背根神经节嘌呤受体亚型P2X3R介导小鼠术后急—慢痛转化-USB迷|专注于互联网分享

2024年4月26日发(作者：是元冬)

··１２８２

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）：１２８２～８

网络出版时间：２０２３－０６－１５１４：１７：２０　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ２／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０６１４．１５４５．０２７．ｈｔｍｌ

背根神经节嘌呤受体亚型Ｐ２Ｘ３Ｒ介导小鼠术后急－慢痛转化

甄思佳

１

，赵　贝

１

，郑博习

１

，田书心

１

，徐　婷

１

，吴茗慧

１

，房军帆

１

，

，２，２

周　杰

２

，杜俊英

１

，徐　驰

１

，方剑乔

１

，梁　宜

１

（１．浙江中医药大学第三临床医学院针灸神经生物学实验室，浙江杭州　３１００５３；

２．浙江中医药大学附属第三医院针灸科，浙江杭州　３１０００５）

ｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２０９０６５

文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０７－１２８２－０７

中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２２８５；Ｒ３９２１１；Ｒ４４１１；Ｒ６１９９

摘要：目的　探讨不同部位不同嘌呤受体亚型在小鼠切口术

后痛转化中的作用差异。方法　足底切口恢复后注射ＰＧＥ

２

构建术后痛转化模型。第一部分：Ｃ５７ＢＬ／６小鼠随机分为对

照（Ｃｏｎ）组、假敏化（ｓＨＰ）组、敏化（ＨＰ）组，检测机械痛阈、

自发痛评分和焦虑样行为；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测患侧Ｌ３－５背

ＤＲＧ）和脊髓背角（ＳＣＤＨ）中Ｐ２Ｘ３Ｒ和Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋根神经节（

白表达变化。第二部分：Ｃ５７ＢＬ／６小鼠随机分为Ｃｏｎ组、ＨＰ

＋生理盐水组、ＨＰ＋Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂组或ＨＰ＋Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂

组，观察拮抗不同亚型嘌呤受体对小鼠机械痛阈的影响。结

果　与正常小鼠相比，切口痛小鼠注射ＰＧＥ后机械痛阈明

２

显下降，自发痛评分明显增加（Ｐ＜００５），未表现出焦虑样

行为（Ｐ＞００５），且Ｐ２Ｘ３Ｒ蛋白在ＤＲＧ中表达明显增多（Ｐ

＜００５），在ＳＣＤＨ中未检出，而Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白在ＤＲＧ和ＳＣ

Ｐ＞００５）。拮抗Ｐ２Ｘ３Ｒ能阻断ＤＨ各组中表达均无差异（

术后痛转化的产生，而拮抗Ｐ２Ｘ７Ｒ无明显影响。结论　切

口痛小鼠经ＰＧＥ不伴发焦虑

２

诱导可出现急慢性痛的转化，

样情绪，ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ３Ｒ可能是参与术后痛转化的关键受体

之一。

关键词：术后痛转化；背根神经节；脊髓背角；嘌呤受体；

Ｐ２Ｘ３Ｒ；Ｐ２Ｘ７Ｒ

发生率逐年升高，已然成为一个棘手的临床问题。

切口痛作为一种手术操作引起的术后急性创伤，治

疗不当会转变成术后慢性疼痛，严重影响患者的生

活质量。一项关于术后慢性疼痛发生率及患者满意

１］

度的权威调查显示

［

，８６％的患者会产生术后疼

痛，７４％的患者这种疼痛会延长至出院后。急性组

织损伤使神经元变得敏感，在损伤愈合后形成一种

启动状态，在暴露于小剂量炎症介质时即可产生放

大的伤害性反应，从而延长疼痛时间，逐渐形成慢性

疼痛，该类现象被称为痛转化，痛觉敏化诱发模型

（ＨｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃＰｒｉｍｉｎｇ，ＨＰ）是研究痛转化的经典模

型。如能有效阻断急性损伤向慢性疼痛的转化，将

有利于慢性疼痛的控制和治疗。

　　Ｐ２Ｘ受体（Ｐ２ＸＲ）是一种配体门控离子通道，

与三磷酸腺苷（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＡＴＰ）结合后

２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、激活发挥作用，在脊椎动物中有Ｐ

Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７等７种亚型，在背根神经

ＤｏｒｓａｌＲｏｏｔＧａｎｇｌｉｏｎ，ＤＲＧ）、脊髓背角（Ｓｐｉｎａｌ节（

ＣｏｒｄＤｏｒｓａｌＨｏｒｎ，ＳＣＤＨ）等多种组织和细胞中均有

广泛表达。其中Ｐ２Ｘ３受体（Ｐ２Ｘ３Ｒ）和Ｐ２Ｘ７受体

（Ｐ２Ｘ７Ｒ）被报道参与切口疼痛、神经病理性疼痛、

２－４］

炎症性疼痛等多种疼痛的发生和维持

［

。已有研

究报道，ＤＲＧ中代谢型谷氨酸受体５（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ

开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：

ｇｌｕｔａｍａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒ５，ｍＧｌｕＲ５）－蛋白激酶Ｃｅｐｓｉｌｏｎ

（ＰｒｏｔｅｉｎＫｉｎａｓｅｓＣｅｐｓｉｌｏｎ，ＰＫＣ）信号通路参与介

导角叉菜胶痛转化、ＳＣＤＨ中的

氨基丁酸Ａ受体

（ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄＡｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧＡＢＡＡＲ）参与介导

