2024年5月21日发(作者:蛮弘光)
蒙药哈日-沙布嘎(铁杆蒿)的质量标准提
升
作者:袁小红 庞克坚 唐辉 张虹 魏沣 刘乐乐 姜国珍
来源:《中国药房》2021年第05期
摘 要 目的:提升蒙藥哈日-沙布嘎(铁杆蒿)的质量标准,为全面评价其质量提供科学依
据。方法:对哈日-沙布嘎进行外观性状鉴别和显微鉴别;采用薄层色谱(TLC)法对药材中的
东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯和3,5-二咖啡酰奎宁酸进行定性鉴别;建立高效液相
色谱(HPLC)法测定药材中上述5种成分的含量;并对药材的水分、总灰分和浸出物进行检
查。结果:哈日-沙布嘎药材茎呈类圆柱形,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;叶呈卵形或矩圆状
卵形,气香;花黄色,头状花序,近球形或半球形;粉末呈绿色或黄绿色,花粉粒具3个萌发
孔,薄壁细胞簇晶棱尖锐,螺纹导管众多,偶见具缘纹孔导管,木纤维多成束存在。TLC结果
显示,供试品在与5种对照品色谱相应位置上均显相同颜色的斑点。东莨菪苷、绿原酸、咖啡
酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰奎宁酸的质量浓度分别在85.60~428.00、10.16~101.60、
10.20~102.00、40.84~408.40、40.80~408.00 μg/mL范围内与各自峰面积呈良好线性关系(r
均大于0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3.00%(n=6);平均加样回收率
分别为103.07%、99.66%、98.37%、97.78%、98.40%(RSD均小于3.00%,n=6)。10批药材
样品中上述5种成分含量范围分别为0.36%~1.23%、0.09%~0.51%、0.04%~0.13%、
0.61%~1.13%、0.12%~1.11%;水分、总灰分、水溶性浸出物的平均含量分别为6.25%、
5.86%、26.50%。结论:该研究在哈日-沙布嘎原质量标准的基础上增加了显微鉴别、TLC鉴
别、含量测定以及水分、总灰分和浸出物等检查项,方法精密、准确、稳定性良好,能够为更
加科学、规范地评价该药材质量提供依据。
关键词 蒙药;哈日-沙布嘎(铁杆蒿);质量标准;显微鉴别;薄层色谱法;高效液相色谱法;东
莨菪苷;绿原酸;咖啡酸;东莨菪内酯;3,5-二咖啡酰奎宁酸
中图分类号 R284.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2021)05-0536-06
ABSTRACT OBJECTIVE: To improve the quality standard of Mongolian medicine Artemisia
sacrorum, and to provide scientific basis for comprehensive quality evaluation. METHODS: The
appearance and microscopic characteristics of A. sacrorum were identified; scopoletin, chlorogenic
acid, caffeic acid, scopoletin and 3,5-dicaffeoylquinic acid were identified quantitatively by TLC;
the contents of above 5 components were determined by HPLC. The water content, total ash and
extract were examined. RESULTS: The stem of A. sacrorum was cylindrical, and its surface was
purple or purple-brown or cyan-brown; the leaves were ovate or oblong-ovate, fragrant; the flowers
were yellow, head-shaped, subglobose or hemispherical. The powder was green or yellow-green,
its pollen grain had three germination; the parenchymal cell clusters with sharp edges and numerous
threaded ducts,occasionally having marginal pitted ducts; its wood fibers were in bundles mostly.
Results of TLC showed that the spots of the same color were found in the corresponding positions of
chromatogram for 5 substance control and samples. The linear range of scopoletin, chlorogenic
acid, caffeic acid, scopolactone and 3,5-dicaffeoylquinic acid were 85.60-428.00, 10.16-
101.60, 10.20-102.00, 40.84-408.40 and 40.80-408.00 μg/mL (all r>0.999 0). RSDs of
precision, stability, repeatability tests were all less than 3.00% (n=6). The average recoveries
were 103.07%,99.66%,98.37%,97.78%, 98.40% (all RSDs
KEYWORDS Mongolian medicine; Artemisia sacrorum; Quality standard; Microscopic
