2024年4月1日发(作者：森采萱)
一、粒系和单核系细胞抗原表达规律
粒系和单核系细胞起源于共同的祖细胞，随着细胞的分化，出现髓系祖细胞及单核系祖细胞。但在
这个阶段两系造血祖细胞的抗原表达是相同的，没有区别。进一步分化则出现一些抗原表达的不同。通过
对正常造血细胞的研究将粒细胞发育分为5 期，将单核细胞发育分为3 期。
(一) 粒细胞抗原表达规律
第I 期:粒细胞表达CD34 、HLA - DR、CD13、CD45、较高水平的CD33，此时不表达其他成熟标志。FSC中等
大小,SSC较小。分选出这部分细胞为原粒细胞。
第II 期: CD34 、HLA - DR 表达下调，变为阴性。CD15 出现高表达， CD33 表达水平轻度减低。CD13、
CD45 荧光强度不变。SSC 值增大。此部分细胞为早幼粒细胞
第III期:主要变化为出现中等水平的CDllb, CD13表达减弱， CD33 表达与II 期相同,CD45阳性。此期细胞
为中幼粒细胞。
第Ⅳ期: CD13 表达再次增强，并出现CD16的表达， CD33表达进一步减低。CDllb 和CD15 表达增强。此期
细胞形态上为晚幼粒细胞。
第V 期: CDllb、CD13、CD45 表达最强， CD15阳性， CD33弱阳性。此期细胞代表中性分叶核粒细胞。
根据对CD64 的检测， CD64 在原粒细胞为阴性，在早幼粒细胞开始出现，荧光强度在10左右。在
成熟期(V)期，强度减低到10 左右。在原粒至早幼粒细胞阶段， CD117 为阳性，在中幼粒阶段变为阴性。
(二) 单核细胞抗原表达规律
第I 期:原单核细胞，表达中等程度的CD45 、CD34 、CD33 、CD13 和HLA - DR 。与原粒细胞不能区分。
第II 期:幼单核细胞， CDllb 表达快速上调， CD13 、CD33 表达有所增加， CD45 仍保持中等水平。HLA
- DR 表达减弱，但仍为阳性。
第Ⅲ期:成熟单核细胞， CD14 表达快速上调， CD45 表达水平也增加。CD13 、CD33 、HLA - DR 阳性。
注意，成熟中性粒细胞与成熟单核细胞HLA - DR 表达明显不同，前者为阴性，后者为阳性; CD14 在
成熟单核细胞为阳性，而粒细胞为阴性。而CD64 、CD33 表达强度也明显不同。
(一) B 淋巴细胞抗原表达规律
分为4 期。
第I 期:原始B 淋巴细胞，表达CD34、HLA - DR、TdT, CDlO高表达， CD19、CD45、CD22表达较弱。
第II 期: CD19、CD45量增加,CDlO 量减少。CD34、TdT 变为阴性。CD20开始表达， CD22强度不变，仍较
弱。胞质IgM 阳性。
第Ⅲ期: CD20、CD45的强度继续增加达到最大值。CDlO减少至阴性。此期CD5为阳性。可以表现为CD5与CDlO
同时阳性。FMC7及表面IgM 也在此期出现。
第Ⅳ期:出现CD23、CD22的强度明显增加。CD5消失，CD19、CD45保持高水平表达，CD20 强度轻度减低。
(二) T 淋巴细胞抗原表达规律
T 淋巴细胞在胸腺内分化发育，分为4 期。
第I 期: CD7、CD10 高水平表达，但CD3 阴性。CDla 量逐渐增加。只有1/3 细胞表达CD34，并表达CD2、
CD5。CD2表达水平在整个成熟过程中保持不变。
第II 期:抗原表达与第III期相似，但细胞体积较第III期大。在小鼠胸腺内，相当于皮质淋巴细胞。
CDla 、CD45 表达量增加，出现CD4 +/CD8 +细胞， CD7 强度减低。
第III期:出现CD3 表达，其他抗原同第II 期，但细胞体积变小。
第Ⅳ期: CD3、CD7 表达强度达到最大， CDla 变为阴性。CD4 与CD8 变为单阳细胞。CD2、CD5持续阳
性。
2