５－６］

白细胞介素６（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）痛转化

［

。但

　　随着外科手术的快速发展，患者术后疼痛症状

收稿日期：２０２３－０２－２０，修回日期：２０２３－０４－２０

基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２１７４４９０）；浙江省自然

科学基金（ＮｏＬＹ１９Ｈ２７０００３，ＬＱ１８Ｈ２７０００１）

作者简介：甄思佳（１９９７－），女，硕士生，研究方向：针灸镇痛作用机

Ｅｍａｉｌ：ｚｓｊ１８２７６９＠１６３．ｃｏｍ；制，

１９８３－），男，博士，副研究员，研究方向：神经药徐　驰（

理学，通讯作者，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｃｈｉ＠ｚｃｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；

梁　宜（１９８０－），女，博士，研究员，博士生导师，研究方

向：针灸镇痛效应规律及其转化应用，通信作者，Ｅｍａｉｌ：

ｌｉａｎｇｙｉｗｗｗ＠ｚｃｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

是，目前关于介导术后痛转化关键物质仍不十分清

楚，Ｐ２Ｘ３Ｒ和Ｐ２Ｘ７Ｒ作为疼痛相关受体虽参与急性

疼痛，但是是否参与术后痛转化尚未可知。因此，本

研究旨在ＤＲＧ和ＳＣＤＨ两个水平探讨Ｐ２Ｘ３Ｒ和

Ｐ２Ｘ７Ｒ在术后痛转化小鼠中的作用。

１　材料与方法

１．１　材料　

１．１．１　实验动物　本研究使用ＳＰＦ级健康雄性

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

··１２８３

Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，体质量（２０－２５）ｇ，购于中国科学院

上海实验动物中心，由浙江中医药大学实验动物中

心饲养，许可证号：ＳＣＸＫ（沪）２００８００１６。饲养期间

给予啮齿类动物标准颗粒饲料（由中国科学院实验

１２ｈ循环灯光，室温动物中心提供）并自由饮水，

（２３±２）℃。

１．１．２　试剂与仪器　异氟烷（中国瑞沃德，Ｒ５１０

２２）、前列腺素ＥｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥ，ＰＧＥ（美国

２

（

２２

）

Ｓｉｇｍａ，Ｐ５６４０－１ｍｇ）、兔抗Ｐ２Ｘ３Ｒ（美国Ａｌｏｍｏｎｅ，

ＡＰＲ０１６）、兔抗Ｐ２Ｘ７Ｒ（美国Ａｌｏｍｏｎｅ，ＡＰＲ００４）、兔

抗ＧＡＰＤＨ（美国ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，３６８３ｓ）、

Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂Ａ３１７４９１（Ａ３１，美国Ｓｉｇｍａ，Ａ２９７９－５

）、Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂Ａ７４０００３（Ａ７４，美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ，ｍｇ

３７０１）、ＢＣＡ试剂盒（中国碧云天，Ｐ００１０）、ＥＣＬ试

剂盒（中国Ｂｉｏｓｈａｒｐ，ＢＬ５２０Ａ）。

　　纤毛机械刺激针（美国ＳｔｏｅｌｔｉｎｇＣｏ，ＮＣ１２７７５）、

恒温手术台（美国Ｈａｒｖａｒｄ）、移动呼吸麻醉机（中国

瑞沃德，Ｒ５３０ＩＥ）、高架十字迷宫（中国瑞沃德），旷

场（中国瑞沃德），ＡＮＹｍａｚｅ动物行为视频跟踪系

统（美国Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ），高速低温组织研磨仪（中国塞

ＫＺＦ）、电泳－转印系统（美国ＢｉｏＲａｄ）、台维尔，

Ⅲ



式高速冷冻离心机（美国ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｓｏｒｖａｌｌ

）、酶标仪（美国ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ，ＢｉｏｆｕｇｅＳｔｒａｔｏｓ

ＳｐｅｃｔｒａＭａｘＭ４）、凝胶成像系统（美国ＳａｎＪｏｓｅ，

ＦＲ１１２３）。

１．２　方法　

１．２．１　动物造模　切口敏化（ＨｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃＰｒｉｍｉｎｇ，

ＨＰ）组的实验小鼠采用单侧足底切口联合术后足背

注射ＰＧＥ％异

２

建立切口术后痛转化模型。采用１

－１

００ｍＬ·ｍｉｎ氧气流量进行气体麻醉小氟烷以５

和消毒）及术后１５ｄ手术侧足爪足背注射等量生理

盐水；ｓＨＰ组行假切口处理及注射ＰＧＥ；ＨＰ组按照

２

造模方法行足底切口术并注射ＰＧＥ。

２

　　第二部分实验中分两个批次开展。第一批次选

用２０只小鼠完全随机分为Ｃｏｎ组（ｎ＝８）、ＨＰ＋ＮＳ

组（ｎ＝６）、ＨＰ＋Ａ３１（切口痛敏化＋Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂，

ｎ＝６）组。Ｃｏｎ组操作同前；ＨＰ＋ＮＳ和ＨＰ＋Ａ３１组

均行痛转化造模，并分别在注射ＰＧＥ０ｍｉｎ足

２

前１

３１７４９１（５０

Ｌ，１００ｎｍｏｌ·背注射生理盐水或Ａ

－１［］

Ｌ）

８

。第二批次选用２２只小鼠完全随机分为

Ｃｏｎ组（ｎ＝９）、ＨＰ＋ＮＳ组（ｎ＝６）、ＨＰ＋Ａ７４组（切

口痛敏化＋Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂，ｎ＝７），ＨＰ＋Ａ７４组行痛

ＧＥ０ｍｉｎ足背注射转化造模，在注射Ｐ

２

前１

－１

Ａ７４０００３（５０

Ｌ，１００ｎｍｏｌ·Ｌ），余二组操作同前。

１．２．３　机械痛阈检测（ｐａｗｗｉｔｈｄｒａｗａｌｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓ，

