2024年4月27日发(作者:敖黎明)
辣椒素纳肛制备大鼠痔疮模型方法
流程图:
探讨辣椒素纳肛致炎制备大鼠痔疮模型方法的
优越性和可行性实验
实验动物的准备:同系交配的纯种SD无菌五周龄雄性大鼠,同等条件下适应性饲
养一周
建立动物模型,空白对照组,基质对照组,巴豆油纳肛组,辣椒素纳肛组
进行预试验和正式实验,对直肠末端及肛周组织进行HE染色
对采集的图像分析炎性指数,采用图像分析系统,200X高倍镜下进行炎性细胞计
数,统计比较各组染色组织炎性细胞数。
对统计的炎性细胞数和比例进行评分,统计分析巴豆油组,空白对照组,辣椒素
组的组织炎程度。
根据多轮的重复实验的各组组织炎程度的比较分析,总结出各组的造痔效果,证
明辣椒素纳肛建模的优越性和可行性
对查阅文献所得到的辣椒素受体蛋白,准备与该实验所用辣椒素进行Western
blot 。
取大鼠背根神经节组织,提取蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳后进行WB
对WB的结果进行分析,找到与辣椒素结合的辣椒素受体蛋白,证明辣椒素纳肛
的原理。
方法:
(一) 动物模型的建立:
(1) 实验动物的准备与饲养
选择同系交配的纯种SD无菌雄性大鼠,5周龄,200g±10g,适应性饲养一周。
饲养条件 参数
温度 16℃~29℃
空气相对湿度 40%~70%
噪音 60dB以下
光线 自然光线辅以人工光照
食物 同种饲料和饮用水自由进食
(2)建立动物模型
2.1纳肛试剂的配置
各组大鼠在培养七天后无异常,即可开始配置相应的实验试剂。
巴豆油实验组试剂成分 含量 总计
蒸馏水 1ml
吡啶 4ml
乙醚 5ml
6%巴豆油乙醚溶液 10ml
20ml
辣椒素实验组试剂成分 含量 总计
蒸馏水 1ml
吡啶 4ml
乙醚 5ml
1%辣椒素乙醚溶液 10ml
20ml
基质对照组试剂成分 含量 总计
蒸馏水 2ml
吡啶 5ml
乙醚 18ml
25ml
2.2各组大鼠的纳肛
将生长健康的大鼠分成四个组,每组六只,性别对半,准备洁净的医用一次性棉签,准
备蘸取试剂进行纳肛。
组别
巴豆油经典实验组
辣椒素实验组
基质对照组
空白对照组
纳肛试剂
巴豆油实验组试剂
辣椒素实验组试剂
基质对照组试剂
蒸馏水
含量
0.16ml
0.16ml
0.16ml
0.16ml
塞入肛门时间
10s
10s
10s
10s
2024年4月27日发(作者:敖黎明)
辣椒素纳肛制备大鼠痔疮模型方法
流程图:
探讨辣椒素纳肛致炎制备大鼠痔疮模型方法的
优越性和可行性实验
实验动物的准备:同系交配的纯种SD无菌五周龄雄性大鼠,同等条件下适应性饲
养一周
建立动物模型,空白对照组,基质对照组,巴豆油纳肛组,辣椒素纳肛组
进行预试验和正式实验,对直肠末端及肛周组织进行HE染色
对采集的图像分析炎性指数,采用图像分析系统,200X高倍镜下进行炎性细胞计
数,统计比较各组染色组织炎性细胞数。
对统计的炎性细胞数和比例进行评分,统计分析巴豆油组,空白对照组,辣椒素
组的组织炎程度。
根据多轮的重复实验的各组组织炎程度的比较分析,总结出各组的造痔效果,证
明辣椒素纳肛建模的优越性和可行性
对查阅文献所得到的辣椒素受体蛋白,准备与该实验所用辣椒素进行Western
blot 。
取大鼠背根神经节组织,提取蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳后进行WB
对WB的结果进行分析,找到与辣椒素结合的辣椒素受体蛋白,证明辣椒素纳肛
的原理。
方法:
(一) 动物模型的建立:
(1) 实验动物的准备与饲养
选择同系交配的纯种SD无菌雄性大鼠,5周龄,200g±10g,适应性饲养一周。
饲养条件 参数
温度 16℃~29℃
空气相对湿度 40%~70%
噪音 60dB以下
光线 自然光线辅以人工光照
食物 同种饲料和饮用水自由进食
(2)建立动物模型
2.1纳肛试剂的配置
各组大鼠在培养七天后无异常,即可开始配置相应的实验试剂。
巴豆油实验组试剂成分 含量 总计
蒸馏水 1ml
吡啶 4ml
乙醚 5ml
6%巴豆油乙醚溶液 10ml
20ml
辣椒素实验组试剂成分 含量 总计
蒸馏水 1ml
吡啶 4ml
乙醚 5ml
1%辣椒素乙醚溶液 10ml
20ml
基质对照组试剂成分 含量 总计
蒸馏水 2ml
吡啶 5ml
乙醚 18ml
25ml
2.2各组大鼠的纳肛
将生长健康的大鼠分成四个组,每组六只,性别对半,准备洁净的医用一次性棉签,准
备蘸取试剂进行纳肛。
组别
巴豆油经典实验组
辣椒素实验组
基质对照组
空白对照组
纳肛试剂
巴豆油实验组试剂
辣椒素实验组试剂
基质对照组试剂
蒸馏水
含量
0.16ml
0.16ml
0.16ml
0.16ml
塞入肛门时间
10s
10s
10s
10s