2024年6月11日发(作者:亓晓)
某大学生物工程学院《普通生物化学》
课程试卷(含答案)
__________学年第___学期 考试类型:(闭卷)考试
考试时间: 90 分钟 年级专业_____________
学号_____________ 姓名_____________
1、判断题(140分,每题5分)
1. 肽聚糖以含有N乙酰氨基葡萄糖为特点。( )
答案:错误
解析:肽聚糖即胞壁质,是一种构建细菌胞壁结构的杂多糖:由N乙
酰葡糖胺和乙酰胞壁酸经由β(1→4)糖苷键交替连接形成多聚体,
这种多聚体再作为重复构件通过短肽链交联连接。
2. 已在大肠杆菌中发现的五种DNA聚合酶中,DNA polⅢ是参与大
肠杆菌染色体DNA复制的主要酶,在细胞中含量最高。( )
答案:错误
解析:DNA polⅢ的聚合酶活性是五种DNA聚合酶中最高的,在每
个大肠杆菌细胞中的含量大大低于DNA polⅠ和DNA polⅡ。
DNApol Ⅳ和Ⅴ则在细菌生长的特定时期被诱导表达。
3. 辅酶I(NAD+)、辅酶Ⅱ(NADP+)、辅酶A(CoA),黄素单
核苷酸(FMN)和黄素嘌呤二核苷酸(FAD)中都含有腺嘌呤(AMP)残
基。( )
答案:错误
解析:黄素单核苷酸(FMN)中不含腺嘌呤(AMP)残基。
4. 糖原磷酸化酶可直接被蛋白激酶A磷酸化。( )
答案:错误
解析:蛋白激酶A需要经由磷酸化酶b激酶的中介才能将低活性的糖
原磷酸化酶b磷酸化成高活性的磷酸化酶a。
5. 酶的反竞争性抑制作用的特点是Km值变小,Vmax也变小。
( )[华中农业大学2017研]
答案:正确
解析:
6. 用羧肽酶A水解一个肽,发现释放最快的是Leu,其次是Gly,
则据此可推断,此肽的C末端序列是GlyLeu。( )
答案:正确
解析:羧肽酶A是水解从C端逐步水解除了脯氨酸、精氨酸、赖氨酸
之外所有C末端残基。
7. DNA复制时,前导链上的合成方向是5′→3′,后随链上的合成
方向则是3′→5′。( )[中国科学院研]
答案:错误
解析:DNA复制时,两条链的合成方向都是5′→3′。
8. 蛋白质分子的亚基与结构域是同义词。( )[西南农业大学
研]
答案:错误
解析:
9. 真核生物细胞内的hnRNA相对分子质量虽然不均一,但其半衰期
长,比胞质成熟mRNA更为稳定。( )
答案:错误
解析:真核生物细胞内的hnRNA是不成熟的mRNA,没有胞质成熟
mRNA稳定
10. 酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。从B2(核黄素)、烟
酸和烟酰胺以作用于葡萄糖(Km=6×106mol·L1)或果糖(Km=
2×103·mol·L1),则己糖激酶对果糖的亲和力更高。( )[华
东师范大学2007研]
答案:错误
解析:Km值越低,酶对底物的亲和力越高。
11. 竞争性抑制剂不影响酶对底物的Km。( )
答案:错误
解析:竞争性抑制剂使Km增加。
12. 促性腺激素先作用于靶细胞内的受体,然后激活腺苷酸环化酶。
( )
答案:错误
解析:
13. TBP是真核生物三种RNA聚合酶催化基因转录都需要的蛋白质因
子。( )
答案:正确
解析:TBP即TATA box结合蛋白,是RNApolⅠ需要的转录因子
SL1的组分,也是RNA polⅡ需要的转录因子TFⅡD的组分,RNA
pol Ⅲ需要的转录因子TFⅢ B的组分。
14. 线粒体内膜与外膜的结构完全相同,它们是完全分开互不接触
的两种膜。( )
答案:错误
解析:内膜和外膜有小部分是融合(接触)的。
15. 生物膜结构的骨架的重要组分是磷脂。( )
答案:正确
解析:生物膜结构的骨架为磷脂双分子层,其主要组分为磷脂。
16. 蛋白质合成的方向是从羧基端到氨基端。( )
答案:错误
解析:
17. 葡萄糖通过脱氢可异构为果糖。( )[中山大学2018研]
答案:错误
解析:
18. 共价修饰酶的活性调节涉及一系列酶促反应,因此不是一种快
速调节方式。( )
答案:错误
解析:
19. 膜的独特功能由特定的蛋白质执行,功能越复杂的生物膜,膜
蛋白的含量越高。( )
答案:正确
解析:
20. D葡萄糖,D甘露糖和D果糖生成同一种糖脎。( )
答案:正确
解析:
21. 大多数真核生物的mRNA和它的DNA模板是等长的。( )
答案:错误
解析:真核生物DNA模板中存在大量非编码序列,因此比mRNA长。
22. 由于增强子的作用与距离无关,所以某一个增强子可同时提高
与它同在一条染色体DNA上所有的基因的转录效率。( )
答案:错误
解析:增强子无论处在启动子的上游或者是下游,甚至相隔几千个碱
基对,只要存在于同一DNA分子上都能对其起作用。但如果临近有几
个启动子,增强子总是优先作用于最近者。
23. 缺乏维生素B易引起夜盲症。( )
答案:错误
解析:夜盲症是由于严重缺乏维生素A引起的。
24. DNA分子中的两条链在体内都可能被转录成RNA。( )
答案:正确
解析:
25. 在生物体内,肽链是在合成结束后才开始折叠的。( )
答案:错误
解析:
26. 构成蛋白质的20种氨基酸都会含有不对称碳原子。( )
答案:错误
解析:常见的20种氨基酸中甘氨酸例外,没有不对称碳原子,其余的
氨基酸均有不对称的碳原子,具有手性。
27. 核糖体大亚基中有mRNA的结合位点。( )
答案:错误
解析:
28. 人们已在哺乳动物体内找到参与大肠杆菌DNA错配修复的几种
主要蛋白质:MutH、MutL、MutS的同源蛋白。( )
答案:错误
解析:人们已在哺乳动物体内找到参与大肠杆菌DNA错配修复的绝大
多数蛋白质的同源蛋白,但是缺少MutH的对应物。
2、名词解释题(65分,每题5分)
1. 衰减子(attenuator)[北京师范大学研]
答案:衰减子(attenuator)是指在操纵区与结构基因之间的一段可
以终止转录作用的核苷酸序列。
