2024年5月13日发(作者：尔玉宸)
第３５卷第６期
江西师范大学学报（自然科学版）
Ｖｂ１．３５ＮＯ．６
２０１１年１ １月
ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＪＩＡＮＧＸＩ ＮＯＲＭＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＮＡＴＵＲＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥ）
ＮＯｖ．２０ｌｌ
文章编号：｛０００－５８６２（２０１ １）０６．０５７０—０４
大蒜提取物中总酚含量及其抗氧化活性研究
武宇芳，乔丽钧，赵二劳
（忻州师范学院化学系，山西忻州０３４０００）
摘要：分别以水、体积分数为５０％的乙醇、加酶水和加酶的体积分数为５０％的乙醇为溶剂，采用超声波提取
大蒜，用Ｆｏｌｉｎ—Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ法测定提取物中总酚含量，研究提取物对ＤＰＰＨ・、・ＯＨ和Ｏ 的清除能力．实验结果表
明：提取剂水、体积分数为５０％的乙醇、加酶水和加酶的体积分数为５０％的乙醇的超声波在１００ ｇ大蒜的提取
物中总酚含量依次为１１２．７、１０２．４、１７１．１和１３０．８ ｍｇ．４种提取物对ＤＰＰＨ・、・ＯＨ和Ｏ；均具有较强的清除能
力，表明其均具有较强的抗氧化活性．大蒜提取物抗氧化活性与其总酚含量呈明显的量效关系．
关键词：大蒜；超声波；纤维素酶；总酚；抗氧化
中图分类号：Ｒ ２８４．２ 文献标识码：Ａ
有限公司）；ＫＱ．４００ＫＤＥ型高功率数控超声波清洗
０ 引言
器（昆山市超声仪器有限公司）；ｐＨＳ一３７Ｃ数显ｐＨ计
大蒜为百合科葱属植物蒜 Ｉｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）的
（上海天达仪器有限公司）．纤维素酶（北京奥博星生
地下鳞茎．大蒜中含有多酚类物质等多种活性成分，
物技术有限责任公司）；１，１－二苯基一２．苦肼基（ＤＰＰＨ・）
具有抗菌抗病毒、提高机体免疫力、降血脂和抗动
（日本东京化成工业株式会社）；酚试剂（上海源聚生
脉粥样硬化以及抗肿瘤等活性功能【１ １．近年来国
物科技有限公司，生化试剂）；没食子酸（Ａ．Ｒ．，天津
内外学者对大蒜中大蒜素和多糖的提取分离研究较
市光复精细化工研究所）．其它试剂均为国产分析纯，
多ｌ３～ｉ，对火蒜中多酚的研究鲜见报道．多酚类物质
实验用水为２次蒸馏水．
作为植物中广泛存在的一类酚羟基结构的化合物，
１．３大蒜提取物的制备
具有独特的生理和药理活性，在抗肿瘤、抗病毒及延
取新鲜大蒜，去皮捣碎成蒜泥，取蒜泥每份约
缓组织和人体衰老等方面都具有良好的作用［７。 １．本
１０ ｇ，精确称定，分别以１００ ｍＬ水、１００ ｍＬ体积分
文分别以水、体积分数为５０％的乙醇、加纤维素酶的
数为５０％的乙醇、１００ ｍＬ加０．５ ｇ纤维素酶的水和
水和加纤维素酶的体积分数为５０％的乙醇为溶剂，
１００ ｍＬ加０．５ ｇ纤维素酶的体积分数为５０％乙醇为
利用超声波法提取大蒜，测定了提取物中总多酚含
提取剂，在温度５Ｏ℃、超声波功率２００ Ｗ的条件下，
量，并采用清除ＤＰＰＨ・、ＯＨ・及Ｏｉ法对４种提取物
超声提取６０ ｒａｉｎ，提取液过滤后定容为１００ ｍＬ，置
的抗氧化活性进行了研究，以期为大蒜资源的综合
冰箱中冷藏保存，待用．
利用和大蒜中多酚类物质开发应用提供理论依据．
１．４大蒜提取物总酚含量测定方法
总酚含量的测定采用Ｆｏｌｉｎ—Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ法【１引，以
１材料与方法
没食子酸为标准品．实验确定的回归方程为：Ａ：
０．０９２ ２Ｃ十０．０１ １ ６，相关系数ｒ＝０．９９９ ７，其中ｃ为没食
１．１材料
子酸的质量浓度（￣ｔｇ／ｍＬ）．没食子酸浓度ｃ在２．２～
大蒜：购于当地农贸市场，为本地产的白皮蒜．
ｌ３．２￣ｔｇｌｍＬ的范围内与吸光度呈良好线性关系．精
１．２仪器与试剂
密称取０．６ ｍＬ大蒜提取液，按实验方法测定吸光度，
７２３型可见分光光度计（上海光谱仪器有限公
由回归方程计算总酚含量．大蒜提取物总酚含量以
