2024年3月27日发(作者：屈心宜)
第一部分：四溴双酚A（TBBPA）暴露对草鱼的毒性及抗氧化防御系统酶的影响
一、急性毒性实验
1、草鱼：选择大小均匀，行动活泼，体态完好，逆水性强的当年鱼种，雌雄各
半，实验室驯化培养后使用。
2、实验条件：实验容器为玻璃缸，盛水量2-3L/鱼，PH6-8，DO不少于4mg/L，
温度20-28
0
C，采用放置3天得自来水或清洁湖水。
3、剂量：查文献，根据受试生物的类似物的半数致死浓度或剂量，以3倍之差
的三个剂量组进行预实验。
4、急性毒性实验：根据预实验，缩小剂量范围，按照等对数间距，设置5-7个
剂量组和空白对照组。每组10尾，雌雄各半。每组均设平行组。静水停食实验。
染毒96h，前8小时内经常观察，之后定期观察，记录中毒反应和死亡时间。
5、LC
50
计算：采用改良寇氏法计算 LD
50
和可信限 ,计算各剂量组死亡率 ,然后
按下列公式计算:
LD
50
=Log
- 1
【Xm - i (∑P - 0 . 5)】
式中符号：Xm为最大剂量组剂量的对数
i为相邻两组剂量对数剂量之差 ,即: lgd
3
- lgd
2
=lgd
2
- lgd
1
P为各组死亡率 ,用小数表示 , ∑P为各组死亡率的总和。
n为每组动物数
lg LD
50
的标准误 ( Sx
50
)计算公式:
S
x 50
= i×【（∑P - ∑P
2
）/（n - 1）】
1/2
Sx
50
: lg LD
50
的标准误 , x
50
= lg LD
50
LD
50
的95%可信限 =LD
50
±4.5×【（∑P - ∑P
2
）/（n - 1）】
1/2
=lg
- 1
( x
50
± 1 . 96Sx
50
)
LD
50
的平均可信限 =LD
50
±(LD
50
高限 - LD
50
低限 ) /2
二、慢性毒性实验
1、剂量：根据急性毒性试验资料，并考虑环境中实际可能的暴露剂量，选择LD
50
的1 /1 000 ~ 1 /20中的3个剂量，作为慢性毒性试验的高、中和低剂量组，并
作空白对照。采用动态试验，以保持毒物浓度恒定和实验鱼生活条件良好。
2、观察指标：外部形态（体色、 体纹、 体表和鳍的变化）、行动（对外部刺激
的反应、 游泳状态及位置、 对饵料的反应）和死亡状况。
生长和生殖指标：测定全长、 体长和体重等，观察产卵数，孵化数、幼体成活
率等。
病理组织学检查：对实验鱼各脏器组织的病理变化进行检测。
3、数据处理：
用统计学方法处理检查和对照之间是否存在显著性差异，以确定最大可接受浓度
MATC，不产生影响的最高浓度NOEC和产生影响的最低浓度LOEC并计算AF
因子：AF=MATC/LC
50
2024年3月27日发(作者：屈心宜)
第一部分：四溴双酚A（TBBPA）暴露对草鱼的毒性及抗氧化防御系统酶的影响
一、急性毒性实验
1、草鱼：选择大小均匀，行动活泼，体态完好，逆水性强的当年鱼种，雌雄各
半，实验室驯化培养后使用。
2、实验条件：实验容器为玻璃缸，盛水量2-3L/鱼，PH6-8，DO不少于4mg/L，
温度20-28
0
C，采用放置3天得自来水或清洁湖水。
3、剂量：查文献，根据受试生物的类似物的半数致死浓度或剂量，以3倍之差
的三个剂量组进行预实验。
4、急性毒性实验：根据预实验，缩小剂量范围，按照等对数间距，设置5-7个
剂量组和空白对照组。每组10尾，雌雄各半。每组均设平行组。静水停食实验。
染毒96h，前8小时内经常观察，之后定期观察，记录中毒反应和死亡时间。
5、LC
50
计算：采用改良寇氏法计算 LD
50
和可信限 ,计算各剂量组死亡率 ,然后
按下列公式计算:
LD
50
=Log
- 1
【Xm - i (∑P - 0 . 5)】
式中符号：Xm为最大剂量组剂量的对数
i为相邻两组剂量对数剂量之差 ,即: lgd
3
- lgd
2
=lgd
2
- lgd
1
P为各组死亡率 ,用小数表示 , ∑P为各组死亡率的总和。
n为每组动物数
lg LD
50
的标准误 ( Sx
50
)计算公式:
S
x 50
= i×【（∑P - ∑P
2
）/（n - 1）】
1/2
Sx
50
: lg LD
50
的标准误 , x
50
= lg LD
50
LD
50
的95%可信限 =LD
50
±4.5×【（∑P - ∑P
2
）/（n - 1）】
1/2
=lg
- 1
( x
50
± 1 . 96Sx
50
)
LD
50
的平均可信限 =LD
50
±(LD
50
高限 - LD
50
低限 ) /2
二、慢性毒性实验
1、剂量：根据急性毒性试验资料，并考虑环境中实际可能的暴露剂量，选择LD
50
的1 /1 000 ~ 1 /20中的3个剂量，作为慢性毒性试验的高、中和低剂量组，并
作空白对照。采用动态试验，以保持毒物浓度恒定和实验鱼生活条件良好。
2、观察指标：外部形态（体色、 体纹、 体表和鳍的变化）、行动（对外部刺激
的反应、 游泳状态及位置、 对饵料的反应）和死亡状况。
生长和生殖指标：测定全长、 体长和体重等，观察产卵数，孵化数、幼体成活
率等。
病理组织学检查：对实验鱼各脏器组织的病理变化进行检测。
3、数据处理：
用统计学方法处理检查和对照之间是否存在显著性差异，以确定最大可接受浓度
MATC，不产生影响的最高浓度NOEC和产生影响的最低浓度LOEC并计算AF
因子：AF=MATC/LC
50