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对GBT4789.3—2008标准的理解与应用
2024年3月16日发(作者:忻宛畅)
研究与探讨 中国标准导报
CHINA STANDARDS REVlEW
对GB/T 4789.3—2008标准的理解与应用
裴鸣宇 陈晶
国家新颁布的GB/T 4789.3—2OO8《食品卫生
发酵管中利用胆盐作为抑菌剂,新标准中则以月桂
微生物检验大肠菌群计数》标准,在2009年3月
基硫酸盐胰蛋白胨肉汤中利用十二烷基硫酸钠(月
1日已正式实施了。
桂基)作为抑菌剂。两者比较,月桂基比胆盐更能
本人在学习与应用中理解并体会到,新标准与
有效地抑制革兰氏阳性菌的生长,同时比胆盐的选
GB/T 4789.3—2OO3相比主要不同点和在实施过
择性和稳定性好,抑制剂可抑制样品中目标菌株外
程中应注意的几点问题:
的一些杂菌,而有利于大肠菌群细菌的生长和挑
1 新标准将原标准拆分并改名称 选,但对大肠菌群中的某些菌株有时也会产生一些
新标准将原标准拆分为大肠菌群计数、粪大肠 抑制作用。有时抑菌剂在培养基中用量甚微,称量
菌群计数和大肠杆菌计数三个独立的标准方法。
时略有误差,即可对目标菌产生抑制作用,从而影
标准名称有所变化,将大肠菌群测定改为大肠菌群
响检测结果,因此抑菌剂的添加应严格按照标准方
计数。
法进行。
在新标准中除了MPN法还增加了大肠菌群平 4新标准将原标准中“报告每100 mL(g)大肠菌
板计数和纸片法,这些方法常常一步就能检测出大 群的MPN值”修改为“报告每1 mL(g)大肠菌群的
肠菌群的存在,而且使用的时问较短,但对于大肠
MPN值”
菌群含量低的样品这个方法不适用。杂菌污染高, 目前我国许多产品的卫生标准中大肠菌群还
大肠菌群含量低的样品应使用MPN法。
是以MPN/100 mL(g)表示,所以在执行新标准以
2新标准对样液的pH值有了范围规定
后得出的检验结果MPN/mI (g)必须换算成
各种食品都有一定酸碱范围,只有接近中性的 MPN/100 mI (g)才能与产品卫生标准相一致。
食品大多数微生物生长良好,过高或过低的pH值
例如:我们依据GB/T 4789.3~2008标准对面
对某些微生物生长繁殖不利,受到一定程度的限
包进行大肠菌群计数检验。首先,用无菌镊子夹
制。另一方面,微生物在食品内生长繁殖过程中也 去外包装,取外部及中心部分共25 g面包,放入
可使其pH值发生改变,从而导致微生物群类(菌
盛有225 mI 灭菌生理盐水的无菌均质器内,
相)的相应变化,在新标准中规定样液的pH值范
8 000 r/min ̄10 000 r/min均质1 rain~2 min之
围在6.5~7.5之间,必要时分别用1 mol/I NaOH
问,必要时分别用1 mol/I NaOH或1 mol/I HC1
或1 mol/I HC1以调节,在调节过程中不能使用浓
进行调节,制成1:10样品匀液,用1 mI 无菌吸管
度过高的酸或碱,严格遵守标准中要求的浓度,否 吸取1:10样液1 mI 沿吸管壁缓慢放入盛有
则浓度过高产生热量,细菌易损伤,造成检验结果
9 mI 灭菌生理盐水中,振摇试管制成1:100的样
的误差加大。
品匀液。
3新标准中MPN法培养基的改变
按以上操作程序制备1:1 000样品匀液。我
新标准中的MPN法是以旧标准中乳糖胆盐为 们按标准中要求选择三个稀释度的样液1:1O、
主要培养基改为以月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤为
1:100、1:1 000,各接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白
主要培养基。GB/T 4789.3 2003中以乳糖胆盐 胨肉汤(LST),每个稀释度 (下转第39页)
24
标准新干线 中国标准导报
CHINA STANDARDS REVIEW
171
1 72
GI3/T 24800.8 2OO9
GB/T 24800.9 2OO9
化妆品中甲氨嘌呤的测定 高效液相色谱法
化妆品中柠檬醛、肉桂醇、茴香醇、肉桂醛和香
素的测定气相色谱法
化妆品中十九种香料的测定 气相色谱质潜法
2O】O O5 O1
2O10 05 0】
173 GB/T 24800
1O 2OO9
2O1O O5 O1
174
1 75
l76
Gt3/T 24800
11—20O9
2一一2OO9
G]3/T 24800
l
化妆品中防腐剂苯甲醇的测定气相色谱法
2O10—05—01
2O10 05—01
2O10—05—01
2010 05—01
2O10 05 01
化妆品中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的测定
