2024年1月6日发(作者:兰复)
复旦大学生命科学学院 遗传工程国家重点实验室
奥林巴斯IX73倒置荧光显微镜使用说明
本内容主要分为以下几个章节:
一、明场方式的使用说明
二、相差方式的使用说明
三、微分干涉(DIC)方式的使用说明
四、荧光方式的使用说明
五、软件的相关使用说明
六、图片组合的使用说明
七、图像拼接的使用说明
八、景深扩展的使用说明
九、时间序列的使用说明
十、维护与保养
注:荧光开关是桔黄色荧光笔标注。拷贝数据请用新的光盘。
一、明场方式的使用说明
1.打开明场光源A;
2.摁下显微镜机身前B按钮,并调节光强旋钮以获得合适的光强;
3.选择适当的物镜,并将聚光镜上的调节环D转至5号位即BF;
4.将荧光滤光块F转至5号位即BF;
5.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位
置;
6.调节调焦旋钮,获得清晰的明场图像。
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二、相差方式的使用说明
1.打开明场光源A;
2.摁下显微镜机身前B按钮,并调节光强旋钮以获得合适的光强;
3.根据需要,选择4X,10X,20X,40X中的一个物镜,并将聚光镜上
的调节环D 转至相应的号位(4X物镜用PHL;10X和20X物镜用PH1;
40X物镜用PH2);
4.将荧光滤光块F转至5号位即BF;
5.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置;
6.调节调焦旋钮,获得清晰的相差图像。
三、微分干涉(DIC)方式的使用说明
1.打开明场光源A;
2.摁下显微镜机身前B按钮,并调节光强旋钮以获得合适的光强;
3.将起偏镜移动手把即C推至右侧;
4.选择60X的物镜,并将聚光镜上的调节环D转至4号位;
5.将DIC滑座即E向里推入至卡住;
6.将荧光滤色块F转至4号位即DIC;
7.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置;
8.调节调焦旋钮,获得清晰的微分干涉图像。
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四、荧光方式的使用说明
1.在明场观察方式下获得清晰的图像后,调节光强旋钮至最弱,并关
闭显微镜机身前B按钮(如果不再使用明场方式观察,请将明场光源A
关闭);
2.接下来请查看荧光开关,即桔黄色荧光笔标注;
3.打开荧光光源A,接着打开SHUTTER开关B;
4.根据需要,将荧光滤色块F转至1、2、3、6中的一个号位;
5.按压一次外接控制器圆按键C打开荧光(再按压一次即会关闭),
并旋转圆按键C调节荧光光强;
6.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置;
7.调节调焦旋钮,获得清晰的荧光图像。
五、软件的相关使用说明
1.当获得清晰的明场图像后,将光路切换杆调至100%相机位置;
2.打开CB5S开关;
3.打开cellSens 软件后,首先在摄像控制工具窗口中切换相机芯片为“彩色模式”即出现红绿蓝条纹按钮,此时相机自动切换为彩色芯片进行明场图像采图;
4.接下来点击“实时观察”对样品进行预览,随后在摄像控制工具窗口中将曝光模式调节为“自动”,最后将曝光模式调节到“手动”,通过增加或减少曝光时间来获得满意的观察效果;
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5.如果明场图像背景不够干净,可以在摄像控制工具窗口中执行白平衡操作,点击“白平衡”后框选预览图像中样品之外的背景区域,即可执行白平衡;
6.根据实验需求,调节拍照的分辨率后点击“拍照”即可完成对当前预览图像的及时拍照,对该图像另存到指定文件夹,图像默认保存格式为“TIF”格式。
1.当获得清晰的荧光图像后,将光路切换杆调至100%相机位置;
2.打开CB5S开关;
3.打开cellSens 软件后,首先在摄像控制工具窗口中切换相机芯片为“灰度模式”即黑白渐进按钮,此时相机自动切换为黑白芯片进行荧光图像采图;接下来勾选高级荧光模式“SFL”;
4.随后点击“实时观察”对荧光图像进行预览,将曝光模式调节为“自动”,根据荧光表达的强弱,可以将曝光模式切换到“自动”,通过增加曝光时间来使得荧光表达更亮,反之亦然;若调节曝光时间超过1s,可以适当调高“增益”值(默认是1,可以调节到2)来使得更短的曝光时间达到相同的荧光亮度;
5.如果觉得荧光样品的背景不够干净,可以执行黑平衡操作,点击“黑平衡”后框选预览图像中荧光样品之外的背景区域,即可执行黑平衡;