解析:空
2. 古细菌(archaebacteria)
答案:古细菌是指一些生长在极端特殊环境中的“细菌”,其形态结
构、遗传装置及其基本生命活动方式虽与原核细胞相似,但16S
rRNA序列同源性和其他一些基本分子生物学特点又与真核生物接近。
解析:空
3. 尿黑酸症
答案:尿黑酸症是指尿黑酸氧化酶缺乏,造成尿黑酸不能进一步代谢,
因而排入尿中,遇空气氧化成黑色物质的一种症状。尿黑酸症是先天
性代谢缺陷症但不影响寿命。
解析:空
4. 遗漏扫描
答案:遗漏扫描是核糖体小亚基的一种运作方式。真核生物翻译起始
时核糖体小亚基会首先识别mRNA5′端的帽子结构,然后沿着
mRNA向下游扫描,一般以离5′端最近的一个AUG作为起始密码子,
但是如果该AUG所处环境与一致序列差别较大,则小亚基会越过第一
个AUG而选用下游处于更好环境中的AUG作为起始密码子,这种扫
描即为遗漏扫描。
解析:空
5. 跨膜蛋白
答案:跨膜蛋白是一种跨越整个生物膜一次或多次的蛋白。膜蛋白中
的整合蛋白嵌入膜脂双分子层中,其中两端分别暴露于膜两侧介质中。
解析:空
6. 组成型表达(constitute expression)
答案:组成型表达是指基因表达受环境因素的影响较小,在个体各个
生长阶段中几乎所有组织中持续表达,表达水平变化较小的现象。
解析:空
7. 沉默突变(silent mutation)同义突变(samesense mutation)
答案:沉默突变又称同义突变,是指在蛋白质编码区,突变的密码子
编码同样的氨基酸,突变结果对蛋白质的结构和功能不会产生任何影
响的点突变。
解析:空
8. 结构域(domain)
答案:结构域是指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成的三
级结构的局部折叠区,是相对独立的紧密球状实体,在空间上可以明
显区分的球状区域。是生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域。
在球形蛋白中,结构域具有自己特定的四级结构,其功能部依赖于蛋
白质分子中的其余部分,但是同一种蛋白质中不同结构域间常可通过
不具二级结构的短序列连接起来。蛋白质分子中不同的结构域常由基
因的不同外显子所编码。
解析:空
9. intron(内含子)[华中师范大学2009、华中农业大学2009、首
都师范大学2008研]
答案:intron(内含子)是指真核生物DNA中的间隔序列,它们在
转录后的修饰中被切除,最终不存在于成熟的mRNA分子中。
解析:空
10. 稀有tRNA
答案:稀有tRNA是指在细胞内的含量也比较低与稀有密码子对应的
同工受体tRNA。
解析:空
11. 第二信使[山东大学2005研]
答案:第二信使是指受细胞外信号的作用,在细胞质溶质内形成或向
细胞质溶质释放的细胞内小分子,负责将信号传到细胞内部,如
cAMP、IP3、Ca2+等。第二信使通过其浓度变化(增加或减少)应
答胞外信号与细胞表面受体的结合,调节细胞内酶和非酶蛋白的活性,
从而在细胞信号转导途径中行使携带和放大信号的功能。
解析:空
12. 呼吸链(respiratory chain)
答案:呼吸链(respiratory chain)是指由一系列的递氢反应和递电
子反应按一定的顺序排列所组成的连续反应体系,它将代谢物脱下的
成对氢原子交给氧生成水,同时有ATP生成。
解析:空
13. RNA干扰(RNA interference,RNAi)[华中科技大学2016研]
答案:RNA干扰(RNAi)是利用双链小RNA高效、特异性降解细
胞内同源mRNA从而阻断靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失表型的
现象。其分子机制是双链RNA(dsRNA)是RNAi的触发物,引发
与之互补的单链RNA(ssRNA)的降解,较长双链RNA经过Dicer
加工被降解形成21~25个核苷酸的siRNA,并有效地定位目标
mRNA。由siRNA中的反义链指导合成RISC(RNA诱导的沉默复
合体)的核蛋白体,再由RISC介导切割目的mRNA分子中与
siRNA反义链互补的区域,从而实现干扰靶基因表达的功能。
解析:空
3、填空题(150分,每题5分)
1. 在DNA自动化测序中,荧光基团可标记在ddNTP上,也可标记在
上。[中山大学2009研]
答案:引物
解析:荧光基团标记是测序仪检测DNA片段的必要条件。标记
ddNTP,则片段3′末端带有标记;标记引物,则片段5′末端带有标记。
2. 一般来说,用嗜热菌蛋白酶水解蛋白质所得到的片段,要比用胰
蛋白酶所得的片段。
答案:多些(或片段小些)
解析:
3. 不能使用Edman降解的方法直接测定促性腺激素释放因子的N端
氨基酸是因为。
答案:N端被封闭
解析:
4. 具有递氢作用的维生素有和。
答案:维生素B2|维生素PP
解析:
5. 同工酶往往具有动力学性质或调节性质,而在结构上有微小差别。
答案:相似
解析:
6. 嘧啶核苷酸从头合成第一个合成的核苷酸是。
答案:UMP或乳清酸核苷酸
解析:
7. 人体内脂肪酸经β氧化产生乙酰CoA,乙酰CoA可以在肌肉细胞
中进入三羧酸循环;在肝或肾细胞中可形成、和这三种物质统称为酮
体。乙酰CoA在体内的这两种去向是受的浓度调控的。
答案:乙酰乙酸|β羟丁酸|丙酮|草酰乙酸。
解析:
8. 只将氨基从一个氨基酸移向另一个氨基酸的脱氨基方式是。
答案:转氨基作用
解析:
9. 真核生mRNA转录后的成熟步骤主要包括、、。
答案:5′端加帽|3′端加polyA尾|剪接
解析:
10. DNA回旋酶又称拓扑异构酶,其功能是。[中山大学2009研]
答案:DNA回旋酶属于拓扑异构酶Ⅱ,其功能为引入负超螺旋,消除
复制叉前进过程中出现的扭曲张力。
解析:
11. 生物素是酶的辅酶。[中山大学2018研]
答案:丙酮酸羧化
解析:
12. 维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是,其次,大量存在于DNA
分子中的弱作用力如,和也起一定作用。
答案:碱基堆积力|氢键|离子键|范德华力
解析:
13. 核苷酸从头合成和补救合成中,其核糖的直接供体是。[中山大
学2018研]
答案:5磷酸核糖1焦磷酸(PRPP)
解析:
14. 是真核生物mRNA的前体形式,它一般含有和其他在RNA成熟过
程中被剪接掉的序列。
答案:不均一性RNA(hnRNA)或“初始转录物”|内含子
解析:
15. 和因分别发现了而共同获得1989年的诺贝
尔化学奖。
答案:核酶
解析:
16. 两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于中,RNA主要位于。
答案:细胞核|细胞质
解析:
17. 氯霉素能与核蛋白体亚基结合,抑制酶活性,从而抑制蛋白质
合成。
答案:50S|肽基转移
解析:
18. 为了糖酵解作用的继续,酵母菌细胞在无氧条件下,须利用作
用再生成,以提供糖酵解作用所需要的电子受体。[中国科学技术大学
2015研]
答案:糖异生|NAD+
解析:
19. 牛磺酸由转变而来;5羟色胺由转变而来;脑中的γ氨基丁酸
由衍生而来;儿茶酚胺是由酸转化而来的。
答案:半胱氨酸|色氨酸|谷氨酸|天冬氨酸
解析:
20. 甲状腺素的生物合成受到、的抑制。
答案:硫脲|硫脲嘧啶
解析:
21. 具有紫外光吸收能力的氨基酸是Phe、Tyr和Trp,其中的摩尔
吸光系数最大。
答案:Trp
解析:
22. 柠檬酸可以增强ATP对的抑制作用。[南开大学研]
答案:磷酸果糖激酶
解析:细胞内柠檬酸含量高,意味着有丰富的生物合成前体存在,无
需提供合成的前体而降解,柠檬酸是通过加强ATP的抑制效应来抑制
磷酸果糖激酶的活性,从而使降解过程减慢。
23. 核蛋白体的P位是的部位,A位是的部位。
答案:结合肽酰tRNA的肽酰基|结合氨基酰tRNA的氨酰基
解析:
24. P700是强电子,P680是强电子。
答案:供体|受体
解析:
25. HMP途径氧化阶段的两个关键酶是和,还原阶段的两个关键酶是
和,为生物体提供的主要贡献是和等。[复旦大学2007研]
答案:6磷酸葡萄糖脱氢酶|6磷酸葡萄糖酸脱氢酶|转酮酶|转醛酶
|NADPH|磷酸戊糖
解析:
26. 真核生物染色体DNA的主要结构特点有。
答案:有重复序列和内含子
解析:
27. 许多代谢途径第一个酶是该途径的限速酶,终产物是它的,对
它进行;底物多为其。
答案:别构抑制剂|反馈抑制|别构激活剂
解析:
28. 通常被用来衡量酶与底物亲和力大小的指标为,被用来衡量酶
的催化效率的指标为。
答案:Km值|Kcat
解析:
29. 维生素B1是由和借助甲烯基连接成的水溶性维生素。
答案:嘧啶环|噻唑环
解析:
30. 在呼吸链中单纯催化电子转移的成分是和。
答案:细胞色素|FeS蛋白
解析:
4、简答题(50分,每题5分)
1. 怎样证明琥珀酸脱氢酶的辅基是与酶蛋白之间以共价键相结合的?
答案:证明琥珀酸脱氢酶的辅基是与酶蛋白之间以共价键相结合的方
法:先分离纯化出琥珀酸脱氢酶,然后使用蛋白酶或者无机酸,将琥
珀酸脱氢酶完全水解,水解的产物进行氨基酸分析,如纸电泳。将电
泳的指纹图与标准电泳图谱进行比较,找出异常的条带,回收该条带
的样品,进行进一步的分析。最终可确定FAD是不是与酶蛋白以共价
键相连,并且能够弄清楚它与哪一个氨基酸残基相连。
解析:空
2. β碳原子被同位素(14C)标记的丝氨酸有很多用途,但通常不
用它来作为标记物研究蛋白质的生物合成,这是因为它在体内不仅能
标记蛋白质,还能标记核酸、碳水化合物以及脂类。试问它如何能够
标记这些化合物的?
答案: β碳原子被同位素(14C)标记的丝氨酸可经过下面的反应
标记糖、磷脂和核酸:
解析:空
3. 2,4二硝基苯酚(DNP)是哪一类氧化磷酸化抑制剂及其功能是什
么?它如何实现这一功能?[四川大学研]
答案: (1)2,4二硝基苯酚是解偶联剂。其功能是只抑制ATP
的形成,不抑制电子传递,使电子传递产生的自由能都变为热能。
(2)实现这一功能是因为2,4二硝基苯酚是一种亲脂的弱酸性化
合物,它能以中性的质子状态穿过线粒体脂质双分子层的内膜。当存
在跨膜的质子梯度时,它在膜的酸性侧结合质子,成为一种中性的不
带电荷的状态,通过扩散穿过膜,并在膜的碱性侧释放出质子(呼吸
链中的质子H+不经ATP合成酶系的质子通道回流),降低或消除了
H+的跨膜梯度,从而抑制ADP磷酸化生成ATP,由电化学能贮存的
能量以热能形式释放。
解析:空
4. 为什么DNA聚合酶有核酸酶活性而RNA聚合酶无核酸酶活性?
答案: DNA聚合酶有核酸酶活性而RNA聚合酶无核酸酶活性的
原因:
(1)DNA聚合酶负责染色体DNA的复制,通过复制把亲代所
携带的遗传信息准确地传递给子代。DNA复制时出现错误影响到遗传
信息的准确传递,造成突变和大部分子代细胞死亡。因此DNA聚合
酶应具有3′→5′外切核酸酶活性以随时修正复制过程中出现的错配核
苷酸,保证遗传信息传递的稳定性。大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的5′→3′
外切酶活性是用于切除冈崎片段的RNA引物及切除受损伤的DNA片
段,以便合成正确的DNA链替换,因此,这些外切酶活性是DNA复
制、修复、重组所必需的。
(2)RNA聚合酶可催化大量mRNA的合成,且合成的mRNA
的半衰期很短。转录时个别错配碱基的出现,也会导致合成的蛋白质
的个别氨基酸与正常的不同,但细胞可以容忍这些小的错误发生。
解析:空
5. 提高天冬氨酸和谷氨酸的合成会对TCA循环产生何种影响?细胞
会怎样应付这种状况?
