2024年4月25日发(作者：悟修德)
安徽农业科学．Ｊｏｕｎ｝ ｄ ｔ －＇￣ｎｈｕｉ Ａｇｆｉ． ｉ ２０（１９，３７（９）：３９６７—３９６８ 责任编辑金苹责任校对傅真治
籼型红米具有的恢复性及其基因定位
廖金花 （乐ＪＩｊ师范学院环境生物系，四川乐山６ｌ４ｏｏ４）
摘要［目的］研究汕型红米的恢复性并对其恢复基因进行定位。［方法］配制（珍汕９７Ａ、Ｄ６２Ａ、Ｃ，Ｌ，１６Ａ和ＤＴ０２Ａ）和红宝石的Ｆｌ、ＢｃＩ和
Ｆ’．并对该３代花粉育性进行调查，用ＳＳＬＰ对恢复基因进行定位。［结果］红宝石对上述不育系具有１个恢复基因，分布在第７染色体上，
与ＲＭＩ８２的遗传距离是７．４ ｃＭ，不同于恢复系恢复基因在第ｌＯ染色体上成簇分布的形式，是比较特殊的恢复基因。［结论］可以通过转
基因与回交转育的方法选育具红色性状的恢复系。
关键词红米；恢复性；回交；基因定位 ’
中圄分类号￥５１ｌ 文献标识码Ａ 文章编号０５１７—６６１１（２００９）０９—０３９６７—０２
１１ｌｅＲｅａｏａｎｇ Ａｂｌ埘ｔｙ ｏｆＮｏｒｍａｌ ｈｌｄｉ∞ＲｅｄＲｉｃｅｌｈ｜ｂｙ ａｎｄＩｔ’ｓ＆ｓｔ啦ＧｅｍＭａ￣ｉｎｇ
ＬＩＡＯ Ｊｉｎ－ｈｕａ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＢｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｍｍｕｅｎｔ，Ｌｅｄｍｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｌｅｓｈ￣，Ｓｉｅｈｕａｎ ６１４Ｏ０４）
Ａｂｓｌｒａｃｔ ［Ｏｂｊｅｘ：ｔｉｖｅ］Ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ａｉｎ￣ｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｒｅｓｌｏｒｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｍ１ｄ ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅ ｍａｐｐｉｇｎ ｏｆ ｎｏｍｒａｌ ｉｎｄｉｃａ ｉ ｒｉｃｅ Ｒｕｂｙ．【Ｍｅｔｈｏｄ Ｊ＂Ｉｈｅ￣ｌｌｅｎ
ｆｅｒｌｉｌｉｌｙ ０ｆ ｔｈｅ（Ｚｈｅｎｓｈｍａ卯Ａ、Ｄ６２Ａ、Ｇ４６Ａ ａｎｄ Ｄ＇／０２Ａ）／Ｒｕｂｙ ＦＩ，ａｎｄ ，Ｂ（：ｌ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ ｗｅＩｅ＇ ｅｘａｍｉｎｅｄ，ａｎｄ ｍａｐｐｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅ ｗｉｔｈ ＳＳＬＰ．
［Ｒｅｓｕｌｔ］１１１ｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅ￣ｔｏｉｒｇｎ ｎｅｗａｓｌｏ（ ｋｄ ｏｎｔｈｅ ｃｈｒ０ｆｒｌ０ｓ‘ｍ１ｅ７，７．４ ｃＭｆｒｏｍＲＭｌ８２，ｗｈｉｃｈｗａｓ ｎｏｔｔｈｅ ｓａｒＩ】ｅ ａｓｔｈｅ ｕｓｕａｌｌｙｆｅｒｔｉｌｉ・