6.根据实验需求,调节拍照的分辨率后点击“拍照”即可完成对当前预览图像的及时拍照,随后点击“图像”>“印入信息”>并选择4
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“是”之后再对该图像进行保存,这样荧光图像为彩色,否则是黑白颜色的图片;图像默认保存格式为“TIF”格式。
标尺的添加
1. 如果要在软件上显示并保存标尺信息,可在进行图像预览时点击
“视图”>“标尺”,标尺就会在图像上显示出来;
2. 随后点击“拍照”,拍照完成后,再点击“图像”>“印入信息”>
并选择“是”之后再对该图像进行保存,标尺信息就会印在该图像上;
3. 如果改变标尺格式可选“工具”>“选项”>“标尺”。
六、图片组合的使用说明
荧光图片的组合
多通道荧光自动叠加
1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口;
2. 选定“自动处理”选项;
3. 单击“多通道”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内
部的充实浅黄色的背景;
4. 单击添加通道按钮,上下文菜单随即被打开;该上下文菜单中将列出所有当前软件设置的观测模式(FUW、FBWA、FGW、CY5 等荧光观测模式);
5.选定首先要采集的色彩通道,例如蓝色“FUW”,随后单击第一个
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色彩通道旁边的小加号,激活当前蓝色通道,并按软件提示将滤色块
转盘转至1 号位;
6.随后将工具窗口切换至“摄像控制”工具窗口,点击“实时观察”对荧光样品进行曝光时间及增益值进行调节,达到一个最佳的观察效果;然后切换至“流程管理”工具窗口,单击读取设置按钮,将最佳观察效果时的曝光时间及增益值读取到当前所激活的荧光通道;
7.后面可以重复操作第4-6 步,添加想要与当前已激活通道(例:
蓝色通道)组合的其他荧光通道;
8.在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,随后软件中会提示你切
换滤色块的指令,每当你按照软件提示切换一个滤色块,相机就拍一
张荧光图像,指令提示完毕后,软件自动将不同通道下拍摄的多张荧
光图像进行荧光叠加,图像窗口中将显示所有通道的叠加荧光图像;
9.将多通道荧光图像另存为指定文件夹,默认的文件保存格式为“TIF”格式。
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多通道荧光手动叠加
多通道图像:用黑白相机芯片所拍出的荧光图像,该图像在软件中已默认添加并使用了相应通道的伪彩色,此时图像模式为“多通道,16 位图像”。
1. 鼠标选中任意一张多通道图像文件名后,点击图像> 组合通道,
组合通道对话框随即打开;
2. 选中的多通道图像将作为第一色彩通道被自动输入到图像列表中,
组合通道对话框中显示出当前色彩通道图像的预览图像;
3. 在下一可用行中,单击图像单元格。随即会出现一个可用图像的
文件名列表,表中包含所有的可用图像。此时从表格中单击选中另一可用多通道图像后,组合通道对话框中立即显示组合好的预览图像;
4. 在列表里鼠标选中任一色彩通道图像文件名,可进行该通道色彩
亮度值的调节,增加该色彩通道的权重;如有必要,使用像素偏移组中的箭头按钮,设定X/Y 的偏移值,也可以相对于彼此移动单幅图像。随后单击“确定”按钮,创建一个包含多个荧光通道的新多通道图像,该图像模式为“多通道,16 位图像”;
5.点击文件> 另存为命令保存新的多通道图像,保存图像时,请始终使用TIF文件格式。
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明场图片与荧光图片的手动叠加
透射图像:用彩色相机芯片所拍出的图像,此类图像模式为“RGB,8 位图像”。透射图像不必具有与单张荧光图像相同的图像类型,不过透射图像的位深要与荧光图像一致。
1. 鼠标选中透射图像文件名后,点击图像> 模式,将模式里的位深
从“8位图像”更改为“16 位图像”;
2. 鼠标选中该透射图像文件名后,点击图像> 组合通道,组合通道
对话框随即打开,随后在透射列表中选择该透射图像,组合通道对话框中显示出当前透射图像的预览图像;
3. 在图像列表单元格中单击一次,将获得包含可以与所选透射图像
组合的所有多通道荧光图像文件名的取值表。选择所需荧光图像(可以选择一张或一张以上的多通道荧光图像),选择完成后组合通道对话框中立即显示将“多通道图像与透射图像”组合好的预览图像,随后单击“确定”按钮创建新图像文档,该图像文档为具有两个图像层的多层图像;
