2024年4月12日发(作者:可靖儿)
.
Meso Scale Discovery ( MSD ) 将ELISA线性范围提高2-3个数
量级,灵敏度提高10-100倍
Percepta在针对550位北美和欧洲的顶级生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发
光技术的MSD ( Meso Scale Discovery ) 是最受欢迎的5大免疫分析品牌之一。
MSD电化
学发光技术与传统酶联免疫分析ELISA优势比照方下:
1. 更高灵敏度与更宽的线性范围:
传统酶联免疫分析ELISA主要基于酶标仪,酶标仪的灵敏度往往在10-1pg/ml。MSD
电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESO Sector 600或
Quickplex SQ 120。MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6 log。
传统ELISA常规线性范围在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-sensitivity试剂盒那么为
0.5-10pg/ml。对于一个生物学实验,往往要兼顾正常对照组与疾病组的样本,样本中
的待测蛋白浓度分布一般从零点几个pg到几千pg不等,所以一个ELISA试剂盒的线
性范围不能同时兼顾上下丰度蛋白的检测,需要非常多的预实验进展稀释度摸索,费
时费力。而MSD提供了从亚皮克级到几万皮克浓度的宽线性范围,有效将所有样本落
在最正确线性范围内,得到准确测定〔见以下图比对,红色条状为疾病样本,黄色条
状为正常参照组〕。同时MSD的灵敏度可达0.05pg/ml,对于目前有些疾病样本中待
测蛋白浓度下调的研究工程来说,更能够有效的发现疾病组与正常对照组的差异,实
现新的科学发现。
2. 节省样本用量,可实现多重检测。
传统ELISA所需样本量一般为50-100ul,如果
同时关注10个细胞因子的表达调控那么可能需要多
达500-1000ul的样本,对于很多ELISA实验来说
样本量就成了关键问题。
MSD通过点阵技术,在96孔石墨电极板里可
实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里
定制实现100指标/孔的筛选检测。满足了不同
的实验需求。在样本用量上,无论单指标或多
指标都只需≤25ul的样本,即可完成检测。为
珍稀样本的研究提供了更多的数据。
目前MSD可以在100ul的极其珍贵的脑脊液样
本中,复孔定量测定40种Biomarker,这是以往
技术都所不能实现的。
3. 均一性、重复性高:
MSD 板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月,为长
时间研究工程,提供了使用同一批号试剂的可能性。
4. 样本兼容度高,基质效应小:
MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,所以受样本性质
的影响就更小〔如粘稠样本,悬浊颗粒样本等〕,因此对于各类生物学样本的兼容度更高。
目前MSD平台上测定样本总类主要包括:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑
脊液,尿液,关节滑液,唾液,痰液,粪便提取液,眼睛房水,各类灌洗液等根本所有的
生物学样本。对于最简单的血浆样本来说,MSD也可兼容不同抗凝剂的血浆样本。大大降
低了实验所需样本收集上的难度。
此外基质效应会影响到实验准确性与灵敏度,MSD是目前唯一一个被国外科学家广泛认可
的根本无基质效应的免疫分析平台。
请参见: Immunol Res;DOI 10.1007/s12026-014-8491-6; r
5. 实验流程简便、快速、多元化
MSD提供了比ELISA更为便捷快速的实验流程,将加样等手动操作时间缩短至45分钟
以内,并为培养上清等高丰度样本快速检测,提供了只需2.5小时的一步法流程,解放了
劳动力,提高了科研效率。同时在MSD平台上由于特有的电化学发光技术,可有效控制
背景信号,可以实现免洗的实验流程。请见以下图MSD流程以及实验时间比较:
. v
.
