2024年4月11日发(作者：丘芝英)
88
中国兽医杂志
2020
年
(
第
56
卷
)
第10
期
Chinese
Journal
of
Vete/naR
Medicine
新型季钱盐戊二醛消毒液杀菌效果评价
何淑华
1
,
许
琦1
,
林晓雁
1
,
卢朝成
2
，
傅江南
1
,
和
君
1
(
1.
暨南大学实验动物管理中心
，
广东广州
510632
&
2
成都中牧生物药业有限公司
，
四川成都
610100
)
摘要
:
为了评价一种新型季
W
盐戊二醛消毒液的杀菌效果
，
采用喷雾消毒法
，
比较
5
种市售常用消毒液(
复合过氧乙
酸
、
季
W
盐戊二醛
、
微酸性
酸
、
水
、
)
的雾消毒
&进一步采
和复合过氧乙酸
1：
24
试验
，
比较
W
盐戊二醛和复
合过氧乙酸对大肠埃希菌
(
E.
coil)
、
金黄色葡萄球菌
(
S.
aureus
)
$
绿脓杆菌
(
P.
aeruginosa
)
和白色念珠菌
(
albicans
)
的杀灭效果
。
喷雾消毒
，
季
W
盐戊二醛
1：
100
雾杀灭率达
100%
；
悬
量杀菌试验结果显示
，
季
W
盐戊二醛
1
：
1
000
倍稀释对
S.
aue
的杀灭对数值
>
7
,
1
：
500
倍稀释对
E
coiS
杀灭对数值
>
7
,
1
：
100
倍稀释对
P.
aeruginosa
的杀灭对数值
>7
；
复合过氧乙酸
1
：
1
000
倍稀释液对
E.
coiC
、
S.
aureus
$
P.
aeruginoss
的杀灭
对数
>7
;
季
W
盐戊二醛和复合过
酸
1
：
500
-
albcans
的杀灭对数值均
>6
,
%
型
季
W
盐戊二醛和复合型过氧乙酸消毒液对
Ed'S.
aureos$P.
aeruginDss
及
albicans
均有强的杀灭能力％
关键词
:季
W
盐&戊二醛&过
酸&芳
中图分类号
：
R187
.
2
文献标志码
:
A
文章编号
：
0529
—
6005(2020)10
—
0088—
05
Evaluation
of
Germicidal
Efficacy
of
a
New
Quaternary
Ammonium
Salt
Glutaraldehyde
Disinfectant
HE
Shu-hua
1
,
XU
Qi
1
,
LIN
Xiavpan
1
,
LU
Chav-cheng
2
,
FU
Jiang-nan
1
,
HE
Jun
1
(
1.
Institute
of
LabomtoR
Animal
Science
,
Jinan
University
,
Guangzhou
510632
,
China
&
2
Chengdu
Zhongmu
BiophaemaceuticaeCo
,
Ltd
,
Chengdu
610100
,
China
)
Abstracc
:
Tv
evaluate
the
germicibal
efficacy
of
a
new
quaternary
ammonium
sa/
glumraldehyde
disiPectant
,
spray
disiPection
method
wasused
tocompaeethespea0disineection
e
e
ctsoeeivedisineectants
(
compound
peeaceticacid
,
quateenae0ammonium
geut-
araldehyde
,
slightly
acidic
hypochlorous
acid
,
bleach
,
and
ethanol
)
.
Suspension
quantitative
ste/Pzation
test
was
used
to
observe
the
germicidal
efficacy
of
quaternaR
ammonium
sa/
glumraldehyde
and
compound
peracetic
acid
on
Escherichia
cols
(
E.
coil)
,Stophylo-
coccoe
aureus
(
S.
aueus
)
,
Pseubomonas
aouginosa
(
P.
aouginosa
)
and
Canbila
alcans
(
C.
alcans
)
.
The
results
showed
that
in
the
spray
test,the
kil
/
ng
rate
of
the
bacte/a
were
100%
when
the
1
：
100
dilution
of
quaternaR
ammonium
sa/
glumraldehyde
and
/he1
：
24
dieu
ion
oecompound
peeaceicacid
sion
quan
iaiveseeieiaaion
es/eesuesshowed
/ha//heki
e
ingeog
value
of
the
quaternary
ammonium
salt
glutaralUehyde
at
1
：
1
000
dilution
to
S.
aueus
was
>
7
,
and
at
1:
500
dilution
to
E.
coH
was
>7
,
at
1
:
100
dilution
to
P.
eeroginosa
was
>7
.
The
kP
/
ng
log
value
of
the
compound
peracetic
acid
at
1
：
1
000
dilution
to
E.
coil,
S.
aureos
,
and
P.
aeruginosa
were
all
>
7.
The
kil
/
ng
log
values
of
C.
albicans
in
the
quaternaR
ammonium
salt
glutaraldehyde
and
thecompound
peaaceticacid
1
：
500
dieution
weaea
e
>6.A
e
abovesteaieiaation
e
e
ctsweaeup
teanaa0ammoni-
um
salt
glutaralUehyde
and
the
compound
peracetic
acid
have
strong
kP/ng
ability
to
E.
coil
,
S.
aueus
,
P.
aouginosa
and
C.
alcans.
Key
wordt
:
quaternaR
ammonium
salts
&
glumraldehyde
&
peracetic
acid
&
germicidal
efficacy
CoJTespondiiig
author
：
FU
Jiang-nan
,
:
fujiangnanl26@126.
com
&
HE
Jun
,
:
shadow.
