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苹果的组织培养

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2024年4月25日发(作者:公孙冰海)

苹果的组织培养

苹果的组织培养是采用无菌培养技术, 将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、等器官

以及他们的组织切片进行离体培养, 使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。

1973年Jones等培育苹果砧木M-26和M-9 的茎尖获得成功, 之后美国的Button等利用此

技术大量繁殖了英国东茂林试验站育成的苹果砧木M-27 , 促进了其推广应用。我国在这方

面也进行了大量工作, 加速了苹果新品种的推广应用。另外, 由于离体技术处理严格, 所以

很容易脱除昆虫、一般真菌病害和一些细菌病原及病毒, 是复壮品种的有效措施。已成功

脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。

1苹果矮化砧组织培养

(1)材料方法:

苹果矮化砧GM256,春季芽萌动后取田间的枝条, 将萌发的新芽, 用自来水冲洗后

75%酒精0.5~1 min,0.1%升汞5 min, 然后剥取0.5 mm 左右长的茎尖, 接种于诱导培

养基上。以MS 为基本培养基,pH 值为5.8, 培养室温度24℃, 湿度60%左右。将初代培

养出的芽接种到增殖培养基上, 连续继代(每次25~30 d)2 次。 将长至2 cm 左右的试

管苗接入生根培养基中诱导生根。

(2)结果:

①外植体诱导。外植体接种到诱导培养基中,在正常的光照培养条件下均不能诱导出芽,

暗培养20 d 和30 d 的黄化苗经光照后很快变绿, 正常生长。而暗培养40 d 的黄化苗玻

璃化严重, 经光照后也很难正常生长。诱导培养基中,60d后,当BA浓度低于2 mg/L,NAA

浓度高于1mg/L 时不利于矮化砧芽的诱导。IBA也不适宜矮化砧芽的诱导。适宜的浓度

和种类是: MS+BA2 mg/L + NAA0.1 mg/L。

②增殖。诱导培养出的芽接种到增殖培养基上连续继代(每次25~30 d)2 次,在

MS+BA2.0 mg/L + NAA0.05 mg/L和,MS+BA3.0mg/L+ NAA 0.10mg/L上苗生长健壮,

增殖快, 可增殖5~6倍。BA 浓度为1.0 和1.5, NAA 浓度为0.1 mg/L 时试管苗增殖少,

只增殖1~2 倍, 有叶片黄化, 玻璃化苗现象。

③生根培养。将长至2 cm 左右的试管苗接入接入生根培养基中诱导生根,20d后,

1/2MS+IBA0.5 mg/L对生根效果最好, 生根快, 生根数多,平均5.8条/苗, 生根率可达

86.3%, 浓度超过2mg/L 则抑制生根, 只形成愈伤组织。 暗培养和光培养对生根无明显

差别。

2 苹果抗寒砧木组培

(1)材料方法:

砧木品种:珠美海棠、小金海棠、77-34。在春季植株萌发后,切取嫩芽0.5-1.0cm

清水冲洗,先用75%I酒精浸泡15s,再用0.1%升汞浸4-5min,无菌水冲洗干净。以,MS

为基本培养基,蔗糖浓度为3%,琼脂0.7%,附加不同种类、浓度激素。

(2)结果:

①芽绣导。不同砧木品种的芽绣导对激素的要求是有差异的,30d后,MS+

BA0.7mg/L+IBA0.3mg/L 是小金海棠最适培养基,幼苗粗壮,萌发芽为3.8倍;MS+

2024年4月25日发(作者:公孙冰海)

苹果的组织培养

苹果的组织培养是采用无菌培养技术, 将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、等器官

以及他们的组织切片进行离体培养, 使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。

1973年Jones等培育苹果砧木M-26和M-9 的茎尖获得成功, 之后美国的Button等利用此

技术大量繁殖了英国东茂林试验站育成的苹果砧木M-27 , 促进了其推广应用。我国在这方

面也进行了大量工作, 加速了苹果新品种的推广应用。另外, 由于离体技术处理严格, 所以

很容易脱除昆虫、一般真菌病害和一些细菌病原及病毒, 是复壮品种的有效措施。已成功

脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。

1苹果矮化砧组织培养

(1)材料方法:

苹果矮化砧GM256,春季芽萌动后取田间的枝条, 将萌发的新芽, 用自来水冲洗后

75%酒精0.5~1 min,0.1%升汞5 min, 然后剥取0.5 mm 左右长的茎尖, 接种于诱导培

养基上。以MS 为基本培养基,pH 值为5.8, 培养室温度24℃, 湿度60%左右。将初代培

养出的芽接种到增殖培养基上, 连续继代(每次25~30 d)2 次。 将长至2 cm 左右的试

管苗接入生根培养基中诱导生根。

(2)结果:

①外植体诱导。外植体接种到诱导培养基中,在正常的光照培养条件下均不能诱导出芽,

暗培养20 d 和30 d 的黄化苗经光照后很快变绿, 正常生长。而暗培养40 d 的黄化苗玻

璃化严重, 经光照后也很难正常生长。诱导培养基中,60d后,当BA浓度低于2 mg/L,NAA

浓度高于1mg/L 时不利于矮化砧芽的诱导。IBA也不适宜矮化砧芽的诱导。适宜的浓度

和种类是: MS+BA2 mg/L + NAA0.1 mg/L。

②增殖。诱导培养出的芽接种到增殖培养基上连续继代(每次25~30 d)2 次,在

MS+BA2.0 mg/L + NAA0.05 mg/L和,MS+BA3.0mg/L+ NAA 0.10mg/L上苗生长健壮,

增殖快, 可增殖5~6倍。BA 浓度为1.0 和1.5, NAA 浓度为0.1 mg/L 时试管苗增殖少,

只增殖1~2 倍, 有叶片黄化, 玻璃化苗现象。

③生根培养。将长至2 cm 左右的试管苗接入接入生根培养基中诱导生根,20d后,

1/2MS+IBA0.5 mg/L对生根效果最好, 生根快, 生根数多,平均5.8条/苗, 生根率可达

86.3%, 浓度超过2mg/L 则抑制生根, 只形成愈伤组织。 暗培养和光培养对生根无明显

差别。

2 苹果抗寒砧木组培

(1)材料方法:

砧木品种:珠美海棠、小金海棠、77-34。在春季植株萌发后,切取嫩芽0.5-1.0cm

清水冲洗,先用75%I酒精浸泡15s,再用0.1%升汞浸4-5min,无菌水冲洗干净。以,MS

为基本培养基,蔗糖浓度为3%,琼脂0.7%,附加不同种类、浓度激素。

(2)结果:

①芽绣导。不同砧木品种的芽绣导对激素的要求是有差异的,30d后,MS+

BA0.7mg/L+IBA0.3mg/L 是小金海棠最适培养基,幼苗粗壮,萌发芽为3.8倍;MS+

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