2024年5月21日发(作者：笃德庸)

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医学综述２００８年９月第ｌ４卷第ｌ８期Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｃａｐｉｔｕｌａｔｅ．Ｓｅｐ　２００８，Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．１８　

共聚焦激光显微内镜在消化系统疾病诊断中的应用　

夏新新（综述），施

中图分类号：Ｒ４４５．９　

斌（审校）　

文章编号：１００６－２０８４（２００８）１８－２８５６－０３　

（上海长征医院消化内科，上海２００００１）　

文献标识码：Ａ　

摘要：共聚焦激光显微内镜是新近出现的一种内镜，其通过获得消化道黏膜层高度放大的　

图像以达到“光学活检”目的，不需组织活检和组织病理检查即可诊断某些消化系统疾病。本　

文就共聚交激光显微内镜在消化道疾病诊断中的应用予以简要回顾。　

关键词：共聚焦激光显微内镜；消化道疾病；诊断　

Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｏｎｆｏｃａｌ　Ｌａｓｅｒ　Ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ　ｉｎ　Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ　ＸＩＡ　Ｘｉｎ—　．　

轴范围（即纵向扫面深度）为０　

２５０　ｍ。共聚焦图像可与内　

—

镜图像同时生成。　

在共聚焦激光显微内镜检　

查过程中需应用荧光造影剂辅　

ＳＨＩ　Ｂｉｎ．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｚｈｅｎｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００００１，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ　ｉｓ　ｎｅｗｌｙ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｔｏｏｌ　ｔｏ　ｄｉａｇｎｏｓｅ　ｔｈｅ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　

ｗｉｔｈｏｕｔ　ｔｉｓｓｕｅ　ｂｉｏｐｓｙ　ａｎｄ　ｔｉｓｓｕｅ　ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｗｈｉｃｈ　ｃａｎ　ｒｅａｌｉｚｅ“ｏｐｔｉｃ　ｂｉｏｐｓｙ’’ｂｙ　ａｃｈｉｅｖｉｎｇ　ｔｈｅ　ｈｉｓｈｅｓｔ　

助成像，以使成像对比鲜明。目　

前可用于人的对比剂包括荧光　

素钠、四环素、吖啶黄和甲酚紫。　

ｍａｇｎｉ￣ｉｎｇ　ｉｍａ￣ｎｇ　ｏｆ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｔｒａｃｔ　ｍｅｍｂｒａｎｅ．Ｔｈｉｓ　ａｒｔｉｃｌｅ　ｒｅｎｅｗｓ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｆｏｅａｌ　ｌａｓｅｒ　

ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒａ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ；Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ；Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　