ｔｙ—ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅ｛ ｌ ｌｏｅａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｌ０，ｓ０ ｉｔ ｗａｓ ａ ｓｐｅｃｉａｌ￣ｔｏｒｉ．ｇ ｇｅｎｅ．１Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｊ １１１ｅ ｒｅｓｔｏｒｅｒ ｌｉｎｅ ｗｉｔｈ ｒｅｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｃｔａｔｌｄ ｂｅ ０ｂ・
ｍｉｎｅｄ ｂｙ ｌｎｅｍ１ｓ ｏｆ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ ｔｍｃｋｃｒｏｓｓ ｂｒｅｅｄｉｇｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ Ｒｅｄ ｒｉｃｅ；Ｒｅｓｔｏｒｉｎｇａｂｉｌｉｙｔ；Ｂａｃｋｅｒｏｓｓ；Ｇｅｎｅｍａｐｐｉｇｎ
红米含有许多特殊营养成分，如锌、有机锗、硒等，具有
Ｆ，和回交后代进行花粉镜检，并观察花药形态和散粉情况。
抗肿瘤、免疫赋活与增加机体抗氧化能力等作用。红米水稻
对各组合的单株进行育性分类调查。
均为常规稻，产量较低，如何利用其杂种优势成为研究的主
１．２分子标记经过 测验选择最符合理论比例的红宝
要内容０ 。经四川农业大学水稻研究所良繁研究室发现，
石杂交组合Ｆ＇分离群体作为定位群体。因为不确定红宝石
Ｄ６２Ａ（Ｇ４６Ａ、Ｄ７０２Ａ、珍汕９ｒ７Ａ）／红宝石的Ｆ．代，植株基本全
的育性恢复性，所以笔者使用位于水稻ｌ２条染色体上的３９７
不育，但在回交过程中育性发生分离，可育株数明显增多，猜
个分子标记引物，对其育性恢复性进行定位。其水稻ＤＮＡ
想红宝石具有对Ｇ４６Ａ、Ｄ７０２Ａ、珍汕９７Ａ和Ｄ６２Ａ育性恢复的
的提取参照ＭｃＣｏｕｎｃｈ的方法｜５Ｊ，ＰＣＲ反应体系按照Ｐｍｍｕｄ
特性，为了验证该猜想，笔者构建遗传群体对其恢复性进行
等ｌ６ｊ的方法；反应产物在３％琼脂糖凝胶中电泳，经溴化乙锭
分析，并用ＳＳＬＰ对红宝石的恢复基因加以定位。
染色后在紫外灯下观察拍照。在Ｆ’代植株群体选择极端不
１材料与方法
育株ｌＯ株和极端可育株ｌ０株，每个单株各取等量叶片，再将
１．１ 田间试验组合配制及性状调查２００１年夏季，在温江
这２种单株的叶片分别混合提取，形成不育和可育ＤＮＡ池，
配制（Ｇ４６Ａ、珍汕９７Ａ、Ｄ７０２Ａ）Ｄ６２Ａ／红宝石的Ｆｌ；２００１年冬
构建近等基因池。
季，在海南陵水种植Ｆ．，将其不育株继续与红宝石回交；２ＯＯ２
２结果与分析
年夏季，在温江分期播种各亲本、回交结实粒和Ｆ 植株的自
２．１田间育性调查以１０％划分可育和不育，对花粉育性
交结实粒（自交结实粒再播种种植，长成植株为Ｆ１）。在２００１
分布进行 测验分析，从表１可看出红宝石具有１个主
年冬季抽穗期，２０Ｏ２年夏季抽穗期用Ｉ．ＫＩ溶液对各组合Ｆ．、
效恢复基因．植株育性主要分布在０～１０％和３ｌ％～６０％，说
表１ ４个组合各世代花粉育性的分布
１ＢｌＮｅ １Ⅸ ｂＩ．ｔｉ０ｌＩ ｏｆｐ０ｌＩ鼬ｆｅｒｔｉｌｉｔｙｉｎ嘧ｄｌ ｇｍｃｒａｆｉｏｎ ｏｆ４ ｃｆＤｓｓ
明该恢复基因的恢复性较弱。
基金项目
四川省青年基金项目（０１ＺＱ０５２）
作者简介
廖金花（１９７５一），女，四川眉山人，硕士，讲师，从事作物遗传
另外，从表１还可看出，Ｄ６２Ａ／红宝石杂交组合后代
研究