司）；ＡＬｌ０４电子分析天平（梅特勒．托利多仪器上海 每１００ ｇ大蒜中含相当于没食子酸的毫克数表示．
收稿日期：２０１１．０７—０７
基金项目：山两省高校科技开发研究（２００６１１０４１）资助项目．
作者简介：赵二劳（１９５２ ），男，山两原平人，教授，主要从事天然产物活性成分提取分离研究
第６期 武字芳，等：大蒜提取物中总酚含量及其抗氧化活性研究 ５７１
１．５大蒜提取物抗氧化活性测定
１．５．１对ＤＰＰＨ．清除率的Ｈ４定［１３－１４】ＤＰＰＨ・是一种
稳定的有机自由基，溶于乙醇时溶液呈深紫色，该
溶液在波长５１７ ｎｍ处有强的吸收．当有自由基清
除剂存在时，可与其单电子配对使其溶液褪色吸收
降低，其褪色程度与其所接受的电子数成线性关系，
因此可以用光度法检测自由基的清除情况，从而评
价自由基清除剂即样品的抗氧化能力．
实验时，准确吸取一定量的大蒜提取液于１ ０ ｍＬ
比色管中，然后加入２．０ ｍＬ浓度为０．８ ｍｇ／ｍＬ的
ＤＰＰＨ・溶液，用水定容至刻度，在室温下反应３０ ｍｉｎ
后，于波长５ｌ７ ｎｍ处测定吸光度．按下式计算清
除率：清除率＝［１— 广 ，） ｏ］×１００％，其中／４０为未
加大蒜提取液时溶液的吸光度；Ａ 为大蒜提取液后
溶液的吸光度；Ａ，为大蒜提取液的吸光度．
１．５．２ 羟基自由基（－ＯＨ）清除率的测定 以Ｆｅｎｔｏｎ
反应建立实验体系模型【 】．Ｈ２Ｏ２与Ｆｅ 混合能产
生具有很高的反应活性的・ＯＨ，但・ＯＨ存活时间短，
如在反应体系中加入水杨酸，就能与・ＯＨ反应并生
成紫红色产物，该紫红色产物在５１０ ｎｍ波长处有
强吸收，若在此反应体系中加入具有清除・ＯＨ功能
的被测物，就会与水杨酸竞争・ＯＨ，使有色产物生
成量减少，导致反应体系在５１０ ｎｍ波长处吸收减
弱．采用固定反应时间法，分别测定加入与未加人
大蒜提取物溶液反应体系的吸光度，就可测定大蒜
提取物对・ＯＨ的清除能力，以此评价大蒜提取物的
抗氧化性能．・ＯＨ的清除率计算公式为：清除率＝
。 ｏ×１００％，其中 ，为加人大蒜提取物溶液
后・ＯＨ体系的吸光度；Ａ０为未加大蒜提取物溶液
时・ＯＨ体系的吸光度．
实验时，在１０ ｍＬ比色管中，依次加入１．０ ｍＬ
浓度为７．５０￣１０ ｍｏｌ／Ｌ的硫酸亚铁溶液、１．０ ｍＬ浓
度为７．５１×１０ ｍｏｌ／Ｌ的水杨酸溶液、１．０ ｍＬ质量分
数为０．１％的Ｈ２０２溶液，以水定容至刻度，置于４０℃
恒温水浴中反应１ ｈ后，在波长５１０ ｎｌｎ处测定其吸
光度为Ａｏ，在上述体系中分别加人不同量的大蒜提
取物溶液测定吸光度为 ． ．
１．５－３ 超氧阴离子自由基（Ｏ ）清除率的测定 大
蒜提取物对超氧阴离子自由基（０ ）清除率的测定
参考文献［１６］的方法，即由改良的邻苯三酚自氧化
法产生Ｏ；．实验时，将４．５ ｍＬ ｐｉｔ值为８．３４的磷酸
盐缓冲溶液与４．５ ｍＬ水混匀后置于３０℃水浴中保
温２０ ｍｉｎ，取出后立即加入３０℃预热的１．０ ｍＬ浓
度为２．１０￣１０ ｍｏｌ／Ｌ的邻苯三酚溶液，迅速摇匀，
在波长３２５ ｎｍ处，每隔３０ Ｓ测一次吸光度，并计算
线性范围内每分钟吸光度的增加值 ｏ．用大蒜提
取物溶液代替等量的蒸馏水，按上述方法测定并计
算△ ．清除率按下式计算：
清除率＝（ＡＡｏ—ＡＡｆ）／△Ａ０×１００％．
２结果与分析
２．１大蒜提取物总酚含量测定
按上述实验方法测定大蒜提取液中总酚含量，
结果如表１．由表１可见，在相同的超声波提取条件
下，纤维素酶辅助超声波水提物及醇提物中总酚含
量明显高于水提物及醇提物中总酚含量．其原因可
能是由于大蒜成分中含纤维素，纤维素酶的加入可
以温和地分解、破坏细胞壁，加速花青素等多酚类
物质的释放，从而导致提取物中总酚含量的增加【ｌ 。
表ｌ １００ ｇ大蒜提取物中总酚含量（，ｚ＝３）
２．２抗氧化性的测定
２．２．１ 对ＤＰＰＨ・清除率的测定 大蒜不同溶剂提
取物对ＤＰＰＨ・的清除率如图１所示．由图１可见，各
提取物对ＤＰＰＨ・均具有较强的清除能力，且对
ＤＰＰＨ・清除率都随大蒜提取物用量的增大而增强，
具有明显的量效关系．说明其清除ＤＰＰＨ・的能力与
图１ 大蒜提取物对ＤＰＰＨ・的清除率
江西师范大学学报（自然科学版）
提取液巾总酚含量相关．大蒜提取物对ＤＰＰＨ・清除
６．７％、水提法的５．５％和醇提法的３．５％．表明对超氧
阴离子自由基的清除率与提取液中总酚含量正相关．
能力大４￣ＩＩ．ｉ序为：酶助水提法＞酶助醇提法＞水提法＞
