2024年5月21日发(作者：司寇若星)
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２００８年第１７卷第１７期
芩连合剂质量标准研究
雷小红，杨跃龙
（湖南省怀化市药品检验所，湖南怀化４ｌ８ｏｏｏ）
药物鉴定
摘要：目的建立芩连合剂的质量标准：方法采用薄层色谱法对处方ｆｌ，金银花、连翘、黄芩进行定性鉴别，用反相高效液相色谱（ＲＰ—ＨＰＬＣ）
法对处方ｆｌ，的黄芩进行含量测定。色谱柱为Ｄｉｋｍａ Ｃ 柱（２５０ ｏｔｎｉ ｘ ４．６ ｍｉｌｌ，５ ｐ．ｍ），流动相为甲醇一水一冰醋酸（５０：５０：１），检测波长为
２７４ ｎｍ、柱温２５℃，流速１．０ ｎ Ｉ ／ｍｉｎ 结果金银花、连翘的薄层色谱分离良好，斑点明显，专属性好，无干扰；黄芩苷进样量在０．１ １８ ６～
０．９４８ ８ Ｉｘｇ范围内与峰面积线性关系良好（ｒ：０．９９９ ９），平均回收率为９８．８％，ＲＳＤ＝０．４７％（ｎ＝６）。结论所用方法简便、准确、重现性
好．可作为芩连舍别的质量控制方法。
关键词：芩连合剂；薄层色谱法；质量标准；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ２８４．１：Ｒ２８６．０ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２００８）１７—００１９一Ｏ２
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｏｆ Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ
Ｌｅｉ Ｘｉａｏｈ（），ｔｇ．Ｙａｎｇ Ｙｕｅｌｏｎｇ
ｆ Ｈｕａｉｔｕｍ］ｎｓｔｉｌｕｌｅ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｒｏｌ，Ｈｕａｉｈｎｎ．１１ｌｌｎｎｎ．Ｃｈｉｎａ ４１８０００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｑｕａｉｉｔ＞ｓｔｍＩｄａｒｄ ｏｆ Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＴＬＣ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ＂ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｌｙ Ｆｌｏｓ Ｌｏｎｉｃｅｒａｅ，
Ｆｏｒｓｙｔｈｉａ Ｓｕｓｐｅｎｓｅ．Ｒａｄｉｘ Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｅ．Ｂａｉｃａｌｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｒｍｕｌａ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＲＰ—ＨＰＩ Ｃ，Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ Ｄｉｋｍａ Ｃｌ ８
（２５０／ｉｒｍ ｘ ４．６ ｉｎｎｌ，５ ｍ）．Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｍｅｔｈａｎｏｌ—ｗａｔｅｒ—ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（５０：５０：１）．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ａｔ ２７４ ｎＩｌ１．Ｔｈｅ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ２５℃ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １，０ ｍＬ／ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｌｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｌｏｓ Ｌｎｏｉｃｅｒａｅ．Ｆｏｒｓｙｔｈｉａ