作为一种新型内镜，共聚焦激光显微内镜可获　

这些对比剂既可全身应用（荧光　

素钠、四环素），也可局部喷洒（吖啶黄、甲酚紫）　Ｊ。　

得消化道黏膜层高度放大１０００倍后的图像，消化道　

其中最常用的是荧光素钠（１０％，５—１０　ｍＬ，用于结　

黏膜的组织结构、细胞及亚细胞结构清晰可见，使临　

肠、食管和胃）和吖啶黄（０．０２％，用于胃和结肠）。　

床医师获得即时的、高分辨率的组织学诊断，并根据　

组织学诊断及时采取相应治疗措施。共聚焦激光内　

镜的诞生意味着内镜检查从宏观到微观、从表层到　

深层、从影像形态学到功能组织学的质的转变。尽　

管其应用于临床仅有很短的时间，却已经显示出其　

出色的诊断价值。　

１　共聚焦激光内镜的原理及组成　

共聚焦激光显微内镜是在传统电子内镜的头端　

整合了共聚焦激光显微镜而成。单点扫描共聚焦显　

微镜是以光栅模式扫描某点，测量从连续的点返回　

至检测器的光并将其数字化，从而构成扫描区域的　

二维图像，每个图像的形成均为一“光学组成”，代表　

组织中的局部平面　。　

为了适应临床应用的需要，微型化的共聚焦显　

微镜应用单根光纤同时充当照明点光源和观察针　

孔，除可行标准的电子内镜检查外，还能进行共聚焦　

显微镜检查　Ｊ。其前端部和插入镜管的直径均为　

ｌ２．８　ｍｍ，包含１个注水和注气孔、２个光导束、１个　

辅助注水孔道（用于局部应用对比剂）和１个２．８　

ｍｍ的工作孔道。成像平面的深度由手柄上的２个　

遥控按钮控制。进行激光显微内镜检查时，发射至　

组织表面的氩离子激光激发波长４８８　ｎｍ，到达组织　

表面的最大激光输出功率≤１　ｍＷ。共聚焦图像的扫　

描速度为０．８　ｓ（１０２４×１０２４像素）或１．６　ｓ　

（１０２４×５１２像素）。光学层面厚度为７　ｍ，侧面分　

辨率为０．７　ｍ（视野４７５　ｍ×４７５　ｍ）。表层下ｚ　

荧光素钠是一种廉价、无致突变作用的荧光对　

比剂，静脉注射后２０　ｓ内即可显像，其作用可持续３Ｏ　

ｍｉｎ＿４　Ｊ

荧光素钠可进行全部ｚ轴范围的检测，但由　

于其静脉给药后不进入胃肠黏膜上皮细胞的细胞　

核，故在共聚焦内镜下不易看到细胞核，但对于细　

胞、血管和结缔组织分辨率较高　Ｊ。盐酸吖啶黄可　

被细胞核和细胞质染色，仅局限于黏膜表层（自黏膜　

表面至黏膜下５０　ｍ的深度），对不典型增生和肿瘤　

的检测极为有利。　

２共聚焦激光内镜对消化道疾病诊断价值　

２．１　Ｂａｒｒｅｔｔ食管共聚焦激光显微内镜对正常食　

管鳞状上皮和乳头等结构具有很高的解析度。Ｂａｒ—　

ｒｅｔｔ食管是胃食管反流病患者的一种癌前状态，典型　

的Ｂａｒｒｅｔｔ食管化生柱状上皮与贲门或胃柱状上皮不　

同，其形态呈绒毛状，具有特征性的杯状细胞。同　

时，新生血管及其渗漏现象的存在也使其固有层亮　

度不均匀因此，Ｂａｒｒｅｔｔ食管在共聚焦激光显微内镜　

检查过程中即可被确诊。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ等。。　对疑为Ｂａｒ—　

ｒｅｔｔ食管的４２例患者进行了荧光素钠辅助的共聚焦　

激光显微内镜检查，并对检查区域的黏膜进行活检，　

把内镜获得的组织学信息与活检组织病理学比较。　

结果显示，共聚焦激光显微内镜对Ｂａｒｒｅｔｔ食管及　

Ｂａｒｒｅｔｔ食管瘤样变诊断的敏感度分别是９８．８％和　

９１．７％，特异度分别为９４．４％和９９．０％，准确度均为　

９７．５％。刘红等　的研究结果与国外相似，因此共　

聚焦内镜可在内镜检查实时进行黏膜组织学检查，　

。

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２００８年９月第１４卷第１８期Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｃａｏｉｔｕｌａｔｅ，Ｓｅｐ　２００８，Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．１８　