Oon@
163.
com
收稿日期
：
2020
—
05
—
12
基金项目
：
广东省自然科学基金面上项目
(
2019A1515011994
,
2016A030310085
)
&广东省科技计划项目
(
2016A030303013
)
消毒工作是实验动物管理的关键环节,是实验
动物
的基础保障
。
从业
只
，
才能在
确配
的消毒剂才能达到消毒
、
试验
作者简介:何淑华
(
1989
-
)
，
女,本
,
就读专业为生物
技
术
,
:
sausagehe@
126
-
com
许琦
(1993
-),
女
，
本科生
,
就读专业为动物医学
，
E-mail:
t-
qi2017kate@
163.
com
过程中
把
控实验动物的质量
,
规实验动物的安全
管理⑴％
此
，
消毒
是控制
中病原的关
%
，
实验动物
屏
中常见的消毒剂种类
:许琦与何淑华对本文具有同等贡献
通讯作者
：
傅江
南
，
E-mail:fujiangnan126@126.
com；
和君
，
E-mai
:
*******************
含氯类
、
过化物类
、
醛类
、
醇类和季
W
盐类消
毒剂
[
2
]
%
一消毒剂易受
物的种类
、
浓
度
、
中
物
的
能达到预期的
Chinese
Journal
of
Veterina/
Medicine
效果
，
复合型消毒剂可避免此类问题达到好的杀灭
效果
4
］
%
本试验对一种新型三组方季
W
盐戊二醛
消毒剂进行杀菌效果评价
,
选用
4
种常用消毒剂进
行喷雾消毒对比试验⑸
；
与复合过氧乙酸进行悬液
定量杀菌对比试验％本试验结果对实验动物设施
的消毒剂选择及有效配比提供参考％
1
材料与方法
1-1
材料
1.1.1
试验组消毒液
复合过氧乙酸
（
Compound
peracetic
acid
disinfectant
,
CPAA
）
，
有效成分
：
过氧乙
酸
30
-60
g/L
、
过氧化
氢
220
-280
g/L
；
季
W
盐戊二
醛
（
Quateoa/
ammonium
salt
glutaraldehyda
disin
fectant
,
QASG
）
，
主要成分:苯扎氯
W
16
g/L
、
癸甲漠
W
24
g/L
、
戊二醛
20
g/L
,
用前加无水碳酸钠
20
g/L
进行碱化
；
漂白水
，
主要成分
：
次氯酸钠和氢氧化
钠;微酸性次氯酸
，
有效氯含量
60
~80
mg/L
；
乙醇,
含量为
（
950
±50
）
mL/L
%
以上产品均为市售产品％
1.1.2
菌种
大肠埃希菌
ATCC
8099
$
金黄色葡萄
球菌
ATCC
6538
、
绿脓杆菌
ATCC
15442
、
白色念珠
菌
ATCC
10231
,
均购自
广
东环凯微生物科技有限公
司％
1-1.3
培养基与试剂
胰蛋白月东大豆肉汤
（
TSB
）
、
胰蛋白月东大豆琼脂
（
TSA
）
、
液体沙氏培养基
，
购自
青岛海博生物技术有限公司
；
马铃薯葡萄糖琼脂培
养基
（
PDA
）
,
购自
广
东环凯微生物科技有限公司
；
标准硬水
、
胰蛋白月东生理盐水溶液
（
TPS
）、
3%
牛血
清白蛋白
（
BSA
）
,
参照
《
消毒技术规范＞
［
5
］（
简称
《
规范
0
）
配制
;
复合过氧乙酸和季
W
盐戊二醛的中
和剂参照文献
1.24
4
［
6W
］%
1-2.1
喷雾消毒试验
取普通环境实验室桌面自
然菌接种于
TSB
,
37
b
培养
18
h
,
稀释麦氏比浊度
（
McF
）
为
0.5
的菌悬液,
10
4
倍稀释
，
取
0.2
mL/
皿
涂布于
TSA
制成染菌皿
（
染菌量
250
-
300
CFU/
皿
）
％
5
种消毒剂参照说明书的最高消毒浓度
（
复
合过氧乙酸
1
：
24
倍稀释
、
季
W
盐戊二醛
1
：
100
倍稀
释
、
漂白水
6
：
190
倍稀释
、
微酸性次氯酸原液
、
乙醇
100
：
26
倍稀释
）
进行喷雾试验
，
为确保喷雾消毒剂
量的一致性
，
以固定喷头
、
喷洒距离来实现
％
37
b
倒置培养
24
h
,
计算菌落数
，
按下式计算杀灭
率
（
%
）
%
杀灭率
=
（
试验组菌落数-阳性对照菌
落
数
）
/
阳性对照菌落数
x
100%
1-2.2
试验菌悬液的制备
参照
《
规范
》,
复
苏菌种
中国兽医杂志
2020
年
（
第56
卷
）
第10
期
89
培养至
3
代
，
分别取
E.
coil
S.
aureus
、
P.
aeruggosa
单菌落接种
TSA
斜面
37
b
培养
24
h
；
-
albicans
接
种于
PDA
斜面
26
b
培养
48
h
%
用
TPS
洗脱斜面培
物,
为
E
B
ccgl
1B9
McF
、
S
B
auerus
2B0
McF
、
P.
aeruggosa
2
.
1
McF
、
C.
albicans
6
-
9
McF
%
1-
2
-
3
活菌培养计数
参照
《
规范
》
将
E.
cog
S-
aureus
^P.
aeruginosa
在
TSA
中
37
°C
培养
48
h
,
C-
albicans
在
PDA
中
26
b
培养
72
h
,
计算菌浓度
（
CFU/mL
）
%
1-
2
-
4
中和剂鉴定试验
以
E.
cog
和
C-
albgans
为试验菌
，
室温下按中和剂悬液定量鉴定试验设计
6
组
，
参照
《
规范
》
进行试验:第
1
组
（
消毒液
+
菌悬
液
）
；
第
2
组
（
消毒液
+
菌悬液
+
中和剂
）；
第
3
组
（
中和剂
+
准
水
+
）
；
第
4
（
中和
物
+
）
；
第
5
（
TPS
+
准
水
+
）
；
第
6
组
（
TPS
+
中和剂
+
标准硬水
）
%
试验重复
3
次
,
计算各组的菌落数,按下式计算第
3
、
4
、
5
组间菌落
数误差率％
P
a
=
（
+
N-N
）
｝
（
+
N
）
X100%
P
a
：
组间菌落数误差率
；
N3
组间菌落平均数;
N
：
各组菌落平均数
1.2.5
悬液定量杀菌试验
参照
《
规范
》，
室温下
比较复合过氧乙酸和季
W
盐戊二醛不同浓度下对
E
.
occl
、
S
.
auerus
、
P
.
areugcncsa
和
C
.
alicoans
的
定量杀菌效果％消毒液的稀释度为
1
：
100
、
1
：
500
和
1
：
1
000
，
消毒液与标准硬水以
1.25
：
100
、
1.25
：
500
和
1.
25
：
1
000
配制％
0.