ｓｕｓｐｅｎｓｅ ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ ｗｉｔｈ ｏｂｖｉｏｕｓ ｓｐｏｔｓ．ｇｏｏｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｗｉｔｈｏｕｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｂａｉｃａｌｉｎ ｗａｓ ０，１ １ ８ ６—０．９４８ ８ ｔｘｇ（ｒ：
０．９９９ ９）．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒ） ｗａｓ ９８．８０％，ａｎｄ ＲＳＤ ｗａｓ ０．４７ｃＡ（ｎ＝６）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ
ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ，Ｉｔ ｃａｎ ｈｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔＹ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ；ＴＬＣ；ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄ；ＨＰ１ Ｃ
芩连合剂由金银花、连翘、黄芩、板蓝根等制成，具有辛凉解
表、清热解毒功效，用于治疔病毒、细菌引起的肺炎、上呼吸道感
染、扁桃体炎等ｉ 为了更好地控制该药质量，笔者采用高效液相
色谱（ＨＰＬＣ）法测定君药黄芩的主要成分黄芩苷的含量，并对金银
花、连翘进行ｌ『薄层鉴别，现报道如下：
１ 仪器与试药
板，聚酰胺薄膜，芩连合剂（麻阳苗族自治县人民医院自制，规格为
１２０ ｇ／瓶）；绿原酸、黄芩苷和连翘苷对照品（中国药品生物制品检
定所，批号分别为０７５６—２００１ １０，０７９６—２００２０８，８２１—９４０１）；甲醇
（色谱纯），冰醋酸（色谱纯），超纯水，其他试剂（分析纯）。
２ 方法与结果
２．１ 薄层色谱鉴别
ＬＣ一１ＯＡＴｖ 型高效液相色谱仪（日本岛津）；ＡＢ１３５一Ｓ型电子
分析天平（瑞士梅特勒）；湘仪ＡＥＵ一２１０型电子分析天平；硅胶Ｇ
金银花…：取本品０．５ ｇ，加７５％乙醇２０ ｍＬ，超声处理１０ ａｒｉｎ，
滤过，滤液作为供试品溶液；取处方中除金银花外的其他药材，按
前者对吸光度的贡献主要来自于氨基酸本身而并非其自身存在的
残留糖，所以在此可用作不含糖的空白对照。
２ ３ 准确度考察
５／Ｎ＞１０时，最小定量限为２５ ｍｇ／ｋｇ。
２ ７ 样品检测
对５批样品进行检测，每批重复４次。结果５批样品中糖含量
取９份样品，每份０．５ ｇ，准确称量，各置１０．０ ｍＬ量瓶中，分
成３组。分别加２００ ｔｘｇ／ｍＬ的葡萄糖标准溶液０．５，１．０，２．０ ｍＬ，
每组重复３次，用水溶解并定容至刻度。取１．００ ｍＬ上述样品溶
分别为４１１，４４７，４３１，４１５，４２９ｍｇ／ｋｇ，扣除硫酸多黏菌素自身的影
响，样品中实际糖残留量为３３０～３５０ ｍｇ／ｋｇ。
３ 讨论
液，按２．１项下方法进行操作。结果葡萄糖平均回收率分别为
９７．Ｏ％，９４．９％，８４。４％，总体平均回收率为９２．１％，能够满足ＩＣＨ
Ｑ２ｂ对杂质测定回收率的要求。
２ ４ 重现性试验
取１００ Ｉｘｇ／ｍＬ的葡萄糖标准溶液０，４０ ｍＬ，加０．６０ ｍＬ水补
笔者介绍的硫酸多黏菌素中残留总糖的检测方法是在现行硫
酸一苯酚法的基础上，经过对其专属性、精密度、线性关系、检出限
和定量限等进行验证后得到的，它是分析该产品中总糖的一种切
实可行的方法。测定出的硫酸多黏菌素的糖含量为４３０ ｍｇ／ｋｇ，扣
除水解分子片段（氨基酸）的影响，仍有３４０ ｍｇ／ｋｇ的糖含量。该方
法的缺陷是不能定性糖的种类。
至１．００ ｍＩ 。按２．１项下方法进行操作，测定吸光度Ａ。结果的ＲＳＤ
为１．９８％（ｎ＝６）
作者简介：何国亮（１９６８一），男，高级工程师，研究方向＿勾有机
兮析，（电话）Ｏ】０—６３７２７２５８（电子信箱）Ｈｅｇ１６８＠１６３．ｃｏｒｎ。
２ ５ 精密度与中间精密度试验
同一操作者在同一日期和不同日期及不同操作者同时对同一样
品进行６次测试。经计算，同一操作者同一日期测定的样品糖含量为
４３４ ｍｇ／ｋｇ，ＲＳＤ＝２，３％（ｎ＝６）；同一操作者不同日期测定的样品
糖含量为４３０ ｍｇ／ｋｇ，ＲＳＤ＝２．７％（ ＝６）；不同操作者同一日期测