诊断Ｂａｒｒｅｔｔ食管敏感度、特异度高，为Ｂａｒｒｅｔｔ食管的　

一

呈单个和聚集成群的白色光点样表现，幽门螺杆菌　

感染在随后的组织学检查和细菌培养中得到确认，　

诊断提供新的工具。　

般非糜烂性胃食管反流病在胃镜下无阳性表　

且体外细菌培养证实幽门螺杆菌可主动摄取吖啶　

现，病理组织学表现为炎细胞浸润，乳头内毛细血管　

黄。因此，吖啶黄不仅能够显示胃黏膜上皮细胞核，　

扩张，上皮间隙增宽，基底层增生等改变。其临床诊　

而且可以显示黏膜表面和深部黏膜层内的幽门螺杆　

断主要依靠反流症状和２４　ｈ食管ｐＨ值监测。目前　

菌，局部聚集或单个的细菌表现为明亮的点，故经共　

有研究发现，在共聚焦内镜下可以发现非糜烂性胃　

食管反流病的微观改变，从而进行内镜下诊断非糜　

烂性胃食管反流病　。　

聚焦显微内镜图像放大后可清楚地观察到包括菌体　

和鞭毛的特征性形态。相信未来共聚焦激光显微内　

镜有望成为检测有无幽门螺杆菌感染的有效工具。　

２．２食管鳞状细胞癌Ｐｅｃｈ等　应用共聚焦激光　２．５胶原性结肠炎　胶原性结肠炎临床主要症状　

显微内镜对２１例可疑早期鳞状细胞癌患者进行前　

瞻性研究，卢戈溶液局部染色和荧光素钠静脉注射　

后，在标准上消化道内镜检查食管的过程中，同时行　

共聚焦内镜检查，并采集共聚焦图像即进行即时诊　

断，然后进行活检组织学检查。结果显示，来自２１　

例患者４３个不同部位的共聚焦图像中有２７个部位　

（６３％）组织学证明是早期鳞状细胞癌。所有鳞状细　

胞癌都被共聚焦内镜准确无误地显示出来，另外有２　

个部位被误诊为新生瘤。共聚焦内镜预测食管鳞状　

细胞癌总准确度为９５％、敏感度为１００％、特异度为　

８７％。因此，共聚焦激光显微内镜能够准确地提供　

早期鳞状细胞癌的虚拟组织学表现，为食管鳞状细　

胞癌早期诊断提供了有力的工具。　

２．３　胃癌Ｙｅｏｈ等　叫应用共聚焦激光显微内镜对　

５例离体胃切除标本（吖啶黄局部染色）和８例患者　

（荧光素钠静脉注射）进行了检查。在标准上消化道　

内镜检查过程中进行共聚焦内镜检查，在胃窦、胃　

体、贲门等标准采集共聚焦图像，然后行活检组织学　

检查。来自１３２个不同部位的２７６６幅共聚焦图像与　

４４份活检标本的组织学结果进行比较，建立了正常　

胃黏膜、慢性胃炎（存在慢性炎性细胞）、肠化生（存　

在杯状细胞）、癌（结构异形，核浆比增加，染色质凝　

聚）的共聚焦图像诊断标准。应用这些诊断特征，前　

瞻性盲法研究显示共聚焦内镜预测胃癌敏感度为　

８４％、特异度为９５％、准确度为８０％。证实共聚焦激　

光内镜在体内即可诊断黏膜肿瘤和癌前状态，并允　

许在内镜检查中做出细胞组织学诊断。因此，共聚　

焦内镜有望应用于胃癌高风险人群中胃癌和癌前状　

态的筛查与诊断。　

２．４幽门螺杆菌感染　通常幽门螺杆菌感染可用　

非侵入性和侵入性的方法，如尿素呼气试验、粪便监　

测、内镜活检尿素酶试验和血清学检查等诊断，而应　

用共聚焦激光显微内镜经吖啶黄染色证实幽门螺杆　

菌的存在有可能成为替代的诊断方法。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　

等¨　报道，应用共聚焦激光显微内镜在１例７０岁患　

者体内首次检测到幽门螺杆菌感染，吖啶黄染色后　

为慢性腹泻，诊断主要依靠结肠组织活检，其病理特　

征为上皮下胶原带增厚。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ等　报道使用共　

聚焦内镜很容易识别上皮下增厚胶原带。该研究应　

用荧光素钠作为对比剂采集共聚焦图像，根据有无　

胶原带进行靶向活检。结果表明共聚焦内镜有助于　

鉴别受侵袭的结肠黏膜和正常的黏膜部位。　

２．６结、直肠癌筛选性大肠镜检查在西方国家被　

认为是早期诊断结、直肠癌的标准方法。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　

等　对４２例结、直肠病变患者进行共聚焦激光显微　

内镜检查，根据上皮细胞形态、隐窝类型及血管结构　

等对共聚焦图像进行前瞻性评价，随后与活检组织　

学结果进行比较。结果显示，盐酸吖啶黄和荧光素　

钠均可产生高质量的共聚焦图像，在荧光素钠染色　

下，上皮内瘤变和结肠癌表现为管状、绒毛状或不规　

则状结构及杯状细胞减少，瘤变组织新生血管则表　

现为不规则的血管结构伴荧光素渗漏。将来自３９０　

个不同部位的１３　０２０幅图像与１０３８个活检标本的　

组织病理进行比较，结果显示共聚焦激光内镜可高　

度地预测结、直肠新生物的性质，其诊断敏感度为　

９７．４％、特异度为９９．４％、准确度为９９．２％。　

３共聚焦激光显微内镜的前景　

由于使用的荧光剂、激光束的穿透力及其分辨　

率的限制，在一定程度上限制共聚焦激光显微内镜　

的临床应用。但作为一种新发展起来的临床诊断技　

术，共聚交激光显微内镜允许在常规检查中对在体　

组织进行虚拟组织学检查，且随着新型的荧光对比　

剂和分子探针的研发，还能在显微内镜下进行特异　

性染色，可以更轻易地发现病变。相信随着内镜技　

术、激光扫描技术及计算机图像处理技术的不断进　

步和新型荧光剂、分子探针、特异性分子标志物的研　

发，共聚焦激光显微内镜可以逐步完善，并大量应用　

于消化道早期肿瘤的筛检和确诊。　

参考文献　

［１］Ｈｅｌｍｃｈｅｎ　Ｆ．Ｍｉｎｉａｔｕｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｓ　ｕｓｉｎｇ　ｆｉｂｒｅ　

ｏｐｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｅｘｐ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００２，８７（６）：７３７－７４５．　

［２］　Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｎｅｕｒａｃｈ　ＦＭ．Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｉｍａｇｉｎｇ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　

Ｇａｓｔｏｒｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２００５，３（７　Ｓｕｐｐｌ　１）：５８－６０．　

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・

２８５８・　医学综述２００８年９月第１４卷第１８期Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｃａｐｉｔｕｌａｔｅ．Ｓｅｐ　２００８，ｖ０１．１４，Ｎｏ．１８　

高效液相色谱法测定穿琥宁氯化钠注射液中的含量及有关物质　

崔惠平，郭兴奎，俞红卫　

（山东中医药大学附属医院药剂科，济南２５００１２）　

中图分类号：Ｒ９１７　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６－２０８４（２００８）１８－２８５８－０３　

摘要：目的　制定穿琥宁氯化钠注射液含量及有关物质的测定方法。方法　采用高效液相色谱法　

测定，ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃｌ８色谱柱，流动相为甲醇一０．０５％磷酸二氢钾溶液（用磷酸调ｐＨ值为３　０）（６０：　

））；检测波长：２５１　ｎｍ，柱温：３０￣Ｃ，流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ。结果穿琥宁在２１．６～４３２．０　ｍＬ浓度范围内　

线性关系量良好（ｒ＝０．９９９３），日内、日间精密度试验ＲＳＤ分别＜０．５５％和＜１．０８％，回收率为９９．８３％　

（ＲＳＤ＝０．３０％）。结论该方法可作为穿琥宁氯化钠注射液的质量控制方法。　

关键词：穿琥宁；高效液相色谱法；有关物质　

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ｉｎ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｒｏａｎ－　

制剂，已被国家中医药管　

理局批准为全国中医院急　

诊科室首批必备中药之　

一

在临床上已得到广泛　

的应用　］。本文参考　

，

ｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ａｎｄ　Ｓｏｄｉｕｍ　Ｃｈｉｏｒａｄｅ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ＣＵＩ　ｌｉｕｉ—　

ｐｉｎｇ，ＧＵＯ　Ｘｉｎｇ　ｋｕｉ，　Ｈｏｎｇ—ｗｅｉ．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆＳｈａｎｄｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓ　‰一　

《中华人民共和国药典》　

２００５年版二部　中注射　

ｄｉｔｉｏｈａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊｉｎ￣ｔｎ　２５００１　１，Ｃ＾ｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｌｌｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｌｌ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｒｏｇｒａ—　

用穿琥宁的有关规定，建　

ｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ｉｎ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｍａｎｄｍｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ａｎｄ　Ｓｏｄｉｕｍ　ｅｈｌｏｒａｄｅ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　

立了穿琥宁注射液的含量　

ｓｕｂｓｔａｎｅｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｎ　ｏｐｔｉｍａｌ　ＨＰＬＣ　ｍａｔｈｅｄ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ｕｐ．Ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　ＴＭ　

Ｃ１８　ｃｏｌｕｍｎ．Ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．０５ｒａｐｌ・Ｌ～ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｄｉｈｙｄｍｇｅｎ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｓｏ－　

及有关物质的高效液相色　

ｌｕｔｉｏｎ．ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ［（ｐＨ　ａｄｊｕｓｔｅｄ　ｔｏ　３．０）ｂｙ　Ｈ３ＰＯ４］（６０：４０）ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０　ｍＬ・ｍｉｎ－。，ａｎｄ　

谱（ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃ，ｌｉｑｕｉｄ　

ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｖｅ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２５１　ｎｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｅｐｅｒａｒｕｒｅ　ｗａｓ　３０℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｗｉｔｈｉｎ　

２１．６～４３２．０　ｍＬ　ｏｆ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｓｏｄｉｕｍ　ｄｅｈｙｄｒｏａｎｄｒａｎ　ｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　ｓｕｃｃｉｎａｔｅ（ｒ＝０．９９９３）．，Ｉ１Ｉｌｅ　ａｖｅｒａｇｅ　

ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）测　

定方法。　

ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９９．８３％（ＲＳＤ＝０．３％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｐｏ—　

ｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｍａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ａｎｄ　Ｓｏｄｉｕｍ　ｃｈｌｏｒａｄｅ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｄｅｈｙｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　ｓｕｃｃｉｎａｔｅ；Ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃ，ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；　

Ｒｅｌａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　

１材料与仪器　

１．１　仪器　ｕＶ－２１０２紫　

外分光光度计（上海仪器有限公司）；Ａｇｉｌｅｎｔｌ　１００高　穿琥宁来源于爵床科植物穿心莲，它是由叶中　

含量最高的穿心莲内酯与琥珀酸酐反应，生成脱水　

效液相色浦仪（美国）；ＴＨＺ一８２型恒温水浴振荡器　

穿心莲内酯琥珀酸半酯后，再生成单钾盐而制成的　

（上海常思工贸有限公司）。　

微黄色灭菌水溶性液体Ｈ　Ｊ。穿琥宁注射液是国家中　１．２药品及试剂穿琥宁（哈尔滨三联药业有限公　

医药管理局批准的全国中医医院急诊科（室）首批必　

备纯中药制剂，具有抗菌、解毒、解热、消炎、促进肾　

上腺皮质功能及镇静作用，是清热解毒、消肿止痛的　

良药，能静脉和肌内注射。穿琥宁注射剂为纯中药　

司提供，规格：０．１　ｇ／支，批号分别为：０３０４２７，　

０３０４２９，０３０５０８）；脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照　

品（成都天台山制药有限公司提供，经峰面积归一化　

法测得含量为９９．６３％）；其他试剂均为分析纯。　

Ｓｅｌｋｉｎ　Ｂ，Ｒａｊａｄｈｙａｋｓｈａ　Ｍ，Ｇｏｎｚａｌｅｚ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｍｉ－　

Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ　Ｅｎｄｏｓｃ，２Ｏｏ６，６３（５）：２４３．　

ｃｒｏｓｃｏｐｙ　ｉｎ　ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｄｅｒｍａｔｏｌ　Ｃｌｉｎ，２００１，１９（２）：　

３６９—３７７　

Ｉｓａｏ　Ｏ，Ｔｏｍｏｈ　ｆｒｏ　Ｋ，Ｈｉｓａｏ　Ｔ．Ａ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｎｏｒｍａｌ　ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ　ｕｓｉｎｇ　

［９］　

Ｐｅｃｈ　Ｏ．Ｒａｂｅｎｓｔｅｉｎ　Ｔ，Ｍａｎｎｅｒ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓ．　

ｃｏｐｙ　ｆｏｒ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｄｉｇｎｏｓｉｓａ　ｏｆ　ｅａｒｌｙ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｉｎ　ｔｈｅ　

ｅｓｏｐｈａｇｕｓ［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ　Ｅｎｄｏｓｃ，２００７，６５（５）：３４６　

ｔｏ—Ｔｅｌｌｅｚ　Ｍ，Ｋｈｏｒ　ＣＪＬ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒａ　ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ　

［１Ｏ］　

Ｙｅｏｈ　ＫＧ，Ｓａｌ

ｉｓ　ｕｓｅｆｕｌ　ｆｏｒ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｒａｐｉｄ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｇａｓｔｉｃ　ｎｅｏｐｌｒｓｉａａ　ａｎｄ　ｐｒｅ—Ｂｅ—　

ｃ０ｎｆｏｃａｌ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ『Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ　Ｅｎｄｏｓｃ，２００６，６３　

（５）：２２０．　

Ｐａｗｌｅｙ　ＪＢ　Ｌｉｍｉｔａｔａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｏｐｔｉｃａｌ　ｓｅｃｔｉｏｎｉｎｇ　ｉｎ　ｌｉｖｅ—ｃｅｌｌ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　

ｏｐｌａｓｉａ［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２ｏｏ５，１２８（４　Ｓｕｐｐｌ　２）：２７．　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，Ｂｕｒｇ　Ｊ，ｅｔ　ａ１　Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ　Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ　ｐｙｌｏｒｉ　

ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ［Ｊ］．Ｓｃａｎｎｉｎｇ，２００２，２４（５）：２４１－２４６　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｇｏｓｓｎｅｒ　Ｌ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｂａｒｒｅｔｔ　ｓ　

ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ［Ｊ］．Ｇａｓｔｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００５，１２８　

（７）：２１１９－２１２３　

ｅｓｏｐｈａｇｕｓ　ａｎｄ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｎｅｏｐｌａｓｉａ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏ－　

［１２］　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｈｏｆｆｍａｎ　Ａ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｃｏ１．　

ｐｙ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２００６，４（８）：９７９－９８７．　

刘红，李延青，赵幼安，等．共聚焦内镜诊断Ｂａｒｒｅｔｔ食管初步研　

究［Ｊ］．中华消化杂志，２００７，２７（２）：８３—８６．　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｌａｍｍｅｍｄｏｒｆ　Ｋ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，ｅｔ　ａ１　Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ　ｃｈａｎｇｅｓ　

１ａｇｅｎｏｕｓ　ｃｏｌｉｔｉｓ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ［Ｊ］．Ｇｕｔ，２００６，５５　

（４）：５９１－５９２．　

［１３］　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｂｕｒｇ　Ｊ．Ｖｉｅｔｈ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒ　ａｅｎｄｏｓｃｏｐｙ　ｏｒｆ　ｄｉ．　

ａｇｕｏｓｌｎｇ　ｉｎｔｒａｅｐｉｈｅｌｔｉｌ　ｎｅｏｐｌａｓｉａｓ　ａｎｄ　ｃｏｌａｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎ　ｖｌｖｏ　

ｉｎ　ｎｏｎ　ｅｒｏｓｉｖｅ　ｒｅｆｌｕｘ　ｄｉｓｅａｓｅ（ＮＥＲＤ）ｃａｎ　ｂｅ　ｄｉａｇｎｏｓｅｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｏｎ—　

［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｄｏｓｃｏｐｙ，２００４，１２７（３）：７０６－７１３．　

ｇｏｉｎｇ　ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉａｃｒｏｓｃｏｐｙ（ＣＬＥ）［Ｊ］．　

收稿日期：２００８－０４－２８修回日期：２００８－０７—３１　

2024年5月21日发(作者：笃德庸)

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医学综述２００８年９月第ｌ４卷第ｌ８期Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｃａｐｉｔｕｌａｔｅ．Ｓｅｐ　２００８，Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．１８　