在T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、髓细胞的发育过程中， CD3、CD22、CDl3 抗原在胞质的出现早于胞膜。
在发育的早期阶段，胞膜为阴性时，胞质可为阳性。CD79a 是B 淋巴细胞的特异性标志，只表达于胞质，
不表达于胞膜。MPO 为髓系最特异的标志，以往利用细胞组化检测该酶的活性(POX 染色) ，而免疫标记
MPO ，是检测该酶的蛋白成分，因此可以在MPO 表现出酶的活性前，用抗体检测MPO 的蛋白前体，故其灵
敏度比组化染色高。胞质CD3 、CD79a(CD22) 、MPO 是T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、髓系特异性较高的标志，
常用于鉴别不同系列的白血病细胞。
白血病分类中免疫标记技术的应用与意义
应用免疫标记技术对细胞的属性、分化阶段或变异进行鉴别，有助于白血病的诊断和分类。其特点是特异
性强、灵敏性高，并可在原位直接进行定性和半定量的形态学观察，也可进行定量测定和分选，为疾病的
诊断和发病机制的研究提供强有力的手段。[4]
1． AML
MO：其特征为T、B细胞标记的阴性，主要是CD19、CD20、CD22与CD3、CD5、CD7。虽然现在CD10已不作
为B细胞的特异性标记，但CD10也必须阴性。作为干、祖细胞标记的CD34、CD38和HLA-DR均为阳性，具
有特征性的TdT标记应有至少30%的原始细胞会呈阳性表达。而髓系特征不能过多，通常是CD13、CD33、
CD117中的任何一项呈阳性表达；CD68、MPO大多阴性。若髓系有两个以上标记呈阳性，应考虑未成熟的急
性髓细胞白血病。流式上有低的SSC和FSC。在CD45－SSC图上出现在淋巴细胞位置上，至少表达一个特
异性标志，如CD13或CD116，但MPO比CD13与CD33更灵敏。一般淋系标志阴性，但也可表达CD7或CD4，
一般HLA－DR、CD34阳性。有些研究表明CD7与CD34共表达在AML，预后差。
M1：骨髓中原始粒细胞（Ⅰ型+Ⅱ型）≥90%（NEC），并伴形态学异常。早幼粒细胞很少，中幼粒细胞以下
阶段不见或罕见。流式上M1与M0相似不易区分，M1一般CD13＋、CD33＋、HLA-DR－，但CD34表达少于
M0，可能表达部分CD15。
M2：骨髓粒系明显增生，原始细胞明显增多，但可<30%，以异常的中性中幼粒细胞增生为主，其胞核常有
1-2个大核仁，核质发育显著不平衡。
M3：骨髓中以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主，早幼粒与原粒之比应在3：1以上。异常早幼粒细胞其
胞核大小不一，胞质中有大小不等的颗粒，可见束状的Auer小体，也可逸出胞体之外。依颗粒粗细分为粗
颗粒和细颗粒两个亚型。免疫标记具有髓系特征而HLA-DR阴性。流式上显示高颗粒性，具较高的SSC，多
数情况HLA-DR（-）或表达减少，CD34少于M2，一般CD13弱（＋），可有CD2表达。
M4与M5：两型表型相似，但M4较M5表达更多的CD34（＋），较之M0、M1，M4与M5有更大的FSS和SSC，
CD45－SSC图上，成熟细胞出现在单核区，重要的表型为CD13、CD33、HLA－DR、CD14和CD15，CD33可表
达强于CD13，CD33（＋）、CD13（－）、CD34（－）很可能为M5，但只出现在少数病人中，部分M5可见
CD56（＋）。
M6：较少见并且特征不明显，一般HLA－DR、CD34、CD13、CD33阳性，CD45－SSC图显示主要为红系成份。
M7：少于1％，一般CD61（GpⅢa）和/或CD41（GpⅡb-Ⅲa）阳性，可以用流式双色分析在EDTA存在下测
GpⅡb/Ⅲa与CD34，以减少激活血小板的粘附。
