2024年3月21日发(作者：学醉蝶)
Leica DMI6000B活细胞工作站操作手册
一、开机步骤
1、打开总电源开关。
2、打开37℃加温器开关（位置在显微镜桌下方，并有温度显示），等温度升至37℃，夏天
约需0.5hr，冬天约需1.5hr。
3、打开显微镜开关。位于电脑桌右下方。
4、打开电脑显示屏幕，再打开电脑开关（位置在电脑桌下方）。
5、打开汞灯（汞灯开关在左面白色柜子的第二层，）。
6、放倒立柱，放上样品，再放正立柱（放样品前检查显微镜镜头是否下移，以免碰到镜头
损坏样品）。
7、如果需用CO
2
，则接上CO
2
装置，开二氧化碳钢瓶和空气钢瓶。
8、打开红色混合器开光，并调节混合器输出二氧化碳百分比为5%或10%和流量为3（位置
在左面白色柜子第 一层）。
二、软件操作
1、打开leica LAS AF 软件，界面如下图所示
2、开始实验设置
点击setup
根据实验需要选择采图模式以及相应的滤光块，依次查看各个激发光的图像，通过调整焦距
和曝光时间优化图像。
点击Z，可以确定多层扫描的范围
确定begin位置和end位置，z spacing 确定扫面的步宽，number of Z planes 确定扫描层数。
点击T，出现time sequence builder面板，根据实验选择不同的时间参数组合情况。
点击N设置多点拍摄。
先初始化，先将透射光立柱向后倾倒，初始化后，再将立柱竖直放置。
通过xy方向的驱动移动载物台选择需要拍摄的位置，按下add，即将当前位置添加到多点
拍摄序列中。之后重复上面的操作，确定下一个拍摄点。设置完成，点ok即可。
3、完成各项所需设置后，点击capture或start，即开始按设置程序开始获取图像。
点击image view 查看所拍摄的图片。
点击live image 可实时查看拍摄图片。此时可在下次拍摄的空当再次调整焦距等情况
点击stop，暂时停止获图。
4、整理图片
1）保存实验保存Leica .lif 文件
进入Acquire 面板的Experiment 中，右键点击Experiment，从弹出菜单中选中“Save
Experiment “Experiment” as…”，保存lif文件到自己的文件夹中并取名。
2）导出lif文件
右键点击Experiment，从弹出菜单中选中“Export Experiment as tiff”，选择目标文件夹，选
中rawdata导出单通道图片。
3）如需导出overlay 图片，则再次右键点击Experiment，从弹出菜单中选中“Export Experiment
as tiff”，选择目标文件夹，选中overlay 导出多通道合成图片。
三、关机步骤
1、关汞灯
2、关加温器开关。
3、关二氧化碳、空气钢瓶开关。
4、关空气混合器开关。
5、取出二氧化碳装置。
6、刻录光盘导出数据。
7、退出软件系统，关电脑。
8、降低显微镜镜头，关显微镜开关。
9、放倒立柱取出样品，用洁净的擦镜纸擦镜头，再放正立柱。
10、关闭总电源开关。
11、登记使用时间、仪器状况（从预热时开始计时）、签名。
12、关空调、关灯锁门。
2024年3月21日发(作者：学醉蝶)
Leica DMI6000B活细胞工作站操作手册
一、开机步骤
1、打开总电源开关。
2、打开37℃加温器开关（位置在显微镜桌下方，并有温度显示），等温度升至37℃，夏天
约需0.5hr，冬天约需1.5hr。
3、打开显微镜开关。位于电脑桌右下方。
4、打开电脑显示屏幕，再打开电脑开关（位置在电脑桌下方）。
5、打开汞灯（汞灯开关在左面白色柜子的第二层，）。
6、放倒立柱，放上样品，再放正立柱（放样品前检查显微镜镜头是否下移，以免碰到镜头
损坏样品）。
7、如果需用CO
2
，则接上CO
2
装置，开二氧化碳钢瓶和空气钢瓶。
8、打开红色混合器开光，并调节混合器输出二氧化碳百分比为5%或10%和流量为3（位置
在左面白色柜子第 一层）。
二、软件操作
1、打开leica LAS AF 软件，界面如下图所示
2、开始实验设置
点击setup
根据实验需要选择采图模式以及相应的滤光块，依次查看各个激发光的图像，通过调整焦距
和曝光时间优化图像。
点击Z，可以确定多层扫描的范围
确定begin位置和end位置，z spacing 确定扫面的步宽，number of Z planes 确定扫描层数。
点击T，出现time sequence builder面板，根据实验选择不同的时间参数组合情况。
点击N设置多点拍摄。
先初始化，先将透射光立柱向后倾倒，初始化后，再将立柱竖直放置。
通过xy方向的驱动移动载物台选择需要拍摄的位置，按下add，即将当前位置添加到多点
拍摄序列中。之后重复上面的操作，确定下一个拍摄点。设置完成，点ok即可。
3、完成各项所需设置后，点击capture或start，即开始按设置程序开始获取图像。
点击image view 查看所拍摄的图片。
点击live image 可实时查看拍摄图片。此时可在下次拍摄的空当再次调整焦距等情况
点击stop，暂时停止获图。
4、整理图片
1）保存实验保存Leica .lif 文件
进入Acquire 面板的Experiment 中，右键点击Experiment，从弹出菜单中选中“Save
Experiment “Experiment” as…”，保存lif文件到自己的文件夹中并取名。
2）导出lif文件
右键点击Experiment，从弹出菜单中选中“Export Experiment as tiff”，选择目标文件夹，选
中rawdata导出单通道图片。
3）如需导出overlay 图片，则再次右键点击Experiment，从弹出菜单中选中“Export Experiment
as tiff”，选择目标文件夹，选中overlay 导出多通道合成图片。
三、关机步骤
1、关汞灯
2、关加温器开关。
3、关二氧化碳、空气钢瓶开关。
4、关空气混合器开关。
5、取出二氧化碳装置。
6、刻录光盘导出数据。
7、退出软件系统，关电脑。
8、降低显微镜镜头，关显微镜开关。
9、放倒立柱取出样品，用洁净的擦镜纸擦镜头，再放正立柱。
10、关闭总电源开关。
11、登记使用时间、仪器状况（从预热时开始计时）、签名。
12、关空调、关灯锁门。