共聚焦激光显微内镜在消化系统疾病诊断中的应用　

夏新新（综述），施

中图分类号：Ｒ４４５．９　

斌（审校）　

文章编号：１００６－２０８４（２００８）１８－２８５６－０３　

（上海长征医院消化内科，上海２００００１）　

文献标识码：Ａ　

摘要：共聚焦激光显微内镜是新近出现的一种内镜，其通过获得消化道黏膜层高度放大的　

图像以达到“光学活检”目的，不需组织活检和组织病理检查即可诊断某些消化系统疾病。本　

文就共聚交激光显微内镜在消化道疾病诊断中的应用予以简要回顾。　

关键词：共聚焦激光显微内镜；消化道疾病；诊断　

Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｏｎｆｏｃａｌ　Ｌａｓｅｒ　Ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ　ｉｎ　Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ　ＸＩＡ　Ｘｉｎ—　．　

轴范围（即纵向扫面深度）为０　

２５０　ｍ。共聚焦图像可与内　

—

镜图像同时生成。　

在共聚焦激光显微内镜检　

查过程中需应用荧光造影剂辅　

ＳＨＩ　Ｂｉｎ．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｚｈｅｎｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００００１，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ　ｉｓ　ｎｅｗｌｙ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｔｏｏｌ　ｔｏ　ｄｉａｇｎｏｓｅ　ｔｈｅ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　

ｗｉｔｈｏｕｔ　ｔｉｓｓｕｅ　ｂｉｏｐｓｙ　ａｎｄ　ｔｉｓｓｕｅ　ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｗｈｉｃｈ　ｃａｎ　ｒｅａｌｉｚｅ“ｏｐｔｉｃ　ｂｉｏｐｓｙ’’ｂｙ　ａｃｈｉｅｖｉｎｇ　ｔｈｅ　ｈｉｓｈｅｓｔ　

助成像，以使成像对比鲜明。目　

前可用于人的对比剂包括荧光　

素钠、四环素、吖啶黄和甲酚紫。　

ｍａｇｎｉ￣ｉｎｇ　ｉｍａ￣ｎｇ　ｏｆ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｔｒａｃｔ　ｍｅｍｂｒａｎｅ．Ｔｈｉｓ　ａｒｔｉｃｌｅ　ｒｅｎｅｗｓ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｆｏｅａｌ　ｌａｓｅｒ　

ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒａ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ；Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ；Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　

作为一种新型内镜，共聚焦激光显微内镜可获　

这些对比剂既可全身应用（荧光　

素钠、四环素），也可局部喷洒（吖啶黄、甲酚紫）　Ｊ。　

得消化道黏膜层高度放大１０００倍后的图像，消化道　

其中最常用的是荧光素钠（１０％，５—１０　ｍＬ，用于结　

黏膜的组织结构、细胞及亚细胞结构清晰可见，使临　

肠、食管和胃）和吖啶黄（０．０２％，用于胃和结肠）。　

床医师获得即时的、高分辨率的组织学诊断，并根据　

组织学诊断及时采取相应治疗措施。共聚焦激光内　

镜的诞生意味着内镜检查从宏观到微观、从表层到　

深层、从影像形态学到功能组织学的质的转变。尽　

管其应用于临床仅有很短的时间，却已经显示出其　

出色的诊断价值。　

１　共聚焦激光内镜的原理及组成　

共聚焦激光显微内镜是在传统电子内镜的头端　

整合了共聚焦激光显微镜而成。单点扫描共聚焦显　

微镜是以光栅模式扫描某点，测量从连续的点返回　

至检测器的光并将其数字化，从而构成扫描区域的　

二维图像，每个图像的形成均为一“光学组成”，代表　

组织中的局部平面　。　

为了适应临床应用的需要，微型化的共聚焦显　

微镜应用单根光纤同时充当照明点光源和观察针　

孔，除可行标准的电子内镜检查外，还能进行共聚焦　

显微镜检查　Ｊ。其前端部和插入镜管的直径均为　

ｌ２．８　ｍｍ，包含１个注水和注气孔、２个光导束、１个　

辅助注水孔道（用于局部应用对比剂）和１个２．８　

ｍｍ的工作孔道。成像平面的深度由手柄上的２个　

遥控按钮控制。进行激光显微内镜检查时，发射至　

组织表面的氩离子激光激发波长４８８　ｎｍ，到达组织　

表面的最大激光输出功率≤１　ｍＷ。共聚焦图像的扫　

描速度为０．８　ｓ（１０２４×１０２４像素）或１．６　ｓ　

（１０２４×５１２像素）。光学层面厚度为７　ｍ，侧面分　

辨率为０．７　ｍ（视野４７５　ｍ×４７５　ｍ）。表层下ｚ　

荧光素钠是一种廉价、无致突变作用的荧光对　

比剂，静脉注射后２０　ｓ内即可显像，其作用可持续３Ｏ　

ｍｉｎ＿４　Ｊ

荧光素钠可进行全部ｚ轴范围的检测，但由　

于其静脉给药后不进入胃肠黏膜上皮细胞的细胞　

核，故在共聚焦内镜下不易看到细胞核，但对于细　

胞、血管和结缔组织分辨率较高　Ｊ。盐酸吖啶黄可　

被细胞核和细胞质染色，仅局限于黏膜表层（自黏膜　

表面至黏膜下５０　ｍ的深度），对不典型增生和肿瘤　

的检测极为有利。　

２共聚焦激光内镜对消化道疾病诊断价值　

２．１　Ｂａｒｒｅｔｔ食管共聚焦激光显微内镜对正常食　

管鳞状上皮和乳头等结构具有很高的解析度。Ｂａｒ—　

ｒｅｔｔ食管是胃食管反流病患者的一种癌前状态，典型　

的Ｂａｒｒｅｔｔ食管化生柱状上皮与贲门或胃柱状上皮不　

同，其形态呈绒毛状，具有特征性的杯状细胞。同　

时，新生血管及其渗漏现象的存在也使其固有层亮　

度不均匀因此，Ｂａｒｒｅｔｔ食管在共聚焦激光显微内镜　

检查过程中即可被确诊。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ等。。　对疑为Ｂａｒ—　

ｒｅｔｔ食管的４２例患者进行了荧光素钠辅助的共聚焦　

激光显微内镜检查，并对检查区域的黏膜进行活检，　

把内镜获得的组织学信息与活检组织病理学比较。　

结果显示，共聚焦激光显微内镜对Ｂａｒｒｅｔｔ食管及　

Ｂａｒｒｅｔｔ食管瘤样变诊断的敏感度分别是９８．８％和　

９１．７％，特异度分别为９４．４％和９９．０％，准确度均为　

９７．５％。刘红等　的研究结果与国外相似，因此共　

聚焦内镜可在内镜检查实时进行黏膜组织学检查，　

。

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２００８年９月第１４卷第１８期Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｃａｏｉｔｕｌａｔｅ，Ｓｅｐ　２００８，Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．１８　