2．ALL
B祖细胞型ALL：一般TdT(+)、HLA-DR(+)、CD19(+)，此型又分为2个亚型，CD10＋和CD10－，前者预后
好。多数病例CD24＋、CD34＋、CD20表达随成熟度增加而增加。
前B细胞型ALL：一般为细胞CD19＋、CD24+、HLA－DR＋，胞浆CD22＋、CD10＋、TdT随CD20变化，CD34
多为阴性，比B祖细胞型预后更差。
B细胞型ALL：比B祖细胞型ALL有更大的FSC和SSC，在CD45－SSC图上出现在淋巴和单核细胞区域，表
型为CD19、CD20、CD22、CD24，多数病例CD10＋。
T细胞型ALL：多数病例有大的FSC、SSC，在CD45－SSC图上可能出现在淋系未成熟细胞和髓系未成熟细
胞或单核细胞区。最常见亚型为皮质晚期表达，CD1、CD2、CD5、CD7、CD4/ CD8双阳与极少膜表面CD3、
TdT多为阳性，另一常见亚型为皮质早期表达，CD2、CD5、CD7、TdT强表达。
3．CML
由于慢性期显著的细胞分化，在CD45－SSC图上除了髓系细胞占主导外，只显示一个正常骨髓像，CML可
确诊。流式细胞术对急变期的诊断具有极高价值，直接影响到治疗效果。急变期CML主要表现为髓系，偶
为淋系。髓性急变可表现出多种形态包括未分化细胞，淋性急变具典型形态特征，为CD10＋。
4．CLL
免疫分型主要为：B系抗原CD19、CD20、CD43、CD79a与CD5共表达，CD23表达使得CLL区别于毛细胞淋巴癌
MCL。CD10－、CD23－、CD11c和CD25、CD20常弱表达。B型前淋巴细胞白血病B－DLL较CLL更为严重，流式
细胞术在区分B－DLL和CLL上发挥很大作用，B－DLL多为CD5－、CD22＋。[5]
活着就是痛苦的根源，
痛苦是什么？
一种情绪而已！
就像喜怒哀乐愁
就像黄绿青蓝紫
都只是生活中的色彩之一
2024年4月1日发(作者：森采萱)
一、粒系和单核系细胞抗原表达规律
粒系和单核系细胞起源于共同的祖细胞，随着细胞的分化，出现髓系祖细胞及单核系祖细胞。但在
这个阶段两系造血祖细胞的抗原表达是相同的，没有区别。进一步分化则出现一些抗原表达的不同。通过
对正常造血细胞的研究将粒细胞发育分为5 期，将单核细胞发育分为3 期。
(一) 粒细胞抗原表达规律
第I 期:粒细胞表达CD34 、HLA - DR、CD13、CD45、较高水平的CD33，此时不表达其他成熟标志。FSC中等
大小,SSC较小。分选出这部分细胞为原粒细胞。
第II 期: CD34 、HLA - DR 表达下调，变为阴性。CD15 出现高表达， CD33 表达水平轻度减低。CD13、
CD45 荧光强度不变。SSC 值增大。此部分细胞为早幼粒细胞
第III期:主要变化为出现中等水平的CDllb, CD13表达减弱， CD33 表达与II 期相同,CD45阳性。此期细胞
为中幼粒细胞。
第Ⅳ期: CD13 表达再次增强，并出现CD16的表达， CD33表达进一步减低。CDllb 和CD15 表达增强。此期
细胞形态上为晚幼粒细胞。
第V 期: CDllb、CD13、CD45 表达最强， CD15阳性， CD33弱阳性。此期细胞代表中性分叶核粒细胞。
根据对CD64 的检测， CD64 在原粒细胞为阴性，在早幼粒细胞开始出现，荧光强度在10左右。在
成熟期(V)期，强度减低到10 左右。在原粒至早幼粒细胞阶段， CD117 为阳性，在中幼粒阶段变为阴性。
(二) 单核细胞抗原表达规律
第I 期:原单核细胞，表达中等程度的CD45 、CD34 、CD33 、CD13 和HLA - DR 。与原粒细胞不能区分。
第II 期:幼单核细胞， CDllb 表达快速上调， CD13 、CD33 表达有所增加， CD45 仍保持中等水平。HLA