ＰＷＴｓ）　测量前，各组小鼠适应环境３ｄ。测量时，

在一个安静、温度维持在（２０～２５）℃的房间进行。

测定前，将小鼠分别放置在具有金属丝网地板的透

３

明有机塑料箱（８×１０×１０ｃｍ）中，其足部可暴露于

铁丝网眼中，待其安静后（即停止梳理毛发和探索

性活动，约３０ｍｉｎ），用不同力量的ｖｏｎＦｒｅｙｈａｉｒ

（００２、００４、００７、０１６、０４、０６、１、１４ｇ和２ｇ）。

从０４ｇ刺激强度开始，垂直刺激小鼠左后爪足底

中部，避开小鼠足垫，向小鼠足底施加压力至ｖｏｎ

Ｆｒｅｙｈａｉｒ轻微弯曲并持续５ｓ，若小鼠出现缩腿或舔

足反应则为阳性反应，记为“Ｘ”并给予相邻小一级

ｏｎＦｒｅｙｈａｉｒ刺激不能引力度的刺激。当该力度的ｖ

起阳性反应时，则记为“Ｏ”并给予相邻大一级力度

的纤维刺激，每次刺激间隔３０ｓ。由此可得到一串

以“Ｏ”或“Ｘ”组合的序列，以第一次出现“Ｘ”的前

Ｏ”作为起点，选择包括该起点的连续６次的一次“

刺激反应，作为推算５０％ＭＷＴ的关键序列。

１．２．４　自发痛行为检测（ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｐａｉｎｓｃａｌｅ）　

［９］

采用Ｍｉｙａｋａｗａ等的方法。测量前，各组小鼠适应

鼠，输出浓度为１％的异氟烷通过鼻子麻痹小鼠，碘

伏消毒足底皮肤后，在左后爪上做一约５ｍｍ长纵

形切口，用镊子抬起足底肌腱并纵向切开，用

５－０

缝合线缝合皮肤，常规消毒并于术后４８ｈ后拆线；

切口痛术后１５ｄ（实验小鼠机械痛阈恢复至正常）

［７］

时于手术侧足爪足背活射ＰＧＥ（１００ｎｇ／２５

Ｌ）。

２

测量环境３ｄ。测量时，在一个安静、温度维持在

（２０～２５）℃的房间进行。正式测定前，将小鼠放置

在独立有机玻璃容器内适应２０ｍｉｎ，然后连续观察

并记录其行为５ｍｉｎ。本研究使用的量表为：０＝手

术侧爪正常按压在地板上；１＝爪子轻轻地放在地板

上；２＝只有爪子的内侧被压在地板上；３＝只有脚后

跟压在地板上，后爪倒置；４＝整个爪子抬起；５＝动

物舔了舔受伤的爪子。采用最大尺度数估计实验小

鼠自发疼痛相关行为。

１．２．５　高架十字迷宫检测（ＥｌｅｖａｔｅｄＰｌｕｓＭａｚｅ，

ＥＰＭ）　测试前，各组小鼠在一个安静的房间中适应

　　对照（ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｃｏｎ）组小鼠进行假切口（即进行

相同的麻醉和消毒），对照注射相同剂量的生理盐

水（ｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅ，ＮＳ）。

　　切口假敏化（ｓｈａｍＨｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃＰｒｉｍｉｎｇ，ｓＨＰ）

组小鼠进行假切口（同Ｃｏｎ组小鼠），注射相同剂量

ＧＥ（同ＨＰ组小鼠）。的Ｐ

２

１．２．２　分组与处理　第一部分实验，将１８只小鼠

完全随机分为Ｃｏｎ组（ｎ＝６）、ｓＨＰ组（ｎ＝６）、ＨＰ组

（ｎ＝６）。Ｃｏｎ组小鼠行假切口处理（仅相同的麻醉

·１２８４·

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

１ｈ，房间的温度维持在（２０～２５）℃，且房间环境较

暗并无直射光线。高架十字迷宫包括两个张开的手

臂（开放臂）（长３０ｃｍ，宽６ｃｍ），和两个封闭的手

臂（闭合臂）（长３０ｃｍ，宽６ｃｍ，高１５ｃｍ）和一个中

ｍ，宽６ｃｍ），高架十字迷宫放置在距心区域（长６ｃ

离房间地板３５ｃｍ的高度处。每只动物的行为都由

