2024年4月22日发(作者：宏毅君)
PCR SuperMix HiFi(即用型)
使用说明书
Web:
Tel**************
Fax**************
Email:**********************
产品简介
GBI PCR SuperMix High Fidelity是一种预混有
DNA
聚合酶，盐，镁离子及
dNTPs
的即用型。使用本制品只需要
在制品溶液中加入模板和引物便可以进行
PCR
反应，简化了操作步骤，减少了
PCR
操作过程中的污染。
GBI PCR SuperMix High Fidelity特别适用于高特异性，高保真性的DNA扩增，如基因克隆或定点突变等。因为
本产品的
Taq DNA
聚合酶与具有校正功能的热聚合酶的混合使用可以实现扩增的高保真性，以及
anti-Taq
抗体的
使用能够在高温下实现"自动热启动"，从而达到高特异性扩增。由于本产品具有"自动热启动"的特性，故您完全
可以在室温下配制反应体系，而不影响产量及扩增的特异性。
主要特点
•
•
•
•
保真性比
Taq DNA
聚合酶高
6
倍
高产量
扩增片段长度长达
10 kb
产物含有平末端产物和
3-A'
产物(可以直接用于
T-A
克隆)
产品组分
说明：GBI PCR SuperMix HiFi 为1.1×浓度的反应液， 预留10%的体积可用于引物及
DNA
模板的添加。
组分：预混的
Taq DNA
聚合酶，热聚合酶，
Taq
抗体；
PCR
溶液；及稳定剂。
保存：产品在-20℃条件下可保存一年以上，无明显活性改变。反复冻融可能使其活性降低，使用频率高时融解后
请于
4 ℃
保存，使用前需充分化冻混匀。
产品用途
•
•
各种常规的
PCR
法扩增
DNA、cDNA
菌落直接
PCR
挑选阳性克隆
注：为方便用户，可向我们询问相关产品（载体、大肠杆菌、基因组文库、
cDNA
文库等）
订购信息
产品名称
PCR SuperMix HiFi
PCR SuperMix HiFi
PCR SuperMix HiFi
编号
GB3001-40
GB3002-80
GB3003-160
规格
1 × 1 ml ( 25 µl × 40次反应)
2 × 1 ml
( 25 µl × 80次反应)
4 × 1 ml ( 25 µl × 160次反应)
Tel： Fax： Email：**********************
操作过程
1. 将
PCR SuperMix HiFi
在室温下充分融解混匀， 并短暂离心将其离至管底。
2. 按下列体系进行配制：
PCR SuperMix，1.1X
体积
22.5 µl
0.25-1.0 µl
0.25-1.0 µl
0.5-2 µl
25 µl
体积
45 µl
0.5–2.0 µl
0.5–2.0 µl
1–4 µl
50 µl
终浓度
1X
0.1–1.0 µM
0.1–1.0 µM
< 300 ng
Forward引物，10 µM
Reverse引物，10 µM
DNA 模板
总体积
3. 轻轻混匀样品并离心至管底。
4. 如果PCR 仪没有使用热盖，反应管内需加25
µl
石蜡油。请使用推荐的反应条件进行
PCR
扩增：
预变性
变性
退火
延伸
最后延伸
温度
94°C
94°C
Tm-5°C
68–72°C
68–72°C
时间
1-3 min
30 s
30 s
1 min/kb
10 min
循环度
1
25-30
25-30
25-30
1
常见问题
PCR产物非常少或没有特异性条带
1. 引物设计不佳。请选择适当的引物设计软件进行引物设计，注意引物的
GC
含量、二级结
构、二聚体、退火温度、长度、特异性等方面的问题。
2. 待扩增片断
GC
含量偏高。
GC
含量较高的情况下
PCR
会变得相对比较困难，此时可以使用
适合扩增高
GC
含量
DNA
片断的
GC-rich buffer
，并相应地根据
GC-rich buffer
的要求或说明调
整
PCR
反应参数的设置。
3. 退火温度不佳。如果有温度梯度
PCR
仪，则可以设置退火的温度梯度，摸索退火的最佳温
度。如果没有温度梯度
PCR
仪，则可以通过多次
PCR
反应摸索最佳的退火温度。
4. 延伸时间不足。可按照每
1kb
片断延伸1分钟进行设置，对于较难扩增的片断可以设置
为每
1kb
片断延伸1.5-2分钟。
5. 模板中含有抑制
PCR
反应的物质。可以用适当的
DNA
纯化方法纯化模板
DNA
。
当产生较多非特异性条带
设置退火的温度梯度，摸索退火的最佳温度。
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2024年4月22日发(作者：宏毅君)