值的显著性水平最高（其Ｂｃ 的）［ 值为Ｏ．０３，显著性水平为
收稿日期
９
２
．
００８ ｌ２ ｌ６
０．７５—０．９ｏ；其Ｆ２的 为０．３９，显著性水平为０．５０～０．７５），
３９６８ 安徽农业科学 ２００９盎
最符合理论分布，其Ｆ２分离群体可用于分子标记分析。
２．２分子标记分析用３９７个引物对Ｄ６２Ａ／红宝石育性恢
个近等基因池中表现多态性。故选用该标记引物对Ｄ６２Ａ／红
宝石Ｆ２群体中的４７个极端不育株进行ＰＣＲ，扩增产物见图
复性定位发现，上述引物中有２５个引物在Ｄ６２Ａ／红宝石双亲
１。由图１可见，有７株表现为双亲杂合带型，根据极大似然
中表现多态性，多态性频率为６．３％；而其中只有ＲＭ１８２在２
法的交换值计算公式得，该标记与目的基因相距７．４ ｃ Ｍ［ 。
２ ０００ ｂｐ
ｌ ０００ ｂｐ
７５０ ｂｐ
５００ ｂｐ
２５０ ｂｐ
１００ ｂｐ
１ Ｚ ｊ ４ ０ ７ ９ １０ ｌ１ ｌ２ ｌｊ １４ ｌ ｌ６ １，１８ Ｉ ２０ ２ｌ ２２ ２３ ２４ ２５ ２６ ２ ２８
注：１．Ｉ）６２Ａ；２．Ｒｕｂｙ；３～２８．Ｆ２不育株的不同种质。
Ｎｏｔｅ：１，Ｄ６２Ａ；２，Ｒｕｂｙ；３—２８，Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｇｅｎｒ￣ｌａｓｍ ｏｆ ｓｔｅｒｉｌｅ ｐｌａｎｔｓ．
图１引物ＲＭＩ８２对不育株的扩增产物
Ｆｉｇ．１￣￣ａｌｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆｐｒｉｍｅｒＲＭ１８２ｆｏｒ ｓｔｅｒｉｌｅ＃ａｎｔｓ
３讨论 （３）：３０—３５．
（１）随着回交次数的增加，以定向选择回交过程中的不 寡
育株作为非轮回亲本，削弱基因之间的相互作用，即其弱恢
株系保持不育的能力，最终成功选育红米不育系＿８ｊ。笔者
采用相似的途径，以定向选择回交过程中的可育株作为非轮
回亲本聚合恢复基因，致使最后选育出的是具有强恢复性、
可以生产利用的恢复系。 ．
（２）转基因的前提是基因克隆，克隆的第１步就是筛选
箍
］
ｚ￣Ｌｔ
．
动脉硬化和抗氧化作用初步
ｐｐｉｎｇ 打ｃｅ。 一
［３］陈起萱，凌文化，马静，等．黑米和红米对兔主动脉脂质斑块面积和血
一３４．
复性和其保持不育能力相比较就显得微弱，这就相对增强了 ［４］ ： 春篙橐； ３Ｊ用）：…１７０ 业学报， ９９９ （３）：３２
ｉｎ
ｄ
ｏ
Ｅ６］ＰＡＮＡＵＤ Ｏ，ＣＨＥＮ ｘ，ＭＣＣＯＵＣＨ Ｓ Ｒ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ０ｆ ｍｉｅｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｍａｒｋｅｒｓ
）［Ｊ
］． ＝１ ““
［７］ＡＫＡＧＩ Ｈ，ＹＯＫＯＺＥ￣Ｙ，ＩＮＡＧＡＫＩ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｍｉ口 ａｔ出ｔｅ ＤＮＡ“ ｍ ｆ０ｒ
与目的基因紧密连锁的分子标记。关于核恢复基因，已有很
多该方面的研究，其中 １， ，ｅ￣３，８／４和 ５分别在ＣＭＳ－
ＢＴ、ＣＭＳ－ＨＬ和ＣＭＳ－ＷＡ中得到了证实。比较不同的分子连
害
：
詈
： 。炯
譬 －及１其０７７特．
性ＥＪ］＿种子，２１３Ｏ４，３（３）：１４—１６．