identification; TLC; HPLC; Scopoletin; Chlorogenic acid; Caffeic acid; Scopoletin; 3,5-
dicaffeoylquinic acid
蒙药哈日-沙布嘎,为菊科植物铁杆蒿Artemisia sacrorum Ledeb.的干燥全草,别名白莲
蒿、万年蒿;其在新疆、宁夏、甘肃、西藏、内蒙古等地均有广泛分布[1],且用药多为自采。
哈日-沙布嘎全株均能入药,据蒙医药有关书籍记载,其性凉、味苦,具有杀虫止痛、消肿、
燥“协日乌素”(注:“协日乌素”為蒙医对病症“黄水”的专有名词)等功能[2]。研究发现,哈日
-沙布嘎的主要成分有黄酮类、肉桂酸类、香豆素类、萜类、挥发油等[3-5]。其提取物中含有
的木脂素具有较好的保肝作用;香豆素类化合物具有抗炎、抗菌等作用;地上部分的甲醇提取物
显示出强抗氧化作用[6-8];此外,其含有的咖啡酰奎尼酸类化合物具有较强的抗氧化、抗炎活
性[9],这一作用与哈日-沙布嘎用药功效一致。
哈日-沙布嘎收载于1998年版的《卫生部药品标准·蒙药分册》中,但该标准仅收录了该药
材的外观性状、性味和功能主治等,缺乏其他鉴别项,也没有基于药效的化学成分含量测定
[2]。现有对其质量控制的报道多是采用高效液相色谱(HPLC)法对药材中单一成分进行定量
分析,如徐犇等[10]对药材中东莨菪内酯进行了含量测定,佟皎薇等[11]测定了药材中绿原酸
的含量,这些方法均难以全面评价药材质量。鉴于此,本研究采集了10批哈日-沙布嘎药材,
在原质量标准基础上增加了显微鉴别、薄层色谱(TLC)鉴别、含量测定以及水分、总灰分和
浸出物等检查项,以期对该药材的质量进行全面控制。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所使用的主要仪器有:Primo Star型数码生物显微镜(德国Zeiss公司)、Eclipse
E200型生物显微镜(日本Nikon公司)、YOKO-ZS型薄层数码成像仪(武汉药科新技术开发
有限公司)、G型硅胶板(青岛海洋化工有限公司,规格50 mm×100 mm,批号20191109)、
展开槽(北京杰瑞恒达科技有限公司,规格110 mm×120 mm)、e2695型HPLC仪(含2998
型光电二极管矩阵检测器,美国Waters公司)、KH-300DE型台式数控超声波清洗器(昆山禾
创超声仪器有限公司)、BT125D型十万分之一电子分析天平(德国Sartorius公司)、UV-
2600型紫外分光光度计(日本Shimadzu公司)。
1.2 主要试剂
本研究所使用的主要试剂有:东莨菪苷对照品、绿原酸对照品、咖啡酸对照品、东莨菪内
酯对照品、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号分别为
Z15J11S115885、Y24J7K16726、Y09J8C28349、Z17J10Y90380、Z05M10X87215,纯度均大于
98%),乙腈(美国Fisher公司,色谱纯),磷酸、甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分
析纯),超纯水。
1.3 药材
10批哈日-沙布嘎药材来源见表1。其中S1~S2号药材采购于新疆精河县蒙医诊所,
S3~S5号药材采购于新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院,S6~S10号药材采自新疆新源、昭
苏、乌鲁木齐等地,均经新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院巴特孟克主任医师鉴定为菊科植物
铁杆蒿A. sacrorum Ledeb.的干燥全草。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 分别取东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰
奎宁酸对照品适量,精密称定,加入甲醇制成上述5个成分质量浓度分别为1.070、1.016、
1.020、2.042、2.040 mg/mL的单一成分对照品贮备液。分别取东莨菪苷对照品贮备液0.75
mL,绿原酸、咖啡酸对照品贮备液各0.20 mL,东莨菪内酯、 3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品贮
备液各0.40 mL,置于同一5 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,制成混合对照品溶液,
备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取哈日-沙布嘎药材粉末(过30目筛)0.5 g,精密称定,置于100
mL锥形瓶中,加甲醇20 mL,称质量,超声(功率300 W,频率40 kHz)处理1 h,取出,放
冷至室温,再次称质量,用甲醇补足减失的质量,先后以滤纸、0.45 μm微孔滤膜滤过,取续
滤液,即得供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备 取甲醇20 mL,置于100 mL锥形瓶中,按“2.1.2”项下方法制成
阴性对照溶液。
2.2 性状和显微鉴别
2.2.1 性状鉴别 药材茎呈类圆柱形,直径1~5 mm,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;质韧易
折断,断面呈绿白色或黄褐色,部分茎中空。叶呈卵形或矩圆状卵形,二回羽状全裂;侧裂片
2~5对,羽状全裂;小裂片条状披针形,宽1~3 mm,全缘;上表面呈绿色,下表面呈灰绿色,
气香。花黄色,头状花序,近球形或半球形,直径2~3 mm,下垂,排列成复总状花序。哈日
-沙布嘎药材的外观性状见图1。
2.2.2 茎横切面显微鉴别 药材的茎横切面有1列表皮细胞,呈类方形或圆形;皮层由多层薄
壁细胞组成,呈类椭圆形或不规则形,在纵棱处有1~3层厚角组织;维管束为外韧型,由1~4
列纤维构成帽状纤维束;韧皮部薄壁细胞呈圆形或椭圆形,形成层不明显,导管排列不规则;髓
部较宽广,由圆形或椭圆形的薄壁细胞组成。哈日-沙布嘎药材的茎横切面图见图2。
KEYWORDS Mongolian medicine; Artemisia sacrorum; Quality standard; Microscopic