化妆品中、 硝酸盐的测定 离子色谱法
1000kV变电站监控系统技术规范
1000kV交流架空输电线路金具技术规范
GB/ T 24800
】3—20O9
177
l78
G]3/T 24833
2OO9
GB/T 24834
2OO9
179 G13/Z 24835
2OO9
1000kV气体绝缘金属封闭开关设备运行及维护
规程
2OlO—O5 Ol
1 8O GB/Z 24836—2OO9
l100kV气体绝缘金属封闭开关设备技术规范
2()1O O5 0l
2O1O O5一O1
181 GB/Z 24837 2OO9
1 100kV高压交流隔离开关和接地开关技术规范
1100kV高压交流断路器技术规范
1000kV交流系统用支柱绝缘子技术规范
1000kV交流系统用套管技术规范
1000kV交流系统用电容式电压互感器技术规范
182
183
G13/Z 24838 2OO9
GB/Z 24839—2OO9
2O1O—O5—01
2O1 O~O5一O1
2Ol0 O5—01
201O—O5一O1
2O1O O5 01
l84
185
186
G]3/z 24840 2009
GI3/Z 2484l一2OO9
GB/Z 24842 2OO9
1000kV特高压交流输变电工程过电压和绝缘
配合
1000kV单相油浸式自耦电力变压器技术规范
1000kV交流系统用油浸式并联电抗器技术规范
1000kV交流系统用无问隙金属氧化物避雷器技
术规范
l87 G13/Z 24843--2009
201O O5 0l
2O1O一05一O1
2O10 05 01
188
189
GB/Z 24844—2009
GB/Z 24845 2009
l90
】91
G13/Z 24846—2009
GB/Z 24847 2009
l000kV交流电气设备预防性试验规程
1000kV交流系统电压和无功电力技术导则
2OlO 05 Ol
2O1O一05 O1
,,,m,,,,,.1ll,Ip-,,,’,’''''lib'’',,',,,',','l ’,,'',,l’’l,,',',,'’’m,m,,,,',,’,,''''l',●,’,,’','
(上接第24页)
换用一次1 mI,无菌吸管,每管接种1 mI ,36℃±
1 oC培养48 h±2 h,观察管内是否有气泡产生,未
产气者为大肠菌群阴性,产气者则进行复发酵试
验,用接种环从所有发酵产气的LST肉汤之中分别
取培养物2环,接种于煌绿乳糖胆盐肉汤管中,36℃
量,并非稀释后的量,对固体样品更应注意,如固体
样品经1O倍稀释后,虽加入1 mI 的量,但实际其中
只有0.1 g样品,所以按以上操作进行检验时,采用3
个稀释度1:1O、1:100、1:1 000,在LST肉汤管中,
必须分别加入3管10 mI 样液(1:10),1 mI 样液
(1:100),1 mL样液(1:1 000),加入实际样品量
分别是1 g,0.1 g,0.01 g,查MPN检索表,
<O.3 MPN/g(标准中规定增大几倍检样量,结果
降低几倍),换算<O.3 MPN/g ̄H当于<30 MPN/
100 g,这样就与面包糕点的卫生标准中规定的大肠
±1℃培养48 h±2 h,观察产气情况,产气者即为大
肠菌群阳性,根据大肠菌群阳性管数,查MPN检索
表,报告每克样品中大肠菌群的MPN值;如果以上试
验LST肉汤管都没有产气,查MPN表结果是大肠菌
群计数<3.0 MPN/g,换算<3.0 MPN/g相当于
<300 MPN/100 g,但GB 7099--2003《糕点、面包
菌群计数相一致了。
但值得注意的是在加大检验量的同时,接种量
卫生标准》中大肠菌群要求是<30 MPN/i00 g,所
以<3 O(j MPN/100 g与<3O MPN/100 g两个数据
无法进行比较,不能判定是否合格。为了使检验
也相对增大了,例如:1:10的稀释度样液,如果检
样量增大到1 g(mL)接种量是l0 mL,新标准中规
结果与产品卫生标准换算后的MPN值相符,我
们在检验时不能采用MPN检查表给出的3个稀
释度即0.1 mL(g)、0.01 mI (g)、0.001 mL(g)应
定接种量如果超过1 mL,I ST肉汤用双料管,否则
的话,增大了I ST肉汤培养基稀释度,造成营养成
分不足,导致结果有误差。
该增大检验量,在MPN检索表第一栏阳性管数下
(作者单位:吉林省长春市产品质量监督检验院)
面列出的mL(g)是指原样品(包括液体和固体)的
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2024年3月16日发(作者:忻宛畅)
研究与探讨 中国标准导报
CHINA STANDARDS REVlEW
对GB/T 4789.3—2008标准的理解与应用