4. 点击文件> 另存为命令保存新的多层图像。保存图像时,请始终
使用TIF文件格式。
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七、手动图像拼接的使用说明
1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口;
2. 选定“手动处理”选项;
3.单击“手动图像拼接”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内部的充实浅黄色的背景;
4.请确定“自动对齐”按钮显示为已点击状态;
5.在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,软件将切换到实时观察模式,对样品聚焦清楚后,可以移动载物台使得从样品的左上角出现在视野里;接下里单击某个箭头按钮可设置要将下一幅图像排列在当前图像的哪一侧;
6. 当你点击箭头时,软件会自动采集当前的样品图像出现出现在图像窗口里,而该采集图像右侧会出现当前的实时图像,通过移动载物台使得实时图像中样品的右上角部分与采集好左上角的图像重合;随后点击箭头时,当前样品左右两部分重合好的图像会被采集,随后在该采集图像下方会出现当前的实时图像,通过移动载物台使得实时图像中样品到右下角部分和采集好的图像重合;依次反复,直至一个完整的样品被完全拼出,点击“停止”;
7. 将已拼接好的的图像另存为指定文件夹,默认的文件保存格式为
“TIF”格式。
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八、手动景深扩展
1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口;
2. 选定“手动处理”选项;
3. 单击“即时扩展景深”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内部的充实浅黄色的背景;
4. 明场图像做景深扩展时选择透射(指数/二次函数),荧光图像做
景深扩展时选择反射(指数/二次函数);
5. 在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,此时图像窗口下方右侧
画面即为当前的样品焦面的实时图像,而图像窗口下方左侧画面显示即为当前焦面上的样品信息,缓慢微调过程中,依次达到样品不同的焦面,等使用微调机构从样品的下焦面走到上焦面后,图像窗口下方左侧画面里会把不同焦面上所有的样品信息完全累积记录;而在图像窗口上方会自动生成一张把不同焦面样品信息叠加后的图片,随后单击停止按钮,图像窗口会生成一张叠加好全部清晰的图片;
6.点击文件> 另存为命令保存新的图像。保存图像时,请始终使用TIF文件格式。
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九、时间序列拍照
1. 激活流程管理工具窗口;
2. 选定“自动处理”选项;
3. 单击“缩时”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内部的充实浅黄色的背景;
4. 指定完成采集所需的时间,如10 秒。在录制时间字段中输入值
“00000:00:10”(即10 秒)。你可以在该字段中直接编辑每个数字。为此,只需在要编辑的数字前单击一下;
5. 选择数据段右侧的单选按钮,以将采集时间指定为不再更改。锁
形图标会自动出现在所选单选按钮旁;
6. 指定您要采集的帧数。在周期数字段中输入,例如10,随即会更
新间隔字段。它表示两个连续帧之间经过的时间;
7. 在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,随即会立即开始采集时间序列;
8. 随后启动流程按钮会变为暂停按钮,单击此按钮将中断采集流程;
停止按钮将变为激活状态,单击此按钮将停止采集流程,到此时为止
所采集的时间栈图像将得到保留;在图像窗口左下部的状态栏中将出
现进度条,它会告诉你还需要采集多少幅图像;
9. 当你在流程管理工具窗口中再次看见开始按钮,同时进度条消失时,即表示采集已完成;将时间序列成像另存为指定文件夹,预设的文件保存格式为“VSI”格式。
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十、维护与保养
使用须知
1.显微镜使用好以后,请将显微镜的光强旋钮调至最小后再关闭电源开关。
2.拍照结束后的关机顺序:将物镜切换至低倍镜并通过调焦机构将物镜降下来——》关闭cellSens 软件——》关闭编码控制器U-CB5S