identification; TLC; HPLC; Scopoletin; Chlorogenic acid; Caffeic acid; Scopoletin; 3,5-
dicaffeoylquinic acid
蒙药哈日-沙布嘎,为菊科植物铁杆蒿Artemisia sacrorum Ledeb.的干燥全草,别名白莲
蒿、万年蒿;其在新疆、宁夏、甘肃、西藏、内蒙古等地均有广泛分布[1],且用药多为自采。
哈日-沙布嘎全株均能入药,据蒙医药有关书籍记载,其性凉、味苦,具有杀虫止痛、消肿、
燥“协日乌素”(注:“协日乌素”为蒙医对病症“黄水”的专有名词)等功能[2]。研究发现,哈日
-沙布嘎的主要成分有黄酮类、肉桂酸类、香豆素类、萜类、挥发油等[3-5]。其提取物中含有
的木脂素具有较好的保肝作用;香豆素类化合物具有抗炎、抗菌等作用;地上部分的甲醇提取物
显示出强抗氧化作用[6-8];此外,其含有的咖啡酰奎尼酸类化合物具有较强的抗氧化、抗炎活
性[9],这一作用与哈日-沙布嘎用药功效一致。
哈日-沙布嘎收载于1998年版的《卫生部药品标准·蒙药分册》中,但该标准仅收录了该药
材的外观性状、性味和功能主治等,缺乏其他鉴别项,也没有基于药效的化学成分含量测定
[2]。现有对其质量控制的报道多是采用高效液相色谱(HPLC)法对药材中单一成分进行定量
分析,如徐犇等[10]对药材中东莨菪内酯进行了含量测定,佟皎薇等[11]测定了药材中绿原酸
的含量,这些方法均难以全面评价药材质量。鉴于此,本研究采集了10批哈日-沙布嘎药材,
在原质量标准基础上增加了显微鉴别、薄层色谱(TLC)鉴别、含量测定以及水分、总灰分和
浸出物等检查项,以期对该药材的质量进行全面控制。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所使用的主要仪器有:Primo Star型数码生物显微镜(德国Zeiss公司)、Eclipse
E200型生物显微镜(日本Nikon公司)、YOKO-ZS型薄层数码成像仪(武汉药科新技术开发
有限公司)、G型硅胶板(青岛海洋化工有限公司,规格50 mm×100 mm,批号20191109)、
展开槽(北京杰瑞恒达科技有限公司,规格110 mm×120 mm)、e2695型HPLC仪(含2998
型光电二极管矩阵检测器,美国Waters公司)、KH-300DE型台式数控超声波清洗器(昆山禾
创超声仪器有限公司)、BT125D型十万分之一电子分析天平(德国Sartorius公司)、UV-
2600型紫外分光光度计(日本Shimadzu公司)。
1.2 主要试剂
本研究所使用的主要试剂有:东莨菪苷对照品、绿原酸对照品、咖啡酸对照品、东莨菪内
酯对照品、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号分别为
Z15J11S115885、Y24J7K16726、Y09J8C28349、Z17J10Y90380、Z05M10X87215,純度均大于
98%),乙腈(美国Fisher公司,色谱纯),磷酸、甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分
析纯),超纯水。
1.3 药材
10批哈日-沙布嘎药材来源见表1。其中S1~S2号药材采购于新疆精河县蒙医诊所,
S3~S5号药材采购于新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院,S6~S10号药材采自新疆新源、昭
苏、乌鲁木齐等地,均经新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院巴特孟克主任医师鉴定为菊科植物
铁杆蒿A. sacrorum Ledeb.的干燥全草。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 分别取东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰
奎宁酸对照品适量,精密称定,加入甲醇制成上述5个成分质量浓度分别为1.070、1.016、
1.020、2.042、2.040 mg/mL的单一成分对照品贮备液。分别取东莨菪苷对照品贮备液0.75
mL,绿原酸、咖啡酸对照品贮备液各0.20 mL,东莨菪内酯、 3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品贮
备液各0.40 mL,置于同一5 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,制成混合对照品溶液,
备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取哈日-沙布嘎药材粉末(过30目筛)0.5 g,精密称定,置于100
mL锥形瓶中,加甲醇20 mL,称质量,超声(功率300 W,频率40 kHz)处理1 h,取出,放
冷至室温,再次称质量,用甲醇补足减失的质量,先后以滤纸、0.45 μm微孔滤膜滤过,取续
滤液,即得供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备 取甲醇20 mL,置于100 mL锥形瓶中,按“2.1.2”项下方法制成
阴性对照溶液。
2.2 性状和显微鉴别
2.2.1 性状鉴别 药材茎呈类圆柱形,直径1~5 mm,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;质韧易
折断,断面呈绿白色或黄褐色,部分茎中空。叶呈卵形或矩圆状卵形,二回羽状全裂;侧裂片
2~5对,羽状全裂;小裂片条状披针形,宽1~3 mm,全缘;上表面呈绿色,下表面呈灰绿色,
气香。花黄色,头状花序,近球形或半球形,直径2~3 mm,下垂,排列成复总状花序。哈日
-沙布嘎药材的外观性状见图1。
2.2.2 茎横切面显微鉴别 药材的茎横切面有1列表皮细胞,呈类方形或圆形;皮层由多层薄
壁细胞组成,呈类椭圆形或不规则形,在纵棱处有1~3层厚角组织;维管束为外韧型,由1~4
列纤维构成帽状纤维束;韧皮部薄壁细胞呈圆形或椭圆形,形成层不明显,导管排列不规则;髓
部较宽广,由圆形或椭圆形的薄壁细胞组成。哈日-沙布嘎药材的茎横切面图见图2。