- DR 表达减弱，但仍为阳性。
第Ⅲ期:成熟单核细胞， CD14 表达快速上调， CD45 表达水平也增加。CD13 、CD33 、HLA - DR 阳性。
注意，成熟中性粒细胞与成熟单核细胞HLA - DR 表达明显不同，前者为阴性，后者为阳性; CD14 在
成熟单核细胞为阳性，而粒细胞为阴性。而CD64 、CD33 表达强度也明显不同。
(一) B 淋巴细胞抗原表达规律
分为4 期。
第I 期:原始B 淋巴细胞，表达CD34、HLA - DR、TdT, CDlO高表达， CD19、CD45、CD22表达较弱。
第II 期: CD19、CD45量增加,CDlO 量减少。CD34、TdT 变为阴性。CD20开始表达， CD22强度不变，仍较
弱。胞质IgM 阳性。
第Ⅲ期: CD20、CD45的强度继续增加达到最大值。CDlO减少至阴性。此期CD5为阳性。可以表现为CD5与CDlO
同时阳性。FMC7及表面IgM 也在此期出现。
第Ⅳ期:出现CD23、CD22的强度明显增加。CD5消失，CD19、CD45保持高水平表达，CD20 强度轻度减低。
(二) T 淋巴细胞抗原表达规律
T 淋巴细胞在胸腺内分化发育，分为4 期。
第I 期: CD7、CD10 高水平表达，但CD3 阴性。CDla 量逐渐增加。只有1/3 细胞表达CD34，并表达CD2、
CD5。CD2表达水平在整个成熟过程中保持不变。
第II 期:抗原表达与第III期相似，但细胞体积较第III期大。在小鼠胸腺内，相当于皮质淋巴细胞。
CDla 、CD45 表达量增加，出现CD4 +/CD8 +细胞， CD7 强度减低。
第III期:出现CD3 表达，其他抗原同第II 期，但细胞体积变小。
第Ⅳ期: CD3、CD7 表达强度达到最大， CDla 变为阴性。CD4 与CD8 变为单阳细胞。CD2、CD5持续阳
性。
2
在T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、髓细胞的发育过程中， CD3、CD22、CDl3 抗原在胞质的出现早于胞膜。
在发育的早期阶段，胞膜为阴性时，胞质可为阳性。CD79a 是B 淋巴细胞的特异性标志，只表达于胞质，
不表达于胞膜。MPO 为髓系最特异的标志，以往利用细胞组化检测该酶的活性(POX 染色) ，而免疫标记
MPO ，是检测该酶的蛋白成分，因此可以在MPO 表现出酶的活性前，用抗体检测MPO 的蛋白前体，故其灵
敏度比组化染色高。胞质CD3 、CD79a(CD22) 、MPO 是T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、髓系特异性较高的标志，
常用于鉴别不同系列的白血病细胞。
白血病分类中免疫标记技术的应用与意义
应用免疫标记技术对细胞的属性、分化阶段或变异进行鉴别，有助于白血病的诊断和分类。其特点是特异
性强、灵敏性高，并可在原位直接进行定性和半定量的形态学观察，也可进行定量测定和分选，为疾病的
诊断和发病机制的研究提供强有力的手段。[4]
1． AML
MO：其特征为T、B细胞标记的阴性，主要是CD19、CD20、CD22与CD3、CD5、CD7。虽然现在CD10已不作
为B细胞的特异性标记，但CD10也必须阴性。作为干、祖细胞标记的CD34、CD38和HLA-DR均为阳性，具
有特征性的TdT标记应有至少30%的原始细胞会呈阳性表达。而髓系特征不能过多，通常是CD13、CD33、
CD117中的任何一项呈阳性表达；CD68、MPO大多阴性。若髓系有两个以上标记呈阳性，应考虑未成熟的急
性髓细胞白血病。流式上有低的SSC和FSC。在CD45－SSC图上出现在淋巴细胞位置上，至少表达一个特
异性标志，如CD13或CD116，但MPO比CD13与CD33更灵敏。一般淋系标志阴性，但也可表达CD7或CD4，