答案: (1)提高天冬氨酸和谷氨酸的合成,将会减少草酰乙酸和
α酮戊二酸的量。如果这两种物质不能被有效的补充,将会影响到
TCA循环,进而影响乙酰CoA的氧化和ATP的合成。
(2)体内存在的一系列的回补反应可即时补充草酰乙酸和α酮戊
二酸的量。
解析:空
6. 写出辅基TPP的化学名称及其参与的化学反应类型。[山东大学
2016研]
答案:TPP的化学名称是焦磷酸硫胺素。维生素B1的辅酶形式,参
与的化学反应类型是转醛基反应。
解析:空
7. 如果某种密码子5′端的核苷酸发生突变,可能对蛋白质合成发
生什么样的影响?如果该种tRNA反密码子的5′端的核苷酸发生突变,
又会对蛋白质的合成有什么样的影响?
答案: (1)如果某种密码子5′端的核苷酸发生突变,则蛋白质合
成无法进行或蛋白质合成错误。若该密码子为起始密码子,则合成无
法开始;若为非起始密码子,可能与该密码子结合的氨酰tRNA不是
原来的氨酰tRNA,因此会在蛋白质中加入错误的氨基酸。
(2)如果该种tRNA的反密码子5′端的核苷酸发生突变,则蛋
白质可能正常合成也可能合成错误。因为密码的变偶性,反密码子的
第一位碱基和密码子第三位碱基的配对可以在一定范围内变动,这就
使得反密码子的5′端的核苷酸突变有时对蛋白质的合成没有影响。
解析:空
8. RNA和DNA在化学组成上有什么差异?为什么没有生物体具有大
的RNA基因组?为什么蛋白质不能序列特异性识别双链RNA?[中国科
学技术大学2016研]
答案: (1)DNA与RNA在化学组成上的区别:
①DNA中的五碳糖是脱氧核糖,而RNA是核糖;
②构成他们的四种碱基略有差别,RNA中是以尿嘧啶U代替了
DNA中的胸腺嘧啶T;
③DNA是双链分子,而RNA是单链分子;
(2)生物体不具有大的RNA基因组的原因如下:
①从结构上来说,RNA是单链,不稳定,而DNA是双螺旋结构,
能够稳定的存在和复制。
②转录时,DNA是以其中的一条链为模板,称模板链,另一条不
转录的链就称为编码链,这样的转录形式能保证遗传信息地准确传递,
而RNA要先逆转录为cDNA,然后经复制才能形成双链,这样不仅
会导致某些遗传信息的缺失,而且人体内也不普遍存在逆转录酶,因
此以RNA为遗传物质的大的基因组并不能使遗传信息得以表达。
解析:空
9. 糖蛋白的寡糖链有何生物学功能?
答案: 糖蛋白上的亲水性糖链不仅可以改变其蛋白组分的极性和
溶解度,而且空间及电荷性互作还可能会影响到多肽链的局部构象,
从而避免蛋白组分被水解。寡糖链的其他生物学功能有以下几点:
(1)参与新生肽链的折叠和缔合;
(2)影响糖蛋白的分泌和稳定性;
(3)参与分子识别和细胞识别;
(4)与糖蛋白的生物活性有关。
解析:空
10. 单脂与复脂在结构上的区别是什么?复脂的分类是根据什么基
础?磷脂和糖脂在结构上有无相似之处?试用结构式加以说明。
答案: (1)脂质可分为单脂与复脂两大类,它们在结构上的区别
是:
①单脂,即单纯脂质,为脂酸与醇(甘油醇、高级一元醇)所组
成的酯类。
②复脂,即复合脂质,为脂酸与醇(甘油醇,鞘氨醇)所生成的
酯,同时含有其他非脂性物质,如糖、磷酸及氮碱等。
(2)复脂的分类基础
复脂是指含磷酸或含糖的脂质,根据其含有的不同非脂性物质,
可分磷脂与糖脂两类。
(3)磷脂和糖脂在结构上的比较
①磷脂是指含磷酸与氮碱的脂质,分甘油醇磷脂和鞘氨醇磷脂两
类。鞘氨醇磷脂不含甘油醇而含鞘氨醇。
②糖脂是指含糖分子的脂质,由鞘氨醇或甘油醇与脂酸和糖所组
成,如脑苷脂和神经节苷脂等。
磷脂与糖脂在结构上的差异:磷脂是醇基与磷酸基团形成的脂,
而糖脂是醇基与糖形成的脂。
解析:空
5、计算题(5分,每题5分)
1. 何谓PCR技术?简述其原理、应用及派生的PCR相关技术。
答案: (1)PCR技术是指在模板DNA、引物和4种脱氧核糖核
苷酸存在下依赖于DNA聚合酶的DNA酶促合成反应。反应分三步:
①变性;②退火;③延伸。
(2)PCR技术在生命科学领域里的应用相当广泛:①遗传疾病
的诊断;②癌基因的检测;③在法医学上的应用;④在分子生物学上
的应用等。
(3)基于对PCR基本原理的认识和基本技术的掌握,相应地派
生出了许多的新的相关技术和改良方法。
①PCRRFLP技术:PCRRFLP全称多聚酶链反应(PCR)限制性
片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,
RFLP)分析。PCRRFLP主要有二个环节:a.靶基因PCR扩增;
b.扩增的DNA片段限制性酶切图谱(长度多态性)。PERRFLP主
要用于核酸变异性分析与比较。
②PCRSSCP技术:是聚合酶链反应单链构象多态性分析(single
strand conformation polymorphism)的简称,原理是将经扩增
的DNA片段经过变性处理,形成单链,由于序列不同,单链构象就
有差异在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳的迁移率不同,通过与标准物的
对比,即可检测出有无突变,该技术已广泛应用于检测各种病原体基
因的点突变及缺失突变,基因的多态性分析等。
③不对称PCR直接测序法:在扩增反应中加入不等量的两段寡核
苷酸引物,通过PCR扩增获得单链DNA,然后利用双脱氧法直接测
2024年6月11日发(作者:亓晓)
某大学生物工程学院《普通生物化学》
课程试卷(含答案)
__________学年第___学期 考试类型:(闭卷)考试
考试时间: 90 分钟 年级专业_____________
学号_____________ 姓名_____________
1、判断题(140分,每题5分)
1. 肽聚糖以含有N乙酰氨基葡萄糖为特点。( )