KEYWORDS Mongolian medicine; Artemisia sacrorum; Quality standard; Microscopic
identification; TLC; HPLC; Scopoletin; Chlorogenic acid; Caffeic acid; Scopoletin; 3,5-
dicaffeoylquinic acid
蒙药哈日-沙布嘎,为菊科植物铁杆蒿Artemisia sacrorum Ledeb.的干燥全草,别名白莲
蒿、万年蒿;其在新疆、宁夏、甘肃、西藏、内蒙古等地均有广泛分布[1],且用药多为自采。
哈日-沙布嘎全株均能入药,据蒙医药有关书籍记载,其性凉、味苦,具有杀虫止痛、消肿、
燥“协日乌素”(注:“协日乌素”为蒙医对病症“黄水”的专有名词)等功能[2]。研究发现,哈日
-沙布嘎的主要成分有黄酮类、肉桂酸类、香豆素类、萜类、挥发油等[3-5]。其提取物中含有
的木脂素具有较好的保肝作用;香豆素类化合物具有抗炎、抗菌等作用;地上部分的甲醇提取物
显示出强抗氧化作用[6-8];此外,其含有的咖啡酰奎尼酸类化合物具有较强的抗氧化、抗炎活
性[9],这一作用与哈日-沙布嘎用药功效一致。
哈日-沙布嘎收载于1998年版的《卫生部药品标准·蒙药分册》中,但该标准仅收录了该药
材的外观性状、性味和功能主治等,缺乏其他鉴别项,也没有基于药效的化学成分含量测定
[2]。现有对其质量控制的报道多是采用高效液相色谱(HPLC)法对药材中单一成分进行定量
分析,如徐犇等[10]对药材中东莨菪内酯进行了含量测定,佟皎薇等[11]测定了药材中绿原酸
的含量,这些方法均难以全面评价药材质量。鉴于此,本研究采集了10批哈日-沙布嘎药材,
在原质量标准基础上增加了显微鉴别、薄层色谱(TLC)鉴别、含量测定以及水分、总灰分和
浸出物等检查项,以期对该药材的质量进行全面控制。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所使用的主要仪器有:Primo Star型数码生物显微镜(德国Zeiss公司)、Eclipse
E200型生物显微镜(日本Nikon公司)、YOKO-ZS型薄层数码成像仪(武汉药科新技术开发
有限公司)、G型硅胶板(青岛海洋化工有限公司,规格50 mm×100 mm,批号20191109)、
展开槽(北京杰瑞恒达科技有限公司,规格110 mm×120 mm)、e2695型HPLC仪(含2998
型光电二极管矩阵检测器,美国Waters公司)、KH-300DE型台式数控超声波清洗器(昆山禾
创超聲仪器有限公司)、BT125D型十万分之一电子分析天平(德国Sartorius公司)、UV-
2600型紫外分光光度计(日本Shimadzu公司)。
1.2 主要试剂
本研究所使用的主要试剂有:东莨菪苷对照品、绿原酸对照品、咖啡酸对照品、东莨菪内
酯对照品、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号分别为
Z15J11S115885、Y24J7K16726、Y09J8C28349、Z17J10Y90380、Z05M10X87215,纯度均大于
98%),乙腈(美国Fisher公司,色谱纯),磷酸、甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分
析纯),超纯水。
1.3 药材
10批哈日-沙布嘎药材来源见表1。其中S1~S2号药材采购于新疆精河县蒙医诊所,
S3~S5号药材采购于新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院,S6~S10号药材采自新疆新源、昭
苏、乌鲁木齐等地,均经新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院巴特孟克主任医师鉴定为菊科植物
铁杆蒿A. sacrorum Ledeb.的干燥全草。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 分别取东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰
奎宁酸对照品适量,精密称定,加入甲醇制成上述5个成分质量浓度分别为1.070、1.016、
1.020、2.042、2.040 mg/mL的单一成分对照品贮备液。分别取东莨菪苷对照品贮备液0.75
mL,绿原酸、咖啡酸对照品贮备液各0.20 mL,东莨菪内酯、 3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品贮
备液各0.40 mL,置于同一5 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,制成混合对照品溶液,
备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取哈日-沙布嘎药材粉末(过30目筛)0.5 g,精密称定,置于100
mL锥形瓶中,加甲醇20 mL,称质量,超声(功率300 W,频率40 kHz)处理1 h,取出,放
冷至室温,再次称质量,用甲醇补足减失的质量,先后以滤纸、0.45 μm微孔滤膜滤过,取续
滤液,即得供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备 取甲醇20 mL,置于100 mL锥形瓶中,按“2.1.2”项下方法制成
阴性对照溶液。
2.2 性状和显微鉴别
2.2.1 性状鉴别 药材茎呈类圆柱形,直径1~5 mm,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;质韧易
折断,断面呈绿白色或黄褐色,部分茎中空。叶呈卵形或矩圆状卵形,二回羽状全裂;侧裂片
2~5对,羽状全裂;小裂片条状披针形,宽1~3 mm,全缘;上表面呈绿色,下表面呈灰绿色,
气香。花黄色,头状花序,近球形或半球形,直径2~3 mm,下垂,排列成复总状花序。哈日
-沙布嘎药材的外观性状见图1。
2.2.2 茎横切面显微鉴别 药材的茎横切面有1列表皮细胞,呈类方形或圆形;皮层由多层薄
壁细胞组成,呈类椭圆形或不规则形,在纵棱处有1~3层厚角组织;维管束为外韧型,由1~4
列纤维构成帽状纤维束;韧皮部薄壁细胞呈圆形或椭圆形,形成层不明显,导管排列不规则;髓