定的样品糖含量为４ｌ７ ｍｇ／ｋｇ，ＲＳＤ：２ ２％（， ＝６）。
２ ６ 最小检出限和最小定量限确定
参考文献：
［１】俞犬绂．微生物学［Ｍ］，第２版．北京：科学出版社 １９８５：４３１．
［２］陈家华，方晓明，朱坚，现代食品分析新技术［Ｍ］．北京：化学工业出
版社．２００５：１４８一ｌ６１．
［３】何国亮．灵芝饮品中灵芝肽多糖含量的测定［Ｊ】．营养学报，１９９８，２０
／１）：１０２—１０４．
在Ｓ／Ｎ＞３时，样品中葡萄糖的最小检出限为８，２ ｍｇ／ｋｇ；在
（收稿日期：２００７—１０—２８；修回日期：２００８—０１—１３）
・
中国药业Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ
１９・
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药物鉴定
样品制备工艺制成阴性样品，按供试品溶液制备方法制成阴性对
照品溶液；另取金银花１ ｇ，同法制成对照药材溶液；再取绿原酸对
２００８年第１７卷第１７期
照品，加甲醇制成１ ｍｇ／ｍ１ 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱
法试验，吸取上述溶液各１０ Ｌ。分别点于同一聚酰胺薄膜七，以醋
酸为展开剂，展开，晾干，置紫外灯（３６５ ｎｍ）下检观。供试品溶液色
谱中，在与对照药材溶液及对照品溶液色谱相应位置上显相同颜
色斑点，阴性对照品溶液在相应位置无干扰（图１ Ａ）。
Ｏ
，／Ｉ／／Ｖ
１０４
５８
ｌ
二 ：二二＝二二＝＝
０ ｌ５ ２０
Ｂ
３６ ５ Ｊ
ｌ
１８ ５ ＪＬｌ
——
０ ５
ｌ一３．供试品溶液 ４．对照药材溶液 ５．对照品溶液 ６阴性对照品溶液
Ａ．金银花 Ｂ．连翘
Ｊ＿＿—— Ｌ————～———————
——
————————————
八～， —————
Ｉ———————————一—————————— —— ————— ——————————— — —
Ｃ
————— ——— ～
图１ 薄层鉴别色谱图
黄芩苷
Ａ．对照品溶液 Ｂ．阴性对照品溶液 Ｃ．供试品溶液
连翘…：取本品０．５ ｇ，加甲醇ｌ０ ｍＬ，超声使溶解，滤过，滤液
作为供试品溶液；取处方中除连翘外的其他药材，按样品制备工艺
制备阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液；另取
连翘对照药材０．５ ｇ，同法制成对照药材溶液；再另取连翘苷对照
图２ 高效液相色谱图
重现性试验：取样品（批号为２００７０７１７）６份，每份０．６ ｇ，精密
称定，按２．２项下方法操作，制备供试品溶液，测定芩连合剂中黄
芩苷的含量。结果样品中黄芩苷的含量为３．５２％，ＲＳＤ：１．４％
（，ｌ：６）：
品，加甲醇制成１ ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸
取上述溶液各５ Ｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的
硅胶Ｇ板上，以三氯甲烷一甲醇（６：１）为展开剂，展开，取出，晾
加样回收试验：精密称取黄芩苷对照品适量，加入到已知含量
的样品（批号为２００７０１ １７，黄芩苷含量为３．５２％）中，按２．２项下 干，喷以１０％硫酸乙醇溶液，１０５℃下加热至斑点显包清晰。供试
品溶液色谱中，在与对照药材溶液及对照品溶液色谱柑应位置上
显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液在此无干扰（图１ Ｂ）。
２．２ 含量测定
２．２．１ 色谱条件与系统适用性试验
方法操作，制备供试品溶液，测定黄芩苷的含量，计算回收率，结果
见表１ 、
表１ 黄芩苷加样回收试验结果（ｎ＝６）
色谱柱：Ｄｉｋｍａ Ｃ ８住（２５０ ｍｉｌｌ×４．６ ｌＩｌｍ，５ ｎ１）；流动相：甲醇一
水一冰醋酸（５０：５０：１）；检测波长：２７４ ｎｎ１；流速：１ ０ ｍＬ／ｍｉｎ；拄
温：２５ ｑｃ。在此条件下，理论塔板数以黄芩苷峰计算应不低于１ ５００，
色谱图见图２。
２．２．２ 溶液配制…
精密称取本品０．５ ｇ，置５０ ｍＬ量瓶中，加５０％甲醇超声处理
２０ ａｒｉｎ，放冷，加５０％甲醇至刻度，摇匀；精密量取１ ｍＬ，置２５ ｍＬ