一步法流程:
超敏实验流程
:
实验流程时间比对:
6. 信号稳定且不受显色顺序影响
ELISA在显色时,需要避光来保证信号稳定。同时,由于底物与终止液参加有先后时间差
异,会不可防止的产生因显色时间不一致导致的数据差异。
MSD由于基于电化学发光技术,信号分子SULFO-TAG需在电激发的情况下才能产生信
号,因此整个实验流程无需避光,不受实验操作人员技术水平差异的影响。此外,在实验
完成参加所有液体后,并不会被激发出任何信号。只有送入仪器,通过电极电激发前方才
产生信号,每孔激发与信号采集时长统一,防止了像ELISA底物与终止液参加顺序先后所
导致的数据差异,数据稳定度极高。请见以下图电化学发光平台示意图:
SULFO-TAG分子式
反响示意图电化学发光反响
7. 开放性平台,高载量的石墨电极,多样化实验方案,更节省的包被用量。
MSD平台所用的石墨电极板,为高分子聚合材料,外表与内部具有3D构造,能够提高有
效载量至传统的ELISA板的10-100倍。因此在板底可以固定蛋白、小肽、多糖、核酸、
病毒颗粒、细胞膜、活细胞等,实现不同的实验检测方案。
板底3D构造示意图
多元化实验方案
同时,由于载量不同以及外表亲疏水修饰的不同,MSD板在包被方案上可以使用传统
方法的Solution Coat,也可以采用Dot Coat的方法,将2-5ul蛋白点在板底中央进展包
被。蛋白用量只需要Solution Coat的1/10-1/5,且包被时间仅仅需要一个小时,省时省
力。
8.技术成熟可靠。欧美研究人员在10年前已经开场使用“Meso Scale Discovery〞替代
/升级ELISA了。
9.局部检测指标如下:
多因子检测组合
检测指标
. v
.
Human Biomarker 40-Plex Kit (1 Plate) V-PLEX™
bFGF, CRP, Eotaxin, Eotaxin-3, Flt-1, GM-CSF, ICAM-1,
IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-10, IL-12 p70, IL-12/IL-23p40, IL-
13, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-
8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-1α, MIP-1β,
PlGF, SAA, TARC, Tie-2, TNF-α, TNF-β, VCAM-1, VEGF,
VEGF-C, VEGF-D
bFGF, CRP, Eotaxin, Eotaxin-3, Flt-1, ICAM-1, IFN-γ, IL-
1α, IL-1β, IL-10, IL-12/IL-23p40, IL-13, IL-15, IL-16, IL-
17A, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-4,
MDC, MIP-1α, MIP-1β, PlGF, SAA, TARC, Tie-2, TNF-α,
TNF-β, VCAM-1, VEGF, VEGF-C, VEGF-D
Neuroinflammation Panel 1 (hu) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Human Cytokine 30-Plex Kit (1 Plate) V-PLEX™
Eotaxin, Eotaxin-3, GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-10, IL-
12 p70, IL-12/IL-23p40, IL-13, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-2,
IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4,
MDC, MIP-1α, MIP-1β, TARC, TNF-α, TNF-β, VEGF
Eotaxin-3, GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-12/IL-23p40,
IL-15, IL-16, IL-17A, IL-2, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-8 (HA),
IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-1α, MIP-1β, TARC,
TNF-β, VEGF
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-13, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, KC/GRO,
TNF-α
Eotaxin, Eotaxin-3, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4,
MDC, MIP-1α, MIP-1β, TARC
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-12 p70, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6,
KC/GRO, TNF-α
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-12 p70, IL-13, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8,
TNF-α
GM-CSF, IL-1α, IL-12/IL-23p40, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-5,
IL-7, TNF-β, VEGF
IFN-γ, IL-1β, IL-6, TNF-α
IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α
Eotaxin-3, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-
1α, MIP-1β, TARC
Eotaxin-3, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-
1α, MIP-1β, TARC
NHP Cytokine 24-Plex Kit (1 Plate) V-PLEX™
Proinflammatory Panel 1 (rat) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Chemokine Panel 1 (human) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Proinflammatory Panel1 (mouse) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Proinflammatory Panel1 (human) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Cytokine Panel 1 (human) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Human Proinflammatory Panel I (4-Plex) (1 Plate) V-
PLEX™
Human Proinflammatory Panel II (4-Plex) (1 Plate)
V-PLEX™
Chemokine Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Chemokine Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-PLEX™ Plus
. v
.