［ ］ＹＡＯ Ｆ Ｙ，ＸＵ Ｃ Ｇ，ＹＵ Ｓ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｍａｐｐｉｎｇ ｍａｄ ｇｅｎｅｔｉ。ａｎａｌｙｓｉ ｔｗｏｆｅｒｔｉｌｉｔｙ
锁图表明这几个育性恢复基因都定位在第ｌ０染色体上相邻
区［ 。该研究结果不同于前人，将弱恢复基因定位在第７
染色体上，ＳＳＬＰ分析其与ＲＭ１８２的遗传距离为７．４ ｃＭ，将该
ｄ“叫川 。
［１ｏ］ＹＯＫＯＺＥ￣Ｙ，ＮＡＫＡＭＵＲＡ Ａ，ＩＮＡＧＡＫＩ Ａ，ｅｔ ａ１．ＤＮＡ ｎｌ￣ｅｒｓ ｏｆ ａ ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ
…］丑ｒｅｓ｛ｔｏ ｒａＪｉｔＧｏｎ
Ｇ
恢复基因命名为ｅ，ｆ６。在水稻基因组中此标记是重要的发
现，可作为分子标记育种和 基因的物理图谱构建，为选育
有生产力的恢复系作准备。
（３）Ｎ１）２，有２ 途径培育具有红色性状的恢复系：①通
过转基因。在克隆到恢复基因后利用转基因法将其导入红
ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅｆｏｒ ＷＡ秒叩ｌ ｃｍａｌｅ ｓｔｅｉｒｌｉｔｙｉｎ ｉｒｃｅ ｕｓｉｎｇＲＡＰＤａｎｄ
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［１３］ ｃ
．
ｃａｌ 砌 ｄ ｃｖｔ 。 。 ｔ商ｌｉｔｖ ａｎｄ脚ｍｔｙ删一
ｉｎ ｉｒｅ￣ｃＪ］．Ｒｙｕｋｙｕｓ，１９７５，２２：１．
宝石中，根据基因的剂量效应直接创造具有红色外观的优质 ｎ
恢复系。②定向选择可育株。通过回交转育的传统方法。 ｌ６４．
詈
， ＰＡ ＲＫ Ｗ
。
参考文献 ｎ
Ｄ 嚣 ：
2024年4月25日发(作者：悟修德)
安徽农业科学．Ｊｏｕｎ｝ ｄ ｔ －＇￣ｎｈｕｉ Ａｇｆｉ． ｉ ２０（１９，３７（９）：３９６７—３９６８ 责任编辑金苹责任校对傅真治
籼型红米具有的恢复性及其基因定位
廖金花 （乐ＪＩｊ师范学院环境生物系，四川乐山６ｌ４ｏｏ４）
摘要［目的］研究汕型红米的恢复性并对其恢复基因进行定位。［方法］配制（珍汕９７Ａ、Ｄ６２Ａ、Ｃ，Ｌ，１６Ａ和ＤＴ０２Ａ）和红宝石的Ｆｌ、ＢｃＩ和
Ｆ’．并对该３代花粉育性进行调查，用ＳＳＬＰ对恢复基因进行定位。［结果］红宝石对上述不育系具有１个恢复基因，分布在第７染色体上，
与ＲＭＩ８２的遗传距离是７．４ ｃＭ，不同于恢复系恢复基因在第ｌＯ染色体上成簇分布的形式，是比较特殊的恢复基因。［结论］可以通过转
基因与回交转育的方法选育具红色性状的恢复系。
关键词红米；恢复性；回交；基因定位 ’
中圄分类号￥５１ｌ 文献标识码Ａ 文章编号０５１７—６６１１（２００９）０９—０３９６７—０２
１１ｌｅＲｅａｏａｎｇ Ａｂｌ埘ｔｙ ｏｆＮｏｒｍａｌ ｈｌｄｉ∞ＲｅｄＲｉｃｅｌｈ｜ｂｙ ａｎｄＩｔ’ｓ＆ｓｔ啦ＧｅｍＭａ￣ｉｎｇ
ＬＩＡＯ Ｊｉｎ－ｈｕａ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＢｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｍｍｕｅｎｔ，Ｌｅｄｍｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｌｅｓｈ￣，Ｓｉｅｈｕａｎ ６１４Ｏ０４）