开关——》关闭显微镜的卤素光源和LED 荧光光源。
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本内容主要分为以下几个章节:
一、明场方式的使用说明
二、相差方式的使用说明
三、微分干涉(DIC)方式的使用说明
四、荧光方式的使用说明
五、软件的相关使用说明
六、图片组合的使用说明
七、图像拼接的使用说明
八、景深扩展的使用说明
九、时间序列的使用说明
十、维护与保养
注:荧光开关是桔黄色荧光笔标注。拷贝数据请用新的光盘。
一、明场方式的使用说明
1.打开明场光源A;
2.摁下显微镜机身前B按钮,并调节光强旋钮以获得合适的光强;
3.选择适当的物镜,并将聚光镜上的调节环D转至5号位即BF;
4.将荧光滤光块F转至5号位即BF;
5.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位
置;
6.调节调焦旋钮,获得清晰的明场图像。
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二、相差方式的使用说明
1.打开明场光源A;
2.摁下显微镜机身前B按钮,并调节光强旋钮以获得合适的光强;
3.根据需要,选择4X,10X,20X,40X中的一个物镜,并将聚光镜上
的调节环D 转至相应的号位(4X物镜用PHL;10X和20X物镜用PH1;
40X物镜用PH2);
4.将荧光滤光块F转至5号位即BF;
5.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置;
6.调节调焦旋钮,获得清晰的相差图像。
三、微分干涉(DIC)方式的使用说明
1.打开明场光源A;
2.摁下显微镜机身前B按钮,并调节光强旋钮以获得合适的光强;
3.将起偏镜移动手把即C推至右侧;
4.选择60X的物镜,并将聚光镜上的调节环D转至4号位;
5.将DIC滑座即E向里推入至卡住;
6.将荧光滤色块F转至4号位即DIC;
7.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置;
8.调节调焦旋钮,获得清晰的微分干涉图像。
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四、荧光方式的使用说明
1.在明场观察方式下获得清晰的图像后,调节光强旋钮至最弱,并关
闭显微镜机身前B按钮(如果不再使用明场方式观察,请将明场光源A
关闭);
2.接下来请查看荧光开关,即桔黄色荧光笔标注;
3.打开荧光光源A,接着打开SHUTTER开关B;
4.根据需要,将荧光滤色块F转至1、2、3、6中的一个号位;
5.按压一次外接控制器圆按键C打开荧光(再按压一次即会关闭),
并旋转圆按键C调节荧光光强;
6.根据需要将光路切换杆调至100%目镜或50%相机和50%目镜的位置;
7.调节调焦旋钮,获得清晰的荧光图像。
五、软件的相关使用说明
1.当获得清晰的明场图像后,将光路切换杆调至100%相机位置;
2.打开CB5S开关;
3.打开cellSens 软件后,首先在摄像控制工具窗口中切换相机芯片为“彩色模式”即出现红绿蓝条纹按钮,此时相机自动切换为彩色芯片进行明场图像采图;
4.接下来点击“实时观察”对样品进行预览,随后在摄像控制工具窗口中将曝光模式调节为“自动”,最后将曝光模式调节到“手动”,通过增加或减少曝光时间来获得满意的观察效果;
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5.如果明场图像背景不够干净,可以在摄像控制工具窗口中执行白平衡操作,点击“白平衡”后框选预览图像中样品之外的背景区域,即可执行白平衡;
6.根据实验需求,调节拍照的分辨率后点击“拍照”即可完成对当前预览图像的及时拍照,对该图像另存到指定文件夹,图像默认保存格式为“TIF”格式。
1.当获得清晰的荧光图像后,将光路切换杆调至100%相机位置;
2.打开CB5S开关;
3.打开cellSens 软件后,首先在摄像控制工具窗口中切换相机芯片为“灰度模式”即黑白渐进按钮,此时相机自动切换为黑白芯片进行荧光图像采图;接下来勾选高级荧光模式“SFL”;
4.随后点击“实时观察”对荧光图像进行预览,将曝光模式调节为“自动”,根据荧光表达的强弱,可以将曝光模式切换到“自动”,通过增加曝光时间来使得荧光表达更亮,反之亦然;若调节曝光时间超过1s,可以适当调高“增益”值(默认是1,可以调节到2)来使得更短的曝光时间达到相同的荧光亮度;
5.如果觉得荧光样品的背景不够干净,可以执行黑平衡操作,点击“黑平衡”后框选预览图像中荧光样品之外的背景区域,即可执行黑平衡;