部较宽广,由圆形或椭圆形的薄壁细胞组成。哈日-沙布嘎药材的茎横切面图见图2。
2024年5月21日发(作者:蛮弘光)
蒙药哈日-沙布嘎(铁杆蒿)的质量标准提
升
作者:袁小红 庞克坚 唐辉 张虹 魏沣 刘乐乐 姜国珍
来源:《中国药房》2021年第05期
摘 要 目的:提升蒙藥哈日-沙布嘎(铁杆蒿)的质量标准,为全面评价其质量提供科学依
据。方法:对哈日-沙布嘎进行外观性状鉴别和显微鉴别;采用薄层色谱(TLC)法对药材中的
东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯和3,5-二咖啡酰奎宁酸进行定性鉴别;建立高效液相
色谱(HPLC)法测定药材中上述5种成分的含量;并对药材的水分、总灰分和浸出物进行检
查。结果:哈日-沙布嘎药材茎呈类圆柱形,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;叶呈卵形或矩圆状
卵形,气香;花黄色,头状花序,近球形或半球形;粉末呈绿色或黄绿色,花粉粒具3个萌发
孔,薄壁细胞簇晶棱尖锐,螺纹导管众多,偶见具缘纹孔导管,木纤维多成束存在。TLC结果
显示,供试品在与5种对照品色谱相应位置上均显相同颜色的斑点。东莨菪苷、绿原酸、咖啡
酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰奎宁酸的质量浓度分别在85.60~428.00、10.16~101.60、
10.20~102.00、40.84~408.40、40.80~408.00 μg/mL范围内与各自峰面积呈良好线性关系(r
均大于0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3.00%(n=6);平均加样回收率
分别为103.07%、99.66%、98.37%、97.78%、98.40%(RSD均小于3.00%,n=6)。10批药材
样品中上述5种成分含量范围分别为0.36%~1.23%、0.09%~0.51%、0.04%~0.13%、
0.61%~1.13%、0.12%~1.11%;水分、总灰分、水溶性浸出物的平均含量分别为6.25%、
5.86%、26.50%。结论:该研究在哈日-沙布嘎原质量标准的基础上增加了显微鉴别、TLC鉴
别、含量测定以及水分、总灰分和浸出物等检查项,方法精密、准确、稳定性良好,能够为更
加科学、规范地评价该药材质量提供依据。
关键词 蒙药;哈日-沙布嘎(铁杆蒿);质量标准;显微鉴别;薄层色谱法;高效液相色谱法;东
莨菪苷;绿原酸;咖啡酸;东莨菪内酯;3,5-二咖啡酰奎宁酸
中图分类号 R284.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2021)05-0536-06
ABSTRACT OBJECTIVE: To improve the quality standard of Mongolian medicine Artemisia
sacrorum, and to provide scientific basis for comprehensive quality evaluation. METHODS: The
appearance and microscopic characteristics of A. sacrorum were identified; scopoletin, chlorogenic
acid, caffeic acid, scopoletin and 3,5-dicaffeoylquinic acid were identified quantitatively by TLC;
the contents of above 5 components were determined by HPLC. The water content, total ash and
extract were examined. RESULTS: The stem of A. sacrorum was cylindrical, and its surface was
purple or purple-brown or cyan-brown; the leaves were ovate or oblong-ovate, fragrant; the flowers
were yellow, head-shaped, subglobose or hemispherical. The powder was green or yellow-green,
its pollen grain had three germination; the parenchymal cell clusters with sharp edges and numerous
threaded ducts,occasionally having marginal pitted ducts; its wood fibers were in bundles mostly.
Results of TLC showed that the spots of the same color were found in the corresponding positions of
chromatogram for 5 substance control and samples. The linear range of scopoletin, chlorogenic
acid, caffeic acid, scopolactone and 3,5-dicaffeoylquinic acid were 85.60-428.00, 10.16-
101.60, 10.20-102.00, 40.84-408.40 and 40.80-408.00 μg/mL (all r>0.999 0). RSDs of
precision, stability, repeatability tests were all less than 3.00% (n=6). The average recoveries
were 103.07%,99.66%,98.37%,97.78%, 98.40% (all RSDs
KEYWORDS Mongolian medicine; Artemisia sacrorum; Quality standard; Microscopic