Proinflammatory Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Cytokine Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Angiogenesis Panel 1 (human) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Vascular Injury Panel 2(human) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Ab Peptide Panel 1 (4G8) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Ab Peptide Panel 1 (6E10) Kit (1 Plate) V-PLEX™
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-2, IL-6, IL-8
GM-CSF, IL-12/IL-23p40, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-5, IL-7,
TNF-β, VEGF
bFGF, Flt-1, PlGF, Tie-2, VEGF, VEGF-C, VEGF-D
CRP, ICAM-1, SAA, VCAM-1
Abeta 38, Abeta 40, Abeta 42
Abeta 38, Abeta 40, Abeta 42
. v
2024年4月12日发(作者:可靖儿)
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Meso Scale Discovery ( MSD ) 将ELISA线性范围提高2-3个数
量级,灵敏度提高10-100倍
Percepta在针对550位北美和欧洲的顶级生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发
光技术的MSD ( Meso Scale Discovery ) 是最受欢迎的5大免疫分析品牌之一。
MSD电化
学发光技术与传统酶联免疫分析ELISA优势比照方下:
1. 更高灵敏度与更宽的线性范围:
传统酶联免疫分析ELISA主要基于酶标仪,酶标仪的灵敏度往往在10-1pg/ml。MSD
电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESO Sector 600或
Quickplex SQ 120。MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6 log。
传统ELISA常规线性范围在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-sensitivity试剂盒那么为
0.5-10pg/ml。对于一个生物学实验,往往要兼顾正常对照组与疾病组的样本,样本中
的待测蛋白浓度分布一般从零点几个pg到几千pg不等,所以一个ELISA试剂盒的线
性范围不能同时兼顾上下丰度蛋白的检测,需要非常多的预实验进展稀释度摸索,费
时费力。而MSD提供了从亚皮克级到几万皮克浓度的宽线性范围,有效将所有样本落
在最正确线性范围内,得到准确测定〔见以下图比对,红色条状为疾病样本,黄色条
状为正常参照组〕。同时MSD的灵敏度可达0.05pg/ml,对于目前有些疾病样本中待
测蛋白浓度下调的研究工程来说,更能够有效的发现疾病组与正常对照组的差异,实
现新的科学发现。
2. 节省样本用量,可实现多重检测。
传统ELISA所需样本量一般为50-100ul,如果
同时关注10个细胞因子的表达调控那么可能需要多
达500-1000ul的样本,对于很多ELISA实验来说
样本量就成了关键问题。
MSD通过点阵技术,在96孔石墨电极板里可
实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里
定制实现100指标/孔的筛选检测。满足了不同
的实验需求。在样本用量上,无论单指标或多
指标都只需≤25ul的样本,即可完成检测。为
珍稀样本的研究提供了更多的数据。
目前MSD可以在100ul的极其珍贵的脑脊液样
本中,复孔定量测定40种Biomarker,这是以往
技术都所不能实现的。
3. 均一性、重复性高:
MSD 板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月,为长
时间研究工程,提供了使用同一批号试剂的可能性。
4. 样本兼容度高,基质效应小:
MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,所以受样本性质
的影响就更小〔如粘稠样本,悬浊颗粒样本等〕,因此对于各类生物学样本的兼容度更高。
目前MSD平台上测定样本总类主要包括:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑
脊液,尿液,关节滑液,唾液,痰液,粪便提取液,眼睛房水,各类灌洗液等根本所有的
生物学样本。对于最简单的血浆样本来说,MSD也可兼容不同抗凝剂的血浆样本。大大降
低了实验所需样本收集上的难度。
此外基质效应会影响到实验准确性与灵敏度,MSD是目前唯一一个被国外科学家广泛认可
的根本无基质效应的免疫分析平台。
请参见: Immunol Res;DOI 10.1007/s12026-014-8491-6; r
5. 实验流程简便、快速、多元化
MSD提供了比ELISA更为便捷快速的实验流程,将加样等手动操作时间缩短至45分钟
以内,并为培养上清等高丰度样本快速检测,提供了只需2.5小时的一步法流程,解放了
劳动力,提高了科研效率。同时在MSD平台上由于特有的电化学发光技术,可有效控制
背景信号,可以实现免洗的实验流程。请见以下图MSD流程以及实验时间比较:
. v
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一步法流程:
超敏实验流程
:
实验流程时间比对:
6. 信号稳定且不受显色顺序影响
ELISA在显色时,需要避光来保证信号稳定。同时,由于底物与终止液参加有先后时间差
异,会不可防止的产生因显色时间不一致导致的数据差异。
MSD由于基于电化学发光技术,信号分子SULFO-TAG需在电激发的情况下才能产生信
号,因此整个实验流程无需避光,不受实验操作人员技术水平差异的影响。此外,在实验
完成参加所有液体后,并不会被激发出任何信号。只有送入仪器,通过电极电激发前方才
产生信号,每孔激发与信号采集时长统一,防止了像ELISA底物与终止液参加顺序先后所
导致的数据差异,数据稳定度极高。请见以下图电化学发光平台示意图:
SULFO-TAG分子式
反响示意图电化学发光反响
7. 开放性平台,高载量的石墨电极,多样化实验方案,更节省的包被用量。
MSD平台所用的石墨电极板,为高分子聚合材料,外表与内部具有3D构造,能够提高有
效载量至传统的ELISA板的10-100倍。因此在板底可以固定蛋白、小肽、多糖、核酸、
病毒颗粒、细胞膜、活细胞等,实现不同的实验检测方案。
板底3D构造示意图
多元化实验方案
同时,由于载量不同以及外表亲疏水修饰的不同,MSD板在包被方案上可以使用传统
方法的Solution Coat,也可以采用Dot Coat的方法,将2-5ul蛋白点在板底中央进展包
被。蛋白用量只需要Solution Coat的1/10-1/5,且包被时间仅仅需要一个小时,省时省
力。
8.技术成熟可靠。欧美研究人员在10年前已经开场使用“Meso Scale Discovery〞替代
/升级ELISA了。
9.局部检测指标如下:
多因子检测组合
检测指标
. v
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Human Biomarker 40-Plex Kit (1 Plate) V-PLEX™
