2024年5月21日发(作者:登阳炎)
HIV病毒分子生物学检测技术最新进展
艾滋病病毒(HIV)主要侵袭人体免疫系统,导致人体免疫
缺陷发生多种感染疾病或肿瘤。艾滋病的不可治愈及其快速传播
使患者不断增多,2012年全球感染总人数已达3900万人,中国
近半艾滋病病毒感染者尚未发现,为了防止艾滋病的大规模流
行,艾滋病的检测工作越发重要。目前筛查的免疫学方法,由于
灵敏度低,漏检窗口期和新近感染病毒的感染者,而以核酸检测
为代表的分子生物学技术,灵敏度和特异性均显著提高,明显缩
短检出病原体的窗口期,是HIV诊断方法和诊断试剂持续发展的
主要方向,对遏制艾滋病的传播蔓延有重要意义。
1 HIV生物学特性
HIV呈圆形或椭圆形,直径900~140nm,外层为类脂包膜,
成分是外膜糖蛋白(gp120)和跨膜糖蛋白(gp41),核心由RNA
逆转录酶、DNA多聚酶和结构蛋白等组成,基因组除了具有逆转
录病毒的基本结构——基因长末端重复序列(LTR)、核心蛋白
(gag)、聚合蛋白(po1)、包膜蛋白(env)gF,还有非常复
杂的调控机制,包括tat、rev、nef、vif、vpr、vpu等调节基
因,其作用是在转录、翻译、装配等各个环节对病毒的生长和繁
殖起调节作用。HIV基因组中存在3个gag-pol- 基因
编码的核心蛋白均位于病毒的核酸蛋白体上,P17位于核蛋白与
壳层之间的基质上,包被于包膜蛋白的内部。核衣壳包被于内部
核酸的外围,由主要的P24和P40及P55组成,其结构比较稳定,
是HIV-1型的特异性蛋白。Env编码包膜蛋白即gp120和gp41,
起协助HIV进入宿主细胞的作用。聚合酶蛋白包括P66、P51和
P31,它位于病毒的核区内,并与病毒核酸紧密相关[1]。
根据env基因V3段碱基排列的不同,HIV-1分为11个亚型
即A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、M和0亚型,HIV-2分为6
个亚型[2],不同国家和地区有相对优势亚型,HIV亚型在流行
病学、诊断、临床、试剂选择、药物筛选和疫苗研制上有着重要
意义。
2 HIV-1的感染机制及感染标志
病毒侵入人体后,通过病毒表面gpl20在化学因子CCR5或
CXCR4帮助下与细胞表面受体CD4分子结合,然后在gp41的协
助下HIV的膜与CD4+细胞的细胞膜相融合,病毒核心蛋白及RNA
进入胞浆。两条RNA+在逆转录酶作用下成DNA-,在DNA多聚酶
的作用下复制DNA,此DNA部分存留在胞浆内产生系列变化,然
后在细胞膜上装配成新病毒,再感染其它细胞。HIV感染后,首
先能够监测到病毒RNA,其次是p24抗原,最后是抗体[3]。
3 分子生物学检测技术
随着分子生物学检测技术快速发展,HIV RNA或DNA检测得
到应用,核酸检测已是艾滋病实验室诊断的主要发展方向[4],
在HIV感染的监测、诊断、研究、疗效观察及预后判断等方面均
发挥着越来越大的作用,主要有定性和定量两类。
2024年5月21日发(作者:登阳炎)
HIV病毒分子生物学检测技术最新进展
艾滋病病毒(HIV)主要侵袭人体免疫系统,导致人体免疫
缺陷发生多种感染疾病或肿瘤。艾滋病的不可治愈及其快速传播
使患者不断增多,2012年全球感染总人数已达3900万人,中国
近半艾滋病病毒感染者尚未发现,为了防止艾滋病的大规模流
行,艾滋病的检测工作越发重要。目前筛查的免疫学方法,由于
灵敏度低,漏检窗口期和新近感染病毒的感染者,而以核酸检测
为代表的分子生物学技术,灵敏度和特异性均显著提高,明显缩
短检出病原体的窗口期,是HIV诊断方法和诊断试剂持续发展的
主要方向,对遏制艾滋病的传播蔓延有重要意义。
1 HIV生物学特性
HIV呈圆形或椭圆形,直径900~140nm,外层为类脂包膜,
成分是外膜糖蛋白(gp120)和跨膜糖蛋白(gp41),核心由RNA
逆转录酶、DNA多聚酶和结构蛋白等组成,基因组除了具有逆转
录病毒的基本结构——基因长末端重复序列(LTR)、核心蛋白
(gag)、聚合蛋白(po1)、包膜蛋白(env)gF,还有非常复
杂的调控机制,包括tat、rev、nef、vif、vpr、vpu等调节基
因,其作用是在转录、翻译、装配等各个环节对病毒的生长和繁
殖起调节作用。HIV基因组中存在3个gag-pol- 基因
编码的核心蛋白均位于病毒的核酸蛋白体上,P17位于核蛋白与
壳层之间的基质上,包被于包膜蛋白的内部。核衣壳包被于内部
核酸的外围,由主要的P24和P40及P55组成,其结构比较稳定,
是HIV-1型的特异性蛋白。Env编码包膜蛋白即gp120和gp41,
起协助HIV进入宿主细胞的作用。聚合酶蛋白包括P66、P51和
P31,它位于病毒的核区内,并与病毒核酸紧密相关[1]。
根据env基因V3段碱基排列的不同,HIV-1分为11个亚型
即A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、M和0亚型,HIV-2分为6
个亚型[2],不同国家和地区有相对优势亚型,HIV亚型在流行
病学、诊断、临床、试剂选择、药物筛选和疫苗研制上有着重要
意义。
2 HIV-1的感染机制及感染标志
病毒侵入人体后,通过病毒表面gpl20在化学因子CCR5或
CXCR4帮助下与细胞表面受体CD4分子结合,然后在gp41的协
助下HIV的膜与CD4+细胞的细胞膜相融合,病毒核心蛋白及RNA
进入胞浆。两条RNA+在逆转录酶作用下成DNA-,在DNA多聚酶
的作用下复制DNA,此DNA部分存留在胞浆内产生系列变化,然
后在细胞膜上装配成新病毒,再感染其它细胞。HIV感染后,首
先能够监测到病毒RNA,其次是p24抗原,最后是抗体[3]。
3 分子生物学检测技术
随着分子生物学检测技术快速发展,HIV RNA或DNA检测得
到应用,核酸检测已是艾滋病实验室诊断的主要发展方向[4],
在HIV感染的监测、诊断、研究、疗效观察及预后判断等方面均
发挥着越来越大的作用,主要有定性和定量两类。