identification; TLC; HPLC; Scopoletin; Chlorogenic acid; Caffeic acid; Scopoletin; 3,5-
dicaffeoylquinic acid
蒙药哈日-沙布嘎,为菊科植物铁杆蒿Artemisia sacrorum Ledeb.的干燥全草,别名白莲
蒿、万年蒿;其在新疆、宁夏、甘肃、西藏、内蒙古等地均有广泛分布[1],且用药多为自采。
哈日-沙布嘎全株均能入药,据蒙医药有关书籍记载,其性凉、味苦,具有杀虫止痛、消肿、
燥“协日乌素”(注:“协日乌素”為蒙医对病症“黄水”的专有名词)等功能[2]。研究发现,哈日
-沙布嘎的主要成分有黄酮类、肉桂酸类、香豆素类、萜类、挥发油等[3-5]。其提取物中含有
的木脂素具有较好的保肝作用;香豆素类化合物具有抗炎、抗菌等作用;地上部分的甲醇提取物
显示出强抗氧化作用[6-8];此外,其含有的咖啡酰奎尼酸类化合物具有较强的抗氧化、抗炎活
性[9],这一作用与哈日-沙布嘎用药功效一致。
哈日-沙布嘎收载于1998年版的《卫生部药品标准·蒙药分册》中,但该标准仅收录了该药
材的外观性状、性味和功能主治等,缺乏其他鉴别项,也没有基于药效的化学成分含量测定
[2]。现有对其质量控制的报道多是采用高效液相色谱(HPLC)法对药材中单一成分进行定量
分析,如徐犇等[10]对药材中东莨菪内酯进行了含量测定,佟皎薇等[11]测定了药材中绿原酸
的含量,这些方法均难以全面评价药材质量。鉴于此,本研究采集了10批哈日-沙布嘎药材,
在原质量标准基础上增加了显微鉴别、薄层色谱(TLC)鉴别、含量测定以及水分、总灰分和
浸出物等检查项,以期对该药材的质量进行全面控制。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所使用的主要仪器有:Primo Star型数码生物显微镜(德国Zeiss公司)、Eclipse
E200型生物显微镜(日本Nikon公司)、YOKO-ZS型薄层数码成像仪(武汉药科新技术开发
有限公司)、G型硅胶板(青岛海洋化工有限公司,规格50 mm×100 mm,批号20191109)、
展开槽(北京杰瑞恒达科技有限公司,规格110 mm×120 mm)、e2695型HPLC仪(含2998
型光电二极管矩阵检测器,美国Waters公司)、KH-300DE型台式数控超声波清洗器(昆山禾
创超声仪器有限公司)、BT125D型十万分之一电子分析天平(德国Sartorius公司)、UV-
2600型紫外分光光度计(日本Shimadzu公司)。
1.2 主要试剂
本研究所使用的主要试剂有:东莨菪苷对照品、绿原酸对照品、咖啡酸对照品、东莨菪内
酯对照品、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号分别为
Z15J11S115885、Y24J7K16726、Y09J8C28349、Z17J10Y90380、Z05M10X87215,纯度均大于
98%),乙腈(美国Fisher公司,色谱纯),磷酸、甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分
析纯),超纯水。
1.3 药材
10批哈日-沙布嘎药材来源见表1。其中S1~S2号药材采购于新疆精河县蒙医诊所,
S3~S5号药材采购于新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院,S6~S10号药材采自新疆新源、昭
苏、乌鲁木齐等地,均经新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院巴特孟克主任医师鉴定为菊科植物
铁杆蒿A. sacrorum Ledeb.的干燥全草。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 分别取东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰
奎宁酸对照品适量,精密称定,加入甲醇制成上述5个成分质量浓度分别为1.070、1.016、
1.020、2.042、2.040 mg/mL的单一成分对照品贮备液。分别取东莨菪苷对照品贮备液0.75
mL,绿原酸、咖啡酸对照品贮备液各0.20 mL,东莨菪内酯、 3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品贮
备液各0.40 mL,置于同一5 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,制成混合对照品溶液,
备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取哈日-沙布嘎药材粉末(过30目筛)0.5 g,精密称定,置于100
mL锥形瓶中,加甲醇20 mL,称质量,超声(功率300 W,频率40 kHz)处理1 h,取出,放
冷至室温,再次称质量,用甲醇补足减失的质量,先后以滤纸、0.45 μm微孔滤膜滤过,取续
滤液,即得供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备 取甲醇20 mL,置于100 mL锥形瓶中,按“2.1.2”项下方法制成
阴性对照溶液。
2.2 性状和显微鉴别
2.2.1 性状鉴别 药材茎呈类圆柱形,直径1~5 mm,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;质韧易
折断,断面呈绿白色或黄褐色,部分茎中空。叶呈卵形或矩圆状卵形,二回羽状全裂;侧裂片
2~5对,羽状全裂;小裂片条状披针形,宽1~3 mm,全缘;上表面呈绿色,下表面呈灰绿色,
气香。花黄色,头状花序,近球形或半球形,直径2~3 mm,下垂,排列成复总状花序。哈日
-沙布嘎药材的外观性状见图1。
2.2.2 茎横切面显微鉴别 药材的茎横切面有1列表皮细胞,呈类方形或圆形;皮层由多层薄
壁细胞组成,呈类椭圆形或不规则形,在纵棱处有1~3层厚角组织;维管束为外韧型,由1~4
列纤维构成帽状纤维束;韧皮部薄壁细胞呈圆形或椭圆形,形成层不明显,导管排列不规则;髓
部较宽广,由圆形或椭圆形的薄壁细胞组成。哈日-沙布嘎药材的茎横切面图见图2。