醇提法．
２．２，２ 对羟基自由基（・ＯＨ）清除率的测定 按实验
方法测定大蒜提取物对・ＯＨ清除率，结果如图２所示
由图２可见，大蒜提取物对・ＯＨ的清除能力略弱于
３ 结论
大蒜中总酚含量较高，以加纤维素酶的水为提
取剂，超声波提取法是大蒜中总酚提取的较好方法．
实验结果表明，１００ ｇ大蒜的提取物中总酚含量分别
对ＤＰＰＨ・的清除能力．各提取物对・ＯＨ的清除率都
随着大蒜提取物用量的增大而增大．大蒜提取物
对・ＯＨ的清除能力大小顺序为：酶助水提法＞酶助醇
提法＞水提法＞醇提法．各提取物对・ＯＨ清除能力大
小与对ＤＰＰＨ・的清除能力的实验结果一致．这也说
明其清除・ＯＨ的能力与提取液中总酚含量相关．
２．２．３ 对超氧阴离子自由基（０ ）清除率的测定对
超氧阴离子自由基清除率的实验结果如图３所示．由
图３可见，大蒜各提取物均具有较强的清除超氧阴
离子自由基能力，随着大蒜提取物溶液浓度的增大，
清除能力显著提高，且具有明显的量效关系．在相
同浓度下，酶助水提法提取物对超氧阴离子自由基
清除率最高可达９８．１％，明显高于酶助醇提法的
蔷
鬟
ｍＬ
图２大蒜提取物对羟基自由基的清除率
静
赠
ｎＬ
图３ 大蒜提取物对超氧阴离子自由基的清除率
为：酶助水提法１７１．１ ｍｇ；酶助醇提法１３０．８ ｍｇ；水
提法１ １２．７ ｍｇ；醇提法１０２．４ ｍｇ／１Ｏ０ ｇ．
抗氧化活性实验发现，大蒜提取物均能有效
地清除ＤＰＰＨ・、・ＯＨ和Ｏｉ，且呈明显的量效关系．
表明大蒜提取物具有较强的抗氧化能力，且其抗
氧化能力与总酚含量正相关．大蒜提取物抗氧化
能力大小顺序为：酶助水提法＞酶助醇提法＞水提
法＞醇提法．
４ 参考文献
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品科学，２００６，２７（２）：１４７—１５０．
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究与开发，２０１ １，３２（３）：１０—１２．
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ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｔｏ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ【Ｊ１．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎ—
ｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０００，２７（３）：１ ５２—１ ５９．
【８］Ｔｉａｎ Ｓ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｋ，Ｋａｙａｈａｒａ Ｈ－Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｒｎ—
ｐｏｕｎｄｓ ｉｎ ｗｈｉｔｅ ｒｉｃｅ，ｂｒｏｗｎ ｒｉｃｅ，ａｎｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ ｂｒｏｗｎ ｒｉｃｅ［Ｊ】．
Ｊ Ａ ｃ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ，２００４，５２（１５）：４８０８—４８１３．
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【１０】Ｃｈａｎｄｒａ Ｍｏｈａｎ Ｋ Ｖ Ｐ＇Ｇｕｎａｓｅｋａｒａｎ Ｖａｒａｌａｋｓｈｍｉ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｉｎ
ｖｉｔｒｏｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｌｃａｎｃｅｒ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌａｃｔｏ—ｆｅｒｒｉｎ ａｎｄ ｔｅａ
ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ Ｏｉｌ ｏｒａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ…．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ
第６期 武宇芳，等：大蒜提取物中总酚含量及其抗氧化活性研究 ５７３
Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２００７，３１（６）：５９９—６０８．
【ｌ４］张业，邹碧群，方毅林，等．十大功劳果实提取物抗氧化活性
【１ １］Ｋｈａｎ Ｎ，Ｍｕｋｈｔａｒ Ｈ，Ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｏｒ ｈｅａｌｔｈ ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ［Ｊ］．
研究［Ｊ］．广西师范大学学报：自然科学版，２０１１，２９（１）：４３—４６．
Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００７，８１（７）：５１９—５３３．
［１５］王金梅，张旭，康文艺．苍术及其麸炒品抗氧化活性研究［Ｊ］．
［１２】高畅，程大海，高欣，等．蓝莓果渣提取物总酚含量及抗氧化
精细化工，２０１０，２７（７）：６６４．６６６．
活性研究［Ｊ】．植物研究，２０１０，３０（２）：２５３－２５６．
［１６］张京芳，王冬梅，周丽，等．香椿叶抗氧化物提取工艺优化与
［１３】赵二劳，刘宣，武宇芳，等．山楂抗氧化性及其协同作用
抗氧化活性分析【Ｊ］．农业机械学报，２００７，３８（８）：９７—１００．
的研究［Ｊ］＿江西师范大学学报：自然科学版，２００７，３１（６）：
【１７］吴春，张艳．纤维素酶法提取葡萄籽中原花青素的研究【Ｊ］．
５７０—５７】．
食品科学，２００６，２７（１０）：２５８—２６０．
Ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｔｏｔａｌ Ｐｈｅｎｏｌ ａｎｄ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ
Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｇａｒｌｉｃ Ｅｘｔｒａｃｔｓ
ＷＵ Ｙｕ—ｆａｎｇ，ＱＩＡＯ Ｌｉ－ｊｕｎ，ＺＨＡＯ Ｅｒ－ｌａｏ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｘｉｎｚｈｏｕ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｚｈｏｕ Ｓｈａｎｘｉ ０３４０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｇａｒｌｉｃ ｂｙ
ｗａｔｅｒ，５０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｗａｔｅｒ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ａｎｄ ５０％ｅｔｈａｎｏｌ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
．
Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔｓ
ｏｆ ｐｈｅｎｏｌ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｕｓｉｎｇ Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｌｅａｒｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ
ＤＰＰＨ‘，‘ＯＨ ａｎｄ Ｏ三ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｕｎｄｅｒ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｒａｄｉａｔｉｏｎ，ｕｓｉｎｇ ｗａｔｅｒ，５０％ｅｔｈａｎｏｌ，