答案:错误
解析:肽聚糖即胞壁质,是一种构建细菌胞壁结构的杂多糖:由N乙
酰葡糖胺和乙酰胞壁酸经由β(1→4)糖苷键交替连接形成多聚体,
这种多聚体再作为重复构件通过短肽链交联连接。
2. 已在大肠杆菌中发现的五种DNA聚合酶中,DNA polⅢ是参与大
肠杆菌染色体DNA复制的主要酶,在细胞中含量最高。( )
答案:错误
解析:DNA polⅢ的聚合酶活性是五种DNA聚合酶中最高的,在每
个大肠杆菌细胞中的含量大大低于DNA polⅠ和DNA polⅡ。
DNApol Ⅳ和Ⅴ则在细菌生长的特定时期被诱导表达。
3. 辅酶I(NAD+)、辅酶Ⅱ(NADP+)、辅酶A(CoA),黄素单
核苷酸(FMN)和黄素嘌呤二核苷酸(FAD)中都含有腺嘌呤(AMP)残
基。( )
答案:错误
解析:黄素单核苷酸(FMN)中不含腺嘌呤(AMP)残基。
4. 糖原磷酸化酶可直接被蛋白激酶A磷酸化。( )
答案:错误
解析:蛋白激酶A需要经由磷酸化酶b激酶的中介才能将低活性的糖
原磷酸化酶b磷酸化成高活性的磷酸化酶a。
5. 酶的反竞争性抑制作用的特点是Km值变小,Vmax也变小。
( )[华中农业大学2017研]
答案:正确
解析:
6. 用羧肽酶A水解一个肽,发现释放最快的是Leu,其次是Gly,
则据此可推断,此肽的C末端序列是GlyLeu。( )
答案:正确
解析:羧肽酶A是水解从C端逐步水解除了脯氨酸、精氨酸、赖氨酸
之外所有C末端残基。
7. DNA复制时,前导链上的合成方向是5′→3′,后随链上的合成
方向则是3′→5′。( )[中国科学院研]
答案:错误
解析:DNA复制时,两条链的合成方向都是5′→3′。
8. 蛋白质分子的亚基与结构域是同义词。( )[西南农业大学
研]
答案:错误
解析:
9. 真核生物细胞内的hnRNA相对分子质量虽然不均一,但其半衰期
长,比胞质成熟mRNA更为稳定。( )
答案:错误
解析:真核生物细胞内的hnRNA是不成熟的mRNA,没有胞质成熟
mRNA稳定
10. 酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。从B2(核黄素)、烟
酸和烟酰胺以作用于葡萄糖(Km=6×106mol·L1)或果糖(Km=
2×103·mol·L1),则己糖激酶对果糖的亲和力更高。( )[华
东师范大学2007研]
答案:错误
解析:Km值越低,酶对底物的亲和力越高。
11. 竞争性抑制剂不影响酶对底物的Km。( )
答案:错误
解析:竞争性抑制剂使Km增加。
12. 促性腺激素先作用于靶细胞内的受体,然后激活腺苷酸环化酶。
( )
答案:错误
解析:
13. TBP是真核生物三种RNA聚合酶催化基因转录都需要的蛋白质因
子。( )
答案:正确
解析:TBP即TATA box结合蛋白,是RNApolⅠ需要的转录因子
SL1的组分,也是RNA polⅡ需要的转录因子TFⅡD的组分,RNA
pol Ⅲ需要的转录因子TFⅢ B的组分。
14. 线粒体内膜与外膜的结构完全相同,它们是完全分开互不接触
的两种膜。( )
答案:错误
解析:内膜和外膜有小部分是融合(接触)的。
15. 生物膜结构的骨架的重要组分是磷脂。( )
答案:正确
解析:生物膜结构的骨架为磷脂双分子层,其主要组分为磷脂。
16. 蛋白质合成的方向是从羧基端到氨基端。( )
答案:错误
解析:
17. 葡萄糖通过脱氢可异构为果糖。( )[中山大学2018研]
答案:错误
解析:
18. 共价修饰酶的活性调节涉及一系列酶促反应,因此不是一种快
速调节方式。( )
答案:错误
解析:
19. 膜的独特功能由特定的蛋白质执行,功能越复杂的生物膜,膜
蛋白的含量越高。( )
答案:正确
解析:
20. D葡萄糖,D甘露糖和D果糖生成同一种糖脎。( )
答案:正确
解析:
21. 大多数真核生物的mRNA和它的DNA模板是等长的。( )
答案:错误
解析:真核生物DNA模板中存在大量非编码序列,因此比mRNA长。
22. 由于增强子的作用与距离无关,所以某一个增强子可同时提高
与它同在一条染色体DNA上所有的基因的转录效率。( )
答案:错误
解析:增强子无论处在启动子的上游或者是下游,甚至相隔几千个碱
基对,只要存在于同一DNA分子上都能对其起作用。但如果临近有几
个启动子,增强子总是优先作用于最近者。
23. 缺乏维生素B易引起夜盲症。( )
答案:错误
解析:夜盲症是由于严重缺乏维生素A引起的。
24. DNA分子中的两条链在体内都可能被转录成RNA。( )
答案:正确
解析:
25. 在生物体内,肽链是在合成结束后才开始折叠的。( )
答案:错误
解析:
26. 构成蛋白质的20种氨基酸都会含有不对称碳原子。( )
答案:错误
解析:常见的20种氨基酸中甘氨酸例外,没有不对称碳原子,其余的
氨基酸均有不对称的碳原子,具有手性。
27. 核糖体大亚基中有mRNA的结合位点。( )
答案:错误
解析:
28. 人们已在哺乳动物体内找到参与大肠杆菌DNA错配修复的几种
主要蛋白质:MutH、MutL、MutS的同源蛋白。( )
答案:错误
解析:人们已在哺乳动物体内找到参与大肠杆菌DNA错配修复的绝大
多数蛋白质的同源蛋白,但是缺少MutH的对应物。
2、名词解释题(65分,每题5分)
1. 衰减子(attenuator)[北京师范大学研]
答案:衰减子(attenuator)是指在操纵区与结构基因之间的一段可
以终止转录作用的核苷酸序列。
解析:空
2. 古细菌(archaebacteria)
答案:古细菌是指一些生长在极端特殊环境中的“细菌”,其形态结
构、遗传装置及其基本生命活动方式虽与原核细胞相似,但16S
rRNA序列同源性和其他一些基本分子生物学特点又与真核生物接近。
