2024年6月1日发(作者:岑乐松)
mbp标签注意事项
MBP标签(麦芽糖结合蛋白标签)在蛋白质纯化中具有
广泛的应用,以下是使用MBP标签时需要注意的事项:
1. 功能及分类:MBP是一个大标签,分子量大小在
40kDa以上,由大肠杆菌K12的malE基因编码。它可增加
目标蛋白在细菌中的溶解性,尤其是真核蛋白,也可以增加
融合蛋白表达量。
2. 结合与洗脱:MBP可以和交联淀粉亲和树脂结合,
结合的融合蛋白可用10-20mM麦芽糖在温和条件下洗脱,
得到高纯度、高浓度目标蛋白。
3. 标签的序列:MBP序列有两种形式,一种N端含有
信号肽,适用于毒性蛋白的表达纯化,一般融合在N端;一
种不含信号肽序列,可融合在N端或C端,多融合在N端。
4. 其他注意事项:
MBP标签的使用可以增加目标蛋白的产量和纯度,但在
某些情况下,MBP标签可能导致蛋白质的构象变化或影响其
功能。因此,在使用MBP标签之前,建议进行充分的文献调
研和实验验证。
MBP标签的添加可能会影响某些蛋白质的结晶,因此在
蛋白质结晶实验中使用MBP标签时需要特别注意。
在使用MBP标签进行蛋白质纯化时,建议使用专门针
对MBP标签的商业化的纯化试剂和树脂,以确保最佳的纯
化效果。
MBP标签的使用可能会增加蛋白质的免疫原性,因此在
用于制备治疗性蛋白质或抗体时需要特别注意。
总之,使用MBP标签时需要注意以上事项,以确保蛋白
质纯化的成功和实验结果的可靠性。在使用之前,建议查阅
相关文献和资料,或咨询专业人士的建议和意见。
2024年6月1日发(作者:岑乐松)
mbp标签注意事项
MBP标签(麦芽糖结合蛋白标签)在蛋白质纯化中具有
广泛的应用,以下是使用MBP标签时需要注意的事项:
1. 功能及分类:MBP是一个大标签,分子量大小在
40kDa以上,由大肠杆菌K12的malE基因编码。它可增加
目标蛋白在细菌中的溶解性,尤其是真核蛋白,也可以增加
融合蛋白表达量。
2. 结合与洗脱:MBP可以和交联淀粉亲和树脂结合,
结合的融合蛋白可用10-20mM麦芽糖在温和条件下洗脱,
得到高纯度、高浓度目标蛋白。
3. 标签的序列:MBP序列有两种形式,一种N端含有
信号肽,适用于毒性蛋白的表达纯化,一般融合在N端;一
种不含信号肽序列,可融合在N端或C端,多融合在N端。
4. 其他注意事项:
MBP标签的使用可以增加目标蛋白的产量和纯度,但在
某些情况下,MBP标签可能导致蛋白质的构象变化或影响其
功能。因此,在使用MBP标签之前,建议进行充分的文献调
研和实验验证。
MBP标签的添加可能会影响某些蛋白质的结晶,因此在
蛋白质结晶实验中使用MBP标签时需要特别注意。
在使用MBP标签进行蛋白质纯化时,建议使用专门针
对MBP标签的商业化的纯化试剂和树脂,以确保最佳的纯
化效果。
MBP标签的使用可能会增加蛋白质的免疫原性,因此在
用于制备治疗性蛋白质或抗体时需要特别注意。
总之,使用MBP标签时需要注意以上事项,以确保蛋白
质纯化的成功和实验结果的可靠性。在使用之前,建议查阅
相关文献和资料,或咨询专业人士的建议和意见。