量瓶中，加５０％甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（０．４５／ｘｍ）滤过，取
２．２．４ 样品含量测定
按２．２项下方法操作，制备供试品溶液，测定３批样品（批号
为２００７０５２１，２００７０６１０，２００７０６２７）的黄芩苷含量，结果分别为
３．５２％，３．４９％，３．５５％。
续滤液作为供试品溶液。精密称取黄芩苷对照品适量，加５０％甲醇
制成０．２３７ ２ｍｇ／ｍＬ的溶液，作为对照品溶液。依样品制备方法制备
缺黄芩的阴性样品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。
２．２．３ 方法学考察
线性关系考察：分别精密吸取对照品溶液０．５，１．０，２．０，３．０，
４．０ ｎｉＬ，分别置１０ ｍＬ量瓶中，加５Ｏ％甲醇至刻度，摇匀；取１Ｏ Ｌ
分别注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样造为横坐标、峰面积为纵
３ 讨论
该药为八味复方中药，所含成分较多，在用ＨＰＬＣ法测黄芩苷
含量时．样品用５０％甲醇超声处理，流动相为甲醇一水一磷酸（４０：
６０：０．２），捡测波长为２８０ １１１１１，黄芩苷出峰时间约为５０ ａｒｉｎ。为了
缩短时间并使样品中主峰与其他杂质峰分离度能达到要求，流动
相改为甲醇一水一冰醋酸（５０：５０：１），结果满意。
参考文献：
ｆｌ１国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）ｆＭ］．北京：化学工业出
版社．２００５：４０８．
坐标作图．得一条近似直线，回归方程ｙ：１４７．０１３＋４ ６３３．２０ ，
ｒ：０．９９９ ９（ ＝５）。结果表明，黄芩苷进样量在０．１ １８ ６～０．９４８ ８ Ｉｘｇ
范围内与峰面积线性关系良好。
精密度试验：取对照品溶液，重复进样６次。结果黄芩苷含量
的ＲＳＤ为１．８０％（ｎ＝６）
・
（收稿日期：２００７—１２—２４；修回日期：２００８—０３—０２）
２０・
中国药业Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ
2024年5月21日发(作者：司寇若星)
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２００８年第１７卷第１７期
芩连合剂质量标准研究
雷小红，杨跃龙
（湖南省怀化市药品检验所，湖南怀化４ｌ８ｏｏｏ）
药物鉴定
摘要：目的建立芩连合剂的质量标准：方法采用薄层色谱法对处方ｆｌ，金银花、连翘、黄芩进行定性鉴别，用反相高效液相色谱（ＲＰ—ＨＰＬＣ）
法对处方ｆｌ，的黄芩进行含量测定。色谱柱为Ｄｉｋｍａ Ｃ 柱（２５０ ｏｔｎｉ ｘ ４．６ ｍｉｌｌ，５ ｐ．ｍ），流动相为甲醇一水一冰醋酸（５０：５０：１），检测波长为
２７４ ｎｍ、柱温２５℃，流速１．０ ｎ Ｉ ／ｍｉｎ 结果金银花、连翘的薄层色谱分离良好，斑点明显，专属性好，无干扰；黄芩苷进样量在０．１ １８ ６～
０．９４８ ８ Ｉｘｇ范围内与峰面积线性关系良好（ｒ：０．９９９ ９），平均回收率为９８．８％，ＲＳＤ＝０．４７％（ｎ＝６）。结论所用方法简便、准确、重现性
好．可作为芩连舍别的质量控制方法。
关键词：芩连合剂；薄层色谱法；质量标准；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ２８４．１：Ｒ２８６．０ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２００８）１７—００１９一Ｏ２
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｏｆ Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ
Ｌｅｉ Ｘｉａｏｈ（），ｔｇ．Ｙａｎｇ Ｙｕｅｌｏｎｇ
ｆ Ｈｕａｉｔｕｍ］ｎｓｔｉｌｕｌｅ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｒｏｌ，Ｈｕａｉｈｎｎ．１１ｌｌｎｎｎ．Ｃｈｉｎａ ４１８０００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｑｕａｉｉｔ＞ｓｔｍＩｄａｒｄ ｏｆ Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＴＬＣ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ＂ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｌｙ Ｆｌｏｓ Ｌｏｎｉｃｅｒａｅ，
