2024年4月2日发(作者：万俟心远)
・
134
・
地方病通报
2007
年第
22
卷第
4
期
EndemicDiseasesBulletin2007Vol.22,No.4
文章编号
:1000
2
3711
(
2007
)
04
2
0134
2
02
分光光度法中制作标准曲线及影响因素
周敏聪
(
新疆奎屯市自来水公司
,
新疆奎屯
834500
)
3
关键词
:
分光光度法
;
标准曲线
;
绘制
中图分类号
:R123.1
文献标识码
:A
标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线
,
是用来描述被测
物质的浓度
(
或含量
)
在分析仪器响应信号值之间定量关系的
曲线。在分光光度法分析中
,
被测物质的浓度在仪器上的响应
信号值在一定范围内呈直线关系
,
水样测定的结果可以从标准
曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏
,
将会影响测定结果的
准确度。
1
标准曲线的表达式
2.3
截距
(
a
)
:
截距是评价标准曲线准确度的
,
是实验误差在
y
轴上
(
或
x
轴上
)
的反映
,
当用扣除空白值吸光度的数值为
y
值
进行回归时
,
理论上
a
值应为零
,
但实际上截距等于零的情况
是很罕见的
,
当系统误差减至允许程度后
,
随机误差总是存在
的
,
因此截距一般不为零
,
若存在显著的系统误差或操作误差
,
测得
a
值较大时
(
|
a
|>0.010
)
应找出原因后
,
重新绘制标准
曲线。
3
影响标准曲线线性关系的因素
3.1
分析法自身的精密度
:
如当显色反映的灵敏度不高时
,
被
标准曲线应是一条通过原点的直线
,
如果坐标上各浓度点
基本在一条直线上可不进行回归处理
,
但在实验中不可避免地
存在测定误差
,
往往会有一、二点偏离直线
,
此时可用最小二乘
法进行回归分析
,
然后绘制曲线
,
通常称为回归直线
,
而代表回
归直线方程叫回归方程
,
表达式为
:
y
=
bx
+
a
(
式中
:b
为直线斜
率
,a
为
y
轴上的截距
,x
为被测溶液的浓度
,y
为吸光度
,
是多
次测定结果的平均值
)
。
在实际工作中
,
制作标准曲线的目的
,
是要借助它来查出
水样中被测物质的浓度
,
而不是由
x
值通过回归方程去求得最
可靠的
y
值
,
为了便于将观察到仪器响应信号值代入回归方程
中直接计算试样的浓度或含量
,
勿需去绘制标准曲线再从曲线
上查出被测物的浓度
,
改用下式计算
;x
=
by
+
a
(
式中
:a
为
x
轴
线上的截距
,
其它解释同前
)
。
2
标准曲线的参数
标准曲线有
3
个参数
,
即相关系数
r,
斜率
b
和截距
a
。
2
.
1
相关系数
(
r
)
:
相关系数是表示变量
x
与
y
之间的线性关
系的密切程度。如果
r
=1
则所有点都落在一条直线上
,y
与
x
完全呈现线性关系
,
但在分析中总存在随机误差
,
所以
,
一般
r
≥
0
.
999
即可它无量钢
,
取至最后一个
9
后面保留一位数字
,
不
进行数值修约。当相关系数太差时
,
其实验水平受到怀疑
,
应
查找原因
,
重新绘制标准曲线。为了使回归方程比较好
,
在制
作标准曲线的实验中应细心操作
,
最好在每个浓度点特别是
高、低浓度点作重复测定
3
次
,
取平均值来计算回归方程。
2
.