6.根据实验需求,调节拍照的分辨率后点击“拍照”即可完成对当前预览图像的及时拍照,随后点击“图像”>“印入信息”>并选择4
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“是”之后再对该图像进行保存,这样荧光图像为彩色,否则是黑白颜色的图片;图像默认保存格式为“TIF”格式。
标尺的添加
1. 如果要在软件上显示并保存标尺信息,可在进行图像预览时点击
“视图”>“标尺”,标尺就会在图像上显示出来;
2. 随后点击“拍照”,拍照完成后,再点击“图像”>“印入信息”>
并选择“是”之后再对该图像进行保存,标尺信息就会印在该图像上;
3. 如果改变标尺格式可选“工具”>“选项”>“标尺”。
六、图片组合的使用说明
荧光图片的组合
多通道荧光自动叠加
1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口;
2. 选定“自动处理”选项;
3. 单击“多通道”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内
部的充实浅黄色的背景;
4. 单击添加通道按钮,上下文菜单随即被打开;该上下文菜单中将列出所有当前软件设置的观测模式(FUW、FBWA、FGW、CY5 等荧光观测模式);
5.选定首先要采集的色彩通道,例如蓝色“FUW”,随后单击第一个
5
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色彩通道旁边的小加号,激活当前蓝色通道,并按软件提示将滤色块
转盘转至1 号位;
6.随后将工具窗口切换至“摄像控制”工具窗口,点击“实时观察”对荧光样品进行曝光时间及增益值进行调节,达到一个最佳的观察效果;然后切换至“流程管理”工具窗口,单击读取设置按钮,将最佳观察效果时的曝光时间及增益值读取到当前所激活的荧光通道;
7.后面可以重复操作第4-6 步,添加想要与当前已激活通道(例:
蓝色通道)组合的其他荧光通道;
8.在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,随后软件中会提示你切
换滤色块的指令,每当你按照软件提示切换一个滤色块,相机就拍一
张荧光图像,指令提示完毕后,软件自动将不同通道下拍摄的多张荧
光图像进行荧光叠加,图像窗口中将显示所有通道的叠加荧光图像;
9.将多通道荧光图像另存为指定文件夹,默认的文件保存格式为“TIF”格式。
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多通道荧光手动叠加
多通道图像:用黑白相机芯片所拍出的荧光图像,该图像在软件中已默认添加并使用了相应通道的伪彩色,此时图像模式为“多通道,16 位图像”。
1. 鼠标选中任意一张多通道图像文件名后,点击图像> 组合通道,
组合通道对话框随即打开;
2. 选中的多通道图像将作为第一色彩通道被自动输入到图像列表中,
组合通道对话框中显示出当前色彩通道图像的预览图像;
3. 在下一可用行中,单击图像单元格。随即会出现一个可用图像的
文件名列表,表中包含所有的可用图像。此时从表格中单击选中另一可用多通道图像后,组合通道对话框中立即显示组合好的预览图像;
4. 在列表里鼠标选中任一色彩通道图像文件名,可进行该通道色彩
亮度值的调节,增加该色彩通道的权重;如有必要,使用像素偏移组中的箭头按钮,设定X/Y 的偏移值,也可以相对于彼此移动单幅图像。随后单击“确定”按钮,创建一个包含多个荧光通道的新多通道图像,该图像模式为“多通道,16 位图像”;
5.点击文件> 另存为命令保存新的多通道图像,保存图像时,请始终使用TIF文件格式。
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明场图片与荧光图片的手动叠加
透射图像:用彩色相机芯片所拍出的图像,此类图像模式为“RGB,8 位图像”。透射图像不必具有与单张荧光图像相同的图像类型,不过透射图像的位深要与荧光图像一致。
1. 鼠标选中透射图像文件名后,点击图像> 模式,将模式里的位深
从“8位图像”更改为“16 位图像”;
2. 鼠标选中该透射图像文件名后,点击图像> 组合通道,组合通道
对话框随即打开,随后在透射列表中选择该透射图像,组合通道对话框中显示出当前透射图像的预览图像;
3. 在图像列表单元格中单击一次,将获得包含可以与所选透射图像
组合的所有多通道荧光图像文件名的取值表。选择所需荧光图像(可以选择一张或一张以上的多通道荧光图像),选择完成后组合通道对话框中立即显示将“多通道图像与透射图像”组合好的预览图像,随后单击“确定”按钮创建新图像文档,该图像文档为具有两个图像层的多层图像;