Ａｂｓｌｒａｃｔ ［Ｏｂｊｅｘ：ｔｉｖｅ］Ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ａｉｎ￣ｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｒｅｓｌｏｒｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｍ１ｄ ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅ ｍａｐｐｉｇｎ ｏｆ ｎｏｍｒａｌ ｉｎｄｉｃａ ｉ ｒｉｃｅ Ｒｕｂｙ．【Ｍｅｔｈｏｄ Ｊ＂Ｉｈｅ￣ｌｌｅｎ
ｆｅｒｌｉｌｉｌｙ ０ｆ ｔｈｅ（Ｚｈｅｎｓｈｍａ卯Ａ、Ｄ６２Ａ、Ｇ４６Ａ ａｎｄ Ｄ＇／０２Ａ）／Ｒｕｂｙ ＦＩ，ａｎｄ ，Ｂ（：ｌ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ ｗｅＩｅ＇ ｅｘａｍｉｎｅｄ，ａｎｄ ｍａｐｐｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅ ｗｉｔｈ ＳＳＬＰ．
［Ｒｅｓｕｌｔ］１１１ｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅ￣ｔｏｉｒｇｎ ｎｅｗａｓｌｏ（ ｋｄ ｏｎｔｈｅ ｃｈｒ０ｆｒｌ０ｓ‘ｍ１ｅ７，７．４ ｃＭｆｒｏｍＲＭｌ８２，ｗｈｉｃｈｗａｓ ｎｏｔｔｈｅ ｓａｒＩ】ｅ ａｓｔｈｅ ｕｓｕａｌｌｙｆｅｒｔｉｌｉ・
ｔｙ—ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅ｛ ｌ ｌｏｅａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｌ０，ｓ０ ｉｔ ｗａｓ ａ ｓｐｅｃｉａｌ￣ｔｏｒｉ．ｇ ｇｅｎｅ．１Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｊ １１１ｅ ｒｅｓｔｏｒｅｒ ｌｉｎｅ ｗｉｔｈ ｒｅｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｃｔａｔｌｄ ｂｅ ０ｂ・
ｍｉｎｅｄ ｂｙ ｌｎｅｍ１ｓ ｏｆ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ ｔｍｃｋｃｒｏｓｓ ｂｒｅｅｄｉｇｎ．
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红米含有许多特殊营养成分，如锌、有机锗、硒等，具有
Ｆ，和回交后代进行花粉镜检，并观察花药形态和散粉情况。
抗肿瘤、免疫赋活与增加机体抗氧化能力等作用。红米水稻
对各组合的单株进行育性分类调查。
均为常规稻，产量较低，如何利用其杂种优势成为研究的主
１．２分子标记经过 测验选择最符合理论比例的红宝
要内容０ 。经四川农业大学水稻研究所良繁研究室发现，
石杂交组合Ｆ＇分离群体作为定位群体。因为不确定红宝石
Ｄ６２Ａ（Ｇ４６Ａ、Ｄ７０２Ａ、珍汕９ｒ７Ａ）／红宝石的Ｆ．代，植株基本全
的育性恢复性，所以笔者使用位于水稻ｌ２条染色体上的３９７
不育，但在回交过程中育性发生分离，可育株数明显增多，猜
个分子标记引物，对其育性恢复性进行定位。其水稻ＤＮＡ