2
斜率
(
b
)
:
某种分析方法的斜率在实验条件基本一致的情
况下是相对稳定的
,
斜率是检验分析方法灵敏度的
,
因此当斜
率出现异常数据
(
超过相当偏差的
2.5%
)
时
,
就要寻找原因。
我们使用的是
721
分光光度计
,
若使用其它灵敏度较高的分光
光度计
(
如
7230
型分光光度计
)
测得的
b
值会略高一些。
测物低于某一浓度就不能显色
,
当显色溶液中的掩蔽剂或缓冲
液能够络和少量被测离子
,
就会使标准曲线线性关系不好或不
通过坐标原点
,
如用铬酸钡分光光度法测定水中硫酸盐
,
用双
硫腙分光光度法测定水中锌
,
用离子选择电极法测定氟化物
时
,
在标准曲线的低浓度就有可能有此现象。
3.2
测定用仪器
(
包括量具
)
的精密度
:
如单色光纯度不够
,
因
为分光光度法中要求在最大吸收峰处测定吸光度
,
因此要求分
光光度计的有效谱带宽度越窄越好
,
有利于获得纯度高的单色
光
,
当单色光纯度不够时
,
测定的吸光度偏低。
3.3
易挥发的溶剂所引起的测定溶液浓度的改变
:
如双硫腙分
光光度法测定水中的锌、铅、镉、
4-
氨基安替比林分光光度法
测定挥发酚
,
亚甲蓝分光光度法测定阴离子合成洗涤剂时
,
所
用的四氯化碳、氯仿溶剂
,
因其挥发性在实验过程中因时间问
题
,
均会使测定的溶液浓度增大
,
使吸光度的重现性较差。
3.4
污染
:
制作标准曲线的操作步骤中
,
有无损失或玷污
,
当空
白值较高时
,
纯水
,
试剂的加入量是否一致。
3.5
分析人员操作的影响
:
实践证明
,
制作标准曲线所得的一
组浓度与仪器响应信号值对应点
,
往往不是以函数关系严格地
分布在一条直线上
,
而是有一定程度的偏高
,
如果测定方法是
稳定的
,
实验操作也是严密的
,
则各实验点很可能接近于一条
直线。反之如
pH
值的控制
,
温度的控制
,
比色时间
,
加液的速
度
,
振摇时间和强度
,
器皿洗涤
,
测量误差等方面控制不当
,
都
有可能造成误差。
4
其他有关问题
4.1
有效数字
:
在标准曲线的
3
个参数中
,
一般相关系数至少
取
3
位
,
最好是
4
位数
,
斜率
b
的有效数字应于自变量的有效位
3
收稿日期
:2007-04-01
作者简介
:
周敏聪
(
1976-
)
,
女
,
助理工程师1
地方病通报
2007
年第
22
卷第
4
期
EndemicDiseasesBulletin2007Vol.22,No.4
数相等或最多比自变量多保留
1
位。截距
a
的有效位数应与因
变量的有效数相同或最多比因变量有效位数多保留
1
位。
4.2
空白值
:
空白值影响测定方法的检出限和最低检测浓度
,
也影响测定结果的重现性
,
特别是对低浓度样品的测定
,
因此
应引起足够的重视。影响空白值大小的主要因素
,
包括纯水中
的杂质
,
试剂玷污或失效
,
操作过程的玷污
,
实验条件的异常变
化等等。这些因素对测定的影响程度经常变化
,
并非是一恒定
的数值。但在同一组测定中
,
这些因素对每一测试结果的影响
基本一致。因此在每组测定中进行空白试验是十分必要的
,
由
于空白值与诸多因素有关
,
且是影响测定结果准确度的重要指
标
,
因此应对其严格控制
,
并可作为化验室自我评价的重要依
据。在测试工作中应设法降低空白值
,
当空白值过高时
,
应根
・
135
・
据其主要影响因素
,
全面进行检查。
4.3
制作标准曲线的实验点
:
有推荐实验点数
n
=5
。因为在
95%
的置信水平
,
自由度数目函数的
t
值
,
在
n
=4
或
5
时
,t
下
降缓慢。实验点少
,
可减少工作量
,
但这
5
个点分布在整个线
性范围内
,
由于仪器和方法的原因
,
两端点的测定误差较大
,
比
较可靠的实验点只有
3
个
,
因而给样品的测量值带来一定的误
差
,
所以制作标准曲线的实验点为
7
个较好。
制作标准曲线的器皿
,
应经过校准
,
配套专用。在分光光
度计中
,
标准曲线的制作是测定结果准确与否的关键所在
,
只
有我们在实验中细心操作
,
减少系统误差和随机误差
,
如果测
定方法是稳定的
,
实验操作是严密的
,
对各种影响进行适当控
(
本文编辑
:
阮红
)
制
,
就可以获得一条理想的标准曲线。
文章编号
:1000
2
3711
(
2007
)
04
2
0135
2
02
新疆兵团农五师结核病控制“三级网络”现状及对策
沈学枝
,
冯将军
12
3
(
1.