5
mL
菌悬液和
0.
5
mL
3%
BSA
混
匀后加入
4
mL
配制浓度的消毒液
，
混
匀
30
min
后
，
取
0.
5
mL
试验菌
、
消毒混合液加入
4
-
5
mL
中和剂中
，
混匀作用
10
min
,
取
1
mL
该样液计算菌
落数
,
试验独立重复
3
次;同时设立对照组％计算杀
灭对数值
（
OL
）
%
OL
=1/
（
T0
）
-1/
（
T
J
OL
：
杀灭对数值
；
T
:阳性对照组平均活菌浓
度
；
T
：
试验
活
浓度
1.2.6
pH
测定
参照
《
规范
》
“
pH
测定法
”
测定复
合过氧乙酸及季
W
盐戊二醛的不同稀释度的
pH
%
2
结果
2-
1
喷雾消毒
喷雾试验结果显示
（
见中插彩版
图
1
）
,
季
W
盐戊二醛
1
：
100
倍稀释和复合过氧乙酸
1
：
24
倍稀释的杀灭率均为
100%
，
漂白水
6
：
190
倍
稀释
、
微酸性次氯酸原液
、
乙醇
100
：
26
倍稀释的杀
灭率分别为
59%
、
37%
和
50%
%
2.2
中和剂鉴定
参照
《
规范
》
和赵斌秀等
［
8
］
发表
90
中国兽医杂志
2020
年
（
第
56
卷
）
第10
期
Chinese
Journal
of
Veterina/
Medicine
的中和剂合格标准
,
1
组无菌生长
,
2
组比
1
、
3
、
4
、
5
1
。
所用中和剂均能有效中和消毒液
,
且中和剂
、
中
组菌数量显著减少,
3
、
4
、
5
组间菌落数误差率不超
过
15%
,
6
组无菌生长
，
中和剂鉴定合格
，
结果见表
和产物对
E.
coil
和
-
abbon
均无影响
。
表
1
中和剂鉴定试验结果
Table
1
Resulta
of
neutralization
identification
test
各组回收菌落(
CFU/mL
)
消毒液
Disinfectant
(
n
=
3
)
3
、
4
、
5
组间
试验
Strain
Recovered
colonies
of
each g/up
误差
率
/%
Er
va
rate
of
5
1
2
3
0
7
4
4.32
X10
6
6
0
0
0
0
g/up
3
,
4
,
5
复
过
CPAA
酸
E
.
coil
0
0
0
0
5
西
8
X10
6
5.54
X10
6
1
多
3
X10
5
6.43
X10
6
10.37
2.30
C.
albicons
E.
coil
1.55
X10
5
6.03
X10
6
1.64
X10
5
6.05
X10
6
季
W
盐戊二醛
QASG
52
12
2.82
C.
albicons
1.50X10
5
科
0
X10
5
1.52X10
5
0.61
注
：
结果为
3
次试验的平均值
Note
:
The
results
were
the
average
of
3
tuals
2-3
悬液定量杀菌由表
2
所示
，
复合过氧乙酸
1
：
1
000
倍稀释对
E.
cob
、
S-
aueus
、
P-
aeruginosa
的
倍稀释对
-
albicans
的杀灭对数值均
＞6
。
参照
《
规范
》
要求,细菌繁殖体的杀灭对数值&
5
、
真菌的
杀灭对数值&
4
,
判定为消毒合格
。
因此
，
季
W
盐戊
杀灭对数值均
＞7
；
季鞍盐戊二醛
1
：
1
000
倍稀释对
S-
aureus
的杀灭对数值
＞7
,
1
：
500
倍稀释对
E.
coil
二醛
1
：
100
倍稀释,复合过氧乙酸
1
：
500
倍稀释对
杀灭对数值
＞
7
,
1
：
100
倍稀释对
P-
aeruginosa
的杀
所测菌株杀灭效果均可达
100%
，
消毒合格
％
灭对数值
＞7
;
复合过氧乙酸和季
W
盐戊二醛
1
：
500
表
2
悬液定量杀菌试验结果
Table
2
Resulta
of
suspension
quantitative
sterilization
test
杀灭对数值
Killing
log
value
(
x
±s
,
n
=
3
)
试验
Seeain
稀释度
Dieueion
复
过
CPAA
酸
季
W
盐戊二醛
QASG
阳性对照浓度
(
CFU/mL
)
Conceneeaeion
oeposieieeconeeoe
1
：
100
E.
coil
7.84±0.09
7.84±0.09
7.84±0.09
7.80±0.14
7.80±0.14
7.80±0.14
7.43
±0.24
7.43
±0.24
7.43
±0.24
7.81
±0.01
7.81
±0.01
3.07±0.58
1
：
500
1
：
1
000
1
：
100
2.90
x10
7
-8.95
x10
7
7.86±0.19
7.78
±0.07
7.43
±0.61
7.65
±0.37
3.08
±0.09
S.
aureus
1
：
500
1
：
1
000
1
：
100
4.55
X10
7
-2.42X10
8
P.
aeruginosa
1
：
500
1
：
1
000
1
：
100
1.71
X10
7
〜
2
多
8
X10
8
1.47±0.52
6.25
±0.05
6.41
±0.15
6.41
±0.15
3.06±0.18
C.
albicans
1
：
500
1
：
1
000
6.36±0.06
0.02±0.01
1
多
8
X10
6
〜
3
多
6
X10
6
2-
4
pH
测定
由表
3
所示
，
季
W
盐戊二醛原液呈
表
3
不同稀释度消毒液的
pH
Table
3
pH
of
disinfectant
with
different
dilution
度
Dieueion
酸性
，
使用前每升原液需加入
20
g
无水碳酸钠进行
碱化
，
使
pH
达到
9.7-10.0
，
该液的工作浓度
pH
在
7.4~9.8
；
复合过氧乙酸原液呈酸性
，
工作浓度的
复
过
CPAA
0.5
-0.8
酸
季
W
盐戊二醛
QASG
2.4
-2.6
9.7
-10.0
pH
范围在
2.
6~3.