诊断Ｂａｒｒｅｔｔ食管敏感度、特异度高，为Ｂａｒｒｅｔｔ食管的　

一

呈单个和聚集成群的白色光点样表现，幽门螺杆菌　

感染在随后的组织学检查和细菌培养中得到确认，　

诊断提供新的工具。　

般非糜烂性胃食管反流病在胃镜下无阳性表　

且体外细菌培养证实幽门螺杆菌可主动摄取吖啶　

现，病理组织学表现为炎细胞浸润，乳头内毛细血管　

黄。因此，吖啶黄不仅能够显示胃黏膜上皮细胞核，　

扩张，上皮间隙增宽，基底层增生等改变。其临床诊　

而且可以显示黏膜表面和深部黏膜层内的幽门螺杆　

断主要依靠反流症状和２４　ｈ食管ｐＨ值监测。目前　

菌，局部聚集或单个的细菌表现为明亮的点，故经共　

有研究发现，在共聚焦内镜下可以发现非糜烂性胃　

食管反流病的微观改变，从而进行内镜下诊断非糜　

烂性胃食管反流病　。　

聚焦显微内镜图像放大后可清楚地观察到包括菌体　

和鞭毛的特征性形态。相信未来共聚焦激光显微内　

镜有望成为检测有无幽门螺杆菌感染的有效工具。　

２．２食管鳞状细胞癌Ｐｅｃｈ等　应用共聚焦激光　２．５胶原性结肠炎　胶原性结肠炎临床主要症状　

显微内镜对２１例可疑早期鳞状细胞癌患者进行前　

瞻性研究，卢戈溶液局部染色和荧光素钠静脉注射　

后，在标准上消化道内镜检查食管的过程中，同时行　

共聚焦内镜检查，并采集共聚焦图像即进行即时诊　

断，然后进行活检组织学检查。结果显示，来自２１　

例患者４３个不同部位的共聚焦图像中有２７个部位　

（６３％）组织学证明是早期鳞状细胞癌。所有鳞状细　

胞癌都被共聚焦内镜准确无误地显示出来，另外有２　

个部位被误诊为新生瘤。共聚焦内镜预测食管鳞状　

细胞癌总准确度为９５％、敏感度为１００％、特异度为　

８７％。因此，共聚焦激光显微内镜能够准确地提供　

早期鳞状细胞癌的虚拟组织学表现，为食管鳞状细　

胞癌早期诊断提供了有力的工具。　

２．３　胃癌Ｙｅｏｈ等　叫应用共聚焦激光显微内镜对　

５例离体胃切除标本（吖啶黄局部染色）和８例患者　

（荧光素钠静脉注射）进行了检查。在标准上消化道　

内镜检查过程中进行共聚焦内镜检查，在胃窦、胃　

体、贲门等标准采集共聚焦图像，然后行活检组织学　

检查。来自１３２个不同部位的２７６６幅共聚焦图像与　

４４份活检标本的组织学结果进行比较，建立了正常　

胃黏膜、慢性胃炎（存在慢性炎性细胞）、肠化生（存　

在杯状细胞）、癌（结构异形，核浆比增加，染色质凝　

聚）的共聚焦图像诊断标准。应用这些诊断特征，前　

瞻性盲法研究显示共聚焦内镜预测胃癌敏感度为　

８４％、特异度为９５％、准确度为８０％。证实共聚焦激　

光内镜在体内即可诊断黏膜肿瘤和癌前状态，并允　

许在内镜检查中做出细胞组织学诊断。因此，共聚　

焦内镜有望应用于胃癌高风险人群中胃癌和癌前状　

态的筛查与诊断。　

２．４幽门螺杆菌感染　通常幽门螺杆菌感染可用　

非侵入性和侵入性的方法，如尿素呼气试验、粪便监　

测、内镜活检尿素酶试验和血清学检查等诊断，而应　

用共聚焦激光显微内镜经吖啶黄染色证实幽门螺杆　

菌的存在有可能成为替代的诊断方法。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　

等¨　报道，应用共聚焦激光显微内镜在１例７０岁患　

者体内首次检测到幽门螺杆菌感染，吖啶黄染色后　

为慢性腹泻，诊断主要依靠结肠组织活检，其病理特　

征为上皮下胶原带增厚。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ等　报道使用共　

聚焦内镜很容易识别上皮下增厚胶原带。该研究应　

用荧光素钠作为对比剂采集共聚焦图像，根据有无　

胶原带进行靶向活检。结果表明共聚焦内镜有助于　

鉴别受侵袭的结肠黏膜和正常的黏膜部位。　

２．６结、直肠癌筛选性大肠镜检查在西方国家被　

认为是早期诊断结、直肠癌的标准方法。Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　

等　对４２例结、直肠病变患者进行共聚焦激光显微　

内镜检查，根据上皮细胞形态、隐窝类型及血管结构　

等对共聚焦图像进行前瞻性评价，随后与活检组织　

学结果进行比较。结果显示，盐酸吖啶黄和荧光素　

钠均可产生高质量的共聚焦图像，在荧光素钠染色　

下，上皮内瘤变和结肠癌表现为管状、绒毛状或不规　

则状结构及杯状细胞减少，瘤变组织新生血管则表　

现为不规则的血管结构伴荧光素渗漏。将来自３９０　

个不同部位的１３　０２０幅图像与１０３８个活检标本的　

组织病理进行比较，结果显示共聚焦激光内镜可高　

度地预测结、直肠新生物的性质，其诊断敏感度为　

９７．４％、特异度为９９．４％、准确度为９９．２％。　

３共聚焦激光显微内镜的前景　

由于使用的荧光剂、激光束的穿透力及其分辨　

率的限制，在一定程度上限制共聚焦激光显微内镜　

的临床应用。但作为一种新发展起来的临床诊断技　

术，共聚交激光显微内镜允许在常规检查中对在体　

组织进行虚拟组织学检查，且随着新型的荧光对比　

剂和分子探针的研发，还能在显微内镜下进行特异　

性染色，可以更轻易地发现病变。相信随着内镜技　

术、激光扫描技术及计算机图像处理技术的不断进　

步和新型荧光剂、分子探针、特异性分子标志物的研　

发，共聚焦激光显微内镜可以逐步完善，并大量应用　

于消化道早期肿瘤的筛检和确诊。　

参考文献　

［１］Ｈｅｌｍｃｈｅｎ　Ｆ．Ｍｉｎｉａｔｕｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｓ　ｕｓｉｎｇ　ｆｉｂｒｅ　

ｏｐｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｅｘｐ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００２，８７（６）：７３７－７４５．　

［２］　Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｎｅｕｒａｃｈ　ＦＭ．Ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｉｍａｇｉｎｇ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　

Ｇａｓｔｏｒｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２００５，３（７　Ｓｕｐｐｌ　１）：５８－６０．　

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・

２８５８・　医学综述２００８年９月第１４卷第１８期Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｃａｐｉｔｕｌａｔｅ．Ｓｅｐ　２００８，ｖ０１．１４，Ｎｏ．１８　

高效液相色谱法测定穿琥宁氯化钠注射液中的含量及有关物质　

崔惠平，郭兴奎，俞红卫　

（山东中医药大学附属医院药剂科，济南２５００１２）　