安装在仪器上方的摄像机记录下来，这样就可以通

过一个闭路电视电路在另一个房间进行监控。将小

鼠放于高架十字迷宫中心区域，适应３０ｓ后记录５

小鼠的活动，５ｍｉｎ后取出小鼠。仪器的地板用ｍｉｎ

蘸取１０％酒精的纸巾擦拭。使用ＡＮＹｍａｚｅ软件

记录并分析数据：将高架十字迷宫分为开放臂、闭合

臂以及中心区域，分析小鼠的运动总距离以及开放

臂运动时间。

１．２．６　旷场检测（Ｏｐｅｎｆｉｅｌｄｔｅｓｔ，ＯＦＴ）　测试前，

各组小鼠在一个安静的房间中适应１ｈ，房间的温度

维持在（２０～２５）℃，且房间环境较暗并无直射光线。

旷场设备由覆盖着黑色不透水胶木的木材制成，是一

个长宽高均为４０ｃｍ的正方形箱体。每只动物的行

为都由安装在仪器上方的摄像机记录下来，这样就可

以通过一个闭路电视电路在另一个房间进行监控。

每只小鼠被放置在旷场的中心，适应３０ｓ后记录５

ｍｉｎ小鼠的活动，结束后取出小鼠。仪器的地板是用

０％酒精的纸巾擦拭的。使用ＡＮＹｍａｚｅ软件蘸取１

记录并分析数据：将旷场等分为１６个正方形区域边

长为１０ｃｍ，中心４个设置为中心区，其他为周围区，

分析小鼠的运动总距离以及中心区时间。

１．２．７　取材及样本处理　本实验于注射ＰＧＥ

２

后

２４ｈ检测完ＰＷＴｓ后，进行取材。用３％戊巴比妥钠

－１

０１５ｍＬ·１００ｇ）腹腔注射麻醉小鼠，暴露心脏，（

左心室、升主动脉用４℃预冷的生理盐水快速灌注，

快速取出患侧Ｌ３－５ＤＲＧ和ＳＣＤＨ，置入－８０℃冰

箱中保存。

１．２．８　免疫印迹法检测　将Ｌ３－５ＤＲＧ和ＳＣＤＨ

放入ＲＩＰＡ裂解液中超声粉碎，离心：１４０００ｒ·

－１

ｍｉｎ，４℃、５ｍｉｎ，取上清液，ＢＣＡ蛋白定量。取

１５

ｇ蛋白上样，８％ＳＤＳＰＡＧＥ电泳后转印至

ＰＶＤＦ膜，５％脱脂奶粉室温封闭１ｈ，分别用ＴＢＳＴ

稀释好的一抗：兔抗Ｐ２Ｘ３Ｒ、兔抗Ｐ２Ｘ７Ｒ和兔抗

ＧＡＰＤＨ抗体（浓度１∶１０００），４℃孵育过夜（１６～

１８ｈ），用ＴＢＳＴ稀释好的辣根过氧化物酶标记的山

羊抗兔二抗（浓度１∶５０００）室温孵育２ｈ，ＥＣＬ试剂

盒显色后拍照，计算条带的平均吸光度值。

１．３　统计学分析　应用Ｇｒａｐｈｐａｄ软件进行统计学

珋

分析。计量资料以ｘ±ｓ表示。痛行为学数据比较

采用ＴｗｏｗａｙＡＮＯＶＡ结合ｐｏｓｔｈｏｃＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ′ｓ，情

绪行为学以及免疫印迹数据比较采用Ｏｎｅｗａｙ

ＡＮＯＶＡ。

２　结果

２．１　各组小鼠ＰＷＴｓ比较　如Ｆｉｇ１所示，术前各

珋

Ｆｉｇ１　ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｓｏｆＰＷＴｓａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅｐｏｉｎｔｓａｍｏｎｇｇｒｏｕｐｓｏｆｍｉｃｅ（ｘ±ｓ，ｎ＝６）

＃

　　Ａ：Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅｓｉｇｎ；Ｂ：ＴｈｅｉｐｓｉｌａｔｅｒａｌＰＷＴｓｏｆｍｉｃｅ．Ｌｅｆｔ：Ｆ＝８９８６，Ｒｉｇｈｔ：Ｆ＝３４４１．



Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＣｏｎｇｒｏｕｐ；

＃

Ｐ＜

００１ｖｓｔｈｅｓＨＰｇｒｏｕｐ．（Ｎｕｍｂｅｒｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：２，ｎ＝１８）