5
。
Seock
soeueion
碱
化
Aekaeinesoeueion
1
：
100
1
：
500
1
：
1
000
一
2.6
-2.9
3
讨论
动物设施中
，
人源
、
动物源
、
物源使用不规范或
9.5
-9.8
3.1
-3.3
8.3
-8.5
7.4
-7.6
3.3
-3.5
管理不当均可造成外源物的污染
。
因此
，
严格做好
注:一
：
复合过氧乙酸没有碱化液
Note
:
一:
CPAA
without
alkaline
solution
Chinese
Journal
of
Vete/naR
Medicine
中国兽医杂志
2020
年
（
第
56
卷
）
第
10
期
91
大肠埃希菌
E.
coli
|
稀释
105
倍
diluted
10
5
times
C
|
稀释
KT
倍
|Diluted
IO'times
E
F
金黄色葡萄球菌
S.
aureus
|
稀释
KT
倍
|Diluted
IO'times
P
G
C
|
稀释
KT
倍
〔
Diluted
IO'times
//
p
■D
】
Diluted
10?
times
■
稀释
162
倍
畛
|
稀释
W
倍
,
丄
E
］
〔
Diluted
10
3
times
|
F
绿脓杆菌
P.
aeruginosa
（
转下页
Carried
foaoud
）
92
中国兽医杂志
2020
年
(
第
56
卷
)
第
10
期
（
续图
2
Continued
）
Chinese
Journat
of
Veterina/
Medicine
白色念珠菌
C.
albicans
图
2
悬液定量杀菌试验菌落生长情况
Fig.
2
Colony
growth
in
suspension
quantitative
sthrilizatien
test
P
：
阳性对照组;
A
、
B
、
C
：
分别为复合过氧乙酸
1
：
100
、
1
：
500
、
1
：
1
000
的稀释液试验组
；
D
、
E
、
F
：
分别为
季W
盐戊二醛
1
：
100
、
1
：
500
、
1
：
1
000
的稀释液试验组
P
:
Positive
control
goup
；
A
,
B
,
C
：
CPAA
'
s
dilution
test
g/ups
1
:
100
,
1
:
500
,
1
：
1
000
；
D
#
E
#
F
：
QASG
'
s
dilution
test
g/ups
1
:
100
,
1
:
500
,
1
：
1
000
消毒
是保
证
实验动物设施
洁净,
获得的试验数
参考
％
参考文献
：
[
1
]
彭华松
，
徐汪节
，
刘闯
，
等
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研究与思考
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中国兽医学报
，
2019
，
39
(
3
)
：
598-
602.
据真实可靠的关键
％
本试验选用常用的复合过氧
酸
、
水
、
微酸性
酸
、
消毒液
，
W
盐戊二醛进行喷
雾
消毒
试验
。
，
复
过
酸
1
：
24
和
W
盐戊二醛
1
：
100
释的杀灭率均为
100%
%
进一步以复合过氧乙酸和
[
2
]
李超
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张惠
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梁洋洋
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.
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及职业健康防护
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中国比较医学杂志
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2018
，
28
(
8
)
：
11-
15.
W
盐戊二醛进行
W盐戊二醛
1
：
100
较
。
，
和复合过
酸
1
：
500
100%
%
[
3
]
陈血建
，
郭正洋,黄建飞
，
等•季
W
盐类消毒剂的研究现状
[
J
]
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2019
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16
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240
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241.
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4
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高富红•戊二醛消毒剂研究进展
[
J
]
•安徽农业科学,
2016
，
44
试验菌杀灭效率
复合型季
W
盐戊二醛由
苯
扎氯
W
、
癸甲漠
W
和
戊二醛
％
戊醛
醛类
消毒剂
，
可
抑制
RNA
、
DNA
和
(
30
)
：
121
—
122
+126.
质
，
杀灭
种
物
;苯
[
5
]
中华
人民共和国卫生部
食
肖毒技术规范
[
S
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12
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原霖
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2010
,
46
(
7
)
：
58
—
60.
扎氯
W
、
癸
甲漠
W
是常用的单
、
双链季
W
盐类阳离
子
活性剂
，
具良好的
(
9
)
%
复型季
W
盐戊二醛降低了单一组分的
消毒
、
提升
性
、
减少
，
同时达到提高
的目的
(
10
)
%
同
时
，
这类消毒剂在酸性
灭
好
(
3W
)
，
储存
，
在碱性条
的化学消毒剂杀菌
[
8
]
赵斌
秀
，
张流波
.
消毒剂消毒效果评价中残留物去除技术
[
J
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中国消毒学杂志,
2016
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33
(
3
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：
271
—
276.
广
、
、
毒
、
蚀
、
的
％
[
9
]
武月娇食种季
W
盐消毒剂杀菌效果比较分析
[
J
]
•当代畜牧,
2017
,
35
(
29
)
：
55
—56.
本试验在实验室
，
检测了季
W
盐戊二
醛的杀灭
，
杀灭率依次为
：
色
〉
大
希菌
〉
铜绿假单胞菌
，
与
魏
岚
(
11
)
的研究结
一致
，
杀灭
实验室杀灭
物试验的
消毒要求
(
5
打本试验为各实验动物设施消毒液的
[
10
]
李小林
，
关潇
，
林文淑
，等•新型戊二醛
-
癸甲漠
W
复合消毒
剂的杀菌效果及其影响因素的研究
[
J
]
•
中国国境卫生检疫
杂志
,
2017
,
40
(
4
)
：
283
—
289.
[
11
]
魏岚.
3
种常用消毒剂对院内感染常见病原菌效果研究
[
J
]
•
选择提供依据
，
并为有
针
对性杀灭病原体提供
中国病原生物学杂志
,
2016
,
11
(
5
)
：
419
—
423.
中国兽医杂志
2020
年
（
第
56
卷
）
第
10
期
Chinese
Journal
of
Veterinaro
Medicine
《
新型季钱盐戊二醛消毒液杀菌效果评价
》
图版
（
作者
：
何淑华
，
许琦
，
傅江南
，
和君等
，
正文见第
88
〜
92
页
）
图
1
5
种消毒剂喷雾后表面菌落的生长情况
Fig.