KEYWORDS Mongolian medicine; Artemisia sacrorum; Quality standard; Microscopic
identification; TLC; HPLC; Scopoletin; Chlorogenic acid; Caffeic acid; Scopoletin; 3,5-
dicaffeoylquinic acid
蒙药哈日-沙布嘎,为菊科植物铁杆蒿Artemisia sacrorum Ledeb.的干燥全草,别名白莲
蒿、万年蒿;其在新疆、宁夏、甘肃、西藏、内蒙古等地均有广泛分布[1],且用药多为自采。
哈日-沙布嘎全株均能入药,据蒙医药有关书籍记载,其性凉、味苦,具有杀虫止痛、消肿、
燥“协日乌素”(注:“协日乌素”为蒙医对病症“黄水”的专有名词)等功能[2]。研究发现,哈日
-沙布嘎的主要成分有黄酮类、肉桂酸类、香豆素类、萜类、挥发油等[3-5]。其提取物中含有
的木脂素具有较好的保肝作用;香豆素类化合物具有抗炎、抗菌等作用;地上部分的甲醇提取物
显示出强抗氧化作用[6-8];此外,其含有的咖啡酰奎尼酸类化合物具有较强的抗氧化、抗炎活
性[9],这一作用与哈日-沙布嘎用药功效一致。
哈日-沙布嘎收载于1998年版的《卫生部药品标准·蒙药分册》中,但该标准仅收录了该药
材的外观性状、性味和功能主治等,缺乏其他鉴别项,也没有基于药效的化学成分含量测定
[2]。现有对其质量控制的报道多是采用高效液相色谱(HPLC)法对药材中单一成分进行定量
分析,如徐犇等[10]对药材中东莨菪内酯进行了含量测定,佟皎薇等[11]测定了药材中绿原酸
的含量,这些方法均难以全面评价药材质量。鉴于此,本研究采集了10批哈日-沙布嘎药材,
在原质量标准基础上增加了显微鉴别、薄层色谱(TLC)鉴别、含量测定以及水分、总灰分和
浸出物等检查项,以期对该药材的质量进行全面控制。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所使用的主要仪器有:Primo Star型数码生物显微镜(德国Zeiss公司)、Eclipse
E200型生物显微镜(日本Nikon公司)、YOKO-ZS型薄层数码成像仪(武汉药科新技术开发
有限公司)、G型硅胶板(青岛海洋化工有限公司,规格50 mm×100 mm,批号20191109)、
展开槽(北京杰瑞恒达科技有限公司,规格110 mm×120 mm)、e2695型HPLC仪(含2998
型光电二极管矩阵检测器,美国Waters公司)、KH-300DE型台式数控超声波清洗器(昆山禾
创超声仪器有限公司)、BT125D型十万分之一电子分析天平(德国Sartorius公司)、UV-
2600型紫外分光光度计(日本Shimadzu公司)。
1.2 主要试剂
本研究所使用的主要试剂有:东莨菪苷对照品、绿原酸对照品、咖啡酸对照品、东莨菪内
酯对照品、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号分别为
Z15J11S115885、Y24J7K16726、Y09J8C28349、Z17J10Y90380、Z05M10X87215,純度均大于
98%),乙腈(美国Fisher公司,色谱纯),磷酸、甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分
析纯),超纯水。
1.3 药材
10批哈日-沙布嘎药材来源见表1。其中S1~S2号药材采购于新疆精河县蒙医诊所,
S3~S5号药材采购于新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院,S6~S10号药材采自新疆新源、昭
苏、乌鲁木齐等地,均经新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院巴特孟克主任医师鉴定为菊科植物
铁杆蒿A. sacrorum Ledeb.的干燥全草。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 分别取东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰
奎宁酸对照品适量,精密称定,加入甲醇制成上述5个成分质量浓度分别为1.070、1.016、
1.020、2.042、2.040 mg/mL的单一成分对照品贮备液。分别取东莨菪苷对照品贮备液0.75
mL,绿原酸、咖啡酸对照品贮备液各0.20 mL,东莨菪内酯、 3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品贮
备液各0.40 mL,置于同一5 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,制成混合对照品溶液,
备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取哈日-沙布嘎药材粉末(过30目筛)0.5 g,精密称定,置于100
mL锥形瓶中,加甲醇20 mL,称质量,超声(功率300 W,频率40 kHz)处理1 h,取出,放
冷至室温,再次称质量,用甲醇补足减失的质量,先后以滤纸、0.45 μm微孔滤膜滤过,取续
滤液,即得供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备 取甲醇20 mL,置于100 mL锥形瓶中,按“2.1.2”项下方法制成
阴性对照溶液。
2.2 性状和显微鉴别
2.2.1 性状鉴别 药材茎呈类圆柱形,直径1~5 mm,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;质韧易
折断,断面呈绿白色或黄褐色,部分茎中空。叶呈卵形或矩圆状卵形,二回羽状全裂;侧裂片
2~5对,羽状全裂;小裂片条状披针形,宽1~3 mm,全缘;上表面呈绿色,下表面呈灰绿色,
气香。花黄色,头状花序,近球形或半球形,直径2~3 mm,下垂,排列成复总状花序。哈日
-沙布嘎药材的外观性状见图1。
2.2.2 茎横切面显微鉴别 药材的茎横切面有1列表皮细胞,呈类方形或圆形;皮层由多层薄
壁细胞组成,呈类椭圆形或不规则形,在纵棱处有1~3层厚角组织;维管束为外韧型,由1~4
列纤维构成帽状纤维束;韧皮部薄壁细胞呈圆形或椭圆形,形成层不明显,导管排列不规则;髓
