2024年4月2日发(作者：包冉冉)
Loading Control–WB不可或缺的武器
内参的使用――WB过程监测以及目的蛋白定量的标准！
在WB试验中中，最重要和最不可或缺的对照就是内参照（Loading Control，
Internal Control）。内参照的使用有两个方面的作用：
1. 是检测整个WB实验过程及体系是否正常工作，如果一个实验连内参照都
出不料阳性结果的话（在内参抗体有效的情况下），那么这个体系就是存
在问题的了
2. 半定量的标准：内参一般选择的管家基因编码表达的蛋白，在很多组织和
细胞中中都是稳定表达的，因此可以作为检测靶蛋白表达量的标准。
Rabbit polyclonal to beta actin (ab8227) at 1/5000.
Lane 1: HeLa whole cell extract (20ug);
Lane 2: yeast cell extract (20ug)
Lane 3: mouse brain tissue lysate (20ug).
Developed using Goat anti-rabbit IgG (HRP) (ab6721) at 1/2000.
Don’t be a cowboy, use a Loading Control!
WB常用内参及其技术参数：
内参名称
beta-actin
GAPDH
Tubulin
VCDA1/Porin
COXIV
TBP
分子量大小
43kDa
30-40kDa
55kDa
31kDa
16kDa
38kDa
适用范围
胞浆和全细胞
胞浆和全细胞
胞浆和全细胞
线粒体
线粒体
细胞核
Abcam作为全球最大抗体供应商，拥有非常齐全的Loading Control，绝对能满
足您WB的需求！
目录号 产品描述 规格 价格
ab6276 beta Actin antibody [AC-15]-loading control 100 ul 3968
ab8226 beta Actin antibody [mAbcam 8226] - Loading Control 100ug 3968
ab8226 beta Actin antibody [mAbcam 8226] - Loading Control 25ug 1380
ab8227 beta Actin antibody - Loading Control 50ul 3968
ab13822 beta Actin antibody - Loading Control 100ug 3450
ab9484 GAPDH antibody [mAbcam 9484] - Loading Control 200ug 3968
ab9485 GAPDH antibody - Loading Control 100ug 3795
ab9485 GAPDH antibody - Loading Control 25ug 1553
VDAC1 / Porin antibody - Mitochondrial Loading
ab15859 100ug 3795
Control
VDAC1 / Porin antibody - Mitochondrial Loading
ab15859 25ug 1380
Control
VDAC1 / Porin antibody [20B12] – Mitochondrial
ab14734 100ug 3450
Loading Control
ab6046 beta Tubulin antibody – Loading Control 100ug 3795
ab6046 beta Tubulin antibody – Loading Control 25ug 1380
ab21057 beta Tubulin antibody - Loading Control 100ug 3450
ab4074 alpha Tubulin antibody - Loading Control 100ug 3795
ab4074 alpha Tubulin antibody - Loading Control 25ug 1380
ab7291 alpha Tubulin antibody [DM1A] - Loading Control 100ug 3795
ab7291 alpha Tubulin antibody [DM1A] - Loading Control 25ug 1380
ab14744 COX IV antibody [20E8] - Loading Control 100ug 3795
ab16056 COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control 100ug 3795
ab16056 COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control 25ug 1380
ab33985 COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control 100ug 3968
ab818 TBP antibody [1TBP18] - Nuclear Loading Control 100ug 3968
TBP antibody [mAbcam 62126] - Nuclear Loading
ab62126 100ug 3450
Control and ChIP Grade
WESTERN BLOT 常见问题解答
(2007-07-12 16:09:27)
分类：转载文章
AA. 转膜后经丽春红染色的条带，为什么大蛋白分子的一端（即点样空的一侧）的转膜好
象不是很好，为什么？
解答：这是正常的，大分子的蛋白转移的慢，你延长转移时间和电流，大分子一端就会好的
多，但是小分子的就有可能会变淡。
BB. 我想问您裂解细胞用三去污裂解法，还是用上样缓冲液？
解答：用上样缓冲液，这样有几个好处，可以提取总蛋白，同时又可以让磷酸化酶失活。
2024年4月2日发(作者：包冉冉)
Loading Control–WB不可或缺的武器
内参的使用――WB过程监测以及目的蛋白定量的标准！
在WB试验中中，最重要和最不可或缺的对照就是内参照（Loading Control，
Internal Control）。内参照的使用有两个方面的作用：
1. 是检测整个WB实验过程及体系是否正常工作，如果一个实验连内参照都
出不料阳性结果的话（在内参抗体有效的情况下），那么这个体系就是存
在问题的了
2. 半定量的标准：内参一般选择的管家基因编码表达的蛋白，在很多组织和
细胞中中都是稳定表达的，因此可以作为检测靶蛋白表达量的标准。
Rabbit polyclonal to beta actin (ab8227) at 1/5000.