新疆生产建设兵团农五师疾病预防控制中心
,
新疆博乐
833400;
2.
新疆兵团农五师党校
,
新疆博乐
833400
)
关键词
:
结核病
;
控制
;
“三级网络”
中图分类号
:R521;R181.3
文献标识码
:A
结核病控制项目在新疆生产建设兵团农五师启动后
,
各师
开展结核病控制项目工作之间存在较大的差异。根据兵团结
核病控制项目启动后工作开展现状分析
,
结核病控制工作的重
点应该在团场
,
在基层。本文就我师结核病控制工作如何建
立、健全结核病控制项目管理“三级网络”进行探讨。
1
结核病控制工作现状
(
1
)
体制方面的原因
:
农五师结核病防治三级网络不够健
全
,
没有起到应有作用。为降低结核病发病率、保障广大职工
群众身体健康
,
针对我师实际
,
已逐渐建立起了师、团、连结防
三级网络
,
但没有发挥应有的作用。由于师级结防人员对团和
连级无行政隶属、经济制约关系
,
“三级网络”之间没有建立相
互制约、相互促进机制
,
结果是师级布置任务
,
团级应付
,
连级
不执行。即使是上级部门检查
,
也是临时应付。团场为维持生
存和发展
,
出于自身经济利益考虑
,
重临床、轻防疫、轻基层。
医院截留结核病人
,
也是造成病人因没有正规管理而产生耐药
和重复治疗的重要原因之一。
(
2
)
结核病人发现率及管理质量
:
总体来说
,
结核病发现水
平和管理水平是在逐年提高
,
但与经济发展和社会进步的步伐
相比
,
结防工作质量的提高相对缓慢。具体体现是“软件不
精”
,
师、团、连三级管理不到位
,
监督指导能力弱
,
人才缺乏
,
业
务技术水平不高
,
结防人员整体素质较差
;
“硬件不硬”
,
大多数
师、团的设施相对陈旧落后、不全
;
使结防工作的正常开展受到
制约
,
更谈不上结核病人的发现和规范治疗。
(
3
)
执法和健康教育
:
我国传染病防治法颁布实施后
,
为结
核病防治工作的开展提供了法律依据
,
为搞好结核病防治工作
提供了强有力的支持。但也应该看到卫生行政部门、卫生执法
监督部门执法力度不够
,
受到人情、关系网和部门利益等因素
影响
,
对卫生违法行为不及时查处或查处不严
,
致使有发现结
核病人迟报或不报等违法行为时有发生。
由于结核病健康教育力度不够
,
导致广大职工群众对结核
病防治工作认识不到位
,
各级政府领导不重视
,
相关部门不配
合
,
使结核病患者不能自觉自愿地接受结防人员服务
,
严重影
响了结核病人的归口管理和
DOTS
策略执行。
2
对师结防工作的思考
(
1
)
强化行政部门对基层结防工作的责任
,
加强基层网络
建设。政府承诺
,
经费落实
,
是做好结核病控制工作的保障。
各级主管部门要对结核病控制项目工作全面负责
,
要增加经费
投入
,
加强兵团结防“三级网”建设
,
保证师、团、连三级网的有
效运行。建立健全结核病防治“三级网络”是提高基层结核病
防治工作的关键。主管部门转变观念
,
转变职能
,
理顺结防“三
级网”的关系
,
师、团、连三级在业务上实行垂直管理
,
实行定员
定岗
,
不能随意更换结防工作人员。连队是三级网络的网底
,
3
收稿日期
:2007-04-22
作者简介
:
沈学枝
(
1969-
)
,
女
(
维吾尔族
)
,
主管医师1
2024年4月2日发(作者：万俟心远)
・
134
・
地方病通报
2007
年第