裴鸣宇 陈晶
国家新颁布的GB/T 4789.3—2OO8《食品卫生
发酵管中利用胆盐作为抑菌剂,新标准中则以月桂
微生物检验大肠菌群计数》标准,在2009年3月
基硫酸盐胰蛋白胨肉汤中利用十二烷基硫酸钠(月
1日已正式实施了。
桂基)作为抑菌剂。两者比较,月桂基比胆盐更能
本人在学习与应用中理解并体会到,新标准与
有效地抑制革兰氏阳性菌的生长,同时比胆盐的选
GB/T 4789.3—2OO3相比主要不同点和在实施过
择性和稳定性好,抑制剂可抑制样品中目标菌株外
程中应注意的几点问题:
的一些杂菌,而有利于大肠菌群细菌的生长和挑
1 新标准将原标准拆分并改名称 选,但对大肠菌群中的某些菌株有时也会产生一些
新标准将原标准拆分为大肠菌群计数、粪大肠 抑制作用。有时抑菌剂在培养基中用量甚微,称量
菌群计数和大肠杆菌计数三个独立的标准方法。
时略有误差,即可对目标菌产生抑制作用,从而影
标准名称有所变化,将大肠菌群测定改为大肠菌群
响检测结果,因此抑菌剂的添加应严格按照标准方
计数。
法进行。
在新标准中除了MPN法还增加了大肠菌群平 4新标准将原标准中“报告每100 mL(g)大肠菌
板计数和纸片法,这些方法常常一步就能检测出大 群的MPN值”修改为“报告每1 mL(g)大肠菌群的
肠菌群的存在,而且使用的时问较短,但对于大肠
MPN值”
菌群含量低的样品这个方法不适用。杂菌污染高, 目前我国许多产品的卫生标准中大肠菌群还
大肠菌群含量低的样品应使用MPN法。
是以MPN/100 mL(g)表示,所以在执行新标准以
2新标准对样液的pH值有了范围规定
后得出的检验结果MPN/mI (g)必须换算成
各种食品都有一定酸碱范围,只有接近中性的 MPN/100 mI (g)才能与产品卫生标准相一致。
食品大多数微生物生长良好,过高或过低的pH值
例如:我们依据GB/T 4789.3~2008标准对面
对某些微生物生长繁殖不利,受到一定程度的限
包进行大肠菌群计数检验。首先,用无菌镊子夹
制。另一方面,微生物在食品内生长繁殖过程中也 去外包装,取外部及中心部分共25 g面包,放入
可使其pH值发生改变,从而导致微生物群类(菌
盛有225 mI 灭菌生理盐水的无菌均质器内,
相)的相应变化,在新标准中规定样液的pH值范
8 000 r/min ̄10 000 r/min均质1 rain~2 min之
围在6.5~7.5之间,必要时分别用1 mol/I NaOH
问,必要时分别用1 mol/I NaOH或1 mol/I HC1
或1 mol/I HC1以调节,在调节过程中不能使用浓
进行调节,制成1:10样品匀液,用1 mI 无菌吸管
度过高的酸或碱,严格遵守标准中要求的浓度,否 吸取1:10样液1 mI 沿吸管壁缓慢放入盛有
则浓度过高产生热量,细菌易损伤,造成检验结果
9 mI 灭菌生理盐水中,振摇试管制成1:100的样
的误差加大。
品匀液。
3新标准中MPN法培养基的改变
按以上操作程序制备1:1 000样品匀液。我
新标准中的MPN法是以旧标准中乳糖胆盐为 们按标准中要求选择三个稀释度的样液1:1O、
主要培养基改为以月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤为
1:100、1:1 000,各接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白
主要培养基。GB/T 4789.3 2003中以乳糖胆盐 胨肉汤(LST),每个稀释度 (下转第39页)
24
标准新干线 中国标准导报
CHINA STANDARDS REVIEW
171
1 72
GI3/T 24800.8 2OO9
GB/T 24800.9 2OO9
化妆品中甲氨嘌呤的测定 高效液相色谱法
化妆品中柠檬醛、肉桂醇、茴香醇、肉桂醛和香
素的测定气相色谱法
化妆品中十九种香料的测定 气相色谱质潜法
2O】O O5 O1
2O10 05 0】
173 GB/T 24800
1O 2OO9
2O1O O5 O1
174
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Gt3/T 24800
11—20O9
2一一2OO9
G]3/T 24800
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化妆品中防腐剂苯甲醇的测定气相色谱法
2O10—05—01
2O10 05—01
2O10—05—01
2010 05—01
2O10 05 01
化妆品中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的测定
化妆品中、 硝酸盐的测定 离子色谱法
1000kV变电站监控系统技术规范
1000kV交流架空输电线路金具技术规范