&
Growte
of
surface
colonies
after
spraying
five
disinfectents
A
：阳性对照
；
B
：
漂白水
；
C
：
季钱盐戊二醛
；
D
：
微酸性次氯酸
；
E
：
乙醇
；
F
：
复合过氧乙酸
A
:
Positive
control
；
B
:
Bleach
；
C：
QASG
；
D
:
Slightly
acidii
hypochlorous
acid
；
E
:
Ethanol
；
F
:
CPAA
2024年4月11日发(作者：丘芝英)
88
中国兽医杂志
2020
年
(
第
56
卷
)
第10
期
Chinese
Journal
of
Vete/naR
Medicine
新型季钱盐戊二醛消毒液杀菌效果评价
何淑华
1
,
许
琦1
,
林晓雁
1
,
卢朝成
2
，
傅江南
1
,
和
君
1
(
1.
暨南大学实验动物管理中心
，
广东广州
510632
&
2
成都中牧生物药业有限公司
，
四川成都
610100
)
摘要
:
为了评价一种新型季
W
盐戊二醛消毒液的杀菌效果
，
采用喷雾消毒法
，
比较
5
种市售常用消毒液(
复合过氧乙
酸
、
季
W
盐戊二醛
、
微酸性
酸
、
水
、
)
的雾消毒
&进一步采
和复合过氧乙酸
1：
24
试验
，
比较
W
盐戊二醛和复
合过氧乙酸对大肠埃希菌
(
E.
coil)
、
金黄色葡萄球菌
(
S.
aureus
)
$
绿脓杆菌
(
P.
aeruginosa
)
和白色念珠菌
(
albicans
)
的杀灭效果
。
喷雾消毒
，
季
W
盐戊二醛
1：
100
雾杀灭率达
100%
；
悬
量杀菌试验结果显示
，
季
W
盐戊二醛
1
：
1
000
倍稀释对
S.
aue
的杀灭对数值
>
7
,
1
：
500
倍稀释对
E
coiS
杀灭对数值
>
7
,
1
：
100
倍稀释对
P.
aeruginosa
的杀灭对数值
>7
；
复合过氧乙酸
1
：
1
000
倍稀释液对
E.
coiC
、
S.
aureus
$
P.
aeruginoss
的杀灭
对数
>7
;
季
W
盐戊二醛和复合过
酸
1
：
500
-
albcans
的杀灭对数值均
>6
,
%
型
季
W
盐戊二醛和复合型过氧乙酸消毒液对
Ed'S.
aureos$P.
aeruginDss
及
albicans
均有强的杀灭能力％
关键词
:季
W
盐&戊二醛&过
酸&芳
中图分类号
：
R187
.
2
文献标志码
:
A
文章编号
：
0529
—
6005(2020)10
—
0088—
05
Evaluation
of
Germicidal
Efficacy
of
a
New
Quaternary
Ammonium
Salt
Glutaraldehyde
Disinfectant
HE
Shu-hua
1
,
XU
Qi
1
,
LIN
Xiavpan
1
,
LU
Chav-cheng
2
,
FU
Jiang-nan
1
,
HE
Jun
1
(
1.
Institute
of
LabomtoR
Animal
Science
,
Jinan
University
,
Guangzhou
510632
,
China
&
2
Chengdu
Zhongmu
BiophaemaceuticaeCo
,
Ltd
,
Chengdu
610100
,
China
)
Abstracc
:
Tv
evaluate
the
germicibal
efficacy
of
a
new
quaternary
ammonium
sa/
glumraldehyde
disiPectant
,
spray
disiPection
method
wasused
tocompaeethespea0disineection
e
e
ctsoeeivedisineectants
(
compound
peeaceticacid
,
quateenae0ammonium
geut-
araldehyde
,
slightly
acidic
hypochlorous
acid
,
bleach
,
and
ethanol
)
.
Suspension
quantitative
ste/Pzation
test
was
used
to
observe
the
germicidal
efficacy
of
quaternaR
ammonium
sa/
glumraldehyde
and
compound
peracetic
acid
on
Escherichia
cols
(
E.
coil)
,Stophylo-
coccoe
aureus
(
S.
aueus
)
,
Pseubomonas
aouginosa
(
P.
aouginosa
)
and
Canbila
alcans
(
C.
alcans
)
.
The
results
showed
that
in
the
spray
test,the
kil
/
ng
rate
of
the
bacte/a
were
100%
when
the
1
：
100
dilution
of
quaternaR
ammonium
sa/
glumraldehyde
and
/he1
：
24
dieu
ion
oecompound
peeaceicacid
sion
quan
iaiveseeieiaaion
es/eesuesshowed
/ha//heki
e
ingeog
value
of
the
quaternary
ammonium
salt
glutaralUehyde
at
1
：
1
000
dilution
to
S.
aueus
was
>
7
,
and
at
1:
500
dilution
to
E.
coH
was
>7
,
at
1
:
100
dilution
to
P.
eeroginosa
was
>7
.
The
kP
/
ng
log
value
of
the
compound
peracetic
acid
at
1
：
1
000
dilution
to
E.
coil,
S.
aureos
,
and
P.
aeruginosa
were
all
>
7.
The
kil
/
ng
log
values
of
C.
albicans
in
the
quaternaR
ammonium
salt
glutaraldehyde
and
thecompound
peaaceticacid
1
：
500
dieution
weaea
e
>6.A
e
abovesteaieiaation
e
e
ctsweaeup
teanaa0ammoni-
um
salt
glutaralUehyde
and
the
compound
peracetic
acid
have
strong
kP/ng
ability
to
E.
coil
,
S.
aueus
,
P.
aouginosa
and
C.
alcans.
Key
wordt
:
quaternaR
ammonium
salts
&
glumraldehyde
&
peracetic
acid
&
germicidal
efficacy
CoJTespondiiig
author
：
FU
Jiang-nan
,
:
fujiangnanl26@126.
com
&
HE
Jun
,
:
shadow.
