2024年4月10日发(作者：房晓星)
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第３０卷第１期
２００７年２月
云南中医学院学报
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｖｏ１．３０ Ｎｏ．１
２．砌
健脾软肝方及拆方对ＧＥｌ４肝纤维化
大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的影响
陈文慧，魏 东，马 洁，舒静纹，唐 阁
（云南中医学院基础医学院，云南昆明
摘
６５０２００）
要：目的：观察福尔肝健脾软肝方及拆方对ｃｃＪ４肝纤维化大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的影
响。方法：ＳＤ大鼠随机分成正常组、健脾软肝方及拆方组；复制ｃｃＪ４肝纤维化大鼠模型，同时予等效剂量健脾
软肝方及拆方灌胃，并以鳖甲软肝片为对照，观察血清肝功能；检测肝组织羟脯氨酸（Ｈｙｐ），明胶酶图法观察
组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性表达。结果：与正常组大鼠比较，模型组血清ＡＬＴ、ＡＳＴ，肝组织中的Ｈｙｐ含量与基
质金属蛋白酶ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及其蛋白表达都有显著增加。各组经相应药物治疗后，肝组织Ｈｙｐ含量均
有不同程度改善或降低，其中健脾软肝方全方组在降低ＡＬＴ活性，肝组织Ｈｙｐ含量较其他用药组为好，健脾软
肝方全方组及部分拆方均能显著降低ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９酶活性；健脾软肝全方作用为显著。结论：福尔肝健脾
软肝全方及拆方有明显抑制基质金属蛋白酶ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及降低其蛋白表达作用，尤以健脾软肝方全
方组尤为显著。此可能是福尔肝健脾软肝方抗肝纤维化作用机制之一。
关键词：肝纤维化；四氯化碳；健脾软肝方；肝功能；拆方研究
中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０ｏＯ一２７２３（２０ｏ７）０１—００２９一ｏ４
福尔肝健脾软肝方是云南省名老中医苏链教授治
疗肝病的经验方，在以往的临床和动物实验中已显示
明显疗效【卜 。为进一步探讨健脾软肝方的抗纤维化
作用机理及组方规律，本研究通过ｃｃｈ与高脂低蛋
白饮食复合因素复制肝纤维化大鼠模型，按中医病因
病机及治法进行拆方研究，观察健脾软肝方及拆方对
ｃｃｈ纤维化大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的
影响。
１材料和方法
１．１材料
等效剂量计算每２００ｇ大鼠需加入三七粉组的量。鳖甲软
肝片的制备根据使用剂量说明（每日３次，每次４粒，
每粒含生药量０．５ｇ）换算成大鼠的等效剂量所需生药
量，然后根据等浓度把鳖甲软肝片溶于蒸馏水中，４ｑＣ
冰箱密封保存备用。复方鳖甲软肝片，内蒙古福瑞中蒙
药科技股份有限公司生产，批号：国药准字Ｚ１９９９１０１１，
购自云南中医学院门诊部。
１．１．３主要试剂及仪器
１．１．３．１试剂 四氯化碳（ｃｃｈ），分析纯，购自天
津市化学试剂六厂，批号：２００４０７１２；橄榄油（ｏｌｉｖｅ
１．１．１ 实验动物
ｏｉｌ），化学纯，上海化学试剂站分装厂生产。肝功能
测定试剂盒为南京建成生物制品研究所生产。对二甲
基氨基苯甲醛，上海试剂三厂生产，分析纯。氯氨一
Ｔ：中国上海佘山化工厂生产，分析纯。羟脯氨酸
（Ｈｙｐ）标准品：日本于力 于灭 株式会社产品，
雄性ｓＤ大鼠９９只，体重１３０±１３ｇ，购自云南白
药股份有限公司，动物批号：２００２１０４号，云南中医
学院实验动物房饲养。
１．１．２药物
健脾软肝方全方及拆方药物购自云南中医学院门诊
部；福尔肝健脾软肝方全方由三七、莪术、炙香附等５
分析纯，批号：ＭＴＲ８２８２。高氯酸，分析纯，批号：
１９９８０９０７，上海桃浦化工厂生产。兔抗小鼠ＭＭＰ一２，
ＭＭＰ一９多克隆抗体，博士德公司产品。医用ｘ光胶
片（１２．７×１８．７ｃｍ），购自上海海鸥照相机有限公司
味中药组成，按等效剂量计算大鼠所需全方及拆方生药
量，各组方煎煮３次，提取药液用密纱布过滤，最后浓
缩成２ Ｏ００ｍＬ药液，４ｑＣ冰箱密封保存备用。灌胃时，按 感光材料厂。脱脂奶粉，Ｎｅｓｔｌｅ公司产品，购自上海
基金项目：云南省自然科学基金资助。（ＮＯ．２００２Ｃ００５５Ｍ）
收稿日期：２００６—０９—２８ 修回日期：２０ｏ６—１２—２０
作者简介：陈文慧（１９６３～），女，广东兴宁人，副教授。研究方向：中西医结合肝病，中医基础多学科研究。
２９
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２００７芷 云南中医学院学报 第３０卷
生物工程公司。硝酸纤维素膜，Ａｍｅｒｓｈａｍ公司产品。
自由饮用自来水。正常组普通饲料饲养。
考马斯亮蓝Ｒ一２５０，Ｆｌｕｋａ产品，上海化学试剂采购
１．２．２标本采集
供应站试剂厂分装。
大鼠６周末治疗结束后处死，留取血清、肝组
１．１．３．２仪器 ｕ １６００型紫外可见分光光度计， 织，一７０℃保存。
北京瑞利分析仪器公司；ＴＹ—Ｂ型多用脱色摇床，上
１．２．３指标检测
海市新波无线电厂。Ｂｉｏ—Ｒａｄ电泳仪。交联仪，Ｐｏｂ— 血清肝功能测定肝羟脯氨酸测定：Ｊａｍａｌｌ氏法¨５ ；
ｂｉｎ ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ公司；杂交炉，ｒｏｂｂｉｎ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司。一 肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性检测：明胶酶图法。
次成像照相机，Ｐｏｌａｆｉｏｄ公司；Ｅｐｓｏｎ ｌｘ一３００打印机；
应用复日ＦＲ一９８０生物电泳图象分析系统在灰阶模式
复日ＦＲ一９８０生物电泳图像分析系统，上海复日科技 下扫措电泳凝胶，并分析ＭＭＰｓ活性条带灰度密度
有限公司产品。
值；肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９蛋白表达：Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ
１．２方法
方法。
１．２．１造模 ］
１．３统计分析
将实验大鼠随机分成正常组、模型组、复方鳖甲 计量资料用 ±ｓ表示，用统计软件进行方差分析。
软肝片对照组、健脾软肝方全方组，拆方组按中医病
２结果
因病机及治法进行拆方分为健脾活血软肝组、理气活 ２．１健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠血清肝
血软肝组、活血软肝组、健脾理气组，共８组，正常
功能的影响
组８只，其余每组１３只。除正常组外其余组首次皮 与正常组比较，模型组ＡＬＴ、ＡＳＴ的活性显著升高
下注射纯ＣＣｌ４０．５ｍＬ／１００ｇ体重，以后每周２次皮下注 （Ｐ＜０．０５），健脾软肝方及拆方治疗后，脚和ＡＳＴ的
射４０％ＣＣｌ４一橄榄油溶液０．３ｍＬ／１００ｇ体重，共６周。 潘眭有不同程度下降，其中健脾软肝方全方组和理气活
在１～２周给予高脂玉米粉饲料（７９．５％玉米粉＋２０％ 血软肝方组ＡＬＴ含量下降较为明显，与模型组比较有显
猪油＋Ｏ，５％胆固醇），第３～６周予单纯玉米粉饲养， 著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５）。（见表１）
表１健脾软肝方及拆方对肝纤维化大鼠肝功能变化的影响（ －ｉ－ｓ）
注：＊＊Ｐ＜０．０５，ＶＳ正常组；｝｝Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组；Ａｐ＜０．０５，ＶＳ鳖甲软肝片组。
２．２健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组织
表２健脾软肝方及拆方对模型
Ｈｙｐ含量的影响
大鼠肝组织Ｈｙｐ含量的影响（ －ｉ－ｓ）
与正常组大鼠比较，模型大鼠肝组织Ｈｙｐ含量明
显升高（Ｐ＜０．０５）；药物治疗后，与模型组比较，各
用药组肝组织Ｈｙｐ含量均不同程度降低，其中尤以鳖
甲软肝片组、健脾软肝方与理气活血软肝组肝组织
Ｈｙｐ含量降低最为明显；与鳖甲软肝片组比较，健脾
软肝方与理气活血软肝组Ｈｙｐ含量降低明显，有显著
性差异。（见表２）
２．３健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组织
ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性表达的影响
注：＊＊Ｐ＜Ｏ．０５，ＶＳ正常组；＃Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组。
３Ｏ
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第１期 陈文慧，等：健脾软肝方及拆方对ｃｃＪ４肝纤维化大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的影响
与正常大鼠比较，模型组大鼠肝组织ＭＭＰ一２，
ＭＭＰ一９活性表达明显升高（Ｐ＜０．０５）。药物治疗
后，与模型组比较，除健脾活血软肝组ＭＭＰ一２活性
无明显变化外，其各药物组ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性
均显著性降低（Ｐ＜０．０５）；与鳖甲软肝片组比，健脾
软肝方组ＭＭＰ一９活性表达显著降低（Ｐ＜０．０５），余
图１健脾软肝方及拆方对ＣＣｌ４肝纤维化
药物组无显著差异。（见图１、表３）
模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性的影响
明胶酶图Ａ：正常组Ｂ：模型组ｃ：健脾软肝方组
２．４健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组织
Ｄ：鳖甲软肝片组Ｅ：健脾活血软肝组Ｆ：理气活血软肝组
ＭＭＰ一２。ＭＭＰ一９蛋白表达变化
Ｇ：活血软肝组Ｈ：健脾理气组
２．４．１ 健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组
织ＭＭＰ一２蛋白表达变化
与正常组大鼠比较，模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２蛋
白表达含量明显升高（△Ｐ＜０．０５）；药物治疗后，与
模型组比较，健脾软肝方及拆方各药物组ＭＭＰ一２蛋
白含量均显著降低（△Ｐ＜０．０５）；与鳖甲软肝片组比
较，健脾软肝方组及各拆方组均显著下降（△Ｐ＜
模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２蛋白表达的影响
０．０５）。（见图２、表４）
免疫印迹法Ａ：正常组Ｂ：模型组Ｃ：健脾软肝方组
２．４．２健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组
Ｄ：鳖甲软肝片组Ｅ：健脾活血软肝组Ｆ：理气活血软肝组
织ＭＭＰ一９蛋白表达影响
Ｇ：活血软肝组Ｈ：健脾理气组
表３健脾软肝方及拆方对模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性的影响
注：＊＊Ｐ＜０．０５， 正常组；＃＃Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组；△Ｐ＜０．０５，ＶＳ鳖甲软肝片组
表４健脾软肝方及拆方对模型
比较，健脾软肝方及拆方组ＭＭＰ一９蛋白表达含量均
大鼠肝组织ＭＭＰ一２蛋白表达的影响
显著性降低（△Ｐ＜０．０５）；其中尤以鳖甲软肝片组、
健脾软肝方与理气活血软肝组肝组织ＭＭＰ一９蛋白表
达含量降低最为明显；（见图３、表５）
ｊ＝＿ ＿．二
二二二
｝
图３健脾软肝方及拆方对ＣＣｌ４肝纤维化
注：＊＊Ｐ＜０．０５，ＶＳ正常组；＃＃Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组；
模型大鼠肝组织ＭＭＰ一９蛋白表达的影响
△△Ｐ＜０．０５，ＶＳ鳖甲软肝片组
免疫印迹法Ａ：正常组Ｂ：模型组Ｃ：健脾软肝方组
与正常大鼠比较，模型大鼠肝组织ＭＭＰ一９蛋白
Ｄ：鳖甲软肝片组Ｅ：健脾活血软肝组Ｆ：理气活血软肝组
含量显著升高（△Ｐ＜０．０５）。药物治疗后，与模型组
Ｇ：活血软肝组Ｈ：健脾理气组
３１
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２００７年 云南中医学院学报 第３０卷
表５健脾软肝方对模型
显著降低ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９酶活性，但组间无差异；
大鼠肝组织ＭＭＰ一９蛋白表达的影响
健脾软肝方全方组较健脾活血软肝组、理气活血软肝
组等拆方明显降低ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９酶活性，研究
表明福尔肝健脾软肝方及拆方有明显抑制基质金属蛋
白酶ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及降低其蛋白含量作用，
尤以健脾软肝方全方组为显著。此可能是福尔肝健脾
软肝方抗肝纤维化作用机制之一。
［参考文献］
［１］苏涟，张超，陈文慧，等．健脾活血柔肝法治疗慢性
乙型肝炎２５７例疗效观察［Ｊ］．中西医结合肝病杂志，
注：＊＊Ｐ＜０．０５，ｖｓ正常组；＃＃Ｐ＜０．０５，ｖｓ模型组；
１９９８，（８）：５２．
△△Ｐ＜０．０５，ｖｓ鳖甲软肝片组
［２］陈文慧，王臻楠，陆雄，等．福尔肝Ⅵ号对二甲基亚
硝胺肝纤维化大鼠治疗作用的实验研究［Ｊ］．中国中
３讨论
医药科技，２００１，１（８）：１５—１６．
福尔肝健脾软肝方前期实验研究显示该方能抗炎
［３］陈文慧，顾宏图，王臻南，等．福尔肝６号ＤＭＮ诱导
与抑制胶原过度增生沉积，具有较好抗二甲基亚硝胺
肝纤维化大鼠肝脏胶原增生沉积的影响［Ｊ］．云南中
（ＤＭＡ）模型大鼠肝损伤及肝纤维化的作用。
医中药杂志，２００２，１（２３）：３０—３２．
［４］谢彦华，李里，孟凡军，等．基质金属蛋白酶２和９
肝脏细胞外基质（ＥＣＭ）蛋白分解代谢障碍是造
在实验性肝纤维化过程中的动态变化及表达［Ｊ］．中
成肝脏胶原沉积的重要原因，参与ＥＣＭ蛋白分解的
华医学杂志，２００２，９（７）：１１７２．
重要酶是基质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）［４－５ ３。本研究发
［５］朱跃科，王宝恩．实验性肝纤维化基质金属蛋白酶一
现：造模结束６周末，模型组肝组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ
基因表达与酶活性的变化［Ｊ］．中华肝脏病杂志，
一
９活性及蛋白表达较正常组显著增高，经药物干预
２００５，７（７）：５０９—５１２．
治疗后，健脾软肝方全方组与复方鳖甲软肝片组均能
（编辑：迟越）
Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｅｃｉｐｅ ｏｆ Ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ Ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ Ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ Ｌｉｖｅｒ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｍｏｄｉｉｆｅｄ Ｒｅｃｉｅｐ ｏｎ
ＣＣ１４，Ｂｉｇ Ｒａｔｓ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ＣＨＥＮ Ｗｅｎ—ｈｕｉ，ＷＥＩ Ｄｏｎｇ，ＭＡ Ｊｉｅ，ＳＨＵ Ｊｉｎｇ—ｗｅｎ，ＴＡＮＧ Ｇｅ
（Ｙｕｎｎａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ＴＣＭ，Ｋｕｍｎｉｎｇ Ｙｕｎｎａｎ ６５０２００ Ｃｈｉｎａ）
ＡＢ 【ＲＡＣＴ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｅ．
ｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｏｎ ａｎｔｉ— ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｏｆ ｂｉｇ ｒａｔ． Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｏ ｒａｎ—
ｄｏｍｌｙ ｓｅｐａｒａｔａｅ ＳＤ ｂｉｇ ｒａｔ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ—ｎｏｒｍａｌ，ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ ｌｉｖｅｒ，ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ；ａｎｄ ｃｏｐｙ—
ｉｎｇ ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｃｈ ａｎｔｉ—ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｏｆ ｂｉｇ ｒａｔ， ａｎｄ Ｖｅ ｓａｎｌｅ ｄｏｓａｇｅ ｔｏ ｈｔｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ
ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ ｌｉｖｅｒ ｎａｄ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｔｏ ｆｉｌｌ ｓｔｏｍａｃｈ ｓｉｍｕｌｔｎａｅｉｔｙ． ａｎｄ ｔｈｅ ｔｈｅ ＦｕＦａｎｇＢｉｅｊｉａｍａｎｇａｎＰｉａｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｉｓ ｃｏｒｎ—
ｐａｒｉｓｏｎ，ａｎｄ ｏｎｃｅ ａ ｄａｙ ａｌｌ ｔｏｇｅｔｈｅｒ ６ ｗｅｅｋｓ；ｏｂｓｅｖ ｈｔｅ ｌｉｖｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｌｌｌＩｎ；ｄｅｔｅｃｔ ｈｔｅ Ｈｙｐ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ，ａｎｄ ｏｂ．
ｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９ ｂｙ ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ ｐｉｃｔｕｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｃｏｍｐａｒｅ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ
ＡＬＴ ａｎｄ ＡＳＴ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ Ｈｙｐ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＭＰ一２，
ＭＭＰ一９ ｈａｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅ．Ａｆｔｅｒ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｈｙｐ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｏｒ ｄｅ—
ｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｄｉｖｅｒｓｅ ｌｅｖｅｌ，ａｍｏｎｇ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｎｔｉｅｒ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ ｉｓ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒｓ ｉｎ ｒｅｄｕｃｅ ａｖｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＡＬＴ ａｎｄ ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｈｙｐ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ．Ａｎｄ ｈｔｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ｎａｄ ｐａｒｔｌｙ ｔｈｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｓｅｐａ—
ａｒｔｉｏｎｓ ｃａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ，ｅｓｐｅｃｉｌａｌｙ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｆ ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ
ｓｐｌｅｅｎ ｎａｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ： １１１ｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｐａｒｔｌｙ ｔｈｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ
ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｃａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ，ａｎｄｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｆ ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ
ｎａｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ｗａｓ ｂｅｓｔ．Ｉｔ ｉｓ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｔｈａｎｔ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｗａｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｆ
ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｈｅｐａｔｉｃ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ；Ｃａｒｂｏｎ Ｔｅｔａｒ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ；Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ Ｓｐｌｅｎ ａｎｄ Ｓｏｆｔ Ｌｉｖｅｒ；
Ｌｉｖｅｒ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｔｈｅ Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
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2024年4月10日发(作者：房晓星)
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第３０卷第１期
２００７年２月
云南中医学院学报
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｙｕｎｎａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｖｏ１．３０ Ｎｏ．１
２．砌
健脾软肝方及拆方对ＧＥｌ４肝纤维化
大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的影响
陈文慧，魏 东，马 洁，舒静纹，唐 阁
（云南中医学院基础医学院，云南昆明
摘
６５０２００）
要：目的：观察福尔肝健脾软肝方及拆方对ｃｃＪ４肝纤维化大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的影
响。方法：ＳＤ大鼠随机分成正常组、健脾软肝方及拆方组；复制ｃｃＪ４肝纤维化大鼠模型，同时予等效剂量健脾
软肝方及拆方灌胃，并以鳖甲软肝片为对照，观察血清肝功能；检测肝组织羟脯氨酸（Ｈｙｐ），明胶酶图法观察
组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性表达。结果：与正常组大鼠比较，模型组血清ＡＬＴ、ＡＳＴ，肝组织中的Ｈｙｐ含量与基
质金属蛋白酶ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及其蛋白表达都有显著增加。各组经相应药物治疗后，肝组织Ｈｙｐ含量均
有不同程度改善或降低，其中健脾软肝方全方组在降低ＡＬＴ活性，肝组织Ｈｙｐ含量较其他用药组为好，健脾软
肝方全方组及部分拆方均能显著降低ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９酶活性；健脾软肝全方作用为显著。结论：福尔肝健脾
软肝全方及拆方有明显抑制基质金属蛋白酶ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及降低其蛋白表达作用，尤以健脾软肝方全
方组尤为显著。此可能是福尔肝健脾软肝方抗肝纤维化作用机制之一。
关键词：肝纤维化；四氯化碳；健脾软肝方；肝功能；拆方研究
中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０ｏＯ一２７２３（２０ｏ７）０１—００２９一ｏ４
福尔肝健脾软肝方是云南省名老中医苏链教授治
疗肝病的经验方，在以往的临床和动物实验中已显示
明显疗效【卜 。为进一步探讨健脾软肝方的抗纤维化
作用机理及组方规律，本研究通过ｃｃｈ与高脂低蛋
白饮食复合因素复制肝纤维化大鼠模型，按中医病因
病机及治法进行拆方研究，观察健脾软肝方及拆方对
ｃｃｈ纤维化大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的
影响。
１材料和方法
１．１材料
等效剂量计算每２００ｇ大鼠需加入三七粉组的量。鳖甲软
肝片的制备根据使用剂量说明（每日３次，每次４粒，
每粒含生药量０．５ｇ）换算成大鼠的等效剂量所需生药
量，然后根据等浓度把鳖甲软肝片溶于蒸馏水中，４ｑＣ
冰箱密封保存备用。复方鳖甲软肝片，内蒙古福瑞中蒙
药科技股份有限公司生产，批号：国药准字Ｚ１９９９１０１１，
购自云南中医学院门诊部。
１．１．３主要试剂及仪器
１．１．３．１试剂 四氯化碳（ｃｃｈ），分析纯，购自天
津市化学试剂六厂，批号：２００４０７１２；橄榄油（ｏｌｉｖｅ
１．１．１ 实验动物
ｏｉｌ），化学纯，上海化学试剂站分装厂生产。肝功能
测定试剂盒为南京建成生物制品研究所生产。对二甲
基氨基苯甲醛，上海试剂三厂生产，分析纯。氯氨一
Ｔ：中国上海佘山化工厂生产，分析纯。羟脯氨酸
（Ｈｙｐ）标准品：日本于力 于灭 株式会社产品，
雄性ｓＤ大鼠９９只，体重１３０±１３ｇ，购自云南白
药股份有限公司，动物批号：２００２１０４号，云南中医
学院实验动物房饲养。
１．１．２药物
健脾软肝方全方及拆方药物购自云南中医学院门诊
部；福尔肝健脾软肝方全方由三七、莪术、炙香附等５
分析纯，批号：ＭＴＲ８２８２。高氯酸，分析纯，批号：
１９９８０９０７，上海桃浦化工厂生产。兔抗小鼠ＭＭＰ一２，
ＭＭＰ一９多克隆抗体，博士德公司产品。医用ｘ光胶
片（１２．７×１８．７ｃｍ），购自上海海鸥照相机有限公司
味中药组成，按等效剂量计算大鼠所需全方及拆方生药
量，各组方煎煮３次，提取药液用密纱布过滤，最后浓
缩成２ Ｏ００ｍＬ药液，４ｑＣ冰箱密封保存备用。灌胃时，按 感光材料厂。脱脂奶粉，Ｎｅｓｔｌｅ公司产品，购自上海
基金项目：云南省自然科学基金资助。（ＮＯ．２００２Ｃ００５５Ｍ）
收稿日期：２００６—０９—２８ 修回日期：２０ｏ６—１２—２０
作者简介：陈文慧（１９６３～），女，广东兴宁人，副教授。研究方向：中西医结合肝病，中医基础多学科研究。
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２００７芷 云南中医学院学报 第３０卷
生物工程公司。硝酸纤维素膜，Ａｍｅｒｓｈａｍ公司产品。
自由饮用自来水。正常组普通饲料饲养。
考马斯亮蓝Ｒ一２５０，Ｆｌｕｋａ产品，上海化学试剂采购
１．２．２标本采集
供应站试剂厂分装。
大鼠６周末治疗结束后处死，留取血清、肝组
１．１．３．２仪器 ｕ １６００型紫外可见分光光度计， 织，一７０℃保存。
北京瑞利分析仪器公司；ＴＹ—Ｂ型多用脱色摇床，上
１．２．３指标检测
海市新波无线电厂。Ｂｉｏ—Ｒａｄ电泳仪。交联仪，Ｐｏｂ— 血清肝功能测定肝羟脯氨酸测定：Ｊａｍａｌｌ氏法¨５ ；
ｂｉｎ ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ公司；杂交炉，ｒｏｂｂｉｎ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司。一 肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性检测：明胶酶图法。
次成像照相机，Ｐｏｌａｆｉｏｄ公司；Ｅｐｓｏｎ ｌｘ一３００打印机；
应用复日ＦＲ一９８０生物电泳图象分析系统在灰阶模式
复日ＦＲ一９８０生物电泳图像分析系统，上海复日科技 下扫措电泳凝胶，并分析ＭＭＰｓ活性条带灰度密度
有限公司产品。
值；肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９蛋白表达：Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ
１．２方法
方法。
１．２．１造模 ］
１．３统计分析
将实验大鼠随机分成正常组、模型组、复方鳖甲 计量资料用 ±ｓ表示，用统计软件进行方差分析。
软肝片对照组、健脾软肝方全方组，拆方组按中医病
２结果
因病机及治法进行拆方分为健脾活血软肝组、理气活 ２．１健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠血清肝
血软肝组、活血软肝组、健脾理气组，共８组，正常
功能的影响
组８只，其余每组１３只。除正常组外其余组首次皮 与正常组比较，模型组ＡＬＴ、ＡＳＴ的活性显著升高
下注射纯ＣＣｌ４０．５ｍＬ／１００ｇ体重，以后每周２次皮下注 （Ｐ＜０．０５），健脾软肝方及拆方治疗后，脚和ＡＳＴ的
射４０％ＣＣｌ４一橄榄油溶液０．３ｍＬ／１００ｇ体重，共６周。 潘眭有不同程度下降，其中健脾软肝方全方组和理气活
在１～２周给予高脂玉米粉饲料（７９．５％玉米粉＋２０％ 血软肝方组ＡＬＴ含量下降较为明显，与模型组比较有显
猪油＋Ｏ，５％胆固醇），第３～６周予单纯玉米粉饲养， 著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５）。（见表１）
表１健脾软肝方及拆方对肝纤维化大鼠肝功能变化的影响（ －ｉ－ｓ）
注：＊＊Ｐ＜０．０５，ＶＳ正常组；｝｝Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组；Ａｐ＜０．０５，ＶＳ鳖甲软肝片组。
２．２健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组织
表２健脾软肝方及拆方对模型
Ｈｙｐ含量的影响
大鼠肝组织Ｈｙｐ含量的影响（ －ｉ－ｓ）
与正常组大鼠比较，模型大鼠肝组织Ｈｙｐ含量明
显升高（Ｐ＜０．０５）；药物治疗后，与模型组比较，各
用药组肝组织Ｈｙｐ含量均不同程度降低，其中尤以鳖
甲软肝片组、健脾软肝方与理气活血软肝组肝组织
Ｈｙｐ含量降低最为明显；与鳖甲软肝片组比较，健脾
软肝方与理气活血软肝组Ｈｙｐ含量降低明显，有显著
性差异。（见表２）
２．３健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组织
ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性表达的影响
注：＊＊Ｐ＜Ｏ．０５，ＶＳ正常组；＃Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组。
３Ｏ
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第１期 陈文慧，等：健脾软肝方及拆方对ｃｃＪ４肝纤维化大鼠ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及蛋白表达的影响
与正常大鼠比较，模型组大鼠肝组织ＭＭＰ一２，
ＭＭＰ一９活性表达明显升高（Ｐ＜０．０５）。药物治疗
后，与模型组比较，除健脾活血软肝组ＭＭＰ一２活性
无明显变化外，其各药物组ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性
均显著性降低（Ｐ＜０．０５）；与鳖甲软肝片组比，健脾
软肝方组ＭＭＰ一９活性表达显著降低（Ｐ＜０．０５），余
图１健脾软肝方及拆方对ＣＣｌ４肝纤维化
药物组无显著差异。（见图１、表３）
模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性的影响
明胶酶图Ａ：正常组Ｂ：模型组ｃ：健脾软肝方组
２．４健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组织
Ｄ：鳖甲软肝片组Ｅ：健脾活血软肝组Ｆ：理气活血软肝组
ＭＭＰ一２。ＭＭＰ一９蛋白表达变化
Ｇ：活血软肝组Ｈ：健脾理气组
２．４．１ 健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组
织ＭＭＰ一２蛋白表达变化
与正常组大鼠比较，模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２蛋
白表达含量明显升高（△Ｐ＜０．０５）；药物治疗后，与
模型组比较，健脾软肝方及拆方各药物组ＭＭＰ一２蛋
白含量均显著降低（△Ｐ＜０．０５）；与鳖甲软肝片组比
较，健脾软肝方组及各拆方组均显著下降（△Ｐ＜
模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２蛋白表达的影响
０．０５）。（见图２、表４）
免疫印迹法Ａ：正常组Ｂ：模型组Ｃ：健脾软肝方组
２．４．２健脾软肝方及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组
Ｄ：鳖甲软肝片组Ｅ：健脾活血软肝组Ｆ：理气活血软肝组
织ＭＭＰ一９蛋白表达影响
Ｇ：活血软肝组Ｈ：健脾理气组
表３健脾软肝方及拆方对模型大鼠肝组织ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９活性的影响
注：＊＊Ｐ＜０．０５， 正常组；＃＃Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组；△Ｐ＜０．０５，ＶＳ鳖甲软肝片组
表４健脾软肝方及拆方对模型
比较，健脾软肝方及拆方组ＭＭＰ一９蛋白表达含量均
大鼠肝组织ＭＭＰ一２蛋白表达的影响
显著性降低（△Ｐ＜０．０５）；其中尤以鳖甲软肝片组、
健脾软肝方与理气活血软肝组肝组织ＭＭＰ一９蛋白表
达含量降低最为明显；（见图３、表５）
ｊ＝＿ ＿．二
二二二
｝
图３健脾软肝方及拆方对ＣＣｌ４肝纤维化
注：＊＊Ｐ＜０．０５，ＶＳ正常组；＃＃Ｐ＜０．０５，ＶＳ模型组；
模型大鼠肝组织ＭＭＰ一９蛋白表达的影响
△△Ｐ＜０．０５，ＶＳ鳖甲软肝片组
免疫印迹法Ａ：正常组Ｂ：模型组Ｃ：健脾软肝方组
与正常大鼠比较，模型大鼠肝组织ＭＭＰ一９蛋白
Ｄ：鳖甲软肝片组Ｅ：健脾活血软肝组Ｆ：理气活血软肝组
含量显著升高（△Ｐ＜０．０５）。药物治疗后，与模型组
Ｇ：活血软肝组Ｈ：健脾理气组
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２００７年 云南中医学院学报 第３０卷
表５健脾软肝方对模型
显著降低ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９酶活性，但组间无差异；
大鼠肝组织ＭＭＰ一９蛋白表达的影响
健脾软肝方全方组较健脾活血软肝组、理气活血软肝
组等拆方明显降低ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９酶活性，研究
表明福尔肝健脾软肝方及拆方有明显抑制基质金属蛋
白酶ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９活性及降低其蛋白含量作用，
尤以健脾软肝方全方组为显著。此可能是福尔肝健脾
软肝方抗肝纤维化作用机制之一。
［参考文献］
［１］苏涟，张超，陈文慧，等．健脾活血柔肝法治疗慢性
乙型肝炎２５７例疗效观察［Ｊ］．中西医结合肝病杂志，
注：＊＊Ｐ＜０．０５，ｖｓ正常组；＃＃Ｐ＜０．０５，ｖｓ模型组；
１９９８，（８）：５２．
△△Ｐ＜０．０５，ｖｓ鳖甲软肝片组
［２］陈文慧，王臻楠，陆雄，等．福尔肝Ⅵ号对二甲基亚
硝胺肝纤维化大鼠治疗作用的实验研究［Ｊ］．中国中
３讨论
医药科技，２００１，１（８）：１５—１６．
福尔肝健脾软肝方前期实验研究显示该方能抗炎
［３］陈文慧，顾宏图，王臻南，等．福尔肝６号ＤＭＮ诱导
与抑制胶原过度增生沉积，具有较好抗二甲基亚硝胺
肝纤维化大鼠肝脏胶原增生沉积的影响［Ｊ］．云南中
（ＤＭＡ）模型大鼠肝损伤及肝纤维化的作用。
医中药杂志，２００２，１（２３）：３０—３２．
［４］谢彦华，李里，孟凡军，等．基质金属蛋白酶２和９
肝脏细胞外基质（ＥＣＭ）蛋白分解代谢障碍是造
在实验性肝纤维化过程中的动态变化及表达［Ｊ］．中
成肝脏胶原沉积的重要原因，参与ＥＣＭ蛋白分解的
华医学杂志，２００２，９（７）：１１７２．
重要酶是基质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）［４－５ ３。本研究发
［５］朱跃科，王宝恩．实验性肝纤维化基质金属蛋白酶一
现：造模结束６周末，模型组肝组织ＭＭＰ一２、ＭＭＰ
基因表达与酶活性的变化［Ｊ］．中华肝脏病杂志，
一
９活性及蛋白表达较正常组显著增高，经药物干预
２００５，７（７）：５０９—５１２．
治疗后，健脾软肝方全方组与复方鳖甲软肝片组均能
（编辑：迟越）
Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｅｃｉｐｅ ｏｆ Ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ Ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ Ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ Ｌｉｖｅｒ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｍｏｄｉｉｆｅｄ Ｒｅｃｉｅｐ ｏｎ
ＣＣ１４，Ｂｉｇ Ｒａｔｓ ｏｆ Ｌｉｖｅｒ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ＣＨＥＮ Ｗｅｎ—ｈｕｉ，ＷＥＩ Ｄｏｎｇ，ＭＡ Ｊｉｅ，ＳＨＵ Ｊｉｎｇ—ｗｅｎ，ＴＡＮＧ Ｇｅ
（Ｙｕｎｎａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ＴＣＭ，Ｋｕｍｎｉｎｇ Ｙｕｎｎａｎ ６５０２００ Ｃｈｉｎａ）
ＡＢ 【ＲＡＣＴ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｅ．
ｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｏｎ ａｎｔｉ— ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｏｆ ｂｉｇ ｒａｔ． Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｏ ｒａｎ—
ｄｏｍｌｙ ｓｅｐａｒａｔａｅ ＳＤ ｂｉｇ ｒａｔ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ—ｎｏｒｍａｌ，ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ ｌｉｖｅｒ，ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ；ａｎｄ ｃｏｐｙ—
ｉｎｇ ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｃｈ ａｎｔｉ—ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｏｆ ｂｉｇ ｒａｔ， ａｎｄ Ｖｅ ｓａｎｌｅ ｄｏｓａｇｅ ｔｏ ｈｔｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ
ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ ｌｉｖｅｒ ｎａｄ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｔｏ ｆｉｌｌ ｓｔｏｍａｃｈ ｓｉｍｕｌｔｎａｅｉｔｙ． ａｎｄ ｔｈｅ ｔｈｅ ＦｕＦａｎｇＢｉｅｊｉａｍａｎｇａｎＰｉａｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｉｓ ｃｏｒｎ—
ｐａｒｉｓｏｎ，ａｎｄ ｏｎｃｅ ａ ｄａｙ ａｌｌ ｔｏｇｅｔｈｅｒ ６ ｗｅｅｋｓ；ｏｂｓｅｖ ｈｔｅ ｌｉｖｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｌｌｌＩｎ；ｄｅｔｅｃｔ ｈｔｅ Ｈｙｐ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ，ａｎｄ ｏｂ．
ｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９ ｂｙ ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ ｐｉｃｔｕｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｃｏｍｐａｒｅ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ
ＡＬＴ ａｎｄ ＡＳＴ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ Ｈｙｐ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＭＭＰ一２，
ＭＭＰ一９ ｈａｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅ．Ａｆｔｅｒ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｈｙｐ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｏｒ ｄｅ—
ｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｄｉｖｅｒｓｅ ｌｅｖｅｌ，ａｍｏｎｇ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｎｔｉｅｒ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ ｉｓ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒｓ ｉｎ ｒｅｄｕｃｅ ａｖｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＡＬＴ ａｎｄ ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｈｙｐ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ．Ａｎｄ ｈｔｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ｎａｄ ｐａｒｔｌｙ ｔｈｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｓｅｐａ—
ａｒｔｉｏｎｓ ｃａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ，ｅｓｐｅｃｉｌａｌｙ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｆ ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ
ｓｐｌｅｅｎ ｎａｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ： １１１ｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｐａｒｔｌｙ ｔｈｅ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ
ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｃａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ一９ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ，ａｎｄｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｆ ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ
ｎａｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ｗａｓ ｂｅｓｔ．Ｉｔ ｉｓ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｔｈａｎｔ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｗａｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｆ
ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｏｆｔ ｌｉｖｅｒ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｈｅｐａｔｉｃ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ；Ｃａｒｂｏｎ Ｔｅｔａｒ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ；Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｅｒｎｇｔｈｅｎｉｎｇ Ｓｐｌｅｎ ａｎｄ Ｓｏｆｔ Ｌｉｖｅｒ；
Ｌｉｖｅｒ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｔｈｅ Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
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