想红宝石具有对Ｇ４６Ａ、Ｄ７０２Ａ、珍汕９７Ａ和Ｄ６２Ａ育性恢复的
的提取参照ＭｃＣｏｕｎｃｈ的方法｜５Ｊ，ＰＣＲ反应体系按照Ｐｍｍｕｄ
特性，为了验证该猜想，笔者构建遗传群体对其恢复性进行
等ｌ６ｊ的方法；反应产物在３％琼脂糖凝胶中电泳，经溴化乙锭
分析，并用ＳＳＬＰ对红宝石的恢复基因加以定位。
染色后在紫外灯下观察拍照。在Ｆ’代植株群体选择极端不
１材料与方法
育株ｌＯ株和极端可育株ｌ０株，每个单株各取等量叶片，再将
１．１ 田间试验组合配制及性状调查２００１年夏季，在温江
这２种单株的叶片分别混合提取，形成不育和可育ＤＮＡ池，
配制（Ｇ４６Ａ、珍汕９７Ａ、Ｄ７０２Ａ）Ｄ６２Ａ／红宝石的Ｆｌ；２００１年冬
构建近等基因池。
季，在海南陵水种植Ｆ．，将其不育株继续与红宝石回交；２ＯＯ２
２结果与分析
年夏季，在温江分期播种各亲本、回交结实粒和Ｆ 植株的自
２．１田间育性调查以１０％划分可育和不育，对花粉育性
交结实粒（自交结实粒再播种种植，长成植株为Ｆ１）。在２００１
分布进行 测验分析，从表１可看出红宝石具有１个主
年冬季抽穗期，２０Ｏ２年夏季抽穗期用Ｉ．ＫＩ溶液对各组合Ｆ．、
效恢复基因．植株育性主要分布在０～１０％和３ｌ％～６０％，说
表１ ４个组合各世代花粉育性的分布
１ＢｌＮｅ １Ⅸ ｂＩ．ｔｉ０ｌＩ ｏｆｐ０ｌＩ鼬ｆｅｒｔｉｌｉｔｙｉｎ嘧ｄｌ ｇｍｃｒａｆｉｏｎ ｏｆ４ ｃｆＤｓｓ
明该恢复基因的恢复性较弱。
基金项目
四川省青年基金项目（０１ＺＱ０５２）
作者简介
廖金花（１９７５一），女，四川眉山人，硕士，讲师，从事作物遗传
另外，从表１还可看出，Ｄ６２Ａ／红宝石杂交组合后代
研究
值的显著性水平最高（其Ｂｃ 的）［ 值为Ｏ．０３，显著性水平为
收稿日期
９
２
．
００８ ｌ２ ｌ６
０．７５—０．９ｏ；其Ｆ２的 为０．３９，显著性水平为０．５０～０．７５），
３９６８ 安徽农业科学 ２００９盎
最符合理论分布，其Ｆ２分离群体可用于分子标记分析。
２．２分子标记分析用３９７个引物对Ｄ６２Ａ／红宝石育性恢
个近等基因池中表现多态性。故选用该标记引物对Ｄ６２Ａ／红
宝石Ｆ２群体中的４７个极端不育株进行ＰＣＲ，扩增产物见图
复性定位发现，上述引物中有２５个引物在Ｄ６２Ａ／红宝石双亲
１。由图１可见，有７株表现为双亲杂合带型，根据极大似然
中表现多态性，多态性频率为６．３％；而其中只有ＲＭ１８２在２
法的交换值计算公式得，该标记与目的基因相距７．４ ｃ Ｍ［ 。
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注：１．Ｉ）６２Ａ；２．Ｒｕｂｙ；３～２８．Ｆ２不育株的不同种质。
Ｎｏｔｅ：１，Ｄ６２Ａ；２，Ｒｕｂｙ；３—２８，Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｇｅｎｒ￣ｌａｓｍ ｏｆ ｓｔｅｒｉｌｅ ｐｌａｎｔｓ．
图１引物ＲＭＩ８２对不育株的扩增产物
Ｆｉｇ．１￣￣ａｌｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆｐｒｉｍｅｒＲＭ１８２ｆｏｒ ｓｔｅｒｉｌｅ＃ａｎｔｓ
３讨论 （３）：３０—３５．
（１）随着回交次数的增加，以定向选择回交过程中的不 寡
育株作为非轮回亲本，削弱基因之间的相互作用，即其弱恢
株系保持不育的能力，最终成功选育红米不育系＿８ｊ。笔者
