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t7 rna 聚合酶 序列

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2024年4月5日发(作者:力梧)

T7 RNA聚合酶序列

T7 RNA聚合酶是一种重要的酶,它在分子生物学和生物技术领域中具有广泛的应

用。本文将对T7 RNA聚合酶的序列进行详细介绍,包括其结构、功能以及应用。

T7 RNA聚合酶的结构

T7 RNA聚合酶是一种单链RNA聚合酶,它由T7噬菌体中的基因1编码。该酶的分

子量约为99 kDa,由883个氨基酸残基组成。T7 RNA聚合酶具有四个结构域:N

端域、核酸酶域、催化域和C端域。

N端域是T7 RNA聚合酶的最大结构域,它包含了与RNA结合相关的序列。核酸酶

域位于N端域的C端,它具有3’到5’外切酶和3’内切酶的活性,用于修复RNA

链上的错误。催化域是T7 RNA聚合酶的核心部分,它负责催化RNA链合成反应。C

端域与聚合酶的整体结构稳定性相关。

T7 RNA聚合酶的功能

T7 RNA聚合酶主要功能是在DNA模板上合成RNA链。它能够识别DNA模板上的启

动子序列,并在该位置开始RNA合成。T7 RNA聚合酶具有高度的特异性,只在T7

噬菌体启动子序列的存在下才能发挥活性。

T7 RNA聚合酶能够合成长达数千个核苷酸的RNA链。它的合成速度非常快,每分

钟可以合成数千个核苷酸。此外,T7 RNA聚合酶还具有高度的过程性,即在合成

RNA链的同时,它可以解开DNA模板上的双链结构。

T7 RNA聚合酶的应用

T7 RNA聚合酶在分子生物学和生物技术领域中有着广泛的应用。以下是一些常见

的应用:

1. 合成RNA

T7 RNA聚合酶可以用于体外合成RNA。研究人员可以利用T7 RNA聚合酶和DNA模

板合成特定序列的RNA链。这对于研究RNA结构和功能非常重要。

2. 基因表达

T7 RNA聚合酶可以用于体外转录和基因表达。研究人员可以利用T7 RNA聚合酶将

DNA模板转录成RNA,然后通过转染或转化等方法将RNA导入细胞,实现目标基因

的表达。

3. RNA标记与探针制备

T7 RNA聚合酶可以用于合成带有标记的RNA,如荧光标记的RNA。这种标记的RNA

可以用作探针,用于检测RNA或DNA分子的存在和定位。

4. RNA干扰

T7 RNA聚合酶可以用于合成siRNA或shRNA。这些小分子RNA可以干扰目标基因的

表达,从而实现基因沉默和功能研究。

5. RNA结构研究

T7 RNA聚合酶可以用于合成RNA的突变体。通过合成具有不同序列的突变RNA,研

究人员可以揭示RNA结构与功能之间的关系。

总结

T7 RNA聚合酶是一种重要的酶,在分子生物学和生物技术领域中具有广泛的应用。

它能够合成RNA链,具有高度的特异性和过程性。T7 RNA聚合酶的应用包括合成

RNA、基因表达、RNA标记与探针制备、RNA干扰以及RNA结构研究等。通过研究

T7 RNA聚合酶的结构和功能,我们可以深入了解RNA的合成和调控机制,为进一

步的研究提供重要的工具和方法。

参考文献: 1. Studier FW, et al. (1986) Use of T7 RNA polymerase to

direct expression of cloned genes. Methods Enzymol. 185:60-89. 2. Tabor

S, Richardson CC. (1987) DNA sequence analysis with a modified

bacteriophage T7 DNA polymerase. Proc Natl Acad Sci U S A. 84(15):4767-

71. 3. Milligan JF, et al. (1987) Oligoribonucleotide synthesis using

T7 RNA polymerase and synthetic DNA templates. Nucleic Acids Res.

15(21):8783-98.

2024年4月5日发(作者:力梧)

T7 RNA聚合酶序列

T7 RNA聚合酶是一种重要的酶,它在分子生物学和生物技术领域中具有广泛的应

用。本文将对T7 RNA聚合酶的序列进行详细介绍,包括其结构、功能以及应用。

T7 RNA聚合酶的结构

T7 RNA聚合酶是一种单链RNA聚合酶,它由T7噬菌体中的基因1编码。该酶的分

子量约为99 kDa,由883个氨基酸残基组成。T7 RNA聚合酶具有四个结构域:N

端域、核酸酶域、催化域和C端域。

N端域是T7 RNA聚合酶的最大结构域,它包含了与RNA结合相关的序列。核酸酶

域位于N端域的C端,它具有3’到5’外切酶和3’内切酶的活性,用于修复RNA

链上的错误。催化域是T7 RNA聚合酶的核心部分,它负责催化RNA链合成反应。C

端域与聚合酶的整体结构稳定性相关。

T7 RNA聚合酶的功能

T7 RNA聚合酶主要功能是在DNA模板上合成RNA链。它能够识别DNA模板上的启

动子序列,并在该位置开始RNA合成。T7 RNA聚合酶具有高度的特异性,只在T7

噬菌体启动子序列的存在下才能发挥活性。

T7 RNA聚合酶能够合成长达数千个核苷酸的RNA链。它的合成速度非常快,每分

钟可以合成数千个核苷酸。此外,T7 RNA聚合酶还具有高度的过程性,即在合成

RNA链的同时,它可以解开DNA模板上的双链结构。

T7 RNA聚合酶的应用

T7 RNA聚合酶在分子生物学和生物技术领域中有着广泛的应用。以下是一些常见

的应用:

1. 合成RNA

T7 RNA聚合酶可以用于体外合成RNA。研究人员可以利用T7 RNA聚合酶和DNA模

板合成特定序列的RNA链。这对于研究RNA结构和功能非常重要。

2. 基因表达

T7 RNA聚合酶可以用于体外转录和基因表达。研究人员可以利用T7 RNA聚合酶将

DNA模板转录成RNA,然后通过转染或转化等方法将RNA导入细胞,实现目标基因

的表达。

3. RNA标记与探针制备

T7 RNA聚合酶可以用于合成带有标记的RNA,如荧光标记的RNA。这种标记的RNA

可以用作探针,用于检测RNA或DNA分子的存在和定位。

4. RNA干扰

T7 RNA聚合酶可以用于合成siRNA或shRNA。这些小分子RNA可以干扰目标基因的

表达,从而实现基因沉默和功能研究。

5. RNA结构研究

T7 RNA聚合酶可以用于合成RNA的突变体。通过合成具有不同序列的突变RNA,研

究人员可以揭示RNA结构与功能之间的关系。

总结

T7 RNA聚合酶是一种重要的酶,在分子生物学和生物技术领域中具有广泛的应用。

它能够合成RNA链,具有高度的特异性和过程性。T7 RNA聚合酶的应用包括合成

RNA、基因表达、RNA标记与探针制备、RNA干扰以及RNA结构研究等。通过研究

T7 RNA聚合酶的结构和功能,我们可以深入了解RNA的合成和调控机制,为进一

步的研究提供重要的工具和方法。

参考文献: 1. Studier FW, et al. (1986) Use of T7 RNA polymerase to

direct expression of cloned genes. Methods Enzymol. 185:60-89. 2. Tabor

S, Richardson CC. (1987) DNA sequence analysis with a modified

bacteriophage T7 DNA polymerase. Proc Natl Acad Sci U S A. 84(15):4767-

71. 3. Milligan JF, et al. (1987) Oligoribonucleotide synthesis using

T7 RNA polymerase and synthetic DNA templates. Nucleic Acids Res.

15(21):8783-98.

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