一般HLA－DR、CD34阳性。有些研究表明CD7与CD34共表达在AML，预后差。
M1：骨髓中原始粒细胞（Ⅰ型+Ⅱ型）≥90%（NEC），并伴形态学异常。早幼粒细胞很少，中幼粒细胞以下
阶段不见或罕见。流式上M1与M0相似不易区分，M1一般CD13＋、CD33＋、HLA-DR－，但CD34表达少于
M0，可能表达部分CD15。
M2：骨髓粒系明显增生，原始细胞明显增多，但可<30%，以异常的中性中幼粒细胞增生为主，其胞核常有
1-2个大核仁，核质发育显著不平衡。
M3：骨髓中以颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主，早幼粒与原粒之比应在3：1以上。异常早幼粒细胞其
胞核大小不一，胞质中有大小不等的颗粒，可见束状的Auer小体，也可逸出胞体之外。依颗粒粗细分为粗
颗粒和细颗粒两个亚型。免疫标记具有髓系特征而HLA-DR阴性。流式上显示高颗粒性，具较高的SSC，多
数情况HLA-DR（-）或表达减少，CD34少于M2，一般CD13弱（＋），可有CD2表达。
M4与M5：两型表型相似，但M4较M5表达更多的CD34（＋），较之M0、M1，M4与M5有更大的FSS和SSC，
CD45－SSC图上，成熟细胞出现在单核区，重要的表型为CD13、CD33、HLA－DR、CD14和CD15，CD33可表
达强于CD13，CD33（＋）、CD13（－）、CD34（－）很可能为M5，但只出现在少数病人中，部分M5可见
CD56（＋）。
M6：较少见并且特征不明显，一般HLA－DR、CD34、CD13、CD33阳性，CD45－SSC图显示主要为红系成份。
M7：少于1％，一般CD61（GpⅢa）和/或CD41（GpⅡb-Ⅲa）阳性，可以用流式双色分析在EDTA存在下测
GpⅡb/Ⅲa与CD34，以减少激活血小板的粘附。
2．ALL
B祖细胞型ALL：一般TdT(+)、HLA-DR(+)、CD19(+)，此型又分为2个亚型，CD10＋和CD10－，前者预后
好。多数病例CD24＋、CD34＋、CD20表达随成熟度增加而增加。
前B细胞型ALL：一般为细胞CD19＋、CD24+、HLA－DR＋，胞浆CD22＋、CD10＋、TdT随CD20变化，CD34
多为阴性，比B祖细胞型预后更差。
B细胞型ALL：比B祖细胞型ALL有更大的FSC和SSC，在CD45－SSC图上出现在淋巴和单核细胞区域，表
型为CD19、CD20、CD22、CD24，多数病例CD10＋。
T细胞型ALL：多数病例有大的FSC、SSC，在CD45－SSC图上可能出现在淋系未成熟细胞和髓系未成熟细
胞或单核细胞区。最常见亚型为皮质晚期表达，CD1、CD2、CD5、CD7、CD4/ CD8双阳与极少膜表面CD3、
TdT多为阳性，另一常见亚型为皮质早期表达，CD2、CD5、CD7、TdT强表达。
3．CML
由于慢性期显著的细胞分化，在CD45－SSC图上除了髓系细胞占主导外，只显示一个正常骨髓像，CML可
确诊。流式细胞术对急变期的诊断具有极高价值，直接影响到治疗效果。急变期CML主要表现为髓系，偶
为淋系。髓性急变可表现出多种形态包括未分化细胞，淋性急变具典型形态特征，为CD10＋。
4．CLL
免疫分型主要为：B系抗原CD19、CD20、CD43、CD79a与CD5共表达，CD23表达使得CLL区别于毛细胞淋巴癌
MCL。CD10－、CD23－、CD11c和CD25、CD20常弱表达。B型前淋巴细胞白血病B－DLL较CLL更为严重，流式
细胞术在区分B－DLL和CLL上发挥很大作用，B－DLL多为CD5－、CD22＋。[5]
活着就是痛苦的根源，
痛苦是什么？
一种情绪而已！
就像喜怒哀乐愁
就像黄绿青蓝紫
都只是生活中的色彩之一