解析:空
3. 尿黑酸症
答案:尿黑酸症是指尿黑酸氧化酶缺乏,造成尿黑酸不能进一步代谢,
因而排入尿中,遇空气氧化成黑色物质的一种症状。尿黑酸症是先天
性代谢缺陷症但不影响寿命。
解析:空
4. 遗漏扫描
答案:遗漏扫描是核糖体小亚基的一种运作方式。真核生物翻译起始
时核糖体小亚基会首先识别mRNA5′端的帽子结构,然后沿着
mRNA向下游扫描,一般以离5′端最近的一个AUG作为起始密码子,
但是如果该AUG所处环境与一致序列差别较大,则小亚基会越过第一
个AUG而选用下游处于更好环境中的AUG作为起始密码子,这种扫
描即为遗漏扫描。
解析:空
5. 跨膜蛋白
答案:跨膜蛋白是一种跨越整个生物膜一次或多次的蛋白。膜蛋白中
的整合蛋白嵌入膜脂双分子层中,其中两端分别暴露于膜两侧介质中。
解析:空
6. 组成型表达(constitute expression)
答案:组成型表达是指基因表达受环境因素的影响较小,在个体各个
生长阶段中几乎所有组织中持续表达,表达水平变化较小的现象。
解析:空
7. 沉默突变(silent mutation)同义突变(samesense mutation)
答案:沉默突变又称同义突变,是指在蛋白质编码区,突变的密码子
编码同样的氨基酸,突变结果对蛋白质的结构和功能不会产生任何影
响的点突变。
解析:空
8. 结构域(domain)
答案:结构域是指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成的三
级结构的局部折叠区,是相对独立的紧密球状实体,在空间上可以明
显区分的球状区域。是生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域。
在球形蛋白中,结构域具有自己特定的四级结构,其功能部依赖于蛋
白质分子中的其余部分,但是同一种蛋白质中不同结构域间常可通过
不具二级结构的短序列连接起来。蛋白质分子中不同的结构域常由基
因的不同外显子所编码。
解析:空
9. intron(内含子)[华中师范大学2009、华中农业大学2009、首
都师范大学2008研]
答案:intron(内含子)是指真核生物DNA中的间隔序列,它们在
转录后的修饰中被切除,最终不存在于成熟的mRNA分子中。
解析:空
10. 稀有tRNA
答案:稀有tRNA是指在细胞内的含量也比较低与稀有密码子对应的
同工受体tRNA。
解析:空
11. 第二信使[山东大学2005研]
答案:第二信使是指受细胞外信号的作用,在细胞质溶质内形成或向
细胞质溶质释放的细胞内小分子,负责将信号传到细胞内部,如
cAMP、IP3、Ca2+等。第二信使通过其浓度变化(增加或减少)应
答胞外信号与细胞表面受体的结合,调节细胞内酶和非酶蛋白的活性,
从而在细胞信号转导途径中行使携带和放大信号的功能。
解析:空
12. 呼吸链(respiratory chain)
答案:呼吸链(respiratory chain)是指由一系列的递氢反应和递电
子反应按一定的顺序排列所组成的连续反应体系,它将代谢物脱下的
成对氢原子交给氧生成水,同时有ATP生成。
解析:空
13. RNA干扰(RNA interference,RNAi)[华中科技大学2016研]
答案:RNA干扰(RNAi)是利用双链小RNA高效、特异性降解细
胞内同源mRNA从而阻断靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失表型的
现象。其分子机制是双链RNA(dsRNA)是RNAi的触发物,引发
与之互补的单链RNA(ssRNA)的降解,较长双链RNA经过Dicer
加工被降解形成21~25个核苷酸的siRNA,并有效地定位目标
mRNA。由siRNA中的反义链指导合成RISC(RNA诱导的沉默复
合体)的核蛋白体,再由RISC介导切割目的mRNA分子中与
siRNA反义链互补的区域,从而实现干扰靶基因表达的功能。
解析:空
3、填空题(150分,每题5分)
1. 在DNA自动化测序中,荧光基团可标记在ddNTP上,也可标记在
上。[中山大学2009研]
答案:引物
解析:荧光基团标记是测序仪检测DNA片段的必要条件。标记
ddNTP,则片段3′末端带有标记;标记引物,则片段5′末端带有标记。
2. 一般来说,用嗜热菌蛋白酶水解蛋白质所得到的片段,要比用胰
蛋白酶所得的片段。
答案:多些(或片段小些)
解析:
3. 不能使用Edman降解的方法直接测定促性腺激素释放因子的N端
氨基酸是因为。
答案:N端被封闭
解析:
4. 具有递氢作用的维生素有和。
答案:维生素B2|维生素PP
解析:
5. 同工酶往往具有动力学性质或调节性质,而在结构上有微小差别。
答案:相似
解析:
6. 嘧啶核苷酸从头合成第一个合成的核苷酸是。
答案:UMP或乳清酸核苷酸
解析:
7. 人体内脂肪酸经β氧化产生乙酰CoA,乙酰CoA可以在肌肉细胞
中进入三羧酸循环;在肝或肾细胞中可形成、和这三种物质统称为酮
体。乙酰CoA在体内的这两种去向是受的浓度调控的。
答案:乙酰乙酸|β羟丁酸|丙酮|草酰乙酸。
解析:
8. 只将氨基从一个氨基酸移向另一个氨基酸的脱氨基方式是。
答案:转氨基作用
解析:
9. 真核生mRNA转录后的成熟步骤主要包括、、。
答案:5′端加帽|3′端加polyA尾|剪接
解析:
10. DNA回旋酶又称拓扑异构酶,其功能是。[中山大学2009研]
答案:DNA回旋酶属于拓扑异构酶Ⅱ,其功能为引入负超螺旋,消除
复制叉前进过程中出现的扭曲张力。
解析:
11. 生物素是酶的辅酶。[中山大学2018研]
答案:丙酮酸羧化
解析:
12. 维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是,其次,大量存在于DNA
分子中的弱作用力如,和也起一定作用。
答案:碱基堆积力|氢键|离子键|范德华力
解析:
13. 核苷酸从头合成和补救合成中,其核糖的直接供体是。[中山大
学2018研]
答案:5磷酸核糖1焦磷酸(PRPP)
解析:
14. 是真核生物mRNA的前体形式,它一般含有和其他在RNA成熟过
程中被剪接掉的序列。
答案:不均一性RNA(hnRNA)或“初始转录物”|内含子
解析:
15. 和因分别发现了而共同获得1989年的诺贝
尔化学奖。
答案:核酶
解析:
16. 两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于中,RNA主要位于。
答案:细胞核|细胞质
解析:
17. 氯霉素能与核蛋白体亚基结合,抑制酶活性,从而抑制蛋白质
合成。
答案:50S|肽基转移
解析:
18. 为了糖酵解作用的继续,酵母菌细胞在无氧条件下,须利用作
用再生成,以提供糖酵解作用所需要的电子受体。[中国科学技术大学
2015研]
答案:糖异生|NAD+
解析:
19. 牛磺酸由转变而来;5羟色胺由转变而来;脑中的γ氨基丁酸
由衍生而来;儿茶酚胺是由酸转化而来的。
答案:半胱氨酸|色氨酸|谷氨酸|天冬氨酸
解析:
20. 甲状腺素的生物合成受到、的抑制。
答案:硫脲|硫脲嘧啶
解析:
21. 具有紫外光吸收能力的氨基酸是Phe、Tyr和Trp,其中的摩尔
吸光系数最大。
答案:Trp
解析:
22. 柠檬酸可以增强ATP对的抑制作用。[南开大学研]
答案:磷酸果糖激酶
解析:细胞内柠檬酸含量高,意味着有丰富的生物合成前体存在,无
需提供合成的前体而降解,柠檬酸是通过加强ATP的抑制效应来抑制
磷酸果糖激酶的活性,从而使降解过程减慢。
23. 核蛋白体的P位是的部位,A位是的部位。
答案:结合肽酰tRNA的肽酰基|结合氨基酰tRNA的氨酰基
解析:
24. P700是强电子,P680是强电子。
答案:供体|受体
解析:
25. HMP途径氧化阶段的两个关键酶是和,还原阶段的两个关键酶是
和,为生物体提供的主要贡献是和等。[复旦大学2007研]
答案:6磷酸葡萄糖脱氢酶|6磷酸葡萄糖酸脱氢酶|转酮酶|转醛酶
|NADPH|磷酸戊糖
解析:
26. 真核生物染色体DNA的主要结构特点有。
答案:有重复序列和内含子
解析:
27. 许多代谢途径第一个酶是该途径的限速酶,终产物是它的,对
它进行;底物多为其。
答案:别构抑制剂|反馈抑制|别构激活剂
解析:
28. 通常被用来衡量酶与底物亲和力大小的指标为,被用来衡量酶
的催化效率的指标为。
答案:Km值|Kcat
解析:
29. 维生素B1是由和借助甲烯基连接成的水溶性维生素。
答案:嘧啶环|噻唑环
解析:
30. 在呼吸链中单纯催化电子转移的成分是和。
答案:细胞色素|FeS蛋白
解析:
4、简答题(50分,每题5分)
1. 怎样证明琥珀酸脱氢酶的辅基是与酶蛋白之间以共价键相结合的?
答案:证明琥珀酸脱氢酶的辅基是与酶蛋白之间以共价键相结合的方
法:先分离纯化出琥珀酸脱氢酶,然后使用蛋白酶或者无机酸,将琥
珀酸脱氢酶完全水解,水解的产物进行氨基酸分析,如纸电泳。将电
泳的指纹图与标准电泳图谱进行比较,找出异常的条带,回收该条带
的样品,进行进一步的分析。最终可确定FAD是不是与酶蛋白以共价
键相连,并且能够弄清楚它与哪一个氨基酸残基相连。
解析:空
2. β碳原子被同位素(14C)标记的丝氨酸有很多用途,但通常不
用它来作为标记物研究蛋白质的生物合成,这是因为它在体内不仅能
标记蛋白质,还能标记核酸、碳水化合物以及脂类。试问它如何能够
标记这些化合物的?
答案: β碳原子被同位素(14C)标记的丝氨酸可经过下面的反应
标记糖、磷脂和核酸:
解析:空
3. 2,4二硝基苯酚(DNP)是哪一类氧化磷酸化抑制剂及其功能是什
么?它如何实现这一功能?[四川大学研]
答案: (1)2,4二硝基苯酚是解偶联剂。其功能是只抑制ATP
的形成,不抑制电子传递,使电子传递产生的自由能都变为热能。
(2)实现这一功能是因为2,4二硝基苯酚是一种亲脂的弱酸性化
合物,它能以中性的质子状态穿过线粒体脂质双分子层的内膜。当存
在跨膜的质子梯度时,它在膜的酸性侧结合质子,成为一种中性的不
带电荷的状态,通过扩散穿过膜,并在膜的碱性侧释放出质子(呼吸
链中的质子H+不经ATP合成酶系的质子通道回流),降低或消除了
H+的跨膜梯度,从而抑制ADP磷酸化生成ATP,由电化学能贮存的
能量以热能形式释放。
解析:空
4. 为什么DNA聚合酶有核酸酶活性而RNA聚合酶无核酸酶活性?
答案: DNA聚合酶有核酸酶活性而RNA聚合酶无核酸酶活性的
原因:
(1)DNA聚合酶负责染色体DNA的复制,通过复制把亲代所
携带的遗传信息准确地传递给子代。DNA复制时出现错误影响到遗传
信息的准确传递,造成突变和大部分子代细胞死亡。因此DNA聚合
酶应具有3′→5′外切核酸酶活性以随时修正复制过程中出现的错配核
苷酸,保证遗传信息传递的稳定性。大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的5′→3′
外切酶活性是用于切除冈崎片段的RNA引物及切除受损伤的DNA片
段,以便合成正确的DNA链替换,因此,这些外切酶活性是DNA复
制、修复、重组所必需的。
(2)RNA聚合酶可催化大量mRNA的合成,且合成的mRNA
的半衰期很短。转录时个别错配碱基的出现,也会导致合成的蛋白质
的个别氨基酸与正常的不同,但细胞可以容忍这些小的错误发生。
解析:空
5. 提高天冬氨酸和谷氨酸的合成会对TCA循环产生何种影响?细胞
会怎样应付这种状况?