PCR SuperMix HiFi(即用型)
使用说明书
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产品简介
GBI PCR SuperMix High Fidelity是一种预混有
DNA
聚合酶，盐，镁离子及
dNTPs
的即用型。使用本制品只需要
在制品溶液中加入模板和引物便可以进行
PCR
反应，简化了操作步骤，减少了
PCR
操作过程中的污染。
GBI PCR SuperMix High Fidelity特别适用于高特异性，高保真性的DNA扩增，如基因克隆或定点突变等。因为
本产品的
Taq DNA
聚合酶与具有校正功能的热聚合酶的混合使用可以实现扩增的高保真性，以及
anti-Taq
抗体的
使用能够在高温下实现"自动热启动"，从而达到高特异性扩增。由于本产品具有"自动热启动"的特性，故您完全
可以在室温下配制反应体系，而不影响产量及扩增的特异性。
主要特点
•
•
•
•
保真性比
Taq DNA
聚合酶高
6
倍
高产量
扩增片段长度长达
10 kb
产物含有平末端产物和
3-A'
产物(可以直接用于
T-A
克隆)
产品组分
说明：GBI PCR SuperMix HiFi 为1.1×浓度的反应液， 预留10%的体积可用于引物及
DNA
模板的添加。
组分：预混的
Taq DNA
聚合酶，热聚合酶，
Taq
抗体；
PCR
溶液；及稳定剂。
保存：产品在-20℃条件下可保存一年以上，无明显活性改变。反复冻融可能使其活性降低，使用频率高时融解后
请于
4 ℃
保存，使用前需充分化冻混匀。
产品用途
•
•
各种常规的
PCR
法扩增
DNA、cDNA
菌落直接
PCR
挑选阳性克隆
注：为方便用户，可向我们询问相关产品（载体、大肠杆菌、基因组文库、
cDNA
文库等）
订购信息
产品名称
PCR SuperMix HiFi
PCR SuperMix HiFi
PCR SuperMix HiFi
编号
GB3001-40
GB3002-80
GB3003-160
规格
1 × 1 ml ( 25 µl × 40次反应)
2 × 1 ml
( 25 µl × 80次反应)
4 × 1 ml ( 25 µl × 160次反应)
Tel： Fax： Email：**********************
操作过程
1. 将
PCR SuperMix HiFi
在室温下充分融解混匀， 并短暂离心将其离至管底。
2. 按下列体系进行配制：
PCR SuperMix，1.1X
体积
22.5 µl
0.25-1.0 µl
0.25-1.0 µl
0.5-2 µl
25 µl
体积
45 µl
0.5–2.0 µl
0.5–2.0 µl
1–4 µl
50 µl
终浓度
1X
0.1–1.0 µM
0.1–1.0 µM
< 300 ng
Forward引物，10 µM
Reverse引物，10 µM
DNA 模板
总体积
3. 轻轻混匀样品并离心至管底。
4. 如果PCR 仪没有使用热盖，反应管内需加25
µl
石蜡油。请使用推荐的反应条件进行
PCR
扩增：
预变性
变性
退火
延伸
最后延伸
温度
94°C
94°C
Tm-5°C
68–72°C
68–72°C
时间
1-3 min
30 s
30 s
1 min/kb
10 min
循环度
1
25-30
25-30
25-30
1
常见问题
PCR产物非常少或没有特异性条带
1. 引物设计不佳。请选择适当的引物设计软件进行引物设计，注意引物的
GC
含量、二级结
构、二聚体、退火温度、长度、特异性等方面的问题。
2. 待扩增片断
GC
含量偏高。
GC
含量较高的情况下
PCR
会变得相对比较困难，此时可以使用
适合扩增高
GC
含量
DNA
片断的
GC-rich buffer
，并相应地根据
GC-rich buffer
的要求或说明调
整
PCR
反应参数的设置。
3. 退火温度不佳。如果有温度梯度
PCR
仪，则可以设置退火的温度梯度，摸索退火的最佳温
度。如果没有温度梯度
PCR
仪，则可以通过多次
PCR
反应摸索最佳的退火温度。
4. 延伸时间不足。可按照每
1kb
片断延伸1分钟进行设置，对于较难扩增的片断可以设置
为每
1kb
片断延伸1.5-2分钟。
5. 模板中含有抑制
PCR
反应的物质。可以用适当的
DNA
纯化方法纯化模板
DNA
。
当产生较多非特异性条带
设置退火的温度梯度，摸索退火的最佳温度。
Tel： Fax： Email：**********************