2024年5月30日发(作者：道清卓)
Agilent 1260 Infinity液相色谱仪培训材料
一．准备工作
配制流动相
流动相试剂应选择色谱纯试剂，水应为18.2MΩ的超纯水
溶剂过滤：0.22um有机相/水相滤膜
溶剂脱气：超声30min
定期更换溶剂：尽量用棕色瓶盛放水/含盐流动相，每2天更换或过滤水/含
盐流动相，避免溶剂瓶直接日照。
样品前处理
除去微粒、减少杂质干扰、浓缩微量的组分
离心、过滤、沉淀、液-液提取、固相萃取
二．开机
1. 启动计算机：打开计算机电源，登陆 windows操作系统
2. 启动工作站：打开 Agilent 1260主机各模块电源（从上至下）。待各模块自检完成后
(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，再双击桌面“仪器2联机”图标，进入化学工
作站，自动配置仪器，输入IP，默认地址为192.168.254.11。工作站打开，点击“方
法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。打开仪器控制视图：选择“视
图->系统视图”，即可显示仪器控制视图，选择“视图->样品视图”，即可显示样品信
息视图
3. 配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标
左键，出现图形如下：
4.
5.
6.
7.
点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积，也可设定低体积关泵。
排气：逆时针旋开泵模块上的溶液排空阀。右键单击“四元泵”图标，选择“方法”进
入泵参数编辑界面。将泵流量设到3ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线
中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若
大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头），依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
将泵的流量设到0.5ml/min，再设定溶剂配比，如A=20%（水相），B=80%（有机相）；
关闭排气阀（顺时针）。
2分钟后将泵的流量设到1.0ml/min，冲洗色谱柱20-30分钟。
点击“视图->在线信号”，在视图左下角选择“改变”，在“编辑信号图谱”界面，
选定“PMP1A，二元泵：压力（bar）”和“VWD,VWD:信号A（mAU）”，点击“确
定”，监视压力，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。等待信号
基线平稳后，可以进行采集分析。
三．数据采集方法编辑
1. 编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文
件名等。
2. 编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确定”
入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选 择进样源”，选中Als
单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。
3. 四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中B输入
80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运
行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：400bar，在“时间
表”添加编辑梯度。
4. 进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xx ul。“标准进针” ——只能输入进样
体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样” ——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，
此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 、
5. 进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函数即可。
6. TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选
中“与左侧相同” ——使柱温箱的温度左右一致。
7. VWD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如214nm,在
“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时 间,如>0.1min(2s),再设
置“停止时间”和“后运行时间”。
8. 仪器曲线设置：默认即可。
9. 方法设置完成之后可在“方法”选项中依次进行如下操作：
保存方法
调用方法
四．进样分析
1. 单针进样：选择“运行控制->样品信息”。查看单针，点击
目录”、“样品位置”和“样品名称”，点击确定。
。编辑数据文件“子
路径——选择数据文件存储路径
选择手动或者前缀/计数器——命名数据文件名
样品位置——设置样品位置，直接填写数字即可，不需要写“样品瓶”
运行方法——保存样品信息并运行方法
确定——保存样品信息，后“运行控制->运行方法”。
2. 序列进样：利用自动进样器自动批量进样。查看序列，点击
选择“序列->新建序列”，然后再选择“序列->序列参数”
2024年5月30日发(作者：道清卓)
Agilent 1260 Infinity液相色谱仪培训材料
一．准备工作
配制流动相
流动相试剂应选择色谱纯试剂，水应为18.2MΩ的超纯水
溶剂过滤：0.22um有机相/水相滤膜
溶剂脱气：超声30min
定期更换溶剂：尽量用棕色瓶盛放水/含盐流动相，每2天更换或过滤水/含
盐流动相，避免溶剂瓶直接日照。
样品前处理
除去微粒、减少杂质干扰、浓缩微量的组分
离心、过滤、沉淀、液-液提取、固相萃取
二．开机
1. 启动计算机：打开计算机电源，登陆 windows操作系统
2. 启动工作站：打开 Agilent 1260主机各模块电源（从上至下）。待各模块自检完成后
(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，再双击桌面“仪器2联机”图标，进入化学工
作站，自动配置仪器，输入IP，默认地址为192.168.254.11。工作站打开，点击“方
法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。打开仪器控制视图：选择“视
图->系统视图”，即可显示仪器控制视图，选择“视图->样品视图”，即可显示样品信
息视图
3. 配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标
左键，出现图形如下：
4.
5.
6.
7.
点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积，也可设定低体积关泵。
排气：逆时针旋开泵模块上的溶液排空阀。右键单击“四元泵”图标，选择“方法”进
入泵参数编辑界面。将泵流量设到3ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线
中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若
大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头），依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
将泵的流量设到0.5ml/min，再设定溶剂配比，如A=20%（水相），B=80%（有机相）；
关闭排气阀（顺时针）。
2分钟后将泵的流量设到1.0ml/min，冲洗色谱柱20-30分钟。
点击“视图->在线信号”，在视图左下角选择“改变”，在“编辑信号图谱”界面，
选定“PMP1A，二元泵：压力（bar）”和“VWD,VWD:信号A（mAU）”，点击“确
定”，监视压力，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。等待信号
基线平稳后，可以进行采集分析。
三．数据采集方法编辑
1. 编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文
件名等。
2. 编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确定”
入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选 择进样源”，选中Als
单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。
3. 四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中B输入
80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运
行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：400bar，在“时间
表”添加编辑梯度。
4. 进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xx ul。“标准进针” ——只能输入进样
体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样” ——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，
此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 、
5. 进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函数即可。
6. TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选
中“与左侧相同” ——使柱温箱的温度左右一致。
7. VWD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如214nm,在
“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时 间,如>0.1min(2s),再设
置“停止时间”和“后运行时间”。
8. 仪器曲线设置：默认即可。
9. 方法设置完成之后可在“方法”选项中依次进行如下操作：
保存方法
调用方法
四．进样分析
1. 单针进样：选择“运行控制->样品信息”。查看单针，点击
目录”、“样品位置”和“样品名称”，点击确定。
。编辑数据文件“子
路径——选择数据文件存储路径
选择手动或者前缀/计数器——命名数据文件名
样品位置——设置样品位置，直接填写数字即可，不需要写“样品瓶”
运行方法——保存样品信息并运行方法
确定——保存样品信息，后“运行控制->运行方法”。
2. 序列进样：利用自动进样器自动批量进样。查看序列，点击
选择“序列->新建序列”，然后再选择“序列->序列参数”