组小鼠患侧ＰＷＴｓ差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。

与同期Ｃｏｎ组相比，ＨＰ组小鼠术后１－１０ｄ时

ＰＷＴｓ均明显降低（Ｐ＜００５），于术后１４ｄ恢复至

正常（Ｐ＞００５）。所有小鼠于术后ｄ１５手术侧足爪

足背注射ＰＧＥ

２

诱发痛转化，ｓＨＰ组和ＨＰ组小鼠

ＰＷＴｓ于ＰＧＥ

２

注射后４ｈ时均明显低于同期Ｃｏｎ组

（Ｐ＜００５）；于ＰＧＥ

２

注射后２４ｈ，与同期Ｃｏｎ组相

比，ＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ仍维持较低水平，明显低于同

期Ｃｏｎ组（Ｐ＜００５），ｓＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ则恢复正

常，与同期Ｃｏｎ组差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。

２．２　各组小鼠自发痛变化　如Ｆｉｇ２所示，术前各

组小鼠患侧自发痛评分差异无统计学意义（Ｐ＞

００５）。与同期Ｃｏｎ组相比，ＨＰ组小鼠术后１～１０

ｄ时自发痛评分均明显升高（Ｐ＜００５），于术后１４

ｄ恢复至正常（Ｐ＞００５）。所有小鼠于术后ｄ１５手

术侧足爪足背注射ＰＧＥ

２

诱发痛转化，ｓＨＰ组和ＨＰ

组小鼠于ＰＧＥ

２

注射后４ｈ时均明显高于同期Ｃｏｎ

组（Ｐ＜００５）；于ＰＧＥ

２

注射后２４ｈ，与同期Ｃｏｎ组

相比，ＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ仍维持较高水平，明显高于

同期Ｃｏｎ组（Ｐ＜００５），ｓＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ则恢复正

常，与同期Ｃｏｎ组差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。

２．３　各组小鼠焦虑样情绪变化　如Ｆｉｇ３所示，注

射ＰＧＥ

２

后２４ｈ，采用高架十字迷宫和旷场实验观

察小鼠焦虑样情绪。高架十字迷宫实验结果显示，

与同期Ｃｏｎ组相比，ｓＨＰ组和ＨＰ组小鼠进入开放

臂时间和总运动距离均无差异（Ｐ＞００５）（Ｆｉｇ３Ａ，

Ｂ）。旷场实验结果显示，与Ｃｏｎ组相比，ｓＨＰ组和

ＨＰ组小鼠进入中心区域时间和总运动距离无差异

（Ｐ＞００５）（Ｆｉｇ３Ｃ，Ｄ）。以上结果显示，术后痛转

化小鼠未产生焦虑样情绪。

·１２８６·

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

２．４　各组小鼠ＤＲＧ和ＳＣＤＨ中Ｐ２Ｘ３Ｒ、Ｐ２Ｘ７Ｒ

蛋白表达　如Ｆｉｇ４所示，注射ＰＧＥ４ｈ，３组小

２

后２

鼠患侧ＤＲＧ以及ＳＣＤＨ中Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白表达均无明

显差异（Ｐ＞００５）（Ｆｉｇ４Ａ，Ｃ）。与同期Ｃｏｎ组相

ＨＰ组小鼠患侧ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ３Ｒ蛋白表达明显增比，

高（Ｐ＜００５），而ｓＨＰ组小鼠ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ３Ｒ则无明

显差异（Ｆｉｇ４Ｂ）。由于Ｐ２Ｘ３Ｒ在ＳＣＤＨ中表达较少，

免疫印迹检测未显示出Ｐ２Ｘ３Ｒ条带（Ｆｉｇ４Ｄ）。

２．５　注射Ｐ２Ｘ３Ｒ和Ｐ２Ｘ７Ｒ抑制剂对小鼠ＰＷＴｓ

的影响　如Ｆｉｇ５所示，术后１４ｄ各组小鼠患侧

ＰＷＴｓ无差异（Ｐ＞００５）。于术后ｄ１５，实验小鼠手

术侧足爪足背先后注射特异性拮抗剂和ＰＧＥ，ＨＰ

２

ＧＥ、２４ｈ时均明显高于＋Ａ３１组小鼠于Ｐ

２

注射后４

同期ＨＰ＋ＮＳ组（Ｐ＜００５）（Ｆｉｇ５Ｂ）。与同期ＨＰ

＋ＮＳ组相比，ＨＰ＋Ａ７４组小鼠ＰＷＴｓ则无差异（Ｐ

＞００５）（Ｆｉｇ５Ｃ）。

Ｆｉｇ４　ＣｈａｎｇｅｓｏｆＰ２Ｘ３ＲａｎｄＰ２Ｘ７ＲｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＬ３－５

珋

ＣＤＨａｍｏｎｇｇｒｏｕｐｓｏｆｍｉｃｅ（ｘ±ｓ，ｎ＝６）ＤＲＧ，Ｓ

　　Ａ：Ｐ２Ｘ７ＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＤＲＧ；Ｂ：Ｐ２Ｘ３ＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＤＲＧ；Ｃ：Ｐ２Ｘ７Ｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎ

＃

；Ｄ：Ｐ２Ｘ３ＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＳＣＤＨ．



Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＣｏｎｇｒｏｕｐ；

＃

Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＳＣＤＨ

（Ｎｕｍｂｅｒｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：２，ｎ＝１８）ｓＨＰｇｒｏｕｐ．

Ｆｉｇ５　ＥｆｆｅｃｔｏｆＰ２Ｘ３ＲａｎｔａｇｏｎｉｓｔＡ３１７４９１ａｎｄＰ２Ｘ７ＲａｎｔａｇｏｎｉｓｔＡ７４０００３ｏｎｃｈａｎｇｅｓｏｆｐａｗｗｉｔｈｄｒａｗａｌ

珋

（ｘ±ｓ，ｎ＝６；ＢＣｏｎ：ｎ＝８；ＣＣｏｎ：ｎ＝９，ＨＰ＋Ａ７４：ｎ＝７）ｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓｉｎｍｉｃｅ

　　Ａ：Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅｓｉｇｎ；Ｂ，Ｃ：ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＰ２Ｘ３ＲａｎｄＰ２Ｘ７ＲｏｎｉｐｓｉｌａｔｅｒａｌＰＷＴｓｏｆｍｉｃｅ．ＢＬｅｆｔ：Ｆ＝３３５２，Ｒｉｇｈｔ：Ｆ＝２８７９Ｃ

