2024年10月2日发(作者：蚁博雅)
动植物油脂 紫外吸光度的测定
1 范围
本文件规定了动植物油脂紫外吸光度测定的原理、试剂、仪器、扦样、试样制备、测定步骤、结果
计算、精密度和测试报告的要求。
本文件适用于动植物油脂，不适用于乳和乳制品（或从乳和乳制品中获得的脂肪）。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/T 5524 动植物油脂 扦样（ISO 5555:2001, IDT）
GB/T 6379.1 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第1部分：总则与定义
GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第2部分：确定标准测量方法重复性与
再现性的基本方法
GB/T 15687 动植物油脂 试样的制备（ISO 661:2003, IDT）
3 原理
将样品溶解在异辛烷或环己烷中，并在特定的紫外线波长范围内用分光光度法测量吸光度。采用10
mm比色皿，测定浓度为1 g/100 mL的样品溶液在232 nm和268 nm处（溶剂为异辛烷时）或在232 nm和
270 nm处（溶剂为环己烷时）的吸光度值。
4 试剂
除另有说明，所用试剂均为分析纯。
溶剂：2,2,4-三甲基戊烷（异辛烷），用于在波长232 nm和268 nm处的测量；环己烷，用于在波长
232 nm和270 nm处的测量。以蒸馏水为参比溶液，采用10 mm比色皿，在232 nm处的吸光度需小于0.12，
在250 nm处的吸光度需小于0.05。
警告：请遵循危险化学品处理的规定。
5 仪器
所用的玻璃器皿在使用前都应彻底的清洗，并且要用溶剂润洗。避免其他物质在220 nm～320 nm
波长范围内对吸收光谱的影响。
5.1 分光光度计：配置记录仪、10 mm石英比色皿。在使用前，校验分光光度计的波长范围和光谱吸
收范围。
5.1.1 波长范围：根据说明书用汞灯进行校验，或使用钬滤波片校验，其在279.37 nm 和287.5 nm 有
尖锐的吸收峰。
1
5.1.2
吸收范围：将铬酸钾溶于0.05 mol/L的氢氧化钾溶液中，配制成200 mg/L铬酸钾溶液。取上述
溶液25 mL于500 mL的容量瓶中，用0.05 mol/L的氢氧化钾溶液稀释至刻度。用0.05 mol/L的氢氧化
钾溶液作为参比溶液，10 mm比色皿进行测定，此溶液的吸光度应该为0.200 ± 0.005。
警告：在使用铬酸钾溶液时应小心，若吸入铬酸钾溶液有导致癌变的危险。
5.2 分析天平：感量0.1 mg。
5.3 25 mL容量瓶。
6 扦样
按GB/T 5524执行。
7 试样制备
按GB/T 15687执行。
8 测定步骤
8.1 测试溶液制备
8.1.1 为了使样品吸光度在 0.2～0.8 的范围内，称取待测样品（第7章）约 0.05 g～0.25 g，准确至
0. 1 mg（5.2），置于25 mL容量瓶（5.3）中。
8.1.2 在室温下，将试样溶解在几毫升异辛烷中，然后用相同的溶剂稀释至刻度，充分摇匀，以测定
232 nm和268 nm处的吸光度。
8.1.3 在室温下，将试样溶解在几毫升环己烷中，然后用相同的溶剂稀释至刻度，充分摇匀，以测定
232 nm和270 nm处的吸光度。
8.1.4 确保8.1.2和8.1.3中制备的溶液完全透明。如果出现乳白色或浑浊，要迅速用滤纸过滤。
8.1.5 如果测试溶液中测试样品的浓度大于1 g/100 mL，应在测试报告中指出这一点。
8.2 测定
用测试溶液（8.1）将石英比色皿（5.1）润洗三次，将测试溶液倒入石英比色皿。溶剂作为参比，
使用分光光度计（5.1）测定在 220 nm～320 nm波长范围内的吸光度。可连续测定，也可每间隔1 nm～
2 nm进行测定，在最大吸收和最小吸收的范围附近，将间隔缩小至0.5 nm。
注：没有必要在整个波长范围内测定其吸光度。
如果吸光度超过0.8，应适当稀释溶液重新进行测定。
9 结果计算
9.1 特定波长下试样的紫外吸光度
特定波长下试样的紫外吸光度按式（1）计算：
式中：
2
K
=
E
cs
........................................ (1)
K
λ
——特定波长λ下的紫外吸光度；
E
λ
——波长λ下试样吸光度；
c ——测得溶液样品的浓度，单位为克每100毫升（g/100 mL）；
s ——比色杯的光程，单位为厘米（cm）。
注1：λ通常为232 nm、268 nm和270 nm；结果保留至小数点后两位。
9.2 紫外吸光度的变化，ΔK
根据委员会法规（EEC）第2568/91号
[5]
的分光光度法分析橄榄油，还涉及确定比消光度ΔK的变化，
ΔK按式（2）计算：
K=K
m
−
K
m−4
+K
m+4
2
................................. (2)
式中：
K
m
——波长m处的紫外吸光度，最大吸收波长取决于所用溶剂。
注2：结果保留至小数点后两位。
10 精密度
10.1 实验室间测试
多个实验室间的测试结果参见附录A。对于其他测试范围来说，这些实验数据可能是不适用的。
10.2 重复性
在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相
互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于重复性限（r）：232 nm处为0.026、268 nm处
为0.085的情况不得超过5%。
10.3 再现性
在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，对同一被测对象相互独立
进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于再现性限（R）：232 nm处为0.396、268 nm处为0.11