中图分类号：Ｒ９１７　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６－２０８４（２００８）１８－２８５８－０３　

摘要：目的　制定穿琥宁氯化钠注射液含量及有关物质的测定方法。方法　采用高效液相色谱法　

测定，ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ　Ｃｌ８色谱柱，流动相为甲醇一０．０５％磷酸二氢钾溶液（用磷酸调ｐＨ值为３　０）（６０：　

））；检测波长：２５１　ｎｍ，柱温：３０￣Ｃ，流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ。结果穿琥宁在２１．６～４３２．０　ｍＬ浓度范围内　

线性关系量良好（ｒ＝０．９９９３），日内、日间精密度试验ＲＳＤ分别＜０．５５％和＜１．０８％，回收率为９９．８３％　

（ＲＳＤ＝０．３０％）。结论该方法可作为穿琥宁氯化钠注射液的质量控制方法。　

关键词：穿琥宁；高效液相色谱法；有关物质　

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ｉｎ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｒｏａｎ－　

制剂，已被国家中医药管　

理局批准为全国中医院急　

诊科室首批必备中药之　

一

在临床上已得到广泛　

的应用　］。本文参考　

，

ｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ａｎｄ　Ｓｏｄｉｕｍ　Ｃｈｉｏｒａｄｅ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ｒｅｌａｔｅｄ　Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ＣＵＩ　ｌｉｕｉ—　

ｐｉｎｇ，ＧＵＯ　Ｘｉｎｇ　ｋｕｉ，　Ｈｏｎｇ—ｗｅｉ．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆＳｈａｎｄｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓ　‰一　

《中华人民共和国药典》　

２００５年版二部　中注射　

ｄｉｔｉｏｈａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊｉｎ￣ｔｎ　２５００１　１，Ｃ＾ｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｌｌｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｌｌ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｒｏｇｒａ—　

用穿琥宁的有关规定，建　

ｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ｉｎ　Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｍａｎｄｍｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ａｎｄ　Ｓｏｄｉｕｍ　ｅｈｌｏｒａｄｅ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　

立了穿琥宁注射液的含量　

ｓｕｂｓｔａｎｅｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｎ　ｏｐｔｉｍａｌ　ＨＰＬＣ　ｍａｔｈｅｄ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ｕｐ．Ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　ＴＭ　

Ｃ１８　ｃｏｌｕｍｎ．Ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．０５ｒａｐｌ・Ｌ～ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｄｉｈｙｄｍｇｅｎ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｓｏ－　

及有关物质的高效液相色　

ｌｕｔｉｏｎ．ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ［（ｐＨ　ａｄｊｕｓｔｅｄ　ｔｏ　３．０）ｂｙ　Ｈ３ＰＯ４］（６０：４０）ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１．０　ｍＬ・ｍｉｎ－。，ａｎｄ　

谱（ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃ，ｌｉｑｕｉｄ　

ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｖｅ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２５１　ｎｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｅｐｅｒａｒｕｒｅ　ｗａｓ　３０℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｗｉｔｈｉｎ　

２１．６～４３２．０　ｍＬ　ｏｆ　ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｓｏｄｉｕｍ　ｄｅｈｙｄｒｏａｎｄｒａｎ　ｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　ｓｕｃｃｉｎａｔｅ（ｒ＝０．９９９３）．，Ｉ１Ｉｌｅ　ａｖｅｒａｇｅ　

ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）测　

定方法。　

ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９９．８３％（ＲＳＤ＝０．３％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｐｏ—　

ｔａｓｓｉｕｍ　Ｄｅｈｙｄｍａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　Ｓｕｃｃｉｎａｔｅ　ａｎｄ　Ｓｏｄｉｕｍ　ｃｈｌｏｒａｄｅ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ　ｄｅｈｙｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ　ｓｕｃｃｉｎａｔｅ；Ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃ，ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；　

Ｒｅｌａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　

１材料与仪器　

１．１　仪器　ｕＶ－２１０２紫　

外分光光度计（上海仪器有限公司）；Ａｇｉｌｅｎｔｌ　１００高　穿琥宁来源于爵床科植物穿心莲，它是由叶中　

含量最高的穿心莲内酯与琥珀酸酐反应，生成脱水　

效液相色浦仪（美国）；ＴＨＺ一８２型恒温水浴振荡器　

穿心莲内酯琥珀酸半酯后，再生成单钾盐而制成的　

（上海常思工贸有限公司）。　

微黄色灭菌水溶性液体Ｈ　Ｊ。穿琥宁注射液是国家中　１．２药品及试剂穿琥宁（哈尔滨三联药业有限公　

医药管理局批准的全国中医医院急诊科（室）首批必　

备纯中药制剂，具有抗菌、解毒、解热、消炎、促进肾　

上腺皮质功能及镇静作用，是清热解毒、消肿止痛的　

良药，能静脉和肌内注射。穿琥宁注射剂为纯中药　

司提供，规格：０．１　ｇ／支，批号分别为：０３０４２７，　

０３０４２９，０３０５０８）；脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照　

品（成都天台山制药有限公司提供，经峰面积归一化　

法测得含量为９９．６３％）；其他试剂均为分析纯。　

Ｓｅｌｋｉｎ　Ｂ，Ｒａｊａｄｈｙａｋｓｈａ　Ｍ，Ｇｏｎｚａｌｅｚ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｍｉ－　

Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ　Ｅｎｄｏｓｃ，２Ｏｏ６，６３（５）：２４３．　

ｃｒｏｓｃｏｐｙ　ｉｎ　ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｄｅｒｍａｔｏｌ　Ｃｌｉｎ，２００１，１９（２）：　

３６９—３７７　

Ｉｓａｏ　Ｏ，Ｔｏｍｏｈ　ｆｒｏ　Ｋ，Ｈｉｓａｏ　Ｔ．Ａ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｎｏｒｍａｌ　ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ　ｕｓｉｎｇ　

［９］　

Ｐｅｃｈ　Ｏ．Ｒａｂｅｎｓｔｅｉｎ　Ｔ，Ｍａｎｎｅｒ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓ．　

ｃｏｐｙ　ｆｏｒ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｄｉｇｎｏｓｉｓａ　ｏｆ　ｅａｒｌｙ　ｓｑｕａｍｏｕｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｉｎ　ｔｈｅ　

ｅｓｏｐｈａｇｕｓ［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ　Ｅｎｄｏｓｃ，２００７，６５（５）：３４６　

ｔｏ—Ｔｅｌｌｅｚ　Ｍ，Ｋｈｏｒ　ＣＪＬ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒａ　ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ　

［１Ｏ］　

Ｙｅｏｈ　ＫＧ，Ｓａｌ

ｉｓ　ｕｓｅｆｕｌ　ｆｏｒ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｒａｐｉｄ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｇａｓｔｉｃ　ｎｅｏｐｌｒｓｉａａ　ａｎｄ　ｐｒｅ—Ｂｅ—　

ｃ０ｎｆｏｃａｌ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ『Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ　Ｅｎｄｏｓｃ，２００６，６３　

（５）：２２０．　

Ｐａｗｌｅｙ　ＪＢ　Ｌｉｍｉｔａｔａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｏｐｔｉｃａｌ　ｓｅｃｔｉｏｎｉｎｇ　ｉｎ　ｌｉｖｅ—ｃｅｌｌ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　

ｏｐｌａｓｉａ［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２ｏｏ５，１２８（４　Ｓｕｐｐｌ　２）：２７．　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，Ｂｕｒｇ　Ｊ，ｅｔ　ａ１　Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ　Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ　ｐｙｌｏｒｉ　

ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ［Ｊ］．Ｓｃａｎｎｉｎｇ，２００２，２４（５）：２４１－２４６　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｇｏｓｓｎｅｒ　Ｌ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｂａｒｒｅｔｔ　ｓ　

ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ［Ｊ］．Ｇａｓｔｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２００５，１２８　

（７）：２１１９－２１２３　

ｅｓｏｐｈａｇｕｓ　ａｎｄ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｎｅｏｐｌａｓｉａ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌａｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏ－　

［１２］　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｈｏｆｆｍａｎ　Ａ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｃｏ１．　

ｐｙ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏｌ，２００６，４（８）：９７９－９８７．　

刘红，李延青，赵幼安，等．共聚焦内镜诊断Ｂａｒｒｅｔｔ食管初步研　

究［Ｊ］．中华消化杂志，２００７，２７（２）：８３—８６．　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｌａｍｍｅｍｄｏｒｆ　Ｋ，Ｇｏｅｔｚ　Ｍ，ｅｔ　ａ１　Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ　ｃｈａｎｇｅｓ　

１ａｇｅｎｏｕｓ　ｃｏｌｉｔｉｓ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｅｎｄｏｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ［Ｊ］．Ｇｕｔ，２００６，５５　

（４）：５９１－５９２．　

［１３］　

Ｋｉｅｓｓｌｉｃｈ　Ｒ，Ｂｕｒｇ　Ｊ．Ｖｉｅｔｈ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒ　ａｅｎｄｏｓｃｏｐｙ　ｏｒｆ　ｄｉ．　

ａｇｕｏｓｌｎｇ　ｉｎｔｒａｅｐｉｈｅｌｔｉｌ　ｎｅｏｐｌａｓｉａｓ　ａｎｄ　ｃｏｌａｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎ　ｖｌｖｏ　

ｉｎ　ｎｏｎ　ｅｒｏｓｉｖｅ　ｒｅｆｌｕｘ　ｄｉｓｅａｓｅ（ＮＥＲＤ）ｃａｎ　ｂｅ　ｄｉａｇｎｏｓｅｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｏｎ—　

［Ｊ］．Ｇａｓｔｒｏｅｎｄｏｓｃｏｐｙ，２００４，１２７（３）：７０６－７１３．　

ｇｏｉｎｇ　ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ　ｂｙ　ｃｏｎｆｏｃａｌ　ｌｓｅｒ　ｅｎｄｏｍｉａｃｒｏｓｃｏｐｙ（ＣＬＥ）［Ｊ］．　

收稿日期：２００８－０４－２８修回日期：２００８－０７—３１