ｗａｔｅｒ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ｏｒ ５０％ｅｔｈａｎｏｌ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ａｓ ｅｘｔｒａｃｔａｎｔｓ
，
ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｐｈｅｎｏｌ ｗａｓ １ １ ２．７ ｍｇ，
１０２．４ ｍｇ，１７１．１ ｍｇ ａｎｄ １３０．８ ｍｇ ｐｅｒ １００ ｇ ｇａｒｌｉｃ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａｌｌ ｆｏｕｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ｃｌｅａｒｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｎ
ＤＰＰＨ’，‘ＯＨ ａｎｄ Ｏ ｊ，ｗｈｉｃｈ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅｙ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ａｎｔｉ—ｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ．Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｔｈｅ ａｎｔｉ．ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｙｔ
ｉｓ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌ ｔｏ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｇａｒｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｇａｒｌｉｃ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｗａｖｅ；ｃｅｌｌｕｌａｓｅ；ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ；ａｎｔｉｏ—ｘｉｄａｔｉｏｎ
（责任编辑：刘显亮）
2024年5月13日发(作者：尔玉宸)
第３５卷第６期
江西师范大学学报（自然科学版）
Ｖｂ１．３５ＮＯ．６
２０１１年１ １月
ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＪＩＡＮＧＸＩ ＮＯＲＭＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＮＡＴＵＲＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥ）
ＮＯｖ．２０ｌｌ
文章编号：｛０００－５８６２（２０１ １）０６．０５７０—０４
大蒜提取物中总酚含量及其抗氧化活性研究
武宇芳，乔丽钧，赵二劳
（忻州师范学院化学系，山西忻州０３４０００）
摘要：分别以水、体积分数为５０％的乙醇、加酶水和加酶的体积分数为５０％的乙醇为溶剂，采用超声波提取
大蒜，用Ｆｏｌｉｎ—Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ法测定提取物中总酚含量，研究提取物对ＤＰＰＨ・、・ＯＨ和Ｏ 的清除能力．实验结果表
明：提取剂水、体积分数为５０％的乙醇、加酶水和加酶的体积分数为５０％的乙醇的超声波在１００ ｇ大蒜的提取
物中总酚含量依次为１１２．７、１０２．４、１７１．１和１３０．８ ｍｇ．４种提取物对ＤＰＰＨ・、・ＯＨ和Ｏ；均具有较强的清除能
力，表明其均具有较强的抗氧化活性．大蒜提取物抗氧化活性与其总酚含量呈明显的量效关系．
关键词：大蒜；超声波；纤维素酶；总酚；抗氧化
中图分类号：Ｒ ２８４．２ 文献标识码：Ａ
有限公司）；ＫＱ．４００ＫＤＥ型高功率数控超声波清洗
０ 引言
器（昆山市超声仪器有限公司）；ｐＨＳ一３７Ｃ数显ｐＨ计
大蒜为百合科葱属植物蒜 Ｉｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）的