Oon@
163.
com
收稿日期
：
2020
—
05
—
12
基金项目
：
广东省自然科学基金面上项目
(
2019A1515011994
,
2016A030310085
)
&广东省科技计划项目
(
2016A030303013
)
消毒工作是实验动物管理的关键环节,是实验
动物
的基础保障
。
从业
只
，
才能在
确配
的消毒剂才能达到消毒
、
试验
作者简介:何淑华
(
1989
-
)
，
女,本
,
就读专业为生物
技
术
,
:
sausagehe@
126
-
com
许琦
(1993
-),
女
，
本科生
,
就读专业为动物医学
，
E-mail:
t-
qi2017kate@
163.
com
过程中
把
控实验动物的质量
,
规实验动物的安全
管理⑴％
此
，
消毒
是控制
中病原的关
%
，
实验动物
屏
中常见的消毒剂种类
:许琦与何淑华对本文具有同等贡献
通讯作者
：
傅江
南
，
E-mail:fujiangnan126@126.
com；
和君
，
E-mai
:
*******************
含氯类
、
过化物类
、
醛类
、
醇类和季
W
盐类消
毒剂
[
2
]
%
一消毒剂易受
物的种类
、
浓
度
、
中
物
的
能达到预期的
Chinese
Journal
of
Veterina/
Medicine
效果
，
复合型消毒剂可避免此类问题达到好的杀灭
效果
4
］
%
本试验对一种新型三组方季
W
盐戊二醛
消毒剂进行杀菌效果评价
,
选用
4
种常用消毒剂进
行喷雾消毒对比试验⑸
；
与复合过氧乙酸进行悬液
定量杀菌对比试验％本试验结果对实验动物设施
的消毒剂选择及有效配比提供参考％
1
材料与方法
1-1
材料
1.1.1
试验组消毒液
复合过氧乙酸
（
Compound
peracetic
acid
disinfectant
,
CPAA
）
，
有效成分
：
过氧乙
酸
30
-60
g/L
、
过氧化
氢
220
-280
g/L
；
季
W
盐戊二
醛
（
Quateoa/
ammonium
salt
glutaraldehyda
disin
fectant
,
QASG
）
，
主要成分:苯扎氯
W
16
g/L
、
癸甲漠
W
24
g/L
、
戊二醛
20
g/L
,
用前加无水碳酸钠
20
g/L
进行碱化
；
漂白水
，
主要成分
：
次氯酸钠和氢氧化
钠;微酸性次氯酸
，
有效氯含量
60
~80
mg/L
；
乙醇,
含量为
（
950
±50
）
mL/L
%
以上产品均为市售产品％
1.1.2
菌种
大肠埃希菌
ATCC
8099
$
金黄色葡萄
球菌
ATCC
6538
、
绿脓杆菌
ATCC
15442
、
白色念珠
菌
ATCC
10231
,
均购自
广
东环凯微生物科技有限公
司％
1-1.3
培养基与试剂
胰蛋白月东大豆肉汤
（
TSB
）
、
胰蛋白月东大豆琼脂
（
TSA
）
、
液体沙氏培养基
，
购自
青岛海博生物技术有限公司
；
马铃薯葡萄糖琼脂培
养基
（
PDA
）
,
购自
广
东环凯微生物科技有限公司
；
标准硬水
、
胰蛋白月东生理盐水溶液
（
TPS
）、
3%
牛血
清白蛋白
（
BSA
）
,
参照
《
消毒技术规范＞
［
5
］（
简称
《
规范
0
）
配制
;
复合过氧乙酸和季
W
盐戊二醛的中
和剂参照文献
1.24
4
［
6W
］%
1-2.1
喷雾消毒试验
取普通环境实验室桌面自
然菌接种于
TSB
,
37
b
培养
18
h
,
稀释麦氏比浊度
（
McF
）
为
0.5
的菌悬液,
10
4
倍稀释
，
取
0.2
mL/
皿
涂布于
TSA
制成染菌皿
（
染菌量
250
-
300
CFU/
皿
）
％
5
种消毒剂参照说明书的最高消毒浓度
（
复
合过氧乙酸
1
：
24
倍稀释
、
季
W
盐戊二醛
1
：
100
倍稀
释
、
漂白水
6
：
190
倍稀释
、
微酸性次氯酸原液
、
乙醇
100
：
26
倍稀释
）
进行喷雾试验
，
为确保喷雾消毒剂
量的一致性
，
以固定喷头
、
喷洒距离来实现
％
37
b
倒置培养
24
h
,
计算菌落数
，
按下式计算杀灭
率
（
%
）
%
杀灭率
=
（
试验组菌落数-阳性对照菌
落
数
）
/
阳性对照菌落数
x
100%
1-2.2
试验菌悬液的制备
参照
《
规范
》,
复
苏菌种
中国兽医杂志
2020
年
（
第56
卷
）
第10
期
89
培养至
3
代
，
分别取
E.
coil
S.
aureus
、
P.
aeruggosa
单菌落接种
TSA
斜面
37
b
培养
24
h
；
-
albicans
接
种于
PDA
斜面
26
b
培养
48
h
%
用
TPS
洗脱斜面培
物,
为
E
B
ccgl
1B9
McF
、
S
B
auerus
2B0
McF
、
P.
aeruggosa
2
.
1
McF
、
C.
albicans
6
-
9
McF
%
1-
2
-
3
活菌培养计数
参照
《
规范
》
将
E.
cog
S-
aureus
^P.
aeruginosa
在
TSA
中
37
°C
培养
48
h
,
C-
albicans
在
PDA
中
26
b
培养
72
h
,
计算菌浓度
（
CFU/mL
）
%
1-
2
-
4
中和剂鉴定试验
以
E.
cog
和
C-
albgans
为试验菌
，
室温下按中和剂悬液定量鉴定试验设计
6
组
，
参照
《
规范
》
进行试验:第
1
组
（
消毒液
+
菌悬
液
）
；
第
2
组
（
消毒液
+
菌悬液
+
中和剂
）；
第
3
组
（
中和剂
+
准
水
+
）
；
第
4
（
中和
物
+
）
；
第
5
（
TPS
+
准
水
+
）
；
第
6
组
（
TPS
+
中和剂
+
标准硬水
）
%
试验重复
3
次
,
计算各组的菌落数,按下式计算第
3
、
4
、
5
组间菌落
数误差率％
P
a
=
（
+
N-N
）
｝
（
+
N
）
X100%
P
a
：
组间菌落数误差率
；
N3
组间菌落平均数;
N
：
各组菌落平均数
1.2.5
悬液定量杀菌试验
参照
《
规范
》，
室温下
比较复合过氧乙酸和季
W
盐戊二醛不同浓度下对
E
.
occl
、
S
.
auerus
、
P
.
areugcncsa
和
C
.
alicoans
的
定量杀菌效果％消毒液的稀释度为
1
：
100
、
1
：
500
和
1
：
1
000
，
消毒液与标准硬水以
1.25
：
100
、
1.25
：
500
和
1.