GB/ T 24800
】3—20O9
177
l78
G]3/T 24833
2OO9
GB/T 24834
2OO9
179 G13/Z 24835
2OO9
1000kV气体绝缘金属封闭开关设备运行及维护
规程
2OlO—O5 Ol
1 8O GB/Z 24836—2OO9
l100kV气体绝缘金属封闭开关设备技术规范
2()1O O5 0l
2O1O O5一O1
181 GB/Z 24837 2OO9
1 100kV高压交流隔离开关和接地开关技术规范
1100kV高压交流断路器技术规范
1000kV交流系统用支柱绝缘子技术规范
1000kV交流系统用套管技术规范
1000kV交流系统用电容式电压互感器技术规范
182
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G13/Z 24838 2OO9
GB/Z 24839—2OO9
2O1O—O5—01
2O1 O~O5一O1
2Ol0 O5—01
201O—O5一O1
2O1O O5 01
l84
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G]3/z 24840 2009
GI3/Z 2484l一2OO9
GB/Z 24842 2OO9
1000kV特高压交流输变电工程过电压和绝缘
配合
1000kV单相油浸式自耦电力变压器技术规范
1000kV交流系统用油浸式并联电抗器技术规范
1000kV交流系统用无问隙金属氧化物避雷器技
术规范
l87 G13/Z 24843--2009
201O O5 0l
2O1O一05一O1
2O10 05 01
188
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GB/Z 24844—2009
GB/Z 24845 2009
l90
】91
G13/Z 24846—2009
GB/Z 24847 2009
l000kV交流电气设备预防性试验规程
1000kV交流系统电压和无功电力技术导则
2OlO 05 Ol
2O1O一05 O1
,,,m,,,,,.1ll,Ip-,,,’,’''''lib'’',,',,,',','l ’,,'',,l’’l,,',',,'’’m,m,,,,',,’,,''''l',●,’,,’','
(上接第24页)
换用一次1 mI,无菌吸管,每管接种1 mI ,36℃±
1 oC培养48 h±2 h,观察管内是否有气泡产生,未
产气者为大肠菌群阴性,产气者则进行复发酵试
验,用接种环从所有发酵产气的LST肉汤之中分别
取培养物2环,接种于煌绿乳糖胆盐肉汤管中,36℃
量,并非稀释后的量,对固体样品更应注意,如固体
样品经1O倍稀释后,虽加入1 mI 的量,但实际其中
只有0.1 g样品,所以按以上操作进行检验时,采用3
个稀释度1:1O、1:100、1:1 000,在LST肉汤管中,
必须分别加入3管10 mI 样液(1:10),1 mI 样液
(1:100),1 mL样液(1:1 000),加入实际样品量
分别是1 g,0.1 g,0.01 g,查MPN检索表,
<O.3 MPN/g(标准中规定增大几倍检样量,结果
降低几倍),换算<O.3 MPN/g ̄H当于<30 MPN/
100 g,这样就与面包糕点的卫生标准中规定的大肠
±1℃培养48 h±2 h,观察产气情况,产气者即为大
肠菌群阳性,根据大肠菌群阳性管数,查MPN检索
表,报告每克样品中大肠菌群的MPN值;如果以上试
验LST肉汤管都没有产气,查MPN表结果是大肠菌
群计数<3.0 MPN/g,换算<3.0 MPN/g相当于
<300 MPN/100 g,但GB 7099--2003《糕点、面包
菌群计数相一致了。
但值得注意的是在加大检验量的同时,接种量
卫生标准》中大肠菌群要求是<30 MPN/i00 g,所
以<3 O(j MPN/100 g与<3O MPN/100 g两个数据
无法进行比较,不能判定是否合格。为了使检验
也相对增大了,例如:1:10的稀释度样液,如果检
样量增大到1 g(mL)接种量是l0 mL,新标准中规
结果与产品卫生标准换算后的MPN值相符,我
们在检验时不能采用MPN检查表给出的3个稀
释度即0.1 mL(g)、0.01 mI (g)、0.001 mL(g)应
定接种量如果超过1 mL,I ST肉汤用双料管,否则
的话,增大了I ST肉汤培养基稀释度,造成营养成
分不足,导致结果有误差。
该增大检验量,在MPN检索表第一栏阳性管数下
(作者单位:吉林省长春市产品质量监督检验院)
面列出的mL(g)是指原样品(包括液体和固体)的
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