Ｆｏｒｓｙｔｈｉａ Ｓｕｓｐｅｎｓｅ．Ｒａｄｉｘ Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｅ．Ｂａｉｃａｌｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｒｍｕｌａ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＲＰ—ＨＰＩ Ｃ，Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ Ｄｉｋｍａ Ｃｌ ８
（２５０／ｉｒｍ ｘ ４．６ ｉｎｎｌ，５ ｍ）．Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｍｅｔｈａｎｏｌ—ｗａｔｅｒ—ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（５０：５０：１）．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ａｔ ２７４ ｎＩｌ１．Ｔｈｅ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ２５℃ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １，０ ｍＬ／ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｌｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｌｏｓ Ｌｎｏｉｃｅｒａｅ．Ｆｏｒｓｙｔｈｉａ
ｓｕｓｐｅｎｓｅ ｗａｓ ｂｅｔｔｅｒ ｗｉｔｈ ｏｂｖｉｏｕｓ ｓｐｏｔｓ．ｇｏｏｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｗｉｔｈｏｕｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｂａｉｃａｌｉｎ ｗａｓ ０，１ １ ８ ６—０．９４８ ８ ｔｘｇ（ｒ：
０．９９９ ９）．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒ） ｗａｓ ９８．８０％，ａｎｄ ＲＳＤ ｗａｓ ０．４７ｃＡ（ｎ＝６）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ
ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ，Ｉｔ ｃａｎ ｈｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔＹ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｑｉｎｇｌｉａｎ Ｍｉｘｔｕｒｅ；ＴＬＣ；ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄ；ＨＰ１ Ｃ
芩连合剂由金银花、连翘、黄芩、板蓝根等制成，具有辛凉解
表、清热解毒功效，用于治疔病毒、细菌引起的肺炎、上呼吸道感
染、扁桃体炎等ｉ 为了更好地控制该药质量，笔者采用高效液相
色谱（ＨＰＬＣ）法测定君药黄芩的主要成分黄芩苷的含量，并对金银
花、连翘进行ｌ『薄层鉴别，现报道如下：
１ 仪器与试药
板，聚酰胺薄膜，芩连合剂（麻阳苗族自治县人民医院自制，规格为
１２０ ｇ／瓶）；绿原酸、黄芩苷和连翘苷对照品（中国药品生物制品检
定所，批号分别为０７５６—２００１ １０，０７９６—２００２０８，８２１—９４０１）；甲醇
（色谱纯），冰醋酸（色谱纯），超纯水，其他试剂（分析纯）。
２ 方法与结果
２．１ 薄层色谱鉴别
ＬＣ一１ＯＡＴｖ 型高效液相色谱仪（日本岛津）；ＡＢ１３５一Ｓ型电子
分析天平（瑞士梅特勒）；湘仪ＡＥＵ一２１０型电子分析天平；硅胶Ｇ
金银花…：取本品０．５ ｇ，加７５％乙醇２０ ｍＬ，超声处理１０ ａｒｉｎ，