（上海天达仪器有限公司）．纤维素酶（北京奥博星生
地下鳞茎．大蒜中含有多酚类物质等多种活性成分，
物技术有限责任公司）；１，１－二苯基一２．苦肼基（ＤＰＰＨ・）
具有抗菌抗病毒、提高机体免疫力、降血脂和抗动
（日本东京化成工业株式会社）；酚试剂（上海源聚生
脉粥样硬化以及抗肿瘤等活性功能【１ １．近年来国
物科技有限公司，生化试剂）；没食子酸（Ａ．Ｒ．，天津
内外学者对大蒜中大蒜素和多糖的提取分离研究较
市光复精细化工研究所）．其它试剂均为国产分析纯，
多ｌ３～ｉ，对火蒜中多酚的研究鲜见报道．多酚类物质
实验用水为２次蒸馏水．
作为植物中广泛存在的一类酚羟基结构的化合物，
１．３大蒜提取物的制备
具有独特的生理和药理活性，在抗肿瘤、抗病毒及延
取新鲜大蒜，去皮捣碎成蒜泥，取蒜泥每份约
缓组织和人体衰老等方面都具有良好的作用［７。 １．本
１０ ｇ，精确称定，分别以１００ ｍＬ水、１００ ｍＬ体积分
文分别以水、体积分数为５０％的乙醇、加纤维素酶的
数为５０％的乙醇、１００ ｍＬ加０．５ ｇ纤维素酶的水和
水和加纤维素酶的体积分数为５０％的乙醇为溶剂，
１００ ｍＬ加０．５ ｇ纤维素酶的体积分数为５０％乙醇为
利用超声波法提取大蒜，测定了提取物中总多酚含
提取剂，在温度５Ｏ℃、超声波功率２００ Ｗ的条件下，
量，并采用清除ＤＰＰＨ・、ＯＨ・及Ｏｉ法对４种提取物
超声提取６０ ｒａｉｎ，提取液过滤后定容为１００ ｍＬ，置
的抗氧化活性进行了研究，以期为大蒜资源的综合
冰箱中冷藏保存，待用．
利用和大蒜中多酚类物质开发应用提供理论依据．
１．４大蒜提取物总酚含量测定方法
总酚含量的测定采用Ｆｏｌｉｎ—Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ法【１引，以
１材料与方法
没食子酸为标准品．实验确定的回归方程为：Ａ：
０．０９２ ２Ｃ十０．０１ １ ６，相关系数ｒ＝０．９９９ ７，其中ｃ为没食
１．１材料
子酸的质量浓度（￣ｔｇ／ｍＬ）．没食子酸浓度ｃ在２．２～
大蒜：购于当地农贸市场，为本地产的白皮蒜．
ｌ３．２￣ｔｇｌｍＬ的范围内与吸光度呈良好线性关系．精
１．２仪器与试剂
密称取０．６ ｍＬ大蒜提取液，按实验方法测定吸光度，
７２３型可见分光光度计（上海光谱仪器有限公
由回归方程计算总酚含量．大蒜提取物总酚含量以
司）；ＡＬｌ０４电子分析天平（梅特勒．托利多仪器上海 每１００ ｇ大蒜中含相当于没食子酸的毫克数表示．
收稿日期：２０１１．０７—０７
基金项目：山两省高校科技开发研究（２００６１１０４１）资助项目．
作者简介：赵二劳（１９５２ ），男，山两原平人，教授，主要从事天然产物活性成分提取分离研究
第６期 武字芳，等：大蒜提取物中总酚含量及其抗氧化活性研究 ５７１
１．５大蒜提取物抗氧化活性测定
１．５．１对ＤＰＰＨ．清除率的Ｈ４定［１３－１４】ＤＰＰＨ・是一种
稳定的有机自由基，溶于乙醇时溶液呈深紫色，该
溶液在波长５１７ ｎｍ处有强的吸收．当有自由基清
除剂存在时，可与其单电子配对使其溶液褪色吸收
降低，其褪色程度与其所接受的电子数成线性关系，
因此可以用光度法检测自由基的清除情况，从而评
价自由基清除剂即样品的抗氧化能力．
实验时，准确吸取一定量的大蒜提取液于１ ０ ｍＬ
比色管中，然后加入２．０ ｍＬ浓度为０．８ ｍｇ／ｍＬ的
ＤＰＰＨ・溶液，用水定容至刻度，在室温下反应３０ ｍｉｎ
后，于波长５ｌ７ ｎｍ处测定吸光度．按下式计算清
除率：清除率＝［１— 广 ，） ｏ］×１００％，其中／４０为未
加大蒜提取液时溶液的吸光度；Ａ 为大蒜提取液后
溶液的吸光度；Ａ，为大蒜提取液的吸光度．
１．５．２ 羟基自由基（－ＯＨ）清除率的测定 以Ｆｅｎｔｏｎ
反应建立实验体系模型【 】．Ｈ２Ｏ２与Ｆｅ 混合能产
生具有很高的反应活性的・ＯＨ，但・ＯＨ存活时间短，
如在反应体系中加入水杨酸，就能与・ＯＨ反应并生
成紫红色产物，该紫红色产物在５１０ ｎｍ波长处有
强吸收，若在此反应体系中加入具有清除・ＯＨ功能
的被测物，就会与水杨酸竞争・ＯＨ，使有色产物生
成量减少，导致反应体系在５１０ ｎｍ波长处吸收减
弱．采用固定反应时间法，分别测定加入与未加人
大蒜提取物溶液反应体系的吸光度，就可测定大蒜
提取物对・ＯＨ的清除能力，以此评价大蒜提取物的
抗氧化性能．・ＯＨ的清除率计算公式为：清除率＝