采用相似的途径，以定向选择回交过程中的可育株作为非轮
回亲本聚合恢复基因，致使最后选育出的是具有强恢复性、
可以生产利用的恢复系。 ．
（２）转基因的前提是基因克隆，克隆的第１步就是筛选
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动脉硬化和抗氧化作用初步
ｐｐｉｎｇ 打ｃｅ。 一
［３］陈起萱，凌文化，马静，等．黑米和红米对兔主动脉脂质斑块面积和血
一３４．
复性和其保持不育能力相比较就显得微弱，这就相对增强了 ［４］ ： 春篙橐； ３Ｊ用）：…１７０ 业学报， ９９９ （３）：３２
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Ｅ６］ＰＡＮＡＵＤ Ｏ，ＣＨＥＮ ｘ，ＭＣＣＯＵＣＨ Ｓ Ｒ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ０ｆ ｍｉｅｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｍａｒｋｅｒｓ
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与目的基因紧密连锁的分子标记。关于核恢复基因，已有很
多该方面的研究，其中 １， ，ｅ￣３，８／４和 ５分别在ＣＭＳ－
ＢＴ、ＣＭＳ－ＨＬ和ＣＭＳ－ＷＡ中得到了证实。比较不同的分子连
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性ＥＪ］＿种子，２１３Ｏ４，３（３）：１４—１６．
［ ］ＹＡＯ Ｆ Ｙ，ＸＵ Ｃ Ｇ，ＹＵ Ｓ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｍａｐｐｉｎｇ ｍａｄ ｇｅｎｅｔｉ。ａｎａｌｙｓｉ ｔｗｏｆｅｒｔｉｌｉｔｙ
锁图表明这几个育性恢复基因都定位在第ｌ０染色体上相邻
区［ 。该研究结果不同于前人，将弱恢复基因定位在第７
染色体上，ＳＳＬＰ分析其与ＲＭ１８２的遗传距离为７．４ ｃＭ，将该
ｄ“叫川 。
［１ｏ］ＹＯＫＯＺＥ￣Ｙ，ＮＡＫＡＭＵＲＡ Ａ，ＩＮＡＧＡＫＩ Ａ，ｅｔ ａ１．ＤＮＡ ｎｌ￣ｅｒｓ ｏｆ ａ ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ
…］丑ｒｅｓ｛ｔｏ ｒａＪｉｔＧｏｎ
Ｇ
恢复基因命名为ｅ，ｆ６。在水稻基因组中此标记是重要的发
现，可作为分子标记育种和 基因的物理图谱构建，为选育
有生产力的恢复系作准备。
（３）Ｎ１）２，有２ 途径培育具有红色性状的恢复系：①通
过转基因。在克隆到恢复基因后利用转基因法将其导入红
ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ ｇｅｎｅｆｏｒ ＷＡ秒叩ｌ ｃｍａｌｅ ｓｔｅｉｒｌｉｔｙｉｎ ｉｒｃｅ ｕｓｉｎｇＲＡＰＤａｎｄ
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ｉｎ ｉｒｅ￣ｃＪ］．Ｒｙｕｋｙｕｓ，１９７５，２２：１．
宝石中，根据基因的剂量效应直接创造具有红色外观的优质 ｎ
恢复系。②定向选择可育株。通过回交转育的传统方法。 ｌ６４．
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