bFGF, CRP, Eotaxin, Eotaxin-3, Flt-1, GM-CSF, ICAM-1,
IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-10, IL-12 p70, IL-12/IL-23p40, IL-
13, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-
8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-1α, MIP-1β,
PlGF, SAA, TARC, Tie-2, TNF-α, TNF-β, VCAM-1, VEGF,
VEGF-C, VEGF-D
bFGF, CRP, Eotaxin, Eotaxin-3, Flt-1, ICAM-1, IFN-γ, IL-
1α, IL-1β, IL-10, IL-12/IL-23p40, IL-13, IL-15, IL-16, IL-
17A, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IP-10, MCP-1, MCP-4,
MDC, MIP-1α, MIP-1β, PlGF, SAA, TARC, Tie-2, TNF-α,
TNF-β, VCAM-1, VEGF, VEGF-C, VEGF-D
Neuroinflammation Panel 1 (hu) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Human Cytokine 30-Plex Kit (1 Plate) V-PLEX™
Eotaxin, Eotaxin-3, GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-10, IL-
12 p70, IL-12/IL-23p40, IL-13, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-2,
IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4,
MDC, MIP-1α, MIP-1β, TARC, TNF-α, TNF-β, VEGF
Eotaxin-3, GM-CSF, IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-12/IL-23p40,
IL-15, IL-16, IL-17A, IL-2, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-8 (HA),
IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-1α, MIP-1β, TARC,
TNF-β, VEGF
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-13, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, KC/GRO,
TNF-α
Eotaxin, Eotaxin-3, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4,
MDC, MIP-1α, MIP-1β, TARC
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-12 p70, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6,
KC/GRO, TNF-α
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-12 p70, IL-13, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8,
TNF-α
GM-CSF, IL-1α, IL-12/IL-23p40, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-5,
IL-7, TNF-β, VEGF
IFN-γ, IL-1β, IL-6, TNF-α
IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α
Eotaxin-3, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-
1α, MIP-1β, TARC
Eotaxin-3, IL-8 (HA), IP-10, MCP-1, MCP-4, MDC, MIP-
1α, MIP-1β, TARC
NHP Cytokine 24-Plex Kit (1 Plate) V-PLEX™
Proinflammatory Panel 1 (rat) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Chemokine Panel 1 (human) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Proinflammatory Panel1 (mouse) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Proinflammatory Panel1 (human) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Cytokine Panel 1 (human) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Human Proinflammatory Panel I (4-Plex) (1 Plate) V-
PLEX™
Human Proinflammatory Panel II (4-Plex) (1 Plate)
V-PLEX™
Chemokine Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Chemokine Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-PLEX™ Plus
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Proinflammatory Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Cytokine Panel 1 (NHP) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Angiogenesis Panel 1 (human) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Vascular Injury Panel 2(human) Kit (1 Plate) V-
PLEX™
Ab Peptide Panel 1 (4G8) Kit (1 Plate) V-PLEX™
Ab Peptide Panel 1 (6E10) Kit (1 Plate) V-PLEX™
IFN-γ, IL-1β, IL-10, IL-2, IL-6, IL-8
GM-CSF, IL-12/IL-23p40, IL-15, IL-16, IL-17A, IL-5, IL-7,
TNF-β, VEGF
bFGF, Flt-1, PlGF, Tie-2, VEGF, VEGF-C, VEGF-D
CRP, ICAM-1, SAA, VCAM-1
Abeta 38, Abeta 40, Abeta 42
Abeta 38, Abeta 40, Abeta 42
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