22
卷第
4
期
EndemicDiseasesBulletin2007Vol.22,No.4
文章编号
:1000
2
3711
(
2007
)
04
2
0134
2
02
分光光度法中制作标准曲线及影响因素
周敏聪
(
新疆奎屯市自来水公司
,
新疆奎屯
834500
)
3
关键词
:
分光光度法
;
标准曲线
;
绘制
中图分类号
:R123.1
文献标识码
:A
标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线
,
是用来描述被测
物质的浓度
(
或含量
)
在分析仪器响应信号值之间定量关系的
曲线。在分光光度法分析中
,
被测物质的浓度在仪器上的响应
信号值在一定范围内呈直线关系
,
水样测定的结果可以从标准
曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏
,
将会影响测定结果的
准确度。
1
标准曲线的表达式
2.3
截距
(
a
)
:
截距是评价标准曲线准确度的
,
是实验误差在
y
轴上
(
或
x
轴上
)
的反映
,
当用扣除空白值吸光度的数值为
y
值
进行回归时
,
理论上
a
值应为零
,
但实际上截距等于零的情况
是很罕见的
,
当系统误差减至允许程度后
,
随机误差总是存在
的
,
因此截距一般不为零
,
若存在显著的系统误差或操作误差
,
测得
a
值较大时
(
|
a
|>0.010
)
应找出原因后
,
重新绘制标准
曲线。
3
影响标准曲线线性关系的因素
3.1
分析法自身的精密度
:
如当显色反映的灵敏度不高时
,
被
标准曲线应是一条通过原点的直线
,
如果坐标上各浓度点
基本在一条直线上可不进行回归处理
,
但在实验中不可避免地
存在测定误差
,
往往会有一、二点偏离直线
,
此时可用最小二乘
法进行回归分析
,
然后绘制曲线
,
通常称为回归直线
,
而代表回
归直线方程叫回归方程
,
表达式为
:
y
=
bx
+
a
(
式中
:b
为直线斜
率
,a
为
y
轴上的截距
,x
为被测溶液的浓度
,y
为吸光度
,
是多
次测定结果的平均值
)
。
在实际工作中
,
制作标准曲线的目的
,
是要借助它来查出
水样中被测物质的浓度
,
而不是由
x
值通过回归方程去求得最
可靠的
y
值
,
为了便于将观察到仪器响应信号值代入回归方程
中直接计算试样的浓度或含量
,
勿需去绘制标准曲线再从曲线
上查出被测物的浓度
,
改用下式计算
;x
=
by
+
a
(
式中
:a
为
x
轴
线上的截距
,
其它解释同前
)
。
2
标准曲线的参数
标准曲线有
3
个参数
,
即相关系数
r,
斜率
b
和截距
a
。
2
.
1
相关系数
(
r
)
:
相关系数是表示变量
x
与
y
之间的线性关
系的密切程度。如果
r
=1
则所有点都落在一条直线上
,y
与
x
完全呈现线性关系
,
但在分析中总存在随机误差
,
所以
,
一般
r
≥
0
.
999
即可它无量钢
,
取至最后一个
9
后面保留一位数字
,
不
进行数值修约。当相关系数太差时
,
其实验水平受到怀疑
,
应
查找原因
,
重新绘制标准曲线。为了使回归方程比较好
,
在制
作标准曲线的实验中应细心操作
,
最好在每个浓度点特别是
高、低浓度点作重复测定
3
次
,
取平均值来计算回归方程。
2
.
