酸盐工作液：吸取磷酸盐储备液4.0ml并用蒸馏水定容至100ml（此
时溶液中磷含量（以P计）为2μg/ml）；
3实验步骤
3.1标准曲线
取10支10mL比色管，按下列表格加入试剂显色，并测定吸光值A
700
编号
0 1 2 3 4 5 6
磷酸盐工作液/ml
0 1 2 3 4 5 6
蒸馏水定容至10ml
10%抗坏血酸溶液/ml
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
钼酸盐溶液/ml
0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
摇匀，静置15min
10ml溶液中磷酸盐浓
度（以P计）/(μg/ml)
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
A
700
0.013 0.047 0.080 0.119 0.156 0.183 0.224
A= A
700
- A
700
（0） —
0.034 0.067 0.106 0.143 0.170 0.211
以1~6的数据作标准曲线，横坐标为配制成溶液磷酸盐浓度（μg/ml），纵
坐标为A
（此图为3月30日数据）
3.2水样的测量
从各个经预处理的水样中取0.1ml（必要时可以用稀释后水样代替记
下稀释的倍数D）至10ml比色管中，依次加入0.5ml10%抗坏血酸溶液
和0.4ml钼酸盐溶液显色后以蒸馏水为参比水样进行调零，依次测量吸光
值A
700
，各值减去空白试验（即标准曲线0号管的吸光值）即为校正值A
（此全过程应与标准曲线同时操作）；
编号
水样/ml
10%抗坏血酸溶液/ml
钼酸盐溶液/ml
A
700
A= A
700
- A
700
（0）
样品中磷酸盐浓度（以
P计）/(μg/ml)
—
0
0.5
0.4
0.5
0.4
0
0
A
0.1
B
0.1
0.5
0.4
C
0.1
0.5
0.4
D
0.1
0.5
0.4
E
0.1
0.5
0.4
…
…
…
…
…
…
…
蒸馏水定容至10ml
摇匀，静置15min
3.3水中磷的浓度按下式计算：
ρ(P)= [10×(A-a)/(b×V) ]
×D
式中：
ρ(P)——原水样中氨氮的浓度，mg/L，以P 计；
A——试样校正后的吸光值；
b——标准曲线的斜率；
a——标准曲线的截距；
V——所取试样的体积，ml；
D——稀释倍数（水样未经稀释时此值为1）；
4 注意事项
该方法可用的测定范围非常狭窄，注意稀释样品即可；
注意钼酸盐溶液溶剂是高浓度硫酸溶液，小心腐蚀。