25
：
1
000
配制％
0.
5
mL
菌悬液和
0.
5
mL
3%
BSA
混
匀后加入
4
mL
配制浓度的消毒液
，
混
匀
30
min
后
，
取
0.
5
mL
试验菌
、
消毒混合液加入
4
-
5
mL
中和剂中
，
混匀作用
10
min
,
取
1
mL
该样液计算菌
落数
,
试验独立重复
3
次;同时设立对照组％计算杀
灭对数值
（
OL
）
%
OL
=1/
（
T0
）
-1/
（
T
J
OL
：
杀灭对数值
；
T
:阳性对照组平均活菌浓
度
；
T
：
试验
活
浓度
1.2.6
pH
测定
参照
《
规范
》
“
pH
测定法
”
测定复
合过氧乙酸及季
W
盐戊二醛的不同稀释度的
pH
%
2
结果
2-
1
喷雾消毒
喷雾试验结果显示
（
见中插彩版
图
1
）
,
季
W
盐戊二醛
1
：
100
倍稀释和复合过氧乙酸
1
：
24
倍稀释的杀灭率均为
100%
，
漂白水
6
：
190
倍
稀释
、
微酸性次氯酸原液
、
乙醇
100
：
26
倍稀释的杀
灭率分别为
59%
、
37%
和
50%
%
2.2
中和剂鉴定
参照
《
规范
》
和赵斌秀等
［
8
］
发表
90
中国兽医杂志
2020
年
（
第
56
卷
）
第10
期
Chinese
Journal
of
Veterina/
Medicine
的中和剂合格标准
,
1
组无菌生长
,
2
组比
1
、
3
、
4
、
5
1
。
所用中和剂均能有效中和消毒液
,
且中和剂
、
中
组菌数量显著减少,
3
、
4
、
5
组间菌落数误差率不超
过
15%
,
6
组无菌生长
，
中和剂鉴定合格
，
结果见表
和产物对
E.
coil
和
-
abbon
均无影响
。
表
1
中和剂鉴定试验结果
Table
1
Resulta
of
neutralization
identification
test
各组回收菌落(
CFU/mL
)
消毒液
Disinfectant
(
n
=
3
)
3
、
4
、
5
组间
试验
Strain
Recovered
colonies
of
each g/up
误差
率
/%
Er
va
rate
of
5
1
2
3
0
7
4
4.32
X10
6
6
0
0
0
0
g/up
3
,
4
,
5
复
过
CPAA
酸
E
.
coil
0
0
0
0
5
西
8
X10
6
5.54
X10
6
1
多
3
X10
5
6.43
X10
6
10.37
2.30
C.
albicons
E.
coil
1.55
X10
5
6.03
X10
6
1.64
X10
5
6.05
X10
6
季
W
盐戊二醛
QASG
52
12
2.82
C.
albicons
1.50X10
5
科
0
X10
5
1.52X10
5
0.61
注
：
结果为
3
次试验的平均值
Note
:
The
results
were
the
average
of
3
tuals
2-3
悬液定量杀菌由表
2
所示
，
复合过氧乙酸
1
：
1
000
倍稀释对
E.
cob
、
S-
aueus
、
P-
aeruginosa
的
倍稀释对
-
albicans
的杀灭对数值均
＞6
。
参照
《
规范
》
要求,细菌繁殖体的杀灭对数值&
5
、
真菌的
杀灭对数值&
4
,
判定为消毒合格
。
因此
，
季
W
盐戊
杀灭对数值均
＞7
；
季鞍盐戊二醛
1
：
1
000
倍稀释对
S-
aureus
的杀灭对数值
＞7
,
1
：
500
倍稀释对
E.
coil
二醛
1
：
100
倍稀释,复合过氧乙酸
1
：
500
倍稀释对
杀灭对数值
＞
7
,
1
：
100
倍稀释对
P-
aeruginosa
的杀
所测菌株杀灭效果均可达
100%
，
消毒合格
％
灭对数值
＞7
;
复合过氧乙酸和季
W
盐戊二醛
1
：
500
表
2
悬液定量杀菌试验结果
Table
2
Resulta
of
suspension
quantitative
sterilization
test
杀灭对数值
Killing
log
value
(
x
±s
,
n
=
3
)
试验
Seeain
稀释度
Dieueion
复
过
CPAA
酸
季
W
盐戊二醛
QASG
阳性对照浓度
(
CFU/mL
)
Conceneeaeion
oeposieieeconeeoe
1
：
100
E.
coil
7.84±0.09
7.84±0.09
7.84±0.09
7.80±0.14
7.80±0.14
7.80±0.14
7.43
±0.24
7.43
±0.24
7.43
±0.24
7.81
±0.01
7.81
±0.01
3.07±0.58
1
：
500
1
：
1
000
1
：
100
2.90
x10
7
-8.95
x10
7
7.86±0.19
7.78
±0.07
7.43
±0.61
7.65
±0.37
3.08
±0.09
S.
aureus
1
：
500
1
：
1
000
1
：
100
4.55
X10
7
-2.42X10
8
P.
aeruginosa
1
：
500
1
：
1
000
1
：
100
1.71
X10
7
〜
2
多
8
X10
8
1.47±0.52
6.25
±0.05
6.41
±0.15
6.41
±0.15
3.06±0.18
C.
albicans
1
：
500
1
：
1
000
6.36±0.06
0.02±0.01
1
多
8
X10
6
〜
3
多
6
X10
6
2-
4
pH
测定
由表
3
所示
，
季
W
盐戊二醛原液呈
表
3
不同稀释度消毒液的
pH
Table
3
pH
of
disinfectant
with
different
dilution
度
Dieueion
酸性
，
使用前每升原液需加入
20
g
无水碳酸钠进行
碱化
，
使
pH
达到
9.7-10.0
，
该液的工作浓度
pH
在
7.4~9.8
；
复合过氧乙酸原液呈酸性
，
工作浓度的
复
过
CPAA
0.5
-0.8
酸
季
W
盐戊二醛
QASG
2.4
-2.6
9.7
-10.0
pH
范围在
2.
6~3.