答案: (1)提高天冬氨酸和谷氨酸的合成,将会减少草酰乙酸和
α酮戊二酸的量。如果这两种物质不能被有效的补充,将会影响到
TCA循环,进而影响乙酰CoA的氧化和ATP的合成。
(2)体内存在的一系列的回补反应可即时补充草酰乙酸和α酮戊
二酸的量。
解析:空
6. 写出辅基TPP的化学名称及其参与的化学反应类型。[山东大学
2016研]
答案:TPP的化学名称是焦磷酸硫胺素。维生素B1的辅酶形式,参
与的化学反应类型是转醛基反应。
解析:空
7. 如果某种密码子5′端的核苷酸发生突变,可能对蛋白质合成发
生什么样的影响?如果该种tRNA反密码子的5′端的核苷酸发生突变,
又会对蛋白质的合成有什么样的影响?
答案: (1)如果某种密码子5′端的核苷酸发生突变,则蛋白质合
成无法进行或蛋白质合成错误。若该密码子为起始密码子,则合成无
法开始;若为非起始密码子,可能与该密码子结合的氨酰tRNA不是
原来的氨酰tRNA,因此会在蛋白质中加入错误的氨基酸。
(2)如果该种tRNA的反密码子5′端的核苷酸发生突变,则蛋
白质可能正常合成也可能合成错误。因为密码的变偶性,反密码子的
第一位碱基和密码子第三位碱基的配对可以在一定范围内变动,这就
使得反密码子的5′端的核苷酸突变有时对蛋白质的合成没有影响。
解析:空
8. RNA和DNA在化学组成上有什么差异?为什么没有生物体具有大
的RNA基因组?为什么蛋白质不能序列特异性识别双链RNA?[中国科
学技术大学2016研]
答案: (1)DNA与RNA在化学组成上的区别:
①DNA中的五碳糖是脱氧核糖,而RNA是核糖;
②构成他们的四种碱基略有差别,RNA中是以尿嘧啶U代替了
DNA中的胸腺嘧啶T;
③DNA是双链分子,而RNA是单链分子;
(2)生物体不具有大的RNA基因组的原因如下:
①从结构上来说,RNA是单链,不稳定,而DNA是双螺旋结构,
能够稳定的存在和复制。
②转录时,DNA是以其中的一条链为模板,称模板链,另一条不
转录的链就称为编码链,这样的转录形式能保证遗传信息地准确传递,
而RNA要先逆转录为cDNA,然后经复制才能形成双链,这样不仅
会导致某些遗传信息的缺失,而且人体内也不普遍存在逆转录酶,因
此以RNA为遗传物质的大的基因组并不能使遗传信息得以表达。
解析:空
9. 糖蛋白的寡糖链有何生物学功能?
答案: 糖蛋白上的亲水性糖链不仅可以改变其蛋白组分的极性和
溶解度,而且空间及电荷性互作还可能会影响到多肽链的局部构象,
从而避免蛋白组分被水解。寡糖链的其他生物学功能有以下几点:
(1)参与新生肽链的折叠和缔合;
(2)影响糖蛋白的分泌和稳定性;
(3)参与分子识别和细胞识别;
(4)与糖蛋白的生物活性有关。
解析:空
10. 单脂与复脂在结构上的区别是什么?复脂的分类是根据什么基
础?磷脂和糖脂在结构上有无相似之处?试用结构式加以说明。
答案: (1)脂质可分为单脂与复脂两大类,它们在结构上的区别
是:
①单脂,即单纯脂质,为脂酸与醇(甘油醇、高级一元醇)所组
成的酯类。
②复脂,即复合脂质,为脂酸与醇(甘油醇,鞘氨醇)所生成的
酯,同时含有其他非脂性物质,如糖、磷酸及氮碱等。
(2)复脂的分类基础
复脂是指含磷酸或含糖的脂质,根据其含有的不同非脂性物质,
可分磷脂与糖脂两类。
(3)磷脂和糖脂在结构上的比较
①磷脂是指含磷酸与氮碱的脂质,分甘油醇磷脂和鞘氨醇磷脂两
类。鞘氨醇磷脂不含甘油醇而含鞘氨醇。
②糖脂是指含糖分子的脂质,由鞘氨醇或甘油醇与脂酸和糖所组
成,如脑苷脂和神经节苷脂等。
磷脂与糖脂在结构上的差异:磷脂是醇基与磷酸基团形成的脂,
而糖脂是醇基与糖形成的脂。
解析:空
5、计算题(5分,每题5分)
1. 何谓PCR技术?简述其原理、应用及派生的PCR相关技术。
答案: (1)PCR技术是指在模板DNA、引物和4种脱氧核糖核
苷酸存在下依赖于DNA聚合酶的DNA酶促合成反应。反应分三步:
①变性;②退火;③延伸。
(2)PCR技术在生命科学领域里的应用相当广泛:①遗传疾病
的诊断;②癌基因的检测;③在法医学上的应用;④在分子生物学上
的应用等。
(3)基于对PCR基本原理的认识和基本技术的掌握,相应地派
生出了许多的新的相关技术和改良方法。
①PCRRFLP技术:PCRRFLP全称多聚酶链反应(PCR)限制性
片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,
RFLP)分析。PCRRFLP主要有二个环节:a.靶基因PCR扩增;
b.扩增的DNA片段限制性酶切图谱(长度多态性)。PERRFLP主
要用于核酸变异性分析与比较。
②PCRSSCP技术:是聚合酶链反应单链构象多态性分析(single
strand conformation polymorphism)的简称,原理是将经扩增
的DNA片段经过变性处理,形成单链,由于序列不同,单链构象就
有差异在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳的迁移率不同,通过与标准物的
对比,即可检测出有无突变,该技术已广泛应用于检测各种病原体基
因的点突变及缺失突变,基因的多态性分析等。
③不对称PCR直接测序法:在扩增反应中加入不等量的两段寡核
苷酸引物,通过PCR扩增获得单链DNA,然后利用双脱氧法直接测