Ｌｅｆｔ：Ｆ＝８８０８，Ｒｉｇｈｔ：Ｆ＝１２０６．



Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＣｏｎｇｒｏｕｐ；

▲▲

Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＨＰ＋ＮＳｇｒｏｕｐ．（Ｎｕｍｂｅｒｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：２，ｎ＝４２）

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

·１２８７·

３　讨论

　　术后急性疼痛治疗不当可以发展为术后慢性疼

７］

痛，严重影响患者的生活质量。Ｉｎｙａｎｇ等

［

采用足

菜胶和ＩＬ１但不能抑制

诱导的机械性痛觉过敏，

ＰＧＥ

２

诱导的机械性痛觉过敏。故本研究推断拮抗

Ｐ２Ｘ７Ｒ不能逆转术后痛转化的原因可能与Ｐ２Ｘ７Ｒ

介导疼痛的时效性、模型特异性有关。此外Ｋａｎｅｌ

１８］

ｌｏｐｏｕｌｏｓ等

［

研究表明，不同嘌呤受体亚型对ＡＴＰ

ＧＥ底切口作为第一刺激，恢复后足背注射Ｐ

２

成功

建立了术后急性痛向慢性痛转化的经典模型。有研

１０］

究报道

［

，切口术后小鼠伤害感受器和脊髓神经发

具有不同的敏感性，Ｐ２Ｘ１和Ｐ２Ｘ３具有最高的敏感

性并能迅速完全脱敏；Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ４和Ｐ２Ｘ５具有中

２Ｘ７Ｒ需要在更高浓度的等的敏感性并脱敏；而Ｐ

ＡＴＰ下才被激活，并且不脱敏。因此，Ｐ２Ｘ３Ｒ和

Ｐ２Ｘ７Ｒ对ＡＴＰ的敏感性和脱敏动力学差异可能是

两者在术后痛转化中作用差异的原因之一。

　　综上所述，ＤＲＧ神经元中Ｐ２Ｘ３Ｒ的激活介导

了小鼠切口术后急性疼痛向慢性疼痛的转化，ＤＲＧ

和ＳＣＤＨ中的Ｐ２Ｘ７Ｒ未参与小鼠术后痛转化的过

程，该结果为临床预防术后急性痛向术后慢性痛转

化提供了重要的方向。

参考文献：

［１］　ＧａｎＴＪ，ＨａｂｉｂＡＳ，ＭｉｌｌｅｒＴＥ，ｅｔａｌ．Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ，ｐａｔｉｅｎｔｓａｔｉｓ

ｆａｃｔｉｏｎ，ａｎｄｐｅｒｃｅｐｔｉｏｎｓｏｆｐｏｓｔｓｕｒｇｉｃａｌｐａｉｎ：ＲｅｓｕｌｔｓｆｒｏｍａＵＳ

ｎａｔｉｏｎａｌｓｕｒｖｅｙ［Ｊ］．ＣｕｒｒＭｅｄＲｅｓＯｐｉｎ，２０１４，３０（１）：１４９－６０．

［２］　ＧａｏＹＨ，ＬｉＣＷ，ＷａｎｇＪＹ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ

ｏｎｔｈｅｃｅｒｖｉｃｏｓｐｉｎａｌＰ２Ｘ７ｒｅｃｅｐｔｏｒ／ｆｒａｃｔａｌｋｉｎｅ／ＣＸ３ＣＲ１ｓｉｇｎａｌｉｎｇ

ｐａｔｈｗａｙｉｎａｒａｔｎｅｃｋｉｎｃｉｓｉｏｎｐａｉｎｍｏｄｅｌ［Ｊ］．ＰｕｒｉｎｅｒｇｉｃＳｉｇｎａｌ，

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［３］　ＹｕＪ，ＤｕＪＹ，ＦａｎｇＪＦ，ｅｔａｌ．ＴｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＰ２Ｘ３ａｎｄ

ＴＲＰＶ１ｉｎｔｈｅｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａｏｆａｄｕｌｔｒａｔｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐａｔｈｏ

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［４］　陆　帆，傅燕璐，高银平，等．Ｐ２Ｘ７受体参与疼痛调节机制的

Ｊ］．中国药理学通报，２０１９，３５（１２）：１６２９－３２．研究进展［

［４］　ＬｕＦ，ＦｕＹＬ，ＧａｏＹＰ，ｅｔａｌ．ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆＰ２Ｘ７ｒｅｃｅｐ

ｔｏｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐａｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌＢｕｌｌ，２０１９，

３５（１２）：１６２９－３２．

［５］　ＫｉｍＪＹ，ＭｅｇａｔＳ，ＭｏｙＪＫ，ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｌｉｇｉｎ２ｒｅｇｕｌａｔｅｓｓｐｉｎａｌ

ＧＡＢＡｅｒｇｉｃｐｌａｓｔｉｃｉｔｙｉｎｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ，ａｍｏｄｅｌｏｆｔｈｅｔｒａｎ

ｓｉｔｉｏｎｆｒｏｍａｃｕｔｅｔｏｃｈｒｏｎｉｃｐａｉｎ［Ｊ］．Ｐａｉｎ，２０１６，１５７（６）：１３１４

－２４．

［６］　ＷａｎｇＳ，ＤｕＪＹ，ＳｈａｏＦＢ，ｅｔａｌ．Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｒｅｇｕｌａｔｅｓ

ｐａｉｎｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅｍＧｌｕＲ５ＰＫＣｅｐｓｉｌｏｎｓｉｇｎａｌｉｎｇ

ｐａｔｈｗａｙｉｎｔｈｅｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａ［Ｊ］．ＪＰａｉｎＲｅｓ，２０２０，１３：１４７１

－８３．

［７］　ＩｎｙａｎｇＫＥ，ＢｕｒｔｏｎＭＤ，ＳｚａｂｏＰａｒｄｉＴ，ｅｔａｌ．ＩｎｄｉｒｅｃｔＡＭｐａｃ

ｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅａｃｔｉｖａｔｏｒｓｐｒｅｖｅｎｔｉｎｃｉｓｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｈｙｐｅｒａｌ

ｇｅｓｉａａｎｄｂｌｏｃｋｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ，ｗｈｅｒｅａｓｐｏｓｉｔｉｖｅａｌｌｏｓｔｅｒｉｃ

ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓｂｌｏｃｋｏｎｌｙｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＥｘｐＴ

ｈｅｒ，２０１９，３７１（１）：１３８－５０．

［８］　ＦｅｉＸＹ，ＨｅＸＦ，ＴａｉＺＸ，ｅｔａｌ．Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅａｌｌｅｖｉａｔｅｓ

ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎｉｎｒａｔｓｂｙｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇＰ２Ｘ３ｒｅｃｅｐｔｏｒｅｘ

［Ｊ］．ＰｕｒｉｎｅｒｇｉｃＳｉｇｎａｌ，２０２０，１６ｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａ

生可塑性变化，并维持启动状态（对炎症介质敏感

性增加），当足背注射ＰＧＥ诱发出长时间的疼

２

时，

痛，被认为是术后急性疼痛转化为术后慢性疼痛。

本研究结果证实，小鼠切口恢复后注射ＰＧＥ，２４ｈ

２

仍维持低水平的机械痛阈以及高水平的自发痛评

分，推测与小鼠切口术后伤害感受器对炎症介质的

敏感性增加有关。

　　临床上，慢性疼痛通常伴随焦虑、抑郁等情绪变

化，然而术后痛转化短期内是否会伴发焦虑情绪尚

无实验研究报道。有研究表明，切口痛大鼠会产生

焦虑样行为，随着疼痛的消失其焦虑样行为也随之

１１］

消失

［

。而本研究显示注射ＰＧＥ４ｈ小鼠未

２

后２

产生焦虑样行为，与单纯切口痛术后的焦虑表现不

１２］

一致。Ｇｕｉｄａ等

［

报道，ＳＮＩ造模后１４ｄ小鼠会产

１３］

生焦虑样行为。Ｇａｓｐａｒ等

［

报道了在注射１００

Ｌ

ＣＦＡ（结核分枝杆菌１００ｇ·Ｌ）２１ｄ后大鼠出现

焦虑样行为，等剂量ＣＦＡ（丁酸分枝杆菌）注射，Ｐａｒ

１４］

等

［

结果显示，大鼠出现焦虑样行为甚至需要ｅｎｔ

－１

２８ｄ。因此，推测是由于焦虑情绪大多在慢性痛的

中后期出现，而本研究在注射ＰＧＥ４ｈ检测，处

２

后２

于痛转化早期，故痛转化小鼠未产生焦虑样改变。

　　本研究主要聚焦不同层面嘌呤受体在术后痛转

化中的作用展开研究，结果显示术后痛转化小鼠

Ｐ２Ｘ３Ｒ蛋白表达在ＤＲＧ水平增加，足背注射

Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂明显提高小鼠机械痛阈，这与过往多

１５－１６］１５］

种痛转化模型研究结果相一致

［

。Ｊｏｒｇｅ等

［

报道，在角叉菜胶致敏的大鼠中，阻断Ｐ２Ｘ３Ｒ逆转

了ＰＧＥａｉｇｅ

２

诱导的急性肌痛向慢性肌痛的转化。Ｐ

１６］

等

［

的研究结果显示，在ＩＬ６介导的痛转化模型

ＩＬ６阶段抑制Ｐ２Ｘ３／４可阻断雄性小鼠痛转化中，

的产生。此外，本研究显示Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白表达在

ＤＲＧ和ＳＣＤＨ中均未变化，足背注射Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂

２］

无明显变化，这与Ｇａｏ等

［

的颈部切口疼痛研究结

果一致。其研究显示颈部切口术后４ｈＣ２－５ＳＣ

ＤＨ中Ｐ２Ｘ７Ｒ基因与蛋白表达水平无明显变化，而

术后２４ｈ后Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白表达增加，提示Ｐ２Ｘ７Ｒ介

导了早期的颈部切口疼痛。近年Ｎｅｖｅｓ等

［１７］

的研

究表明，阻断大鼠ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ７Ｒ可降低ＣＦＡ、角叉

·１２８８·

（４）：４９１－５０２．

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

６１０．

［１４］ＰａｒｅｎｔＡＪ，ＢｅａｕｄｅｔＮ，ＢｅａｕｄｒｙＨ，ｅｔａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅ

ｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎｒａｔｓｅｘｐｅｒｉｅｎｃｉｎｇｃｈｒｏｎｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｐａｉｎ［Ｊ］．Ｂｅ