的情况不得超过5%。
11 测试报告
测试报告需说明：
——测试样品所需的所有有关信息；
——若已知采样方法，则注明；
——采用的检验方法及引用标准；
——本标准中没有具体说明的，或者被认为是可选性的，以及所有可能影响结果的操作细节；
——测定结果，如果进行了重复性试验，则列出最终结果。
3
附 录 A
（资料性附录）
实验室间比对试验统计结果
组织6家实验室对5个不同样品进行实验室间比对试验，建立了本方法的精密度。结果按GB/T 6379.1
和GB/T 6379.2统计分析，统计结果见表A.1-A.6。
表A.1 异辛烷中232 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值
K
232
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
1.883
0.075
4.5
0.210
0.276
14.6
0.772
B
6
6
36
2.132
0.012
0.5
0.032
0.286
13.4
0.802
C
6
6
36
3.197
0.059
1.8
0.165
0.385
12.1
1.079
D
6
6
36
3.283
0.198
6.0
0.553
0.496
15.1
1.390
E
6
6
36
2.858
0.031
1.0
0.087
0.356
12.4
0.996
表A.2 环己烷中232 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值 K
232
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
1.937
0.025
1.3
0.069
0.255
13.2
0.714
B
6
6
36
2.118
0.005
0.2
0.014
0.248
11.7
0.693
C
6
6
36
3.248
0.062
1.8
0.172
0.485
14.9
1.358
D
6
6
36
3.238
0.075
2.3
0.209
0.450
13.9
1.259
E
6
6
36
2.840
0.003
0.1
0.007
0.403
14.2
1.127
表A.3 异辛烷268 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
样品
A
6
6
B
6
6
C
6
6
D
6
6
E
6
6
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值 K
268
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
36
0.123
0.002
1.3
0.004
0.012
10.1
0.035
36
0.590
0.033
6.9
0.092
0.350
59.4
0.981
36
1.548
0.032
1.9
0.088
0.175
11.3
0.490
36
0.595
0.029
4.4
0.081
0.058
9.8
0.163
36
0.990
0.003
0.3
0.008
0.144
14.6
0.404
表A.4 环己烷中270 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值 K
270
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
0.123
0.001
0.4
0.001
0.014
11.1
0.038
B
6
6
36
0.575
0.006
1.3
0.017
0.344
59.8
0.962
C
6
6
36
1.542
0.084
4.9
0.235
0.151
9.8
0.424
D
6
6
36
0.583
0.035
5.3
0.098
0.056
9.7
0.158
E
6
6
36
1.020
0.001
0.1
0.003
0.084
8.2
0.234
表A.5 环己烷中（270 ± 4）nm处吸光度值ΔK的变化
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值变化
ΔK
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
-0.002
0.001
24.2
0.002
0.004
182.6
0.010
B
6
6
36
0.063
0.005
15.9
0.015
0.051
79.8
0.142
C
6
6
36
0.143
0.028
17.8
0.078
0.031
21.6
0.087
D
6
6
36
0.032
0.001
3.60
0.003
0.004
11.8
0.010
E
6
6
36
0.103
0.028
23.0
0.072
0.020
19.1
0.055
表A.6 异辛烷中（268 ± 4）nm处吸光度值ΔK的变化
项目
实验室数量 n
P
样品
A
4
B
6
C
6
D
6
E
6
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值变化
ΔK
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
4
24
-0.001
0.0004
9.03
0.001
0.001
165.8
0.003
6
36
0.065
0.001
3.45
0.003
0.052
79.8
0.145
6
36
0.145
0.023
15.5
0.065
0.027
18.6
0.075
6
36
0.022
0.014
38.0
0.040
0.011
49.3
0.030
6
36
0.087
0.028
26.9
0.078
0.033
38.7
0.094
2024年10月2日发(作者：蚁博雅)