5
。
Seock
soeueion
碱
化
Aekaeinesoeueion
1
：
100
1
：
500
1
：
1
000
一
2.6
-2.9
3
讨论
动物设施中
，
人源
、
动物源
、
物源使用不规范或
9.5
-9.8
3.1
-3.3
8.3
-8.5
7.4
-7.6
3.3
-3.5
管理不当均可造成外源物的污染
。
因此
，
严格做好
注:一
：
复合过氧乙酸没有碱化液
Note
:
一:
CPAA
without
alkaline
solution
Chinese
Journal
of
Vete/naR
Medicine
中国兽医杂志
2020
年
（
第
56
卷
）
第
10
期
91
大肠埃希菌
E.
coli
|
稀释
105
倍
diluted
10
5
times
C
|
稀释
KT
倍
|Diluted
IO'times
E
F
金黄色葡萄球菌
S.
aureus
|
稀释
KT
倍
|Diluted
IO'times
P
G
C
|
稀释
KT
倍
〔
Diluted
IO'times
//
p
■D
】
Diluted
10?
times
■
稀释
162
倍
畛
|
稀释
W
倍
,
丄
E
］
〔
Diluted
10
3
times
|
F
绿脓杆菌
P.
aeruginosa
（
转下页
Carried
foaoud
）
92
中国兽医杂志
2020
年
(
第
56
卷
)
第
10
期
（
续图
2
Continued
）
Chinese
Journat
of
Veterina/
Medicine
白色念珠菌
C.
albicans
图
2
悬液定量杀菌试验菌落生长情况
Fig.
2
Colony
growth
in
suspension
quantitative
sthrilizatien
test
P
：
阳性对照组;
A
、
B
、
C
：
分别为复合过氧乙酸
1
：
100
、
1
：
500
、
1
：
1
000
的稀释液试验组
；
D
、
E
、
F
：
分别为
季W
盐戊二醛
1
：
100
、
1
：
500
、
1
：
1
000
的稀释液试验组
P
:
Positive
control
goup
；
A
,
B
,
C
：
CPAA
'
s
dilution
test
g/ups
1
:
100
,
1
:
500
,
1
：
1
000
；
D
#
E
#
F
：
QASG
'
s
dilution
test
g/ups
1
:
100
,
1
:
500
,
1
：
1
000
消毒
是保
证
实验动物设施
洁净,
获得的试验数
参考
％
参考文献
：
[
1
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彭华松
，
徐汪节
，
刘闯
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等
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研究与思考
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中国兽医学报
，
2019
，
39
(
3
)
：
598-
602.
据真实可靠的关键
％
本试验选用常用的复合过氧
酸
、
水
、
微酸性
酸
、
消毒液
，
W
盐戊二醛进行喷
雾
消毒
试验
。
，
复
过
酸
1
：
24
和
W
盐戊二醛
1
：
100
释的杀灭率均为
100%
%
进一步以复合过氧乙酸和
[
2
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2018
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28
(
8
)
：
11-
15.
W
盐戊二醛进行
W盐戊二醛
1
：
100
较
。
，
和复合过
酸
1
：
500
100%
%
[
3
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陈血建
，
郭正洋,黄建飞
，
等•季
W
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•安徽农业科学,
2016
，
44
试验菌杀灭效率
复合型季
W
盐戊二醛由
苯
扎氯
W
、
癸甲漠
W
和
戊二醛
％
戊醛
醛类
消毒剂
，
可
抑制
RNA
、
DNA
和
(
30
)
：
121
—
122
+126.
质
，
杀灭
种
物
;苯
[
5
]
中华
人民共和国卫生部
食
肖毒技术规范
[
S
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12
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原霖
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及影响因素
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中国兽医杂志
,
2010
,
46
(
7
)
：
58
—
60.
扎氯
W
、
癸
甲漠
W
是常用的单
、
双链季
W
盐类阳离
子
活性剂
，
具良好的
(
9
)
%
复型季
W
盐戊二醛降低了单一组分的
消毒
、
提升
性
、
减少
，
同时达到提高
的目的
(
10
)
%
同
时
，
这类消毒剂在酸性
灭
好
(
3W
)
，
储存
，
在碱性条
的化学消毒剂杀菌
[
8
]
赵斌
秀
，
张流波
.
消毒剂消毒效果评价中残留物去除技术
[
J
]
.
中国消毒学杂志,
2016
,
33
(
3
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：
271
—
276.
广
、
、
毒
、
蚀
、
的
％
[
9
]
武月娇食种季
W
盐消毒剂杀菌效果比较分析
[
J
]
•当代畜牧,
2017
,
35
(
29
)
：
55
—56.
本试验在实验室
，
检测了季
W
盐戊二
醛的杀灭
，
杀灭率依次为
：
色
〉
大
希菌
〉
铜绿假单胞菌
，
与
魏
岚
(
11
)
的研究结
一致
，
杀灭
实验室杀灭
物试验的
消毒要求
(
5
打本试验为各实验动物设施消毒液的
[
10
]
李小林
，
关潇
，
林文淑
，等•新型戊二醛
-
癸甲漠
W
复合消毒
剂的杀菌效果及其影响因素的研究
[
J
]
•
中国国境卫生检疫
杂志
,
2017
,
40
(
4
)
：
283
—
289.
[
11
]
魏岚.
3
种常用消毒剂对院内感染常见病原菌效果研究
[
J
]
•
选择提供依据
，
并为有
针
对性杀灭病原体提供
中国病原生物学杂志
,
2016
,
11
(
5
)
：
419
—
423.
中国兽医杂志
2020
年
（
第
56
卷
）
第
10
期
Chinese
Journal
of
Veterinaro
Medicine
《
新型季钱盐戊二醛消毒液杀菌效果评价
》
图版
（
作者
：
何淑华
，
许琦
，
傅江南
，
和君等
，
正文见第
88
〜
92
页
）
图
1
5
种消毒剂喷雾后表面菌落的生长情况
Fig.
&
Growte
of
surface
colonies
after
spraying
five
disinfectents
A
：阳性对照
；
B
：
漂白水
；
C
：
季钱盐戊二醛
；
D
：
微酸性次氯酸
；
E
：
乙醇
；
F
：
复合过氧乙酸
A
:
Positive
control
；
B
:
Bleach
；
C：
QASG
；
D
:
Slightly
acidii
hypochlorous
acid
；
E
:
Ethanol
；
F
:
CPAA