ｈａｖＢｒａｉｎＲｅｓ，２０１２，２２９（１）：１６０－７．

［１５］ＪｏｒｇｅＣＯ，ｄｅＡｚａｍｂｕｊａＧ，ＧｏｍｅｓＢＢ，ｅｔａｌ．Ｐ２Ｘ３ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ

ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｆｒｏｍａｃｕｔｅｔｏｃｈｒｏｎｉｃｍｕｓｃｌｅｐａｉｎ［Ｊ］．Ｐｕ

，２０２０，１６（３）：４０３－１４．ｒｉｎｅｒｇｉｃＳｉｇｎａｌ

［１６］ＰａｉｇｅＣ，ＭａｒｕｔｈｙＧＢ，ＭｅｊｉａＧ，ｅｔａｌ．ＳｐｉｎａｌｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＰ２ＸＲ

，ｂｕｔｎｏｔｆｅｏｒｐ３８ｓｉｇｎａｌｉｎｇｄｉｓｒｕｐｔｓｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍａｌｅ

ｍａｌｅ，ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２０１８，１０（３８５）：１３３－４２．

［１７］ＮｅｖｅｓＡＦ，ＦａｒｉａｓＦＨ，ｄｅＭａｇａｌｈａｅｓＳＦ，ｅｔａｌ．Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｉｎ

ｆｌａｍｍａｔｏｒｙｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａｄｅｐｅｎｄｓｏｎＰ２Ｘ７ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎｓａｔｅｌｌｉｔｅｇｌｉ

ａｌｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＰｈｙｓｉｏｌ，２０２０，２５（１１）：４７３．

［１８］ＫａｎｅｌｌｏｐｏｕｌｏｓＪＭ，ＡｌｍｅｉｄａｄａＳｉｌｖａＣＬＣ，ＲｕｕｔｅｌＢｏｕｄｉｎｏｔＳ，

ｅｔａｌ．ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｔｈｅＰ２Ｘ４ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ａｎ

［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＩｍｍｕｎｏｌ，２０２１，２５（１２）：ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ

６４５８３４．

［９］　ＭｉｙａｋａｗａＴ，ＴｅｒａｓｈｉｍａＹ，ＴａｋｅｂａｙａｓｈｉＴ，ｅｔａｌ．Ｔｒａｎｓｉｅｎｔｒｅ

ｃｅｐｔｏｒｐｏｔｅｎｔｉａｌａｎｋｙｒｉｎ１ｉｎｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎ

ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎｉｎｎｅｒｖｅｒｏｏｔｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｏｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＭｏｌＰａｉｎ，

２０１４，１０（５８）：２－１１．

［１０］ＳｕｎＹ，ＳａｈｂａｉｅＰ，ＬｉａｎｇＤＹ，ｅｔａｌ．Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｐｉ

［Ｊ］．ｎａｌＣＸＣＲ２ｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｉｎｃｉｓｉｏｎａｌｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎｍｉｃｅ

Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，２０１３，１１９（５）：１１９８－２０８．

［１１］ＫｏｕｙａＦ，ＩｑｂａｌＺ，ＣｈａｒｅｎＤ，ｅｔａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅｂｅ

ｈａｖｉｏｕｒｉｎａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆａｃｕｔｅｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｐａｉｎ［Ｊ］．ＥｕｒＪＡｎ

ａｅｓｔｈｅｓｉｏｌ，２０１５，３２（４）：２４２－７．

［１２］ＧｕｉｄａＦ，ＤｅＧｒｅｇｏｒｉｏＤ，ＰａｌａｚｚｏＥ，ｅｔａｌ．Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ，ｂｉｏｃｈｅｍｉ

ｃａｌａｎｄｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｉｎｓｐａｒｅｄｎｅｒｖｅｉｎｊｕｒｙｍｏｄｅｌ

ｏｆｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎ［Ｊ］．ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉ，２０２０，２１（９）：３３９６．

［１３］ＧａｓｐａｒＪＣ，ＨｅａｌｙＣ，ＦｅｒｄｏｕｓｉＭＩ，ｅｔａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｂｌｏｃｋ

ａｄｅｏｆＰＰＡＲａｌｐｈａｅｘａｃｅｒｂａｔｅｓｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｐａｉｎｒｅｌａｔｅｄｉｍｐａｉｒ

［Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅｓ，２０２１，９（６）：ｍｅｎｔｏｆｓｐａｔｉａｌｍｅｍｏｒｙｉｎｒａｔｓ

ＤｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉｏｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｔｙｐｅＰ２Ｘ３Ｒｍｅｄｉａｔｅｓ

ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍｉｃｅ

１１１１１１１

ＺＨＥＮＳｉｊｉａ，ＺＨＡＯＢｅｉ，ＺＨＥＮＧＢｏｘｉ，ＴＩＡＮＳｈｕｘｉｎ，ＸＵＴｉｎｇ，ＷＵＭｉｎｇｈｕｉ，ＦＡＮＧＪｕｎｆａｎ，

２１１１，２１，２

ＺＨＯＵＪｉｅ，ＤＵＪｕｎｙｉｎｇ，ＸＵＣｈｉ，ＦＡＮＧＪｉａｎｑｉａｏ，ＬＩＡＮＧＹｉ

（１．ＤｅｐｔｏｆＮｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＡