2024年4月27日发(作者：延半蕾)
控制菌检查
控制菌检查
简述
控制菌检查是用于检查某些特定微生物，规定按一次检出结果为准，不再复试。 由
于控制菌为一次性报告试验结果，故应注意方法的有效性确证（方法验证或阳性对照）、
实验过程保障和结果确证，以提高检验结果的可靠性。既要避免漏检造成的假阴性结果，
又要避免实验室污染造成的假阳性结果。
控制菌检查中，涉及实验室监控菌株的分离鉴定、样品阳性菌株的分离分析、方法验
证试验中的阳性菌操作等，应在专门的阳性菌实验室进行。除另有规定外，阳性菌实验室
应符合国家二级生物安全标准，阳性菌实验室应配备生物安全柜。阳性菌操作不得在供试
品检验用洁净实验室内进行。
目标控制菌的标准菌株：
大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、白色
念珠菌
菌液制备 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌培养
物少许接种至10ml营养肉汤培养基内，置30-35℃培养18-24小时，取均匀培养物1ml，
用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成每1ml含菌10-100cfu的菌悬液，其菌数在做对照试验的同
时用营养琼脂注皿或平板涂布，经培养后基数确定。
验证方法：
试验组 取规定量供试液和10-100cfu试验菌加入增菌培养基中，按相应的检查法进
行检查。当进行薄膜过滤法时，试验菌应加在最后一次冲洗液中，冲洗后，取出滤膜接至
增菌培养基中。
阳性对照 取10-100cfu试验菌加入增菌培养基中，按相应的检查法进行检查。 阴性
对照 取相应的稀释液替代供试液，按相应控制菌的检查法进行检查。
结果判定 阳性对照组应检出试验菌，阴性对照组应无菌生长。若试验组检出试验菌，
按此供试液制备法和控制菌检查法进行供试品的该控制菌检查；若试验组未检出试验菌，
应建立新的方法，消除供试品的抑菌活性，并重新验证。
验证试验可与供试品的控制菌检查同时进行。
（一）大肠埃希菌
简述
大肠埃希菌即大肠杆菌，为肠杆菌科埃希菌属的模式种。埃希菌属除大肠埃希菌外，
新近发现有非脱羧埃希菌等5个种。大肠埃希菌是人和温血动物肠道内的栖居菌，随粪便
排出体外。在药品中检出大肠埃希菌，表明该样品受到人和温血动物的粪便的污染，即可
能污染肠道病原体。大肠埃希菌除普通大肠埃希菌外尚有致病性大肠埃希菌，可引起婴幼
儿、成人爆发性腹泻。为保证人体健康，口服药必须检查大肠埃希菌。 用4-甲基伞形酮
葡糖苷酸和靛基质试验检查大肠埃希菌是一项新技术，其检验步骤为：增菌培养后，转种
MUG蛋白胨培养基培养，多数情况下不需要从混合菌中分离单个菌，如MUG、indole试验
为阳性或阴性即可报告结果。
原理：利用目标菌限定酶作用的底物的水解产物，产生颜色或荧光反应作为指示系统
来鉴定目标菌。
实验证明96%的大肠埃希菌含-葡糖苷酸酶，约10%的沙门菌属一些菌种也含有此酶。
MUG被GUD水解，产生荧光，由于荧光反应的敏感度较颜色反应强千万倍，易于观察，没
有主观性，因而用MUG鉴定大肠埃希菌已被广泛应用于临床、食品、饮水、污水的检测。
单一的MUG鉴别大肠埃希菌其漏检率达6%,鉴于98%
2024年4月27日发(作者：延半蕾)
控制菌检查
控制菌检查
简述
控制菌检查是用于检查某些特定微生物，规定按一次检出结果为准，不再复试。 由
于控制菌为一次性报告试验结果，故应注意方法的有效性确证（方法验证或阳性对照）、
实验过程保障和结果确证，以提高检验结果的可靠性。既要避免漏检造成的假阴性结果，
又要避免实验室污染造成的假阳性结果。
控制菌检查中，涉及实验室监控菌株的分离鉴定、样品阳性菌株的分离分析、方法验
证试验中的阳性菌操作等，应在专门的阳性菌实验室进行。除另有规定外，阳性菌实验室
应符合国家二级生物安全标准，阳性菌实验室应配备生物安全柜。阳性菌操作不得在供试
品检验用洁净实验室内进行。
目标控制菌的标准菌株：
大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、白色
念珠菌
菌液制备 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌培养
物少许接种至10ml营养肉汤培养基内，置30-35℃培养18-24小时，取均匀培养物1ml，
用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成每1ml含菌10-100cfu的菌悬液，其菌数在做对照试验的同
时用营养琼脂注皿或平板涂布，经培养后基数确定。
验证方法：
试验组 取规定量供试液和10-100cfu试验菌加入增菌培养基中，按相应的检查法进
行检查。当进行薄膜过滤法时，试验菌应加在最后一次冲洗液中，冲洗后，取出滤膜接至
增菌培养基中。
阳性对照 取10-100cfu试验菌加入增菌培养基中，按相应的检查法进行检查。 阴性
对照 取相应的稀释液替代供试液，按相应控制菌的检查法进行检查。
结果判定 阳性对照组应检出试验菌，阴性对照组应无菌生长。若试验组检出试验菌，
按此供试液制备法和控制菌检查法进行供试品的该控制菌检查；若试验组未检出试验菌，
应建立新的方法，消除供试品的抑菌活性，并重新验证。
验证试验可与供试品的控制菌检查同时进行。
（一）大肠埃希菌
简述
大肠埃希菌即大肠杆菌，为肠杆菌科埃希菌属的模式种。埃希菌属除大肠埃希菌外，
新近发现有非脱羧埃希菌等5个种。大肠埃希菌是人和温血动物肠道内的栖居菌，随粪便
排出体外。在药品中检出大肠埃希菌，表明该样品受到人和温血动物的粪便的污染，即可
能污染肠道病原体。大肠埃希菌除普通大肠埃希菌外尚有致病性大肠埃希菌，可引起婴幼
儿、成人爆发性腹泻。为保证人体健康，口服药必须检查大肠埃希菌。 用4-甲基伞形酮
葡糖苷酸和靛基质试验检查大肠埃希菌是一项新技术，其检验步骤为：增菌培养后，转种
MUG蛋白胨培养基培养，多数情况下不需要从混合菌中分离单个菌，如MUG、indole试验
为阳性或阴性即可报告结果。
原理：利用目标菌限定酶作用的底物的水解产物，产生颜色或荧光反应作为指示系统
来鉴定目标菌。
实验证明96%的大肠埃希菌含-葡糖苷酸酶，约10%的沙门菌属一些菌种也含有此酶。
MUG被GUD水解，产生荧光，由于荧光反应的敏感度较颜色反应强千万倍，易于观察，没
有主观性，因而用MUG鉴定大肠埃希菌已被广泛应用于临床、食品、饮水、污水的检测。
单一的MUG鉴别大肠埃希菌其漏检率达6%,鉴于98%