滤过，滤液作为供试品溶液；取处方中除金银花外的其他药材，按
前者对吸光度的贡献主要来自于氨基酸本身而并非其自身存在的
残留糖，所以在此可用作不含糖的空白对照。
２ ３ 准确度考察
５／Ｎ＞１０时，最小定量限为２５ ｍｇ／ｋｇ。
２ ７ 样品检测
对５批样品进行检测，每批重复４次。结果５批样品中糖含量
取９份样品，每份０．５ ｇ，准确称量，各置１０．０ ｍＬ量瓶中，分
成３组。分别加２００ ｔｘｇ／ｍＬ的葡萄糖标准溶液０．５，１．０，２．０ ｍＬ，
每组重复３次，用水溶解并定容至刻度。取１．００ ｍＬ上述样品溶
分别为４１１，４４７，４３１，４１５，４２９ｍｇ／ｋｇ，扣除硫酸多黏菌素自身的影
响，样品中实际糖残留量为３３０～３５０ ｍｇ／ｋｇ。
３ 讨论
液，按２．１项下方法进行操作。结果葡萄糖平均回收率分别为
９７．Ｏ％，９４．９％，８４。４％，总体平均回收率为９２．１％，能够满足ＩＣＨ
Ｑ２ｂ对杂质测定回收率的要求。
２ ４ 重现性试验
取１００ Ｉｘｇ／ｍＬ的葡萄糖标准溶液０，４０ ｍＬ，加０．６０ ｍＬ水补
笔者介绍的硫酸多黏菌素中残留总糖的检测方法是在现行硫
酸一苯酚法的基础上，经过对其专属性、精密度、线性关系、检出限
和定量限等进行验证后得到的，它是分析该产品中总糖的一种切
实可行的方法。测定出的硫酸多黏菌素的糖含量为４３０ ｍｇ／ｋｇ，扣
除水解分子片段（氨基酸）的影响，仍有３４０ ｍｇ／ｋｇ的糖含量。该方
法的缺陷是不能定性糖的种类。
至１．００ ｍＩ 。按２．１项下方法进行操作，测定吸光度Ａ。结果的ＲＳＤ
为１．９８％（ｎ＝６）
作者简介：何国亮（１９６８一），男，高级工程师，研究方向＿勾有机
兮析，（电话）Ｏ】０—６３７２７２５８（电子信箱）Ｈｅｇ１６８＠１６３．ｃｏｒｎ。
２ ５ 精密度与中间精密度试验
同一操作者在同一日期和不同日期及不同操作者同时对同一样
品进行６次测试。经计算，同一操作者同一日期测定的样品糖含量为
４３４ ｍｇ／ｋｇ，ＲＳＤ＝２，３％（ｎ＝６）；同一操作者不同日期测定的样品
糖含量为４３０ ｍｇ／ｋｇ，ＲＳＤ＝２．７％（ ＝６）；不同操作者同一日期测
定的样品糖含量为４ｌ７ ｍｇ／ｋｇ，ＲＳＤ：２ ２％（， ＝６）。
２ ６ 最小检出限和最小定量限确定
参考文献：
［１】俞犬绂．微生物学［Ｍ］，第２版．北京：科学出版社 １９８５：４３１．
［２］陈家华，方晓明，朱坚，现代食品分析新技术［Ｍ］．北京：化学工业出
版社．２００５：１４８一ｌ６１．
［３】何国亮．灵芝饮品中灵芝肽多糖含量的测定［Ｊ】．营养学报，１９９８，２０
／１）：１０２—１０４．
在Ｓ／Ｎ＞３时，样品中葡萄糖的最小检出限为８，２ ｍｇ／ｋｇ；在
（收稿日期：２００７—１０—２８；修回日期：２００８—０１—１３）
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１９・
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药物鉴定
样品制备工艺制成阴性样品，按供试品溶液制备方法制成阴性对
照品溶液；另取金银花１ ｇ，同法制成对照药材溶液；再取绿原酸对
２００８年第１７卷第１７期
照品，加甲醇制成１ ｍｇ／ｍ１ 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱
法试验，吸取上述溶液各１０ Ｌ。分别点于同一聚酰胺薄膜七，以醋
酸为展开剂，展开，晾干，置紫外灯（３６５ ｎｍ）下检观。供试品溶液色
谱中，在与对照药材溶液及对照品溶液色谱相应位置上显相同颜
色斑点，阴性对照品溶液在相应位置无干扰（图１ Ａ）。
Ｏ
，／Ｉ／／Ｖ
１０４
５８
ｌ
二 ：二二＝二二＝＝
０ ｌ５ ２０
Ｂ
３６ ５ Ｊ
ｌ
１８ ５ ＪＬｌ
——
０ ５
ｌ一３．供试品溶液 ４．对照药材溶液 ５．对照品溶液 ６阴性对照品溶液
Ａ．金银花 Ｂ．连翘
Ｊ＿＿—— Ｌ————～———————
——
————————————
八～， —————
Ｉ———————————一—————————— —— ————— ——————————— — —
Ｃ
————— ——— ～
图１ 薄层鉴别色谱图
黄芩苷
Ａ．对照品溶液 Ｂ．阴性对照品溶液 Ｃ．供试品溶液
连翘…：取本品０．５ ｇ，加甲醇ｌ０ ｍＬ，超声使溶解，滤过，滤液
作为供试品溶液；取处方中除连翘外的其他药材，按样品制备工艺