2
斜率
(
b
)
:
某种分析方法的斜率在实验条件基本一致的情
况下是相对稳定的
,
斜率是检验分析方法灵敏度的
,
因此当斜
率出现异常数据
(
超过相当偏差的
2.5%
)
时
,
就要寻找原因。
我们使用的是
721
分光光度计
,
若使用其它灵敏度较高的分光
光度计
(
如
7230
型分光光度计
)
测得的
b
值会略高一些。
测物低于某一浓度就不能显色
,
当显色溶液中的掩蔽剂或缓冲
液能够络和少量被测离子
,
就会使标准曲线线性关系不好或不
通过坐标原点
,
如用铬酸钡分光光度法测定水中硫酸盐
,
用双
硫腙分光光度法测定水中锌
,
用离子选择电极法测定氟化物
时
,
在标准曲线的低浓度就有可能有此现象。
3.2
测定用仪器
(
包括量具
)
的精密度
:
如单色光纯度不够
,
因
为分光光度法中要求在最大吸收峰处测定吸光度
,
因此要求分
光光度计的有效谱带宽度越窄越好
,
有利于获得纯度高的单色
光
,
当单色光纯度不够时
,
测定的吸光度偏低。
3.3
易挥发的溶剂所引起的测定溶液浓度的改变
:
如双硫腙分
光光度法测定水中的锌、铅、镉、
4-
氨基安替比林分光光度法
测定挥发酚
,
亚甲蓝分光光度法测定阴离子合成洗涤剂时
,
所
用的四氯化碳、氯仿溶剂
,
因其挥发性在实验过程中因时间问
题
,
均会使测定的溶液浓度增大
,
使吸光度的重现性较差。
3.4
污染
:
制作标准曲线的操作步骤中
,
有无损失或玷污
,
当空
白值较高时
,
纯水
,
试剂的加入量是否一致。
3.5
分析人员操作的影响
:
实践证明
,
制作标准曲线所得的一
组浓度与仪器响应信号值对应点
,
往往不是以函数关系严格地
分布在一条直线上
,
而是有一定程度的偏高
,
如果测定方法是
稳定的
,
实验操作也是严密的
,
则各实验点很可能接近于一条
直线。反之如
pH
值的控制
,
温度的控制
,
比色时间
,
加液的速
度
,
振摇时间和强度
,
器皿洗涤
,
测量误差等方面控制不当
,
都
有可能造成误差。
4
其他有关问题
4.1
有效数字
:
在标准曲线的
3
个参数中
,
一般相关系数至少
取
3
位
,
最好是
4
位数
,
斜率
b
的有效数字应于自变量的有效位
3
收稿日期
:2007-04-01
作者简介
:
周敏聪
(
1976-
)
,
女
,
助理工程师1
地方病通报
2007
年第
22
卷第
4
期
EndemicDiseasesBulletin2007Vol.22,No.4
数相等或最多比自变量多保留
1
位。截距
a
的有效位数应与因
变量的有效数相同或最多比因变量有效位数多保留
1
位。
4.2
空白值
:
空白值影响测定方法的检出限和最低检测浓度
,
也影响测定结果的重现性
,
特别是对低浓度样品的测定
,
因此
应引起足够的重视。影响空白值大小的主要因素
,
包括纯水中
的杂质
,
试剂玷污或失效
,
操作过程的玷污
,
实验条件的异常变
化等等。这些因素对测定的影响程度经常变化
,
并非是一恒定
的数值。但在同一组测定中
,
这些因素对每一测试结果的影响
基本一致。因此在每组测定中进行空白试验是十分必要的
,
由
于空白值与诸多因素有关
,
且是影响测定结果准确度的重要指
标
,
因此应对其严格控制
,
并可作为化验室自我评价的重要依
据。在测试工作中应设法降低空白值
,
当空白值过高时
,
应根
・
135
・
据其主要影响因素
,
全面进行检查。
4.3
制作标准曲线的实验点
:
有推荐实验点数
n
=5
。因为在
95%
的置信水平
,
自由度数目函数的
t
值
,
在
n
=4
或
5
时
,t
下
降缓慢。实验点少
,
可减少工作量
,
但这
5
个点分布在整个线
性范围内
,
由于仪器和方法的原因
,
两端点的测定误差较大
,
比
较可靠的实验点只有
3
个
,
因而给样品的测量值带来一定的误
差
,
所以制作标准曲线的实验点为
7
个较好。
制作标准曲线的器皿
,
应经过校准
,
配套专用。在分光光
度计中
,
标准曲线的制作是测定结果准确与否的关键所在
,
只
有我们在实验中细心操作
,
减少系统误差和随机误差
,
如果测
定方法是稳定的
,
实验操作是严密的
,
对各种影响进行适当控
(
本文编辑
:
阮红
)
制
,
就可以获得一条理想的标准曲线。
文章编号
:1000
2
3711
(
2007
)
04
2
0135
2
02
新疆兵团农五师结核病控制“三级网络”现状及对策
沈学枝
,
冯将军
12
3
(
1.