动植物油脂 紫外吸光度的测定
1 范围
本文件规定了动植物油脂紫外吸光度测定的原理、试剂、仪器、扦样、试样制备、测定步骤、结果
计算、精密度和测试报告的要求。
本文件适用于动植物油脂，不适用于乳和乳制品（或从乳和乳制品中获得的脂肪）。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/T 5524 动植物油脂 扦样（ISO 5555:2001, IDT）
GB/T 6379.1 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第1部分：总则与定义
GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第2部分：确定标准测量方法重复性与
再现性的基本方法
GB/T 15687 动植物油脂 试样的制备（ISO 661:2003, IDT）
3 原理
将样品溶解在异辛烷或环己烷中，并在特定的紫外线波长范围内用分光光度法测量吸光度。采用10
mm比色皿，测定浓度为1 g/100 mL的样品溶液在232 nm和268 nm处（溶剂为异辛烷时）或在232 nm和
270 nm处（溶剂为环己烷时）的吸光度值。
4 试剂
除另有说明，所用试剂均为分析纯。
溶剂：2,2,4-三甲基戊烷（异辛烷），用于在波长232 nm和268 nm处的测量；环己烷，用于在波长
232 nm和270 nm处的测量。以蒸馏水为参比溶液，采用10 mm比色皿，在232 nm处的吸光度需小于0.12，
在250 nm处的吸光度需小于0.05。
警告：请遵循危险化学品处理的规定。
5 仪器
所用的玻璃器皿在使用前都应彻底的清洗，并且要用溶剂润洗。避免其他物质在220 nm～320 nm
波长范围内对吸收光谱的影响。
5.1 分光光度计：配置记录仪、10 mm石英比色皿。在使用前，校验分光光度计的波长范围和光谱吸
收范围。
5.1.1 波长范围：根据说明书用汞灯进行校验，或使用钬滤波片校验，其在279.37 nm 和287.5 nm 有
尖锐的吸收峰。
1
5.1.2
吸收范围：将铬酸钾溶于0.05 mol/L的氢氧化钾溶液中，配制成200 mg/L铬酸钾溶液。取上述
溶液25 mL于500 mL的容量瓶中，用0.05 mol/L的氢氧化钾溶液稀释至刻度。用0.05 mol/L的氢氧化
钾溶液作为参比溶液，10 mm比色皿进行测定，此溶液的吸光度应该为0.200 ± 0.005。
警告：在使用铬酸钾溶液时应小心，若吸入铬酸钾溶液有导致癌变的危险。
5.2 分析天平：感量0.1 mg。
5.3 25 mL容量瓶。
6 扦样
按GB/T 5524执行。
7 试样制备
按GB/T 15687执行。
8 测定步骤
8.1 测试溶液制备
8.1.1 为了使样品吸光度在 0.2～0.8 的范围内，称取待测样品（第7章）约 0.05 g～0.25 g，准确至
0. 1 mg（5.2），置于25 mL容量瓶（5.3）中。
8.1.2 在室温下，将试样溶解在几毫升异辛烷中，然后用相同的溶剂稀释至刻度，充分摇匀，以测定
232 nm和268 nm处的吸光度。
8.1.3 在室温下，将试样溶解在几毫升环己烷中，然后用相同的溶剂稀释至刻度，充分摇匀，以测定
232 nm和270 nm处的吸光度。
8.1.4 确保8.1.2和8.1.3中制备的溶液完全透明。如果出现乳白色或浑浊，要迅速用滤纸过滤。
8.1.5 如果测试溶液中测试样品的浓度大于1 g/100 mL，应在测试报告中指出这一点。
8.2 测定
用测试溶液（8.1）将石英比色皿（5.1）润洗三次，将测试溶液倒入石英比色皿。溶剂作为参比，
使用分光光度计（5.1）测定在 220 nm～320 nm波长范围内的吸光度。可连续测定，也可每间隔1 nm～
2 nm进行测定，在最大吸收和最小吸收的范围附近，将间隔缩小至0.5 nm。
注：没有必要在整个波长范围内测定其吸光度。
如果吸光度超过0.8，应适当稀释溶液重新进行测定。
9 结果计算
9.1 特定波长下试样的紫外吸光度
特定波长下试样的紫外吸光度按式（1）计算：
式中：
2
K
=
E
cs
........................................ (1)
K
λ
——特定波长λ下的紫外吸光度；
E
λ
——波长λ下试样吸光度；
c ——测得溶液样品的浓度，单位为克每100毫升（g/100 mL）；
s ——比色杯的光程，单位为厘米（cm）。
注1：λ通常为232 nm、268 nm和270 nm；结果保留至小数点后两位。
9.2 紫外吸光度的变化，ΔK
根据委员会法规（EEC）第2568/91号
[5]
的分光光度法分析橄榄油，还涉及确定比消光度ΔK的变化，
ΔK按式（2）计算：
K=K
m
−
K
m−4
+K
m+4
2
................................. (2)
式中：
K
m
——波长m处的紫外吸光度，最大吸收波长取决于所用溶剂。
注2：结果保留至小数点后两位。
10 精密度
10.1 实验室间测试
多个实验室间的测试结果参见附录A。对于其他测试范围来说，这些实验数据可能是不适用的。
10.2 重复性
在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相
互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于重复性限（r）：232 nm处为0.026、268 nm处
为0.085的情况不得超过5%。
10.3 再现性
在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，对同一被测对象相互独立
进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于再现性限（R）：232 nm处为0.396、268 nm处为0.11
的情况不得超过5%。