制备阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液；另取
连翘对照药材０．５ ｇ，同法制成对照药材溶液；再另取连翘苷对照
图２ 高效液相色谱图
重现性试验：取样品（批号为２００７０７１７）６份，每份０．６ ｇ，精密
称定，按２．２项下方法操作，制备供试品溶液，测定芩连合剂中黄
芩苷的含量。结果样品中黄芩苷的含量为３．５２％，ＲＳＤ：１．４％
（，ｌ：６）：
品，加甲醇制成１ ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸
取上述溶液各５ Ｌ，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的
硅胶Ｇ板上，以三氯甲烷一甲醇（６：１）为展开剂，展开，取出，晾
加样回收试验：精密称取黄芩苷对照品适量，加入到已知含量
的样品（批号为２００７０１ １７，黄芩苷含量为３．５２％）中，按２．２项下 干，喷以１０％硫酸乙醇溶液，１０５℃下加热至斑点显包清晰。供试
品溶液色谱中，在与对照药材溶液及对照品溶液色谱柑应位置上
显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液在此无干扰（图１ Ｂ）。
２．２ 含量测定
２．２．１ 色谱条件与系统适用性试验
方法操作，制备供试品溶液，测定黄芩苷的含量，计算回收率，结果
见表１ 、
表１ 黄芩苷加样回收试验结果（ｎ＝６）
色谱柱：Ｄｉｋｍａ Ｃ ８住（２５０ ｍｉｌｌ×４．６ ｌＩｌｍ，５ ｎ１）；流动相：甲醇一
水一冰醋酸（５０：５０：１）；检测波长：２７４ ｎｎ１；流速：１ ０ ｍＬ／ｍｉｎ；拄
温：２５ ｑｃ。在此条件下，理论塔板数以黄芩苷峰计算应不低于１ ５００，
色谱图见图２。
２．２．２ 溶液配制…
精密称取本品０．５ ｇ，置５０ ｍＬ量瓶中，加５０％甲醇超声处理
２０ ａｒｉｎ，放冷，加５０％甲醇至刻度，摇匀；精密量取１ ｍＬ，置２５ ｍＬ
量瓶中，加５０％甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（０．４５／ｘｍ）滤过，取
２．２．４ 样品含量测定
按２．２项下方法操作，制备供试品溶液，测定３批样品（批号
为２００７０５２１，２００７０６１０，２００７０６２７）的黄芩苷含量，结果分别为
３．５２％，３．４９％，３．５５％。
续滤液作为供试品溶液。精密称取黄芩苷对照品适量，加５０％甲醇
制成０．２３７ ２ｍｇ／ｍＬ的溶液，作为对照品溶液。依样品制备方法制备
缺黄芩的阴性样品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。
２．２．３ 方法学考察
线性关系考察：分别精密吸取对照品溶液０．５，１．０，２．０，３．０，
４．０ ｎｉＬ，分别置１０ ｍＬ量瓶中，加５Ｏ％甲醇至刻度，摇匀；取１Ｏ Ｌ
分别注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样造为横坐标、峰面积为纵
３ 讨论
该药为八味复方中药，所含成分较多，在用ＨＰＬＣ法测黄芩苷
含量时．样品用５０％甲醇超声处理，流动相为甲醇一水一磷酸（４０：
６０：０．２），捡测波长为２８０ １１１１１，黄芩苷出峰时间约为５０ ａｒｉｎ。为了
缩短时间并使样品中主峰与其他杂质峰分离度能达到要求，流动
相改为甲醇一水一冰醋酸（５０：５０：１），结果满意。
参考文献：
ｆｌ１国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）ｆＭ］．北京：化学工业出
版社．２００５：４０８．
坐标作图．得一条近似直线，回归方程ｙ：１４７．０１３＋４ ６３３．２０ ，
ｒ：０．９９９ ９（ ＝５）。结果表明，黄芩苷进样量在０．１ １８ ６～０．９４８ ８ Ｉｘｇ
范围内与峰面积线性关系良好。
精密度试验：取对照品溶液，重复进样６次。结果黄芩苷含量
的ＲＳＤ为１．８０％（ｎ＝６）
・
（收稿日期：２００７—１２—２４；修回日期：２００８—０３—０２）
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中国药业Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