2024年6月1日发(作者：频叶彤)
人髓磷脂碱性蛋白(MBP)酶联免疫分析
酶联免疫
分析
分析
试剂盒使用说明书
试剂
盒使用说明书
盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
检测范围
：
100pg/ml-4000pg/ml
使用目的：
使用目的
：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中髓磷脂碱性蛋白(MBP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人髓磷脂碱性蛋白(MBP)水平。用纯化的人髓磷
脂碱性蛋白 (MBP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入髓磷脂
碱性蛋白(MBP)，再与HRP标记的髓磷脂碱性蛋白 (MBP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标
抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并
在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的髓磷脂碱性蛋白(MBP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人髓磷脂碱性蛋
白 (MBP)浓度。
试剂盒组成
1
2
3
4
5
6
30倍浓缩洗涤液
酶标试剂
酶标包被板
样品稀释液
显色剂A液
显色剂B液
20ml×1瓶
6ml×1瓶
12孔×8条
6ml×1瓶
6ml×1瓶
6ml×1/瓶
7
8
9
10
11
12
终止液
标准品稀释液
说明书
封板膜
密封袋
6ml×1瓶
1.5ml×1瓶
1份
2张
1个
0.5ml×1瓶 标准品（8000pg/ml）
96T
标本要求
标本
要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
4000pg/ml
2000pg/ml
1000pg/ml
500pg/ml
250pg/ml
5号标准品
4号标准品
3号标准品
2号标准品
1号标准品
150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，
然后再加待测样品10µl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
操作程序总结
：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
2024年6月1日发(作者：频叶彤)
人髓磷脂碱性蛋白(MBP)酶联免疫分析
酶联免疫
分析
分析
试剂盒使用说明书
试剂
盒使用说明书
盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
检测范围
：
100pg/ml-4000pg/ml
使用目的：
使用目的
：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中髓磷脂碱性蛋白(MBP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人髓磷脂碱性蛋白(MBP)水平。用纯化的人髓磷
脂碱性蛋白 (MBP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入髓磷脂
碱性蛋白(MBP)，再与HRP标记的髓磷脂碱性蛋白 (MBP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标
抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并
在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的髓磷脂碱性蛋白(MBP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人髓磷脂碱性蛋
白 (MBP)浓度。
试剂盒组成
1
2
3
4
5
6
30倍浓缩洗涤液
酶标试剂
酶标包被板
样品稀释液
显色剂A液
显色剂B液
20ml×1瓶
6ml×1瓶
12孔×8条
6ml×1瓶
6ml×1瓶
6ml×1/瓶
7
8
9
10
11
12
终止液
标准品稀释液
说明书
封板膜
密封袋
6ml×1瓶
1.5ml×1瓶
1份
2张
1个
0.5ml×1瓶 标准品（8000pg/ml）
96T
标本要求
标本
要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
4000pg/ml
2000pg/ml
1000pg/ml
500pg/ml
250pg/ml
5号标准品
4号标准品
3号标准品
2号标准品
1号标准品
150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，
然后再加待测样品10µl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
操作程序总结
：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标