新疆生产建设兵团农五师疾病预防控制中心
,
新疆博乐
833400;
2.
新疆兵团农五师党校
,
新疆博乐
833400
)
关键词
:
结核病
;
控制
;
“三级网络”
中图分类号
:R521;R181.3
文献标识码
:A
结核病控制项目在新疆生产建设兵团农五师启动后
,
各师
开展结核病控制项目工作之间存在较大的差异。根据兵团结
核病控制项目启动后工作开展现状分析
,
结核病控制工作的重
点应该在团场
,
在基层。本文就我师结核病控制工作如何建
立、健全结核病控制项目管理“三级网络”进行探讨。
1
结核病控制工作现状
(
1
)
体制方面的原因
:
农五师结核病防治三级网络不够健
全
,
没有起到应有作用。为降低结核病发病率、保障广大职工
群众身体健康
,
针对我师实际
,
已逐渐建立起了师、团、连结防
三级网络
,
但没有发挥应有的作用。由于师级结防人员对团和
连级无行政隶属、经济制约关系
,
“三级网络”之间没有建立相
互制约、相互促进机制
,
结果是师级布置任务
,
团级应付
,
连级
不执行。即使是上级部门检查
,
也是临时应付。团场为维持生
存和发展
,
出于自身经济利益考虑
,
重临床、轻防疫、轻基层。
医院截留结核病人
,
也是造成病人因没有正规管理而产生耐药
和重复治疗的重要原因之一。
(
2
)
结核病人发现率及管理质量
:
总体来说
,
结核病发现水
平和管理水平是在逐年提高
,
但与经济发展和社会进步的步伐
相比
,
结防工作质量的提高相对缓慢。具体体现是“软件不
精”
,
师、团、连三级管理不到位
,
监督指导能力弱
,
人才缺乏
,
业
务技术水平不高
,
结防人员整体素质较差
;
“硬件不硬”
,
大多数
师、团的设施相对陈旧落后、不全
;
使结防工作的正常开展受到
制约
,
更谈不上结核病人的发现和规范治疗。
(
3
)
执法和健康教育
:
我国传染病防治法颁布实施后
,
为结
核病防治工作的开展提供了法律依据
,
为搞好结核病防治工作
提供了强有力的支持。但也应该看到卫生行政部门、卫生执法
监督部门执法力度不够
,
受到人情、关系网和部门利益等因素
影响
,
对卫生违法行为不及时查处或查处不严
,
致使有发现结
核病人迟报或不报等违法行为时有发生。
由于结核病健康教育力度不够
,
导致广大职工群众对结核
病防治工作认识不到位
,
各级政府领导不重视
,
相关部门不配
合
,
使结核病患者不能自觉自愿地接受结防人员服务
,
严重影
响了结核病人的归口管理和
DOTS
策略执行。
2
对师结防工作的思考
(
1
)
强化行政部门对基层结防工作的责任
,
加强基层网络
建设。政府承诺
,
经费落实
,
是做好结核病控制工作的保障。
各级主管部门要对结核病控制项目工作全面负责
,
要增加经费
投入
,
加强兵团结防“三级网”建设
,
保证师、团、连三级网的有
效运行。建立健全结核病防治“三级网络”是提高基层结核病
防治工作的关键。主管部门转变观念
,
转变职能
,
理顺结防“三
级网”的关系
,
师、团、连三级在业务上实行垂直管理
,
实行定员
定岗
,
不能随意更换结防工作人员。连队是三级网络的网底
,
3
收稿日期
:2007-04-22
作者简介
:
沈学枝
(
1969-
)
,
女
(
维吾尔族
)
,
主管医师1