部较宽广,由圆形或椭圆形的薄壁细胞组成。哈日-沙布嘎药材的茎横切面图见图2。
KEYWORDS Mongolian medicine; Artemisia sacrorum; Quality standard; Microscopic
identification; TLC; HPLC; Scopoletin; Chlorogenic acid; Caffeic acid; Scopoletin; 3,5-
dicaffeoylquinic acid
蒙药哈日-沙布嘎,为菊科植物铁杆蒿Artemisia sacrorum Ledeb.的干燥全草,别名白莲
蒿、万年蒿;其在新疆、宁夏、甘肃、西藏、内蒙古等地均有广泛分布[1],且用药多为自采。
哈日-沙布嘎全株均能入药,据蒙医药有关书籍记载,其性凉、味苦,具有杀虫止痛、消肿、
燥“协日乌素”(注:“协日乌素”为蒙医对病症“黄水”的专有名词)等功能[2]。研究发现,哈日
-沙布嘎的主要成分有黄酮类、肉桂酸类、香豆素类、萜类、挥发油等[3-5]。其提取物中含有
的木脂素具有较好的保肝作用;香豆素类化合物具有抗炎、抗菌等作用;地上部分的甲醇提取物
显示出强抗氧化作用[6-8];此外,其含有的咖啡酰奎尼酸类化合物具有较强的抗氧化、抗炎活
性[9],这一作用与哈日-沙布嘎用药功效一致。
哈日-沙布嘎收载于1998年版的《卫生部药品标准·蒙药分册》中,但该标准仅收录了该药
材的外观性状、性味和功能主治等,缺乏其他鉴别项,也没有基于药效的化学成分含量测定
[2]。现有对其质量控制的报道多是采用高效液相色谱(HPLC)法对药材中单一成分进行定量
分析,如徐犇等[10]对药材中东莨菪内酯进行了含量测定,佟皎薇等[11]测定了药材中绿原酸
的含量,这些方法均难以全面评价药材质量。鉴于此,本研究采集了10批哈日-沙布嘎药材,
在原质量标准基础上增加了显微鉴别、薄层色谱(TLC)鉴别、含量测定以及水分、总灰分和
浸出物等检查项,以期对该药材的质量进行全面控制。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所使用的主要仪器有:Primo Star型数码生物显微镜(德国Zeiss公司)、Eclipse
E200型生物显微镜(日本Nikon公司)、YOKO-ZS型薄层数码成像仪(武汉药科新技术开发
有限公司)、G型硅胶板(青岛海洋化工有限公司,规格50 mm×100 mm,批号20191109)、
展开槽(北京杰瑞恒达科技有限公司,规格110 mm×120 mm)、e2695型HPLC仪(含2998
型光电二极管矩阵检测器,美国Waters公司)、KH-300DE型台式数控超声波清洗器(昆山禾
创超聲仪器有限公司)、BT125D型十万分之一电子分析天平(德国Sartorius公司)、UV-
2600型紫外分光光度计(日本Shimadzu公司)。
1.2 主要试剂
本研究所使用的主要试剂有:东莨菪苷对照品、绿原酸对照品、咖啡酸对照品、东莨菪内
酯对照品、3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号分别为
Z15J11S115885、Y24J7K16726、Y09J8C28349、Z17J10Y90380、Z05M10X87215,纯度均大于
98%),乙腈(美国Fisher公司,色谱纯),磷酸、甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分
析纯),超纯水。
1.3 药材
10批哈日-沙布嘎药材来源见表1。其中S1~S2号药材采购于新疆精河县蒙医诊所,
S3~S5号药材采购于新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院,S6~S10号药材采自新疆新源、昭
苏、乌鲁木齐等地,均经新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙医医院巴特孟克主任医师鉴定为菊科植物
铁杆蒿A. sacrorum Ledeb.的干燥全草。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 分别取东莨菪苷、绿原酸、咖啡酸、东莨菪内酯、3,5-二咖啡酰
奎宁酸对照品适量,精密称定,加入甲醇制成上述5个成分质量浓度分别为1.070、1.016、
1.020、2.042、2.040 mg/mL的单一成分对照品贮备液。分别取东莨菪苷对照品贮备液0.75
mL,绿原酸、咖啡酸对照品贮备液各0.20 mL,东莨菪内酯、 3,5-二咖啡酰奎宁酸对照品贮
备液各0.40 mL,置于同一5 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀,制成混合对照品溶液,
备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取哈日-沙布嘎药材粉末(过30目筛)0.5 g,精密称定,置于100
mL锥形瓶中,加甲醇20 mL,称质量,超声(功率300 W,频率40 kHz)处理1 h,取出,放
冷至室温,再次称质量,用甲醇补足减失的质量,先后以滤纸、0.45 μm微孔滤膜滤过,取续
滤液,即得供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备 取甲醇20 mL,置于100 mL锥形瓶中,按“2.1.2”项下方法制成
阴性对照溶液。
2.2 性状和显微鉴别
2.2.1 性状鉴别 药材茎呈类圆柱形,直径1~5 mm,表面呈紫色或紫褐色或青褐色;质韧易
折断,断面呈绿白色或黄褐色,部分茎中空。叶呈卵形或矩圆状卵形,二回羽状全裂;侧裂片
2~5对,羽状全裂;小裂片条状披针形,宽1~3 mm,全缘;上表面呈绿色,下表面呈灰绿色,
气香。花黄色,头状花序,近球形或半球形,直径2~3 mm,下垂,排列成复总状花序。哈日
-沙布嘎药材的外观性状见图1。
2.2.2 茎横切面显微鉴别 药材的茎横切面有1列表皮细胞,呈类方形或圆形;皮层由多层薄
壁细胞组成,呈类椭圆形或不规则形,在纵棱处有1~3层厚角组织;维管束为外韧型,由1~4
列纤维构成帽状纤维束;韧皮部薄壁细胞呈圆形或椭圆形,形成层不明显,导管排列不规则;髓
部较宽广,由圆形或椭圆形的薄壁细胞组成。哈日-沙布嘎药材的茎横切面图见图2。