11 测试报告
测试报告需说明：
——测试样品所需的所有有关信息；
——若已知采样方法，则注明；
——采用的检验方法及引用标准；
——本标准中没有具体说明的，或者被认为是可选性的，以及所有可能影响结果的操作细节；
——测定结果，如果进行了重复性试验，则列出最终结果。
3
附 录 A
（资料性附录）
实验室间比对试验统计结果
组织6家实验室对5个不同样品进行实验室间比对试验，建立了本方法的精密度。结果按GB/T 6379.1
和GB/T 6379.2统计分析，统计结果见表A.1-A.6。
表A.1 异辛烷中232 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值
K
232
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
1.883
0.075
4.5
0.210
0.276
14.6
0.772
B
6
6
36
2.132
0.012
0.5
0.032
0.286
13.4
0.802
C
6
6
36
3.197
0.059
1.8
0.165
0.385
12.1
1.079
D
6
6
36
3.283
0.198
6.0
0.553
0.496
15.1
1.390
E
6
6
36
2.858
0.031
1.0
0.087
0.356
12.4
0.996
表A.2 环己烷中232 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值 K
232
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
1.937
0.025
1.3
0.069
0.255
13.2
0.714
B
6
6
36
2.118
0.005
0.2
0.014
0.248
11.7
0.693
C
6
6
36
3.248
0.062
1.8
0.172
0.485
14.9
1.358
D
6
6
36
3.238
0.075
2.3
0.209
0.450
13.9
1.259
E
6
6
36
2.840
0.003
0.1
0.007
0.403
14.2
1.127
表A.3 异辛烷268 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
样品
A
6
6
B
6
6
C
6
6
D
6
6
E
6
6
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值 K
268
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
36
0.123
0.002
1.3
0.004
0.012
10.1
0.035
36
0.590
0.033
6.9
0.092
0.350
59.4
0.981
36
1.548
0.032
1.9
0.088
0.175
11.3
0.490
36
0.595
0.029
4.4
0.081
0.058
9.8
0.163
36
0.990
0.003
0.3
0.008
0.144
14.6
0.404
表A.4 环己烷中270 nm处的紫外吸收
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值 K
270
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
0.123
0.001
0.4
0.001
0.014
11.1
0.038
B
6
6
36
0.575
0.006
1.3
0.017
0.344
59.8
0.962
C
6
6
36
1.542
0.084
4.9
0.235
0.151
9.8
0.424
D
6
6
36
0.583
0.035
5.3
0.098
0.056
9.7
0.158
E
6
6
36
1.020
0.001
0.1
0.003
0.084
8.2
0.234
表A.5 环己烷中（270 ± 4）nm处吸光度值ΔK的变化
项目
实验室数量 n
P
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值变化
ΔK
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
样品
A
6
6
36
-0.002
0.001
24.2
0.002
0.004
182.6
0.010
B
6
6
36
0.063
0.005
15.9
0.015
0.051
79.8
0.142
C
6
6
36
0.143
0.028
17.8
0.078
0.031
21.6
0.087
D
6
6
36
0.032
0.001
3.60
0.003
0.004
11.8
0.010
E
6
6
36
0.103
0.028
23.0
0.072
0.020
19.1
0.055
表A.6 异辛烷中（268 ± 4）nm处吸光度值ΔK的变化
项目
实验室数量 n
P
样品
A
4
B
6
C
6
D
6
E
6
可接受的结果数量 n
p
所有实验室的结果数量 n
t
平均吸光度值变化
ΔK
重复性标准偏差 s
r
重复性变异系数 C
v,r
（%）
重复性限r
再现性标准偏差s
R
再现性变异系数 C
V,R
（%）
再现性限R
4
24
-0.001
0.0004
9.03
0.001
0.001
165.8
0.003
6
36
0.065
0.001
3.45
0.003
0.052
79.8
0.145
6
36
0.145
0.023
15.5
0.065
0.027
18.6
0.075
6
36
0.022
0.014
38.0
0.040
0.011
49.3
0.030
6
36
0.087
0.028
26.9
0.078
0.033
38.7
0.094