4. 点击文件> 另存为命令保存新的多层图像。保存图像时,请始终
使用TIF文件格式。
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七、手动图像拼接的使用说明
1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口;
2. 选定“手动处理”选项;
3.单击“手动图像拼接”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内部的充实浅黄色的背景;
4.请确定“自动对齐”按钮显示为已点击状态;
5.在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,软件将切换到实时观察模式,对样品聚焦清楚后,可以移动载物台使得从样品的左上角出现在视野里;接下里单击某个箭头按钮可设置要将下一幅图像排列在当前图像的哪一侧;
6. 当你点击箭头时,软件会自动采集当前的样品图像出现出现在图像窗口里,而该采集图像右侧会出现当前的实时图像,通过移动载物台使得实时图像中样品的右上角部分与采集好左上角的图像重合;随后点击箭头时,当前样品左右两部分重合好的图像会被采集,随后在该采集图像下方会出现当前的实时图像,通过移动载物台使得实时图像中样品到右下角部分和采集好的图像重合;依次反复,直至一个完整的样品被完全拼出,点击“停止”;
7. 将已拼接好的的图像另存为指定文件夹,默认的文件保存格式为
“TIF”格式。
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八、手动景深扩展
1. 将工具窗口切换至“流程管理”工具窗口;
2. 选定“手动处理”选项;
3. 单击“即时扩展景深”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内部的充实浅黄色的背景;
4. 明场图像做景深扩展时选择透射(指数/二次函数),荧光图像做
景深扩展时选择反射(指数/二次函数);
5. 在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,此时图像窗口下方右侧
画面即为当前的样品焦面的实时图像,而图像窗口下方左侧画面显示即为当前焦面上的样品信息,缓慢微调过程中,依次达到样品不同的焦面,等使用微调机构从样品的下焦面走到上焦面后,图像窗口下方左侧画面里会把不同焦面上所有的样品信息完全累积记录;而在图像窗口上方会自动生成一张把不同焦面样品信息叠加后的图片,随后单击停止按钮,图像窗口会生成一张叠加好全部清晰的图片;
6.点击文件> 另存为命令保存新的图像。保存图像时,请始终使用TIF文件格式。
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九、时间序列拍照
1. 激活流程管理工具窗口;
2. 选定“自动处理”选项;
3. 单击“缩时”按钮,按钮将显示为已点击状态,此时该按钮内部的充实浅黄色的背景;
4. 指定完成采集所需的时间,如10 秒。在录制时间字段中输入值
“00000:00:10”(即10 秒)。你可以在该字段中直接编辑每个数字。为此,只需在要编辑的数字前单击一下;
5. 选择数据段右侧的单选按钮,以将采集时间指定为不再更改。锁
形图标会自动出现在所选单选按钮旁;
6. 指定您要采集的帧数。在周期数字段中输入,例如10,随即会更
新间隔字段。它表示两个连续帧之间经过的时间;
7. 在流程管理工具窗口中,单击开始按钮,随即会立即开始采集时间序列;
8. 随后启动流程按钮会变为暂停按钮,单击此按钮将中断采集流程;
停止按钮将变为激活状态,单击此按钮将停止采集流程,到此时为止
所采集的时间栈图像将得到保留;在图像窗口左下部的状态栏中将出
现进度条,它会告诉你还需要采集多少幅图像;
9. 当你在流程管理工具窗口中再次看见开始按钮,同时进度条消失时,即表示采集已完成;将时间序列成像另存为指定文件夹,预设的文件保存格式为“VSI”格式。
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十、维护与保养
使用须知
1.显微镜使用好以后,请将显微镜的光强旋钮调至最小后再关闭电源开关。
2.拍照结束后的关机顺序:将物镜切换至低倍镜并通过调焦机构将物镜降下来——》关闭cellSens 软件——》关闭编码控制器U-CB5S
开关——》关闭显微镜的卤素光源和LED 荧光光源。
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