。 ｏ×１００％，其中 ，为加人大蒜提取物溶液
后・ＯＨ体系的吸光度；Ａ０为未加大蒜提取物溶液
时・ＯＨ体系的吸光度．
实验时，在１０ ｍＬ比色管中，依次加入１．０ ｍＬ
浓度为７．５０￣１０ ｍｏｌ／Ｌ的硫酸亚铁溶液、１．０ ｍＬ浓
度为７．５１×１０ ｍｏｌ／Ｌ的水杨酸溶液、１．０ ｍＬ质量分
数为０．１％的Ｈ２０２溶液，以水定容至刻度，置于４０℃
恒温水浴中反应１ ｈ后，在波长５１０ ｎｌｎ处测定其吸
光度为Ａｏ，在上述体系中分别加人不同量的大蒜提
取物溶液测定吸光度为 ． ．
１．５－３ 超氧阴离子自由基（Ｏ ）清除率的测定 大
蒜提取物对超氧阴离子自由基（０ ）清除率的测定
参考文献［１６］的方法，即由改良的邻苯三酚自氧化
法产生Ｏ；．实验时，将４．５ ｍＬ ｐｉｔ值为８．３４的磷酸
盐缓冲溶液与４．５ ｍＬ水混匀后置于３０℃水浴中保
温２０ ｍｉｎ，取出后立即加入３０℃预热的１．０ ｍＬ浓
度为２．１０￣１０ ｍｏｌ／Ｌ的邻苯三酚溶液，迅速摇匀，
在波长３２５ ｎｍ处，每隔３０ Ｓ测一次吸光度，并计算
线性范围内每分钟吸光度的增加值 ｏ．用大蒜提
取物溶液代替等量的蒸馏水，按上述方法测定并计
算△ ．清除率按下式计算：
清除率＝（ＡＡｏ—ＡＡｆ）／△Ａ０×１００％．
２结果与分析
２．１大蒜提取物总酚含量测定
按上述实验方法测定大蒜提取液中总酚含量，
结果如表１．由表１可见，在相同的超声波提取条件
下，纤维素酶辅助超声波水提物及醇提物中总酚含
量明显高于水提物及醇提物中总酚含量．其原因可
能是由于大蒜成分中含纤维素，纤维素酶的加入可
以温和地分解、破坏细胞壁，加速花青素等多酚类
物质的释放，从而导致提取物中总酚含量的增加【ｌ 。
表ｌ １００ ｇ大蒜提取物中总酚含量（，ｚ＝３）
２．２抗氧化性的测定
２．２．１ 对ＤＰＰＨ・清除率的测定 大蒜不同溶剂提
取物对ＤＰＰＨ・的清除率如图１所示．由图１可见，各
提取物对ＤＰＰＨ・均具有较强的清除能力，且对
ＤＰＰＨ・清除率都随大蒜提取物用量的增大而增强，
具有明显的量效关系．说明其清除ＤＰＰＨ・的能力与
图１ 大蒜提取物对ＤＰＰＨ・的清除率
江西师范大学学报（自然科学版）
提取液巾总酚含量相关．大蒜提取物对ＤＰＰＨ・清除
６．７％、水提法的５．５％和醇提法的３．５％．表明对超氧
阴离子自由基的清除率与提取液中总酚含量正相关．
能力大４￣ＩＩ．ｉ序为：酶助水提法＞酶助醇提法＞水提法＞
醇提法．
２．２，２ 对羟基自由基（・ＯＨ）清除率的测定 按实验
方法测定大蒜提取物对・ＯＨ清除率，结果如图２所示
由图２可见，大蒜提取物对・ＯＨ的清除能力略弱于
３ 结论
大蒜中总酚含量较高，以加纤维素酶的水为提
取剂，超声波提取法是大蒜中总酚提取的较好方法．
实验结果表明，１００ ｇ大蒜的提取物中总酚含量分别
对ＤＰＰＨ・的清除能力．各提取物对・ＯＨ的清除率都
随着大蒜提取物用量的增大而增大．大蒜提取物
对・ＯＨ的清除能力大小顺序为：酶助水提法＞酶助醇
提法＞水提法＞醇提法．各提取物对・ＯＨ清除能力大
小与对ＤＰＰＨ・的清除能力的实验结果一致．这也说
明其清除・ＯＨ的能力与提取液中总酚含量相关．
２．２．３ 对超氧阴离子自由基（０ ）清除率的测定对
超氧阴离子自由基清除率的实验结果如图３所示．由
图３可见，大蒜各提取物均具有较强的清除超氧阴
离子自由基能力，随着大蒜提取物溶液浓度的增大，
清除能力显著提高，且具有明显的量效关系．在相
同浓度下，酶助水提法提取物对超氧阴离子自由基
清除率最高可达９８．１％，明显高于酶助醇提法的
蔷
鬟
ｍＬ
图２大蒜提取物对羟基自由基的清除率
静
赠
ｎＬ
图３ 大蒜提取物对超氧阴离子自由基的清除率
为：酶助水提法１７１．１ ｍｇ；酶助醇提法１３０．８ ｍｇ；水
提法１ １２．７ ｍｇ；醇提法１０２．４ ｍｇ／１Ｏ０ ｇ．
抗氧化活性实验发现，大蒜提取物均能有效
地清除ＤＰＰＨ・、・ＯＨ和Ｏｉ，且呈明显的量效关系．
表明大蒜提取物具有较强的抗氧化能力，且其抗
氧化能力与总酚含量正相关．大蒜提取物抗氧化
能力大小顺序为：酶助水提法＞酶助醇提法＞水提
法＞醇提法．
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Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｇａｒｌｉｃ Ｅｘｔｒａｃｔｓ
