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葡萄糖氧化酶法测量血糖浓度的详细介绍

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2024年4月9日发(作者:亓官阳德)

葡萄糖氧化酶法测量血糖浓度的详细介绍

?

葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖

【原理】

葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄

糖酸,并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase,POD)在色原性氧受体

存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚

去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量

与葡萄糖含量成正比。

【试剂】

1.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水

磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L

盐酸)调pH至7.0,用蒸馏水定容至1L。

2.酶试剂称取过氧化物酶1200U,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安

替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于磷酸盐缓冲液80ml中,用1mol/L

NaOH调pH至7.0,用磷酸盐缓冲液定容至100ml,置4℃保存,可稳

定3个月。

3.酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中,用棕色瓶贮存。

4.酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合,4℃可以存放1个月。

5.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中,加

温助溶,冷却后加蒸馏水定容至lL。

6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖

1.802g,溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,以12mmol/L苯甲

酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。

7.5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于

100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。

【操作步骤】

1.自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。

2.手工操作法取试管3支,按下表操作。

葡萄糖氧化酶法测血糖操作步骤

加入物(ml)空白管标准管测定管

血清--0.02

葡萄糖标准应用液-0.02-

蒸馏水0.02--

酶酚混合试剂3.03.03.0

混匀,置37℃水浴中,保温15min,在波长505nm处比色,以空白管

调零,读取标准管及测定管吸光度。

【计算】

【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89~6.11mmol/L。

【临床意义】

1.生理性高血糖可见摄入高糖食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时。

2.病理性高血糖

(1)糖尿病:病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。

2024年4月9日发(作者:亓官阳德)

葡萄糖氧化酶法测量血糖浓度的详细介绍

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葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖

【原理】

葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄

糖酸,并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase,POD)在色原性氧受体

存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚

去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量

与葡萄糖含量成正比。

【试剂】

1.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水

磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L

盐酸)调pH至7.0,用蒸馏水定容至1L。

2.酶试剂称取过氧化物酶1200U,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安

替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于磷酸盐缓冲液80ml中,用1mol/L

NaOH调pH至7.0,用磷酸盐缓冲液定容至100ml,置4℃保存,可稳

定3个月。

3.酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中,用棕色瓶贮存。

4.酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合,4℃可以存放1个月。

5.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中,加

温助溶,冷却后加蒸馏水定容至lL。

6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖

1.802g,溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,以12mmol/L苯甲

酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。

7.5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于

100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。

【操作步骤】

1.自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。

2.手工操作法取试管3支,按下表操作。

葡萄糖氧化酶法测血糖操作步骤

加入物(ml)空白管标准管测定管

血清--0.02

葡萄糖标准应用液-0.02-

蒸馏水0.02--

酶酚混合试剂3.03.03.0

混匀,置37℃水浴中,保温15min,在波长505nm处比色,以空白管

调零,读取标准管及测定管吸光度。

【计算】

【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89~6.11mmol/L。

【临床意义】

1.生理性高血糖可见摄入高糖食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时。

2.病理性高血糖

(1)糖尿病:病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。

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