2024年4月9日发(作者:亓官阳德)
葡萄糖氧化酶法测量血糖浓度的详细介绍
?
葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖
【原理】
葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄
糖酸,并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase,POD)在色原性氧受体
存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚
去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量
与葡萄糖含量成正比。
【试剂】
1.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水
磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L
盐酸)调pH至7.0,用蒸馏水定容至1L。
2.酶试剂称取过氧化物酶1200U,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安
替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于磷酸盐缓冲液80ml中,用1mol/L
NaOH调pH至7.0,用磷酸盐缓冲液定容至100ml,置4℃保存,可稳
定3个月。
3.酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中,用棕色瓶贮存。
4.酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合,4℃可以存放1个月。
5.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中,加
温助溶,冷却后加蒸馏水定容至lL。
6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖
1.802g,溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,以12mmol/L苯甲
酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。
7.5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于
100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。
【操作步骤】
1.自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
2.手工操作法取试管3支,按下表操作。
葡萄糖氧化酶法测血糖操作步骤
加入物(ml)空白管标准管测定管
血清--0.02
葡萄糖标准应用液-0.02-
蒸馏水0.02--
酶酚混合试剂3.03.03.0
混匀,置37℃水浴中,保温15min,在波长505nm处比色,以空白管
调零,读取标准管及测定管吸光度。
【计算】
【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89~6.11mmol/L。
【临床意义】
1.生理性高血糖可见摄入高糖食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时。
2.病理性高血糖
(1)糖尿病:病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。
2024年4月9日发(作者:亓官阳德)
葡萄糖氧化酶法测量血糖浓度的详细介绍
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葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖
【原理】
葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄
糖酸,并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase,POD)在色原性氧受体
存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚
去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量
与葡萄糖含量成正比。
【试剂】
1.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水
磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L
盐酸)调pH至7.0,用蒸馏水定容至1L。
2.酶试剂称取过氧化物酶1200U,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安
替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于磷酸盐缓冲液80ml中,用1mol/L
NaOH调pH至7.0,用磷酸盐缓冲液定容至100ml,置4℃保存,可稳
定3个月。
3.酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中,用棕色瓶贮存。
4.酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合,4℃可以存放1个月。
5.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中,加
温助溶,冷却后加蒸馏水定容至lL。
6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖
1.802g,溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,以12mmol/L苯甲
酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。
7.5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于
100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。
【操作步骤】
1.自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
2.手工操作法取试管3支,按下表操作。
葡萄糖氧化酶法测血糖操作步骤
加入物(ml)空白管标准管测定管
血清--0.02
葡萄糖标准应用液-0.02-
蒸馏水0.02--
酶酚混合试剂3.03.03.0
混匀,置37℃水浴中,保温15min,在波长505nm处比色,以空白管
调零,读取标准管及测定管吸光度。
【计算】
【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89~6.11mmol/L。
【临床意义】
1.生理性高血糖可见摄入高糖食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时。
2.病理性高血糖
(1)糖尿病:病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。