ＷＵ Ｙｕ—ｆａｎｇ，ＱＩＡＯ Ｌｉ－ｊｕｎ，ＺＨＡＯ Ｅｒ－ｌａｏ
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｘｉｎｚｈｏｕ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｚｈｏｕ Ｓｈａｎｘｉ ０３４０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｇａｒｌｉｃ ｂｙ
ｗａｔｅｒ，５０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｗａｔｅｒ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ａｎｄ ５０％ｅｔｈａｎｏｌ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
．
Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔｓ
ｏｆ ｐｈｅｎｏｌ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｕｓｉｎｇ Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｌｅａｒｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ
ＤＰＰＨ‘，‘ＯＨ ａｎｄ Ｏ三ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｕｎｄｅｒ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｒａｄｉａｔｉｏｎ，ｕｓｉｎｇ ｗａｔｅｒ，５０％ｅｔｈａｎｏｌ，
ｗａｔｅｒ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ｏｒ ５０％ｅｔｈａｎｏｌ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ａｓ ｅｘｔｒａｃｔａｎｔｓ
，
ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｐｈｅｎｏｌ ｗａｓ １ １ ２．７ ｍｇ，
１０２．４ ｍｇ，１７１．１ ｍｇ ａｎｄ １３０．８ ｍｇ ｐｅｒ １００ ｇ ｇａｒｌｉｃ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａｌｌ ｆｏｕｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ｃｌｅａｒｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｎ
ＤＰＰＨ’，‘ＯＨ ａｎｄ Ｏ ｊ，ｗｈｉｃｈ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅｙ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ａｎｔｉ—ｏｘｉｄａｎｔ ｃａｐａｃｉｔｙ．Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｔｈｅ ａｎｔｉ．ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｙｔ
ｉｓ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌ ｔｏ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｇａｒｌｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｇａｒｌｉｃ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｗａｖｅ；ｃｅｌｌｕｌａｓｅ；ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ；ａｎｔｉｏ—ｘｉｄａｔｉｏｎ
（责任编辑：刘显亮）