Lane 1: HeLa whole cell extract (20ug);
Lane 2: yeast cell extract (20ug)
Lane 3: mouse brain tissue lysate (20ug).
Developed using Goat anti-rabbit IgG (HRP) (ab6721) at 1/2000.
Don’t be a cowboy, use a Loading Control!
WB常用内参及其技术参数：
内参名称
beta-actin
GAPDH
Tubulin
VCDA1/Porin
COXIV
TBP
分子量大小
43kDa
30-40kDa
55kDa
31kDa
16kDa
38kDa
适用范围
胞浆和全细胞
胞浆和全细胞
胞浆和全细胞
线粒体
线粒体
细胞核
Abcam作为全球最大抗体供应商，拥有非常齐全的Loading Control，绝对能满
足您WB的需求！
目录号 产品描述 规格 价格
ab6276 beta Actin antibody [AC-15]-loading control 100 ul 3968
ab8226 beta Actin antibody [mAbcam 8226] - Loading Control 100ug 3968
ab8226 beta Actin antibody [mAbcam 8226] - Loading Control 25ug 1380
ab8227 beta Actin antibody - Loading Control 50ul 3968
ab13822 beta Actin antibody - Loading Control 100ug 3450
ab9484 GAPDH antibody [mAbcam 9484] - Loading Control 200ug 3968
ab9485 GAPDH antibody - Loading Control 100ug 3795
ab9485 GAPDH antibody - Loading Control 25ug 1553
VDAC1 / Porin antibody - Mitochondrial Loading
ab15859 100ug 3795
Control
VDAC1 / Porin antibody - Mitochondrial Loading
ab15859 25ug 1380
Control
VDAC1 / Porin antibody [20B12] – Mitochondrial
ab14734 100ug 3450
Loading Control
ab6046 beta Tubulin antibody – Loading Control 100ug 3795
ab6046 beta Tubulin antibody – Loading Control 25ug 1380
ab21057 beta Tubulin antibody - Loading Control 100ug 3450
ab4074 alpha Tubulin antibody - Loading Control 100ug 3795
ab4074 alpha Tubulin antibody - Loading Control 25ug 1380
ab7291 alpha Tubulin antibody [DM1A] - Loading Control 100ug 3795
ab7291 alpha Tubulin antibody [DM1A] - Loading Control 25ug 1380
ab14744 COX IV antibody [20E8] - Loading Control 100ug 3795
ab16056 COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control 100ug 3795
ab16056 COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control 25ug 1380
ab33985 COX IV antibody - Mitochondrial Loading Control 100ug 3968
ab818 TBP antibody [1TBP18] - Nuclear Loading Control 100ug 3968
TBP antibody [mAbcam 62126] - Nuclear Loading
ab62126 100ug 3450
Control and ChIP Grade
WESTERN BLOT 常见问题解答
(2007-07-12 16:09:27)
分类：转载文章
AA. 转膜后经丽春红染色的条带，为什么大蛋白分子的一端（即点样空的一侧）的转膜好
象不是很好，为什么？
解答：这是正常的，大分子的蛋白转移的慢，你延长转移时间和电流，大分子一端就会好的
多，但是小分子的就有可能会变淡。
BB. 我想问您裂解细胞用三去污裂解法，还是用上样缓冲液？
解答：用上样缓冲液，这样有几个好处，可以提取总蛋白，同时又可以让磷酸化酶失活。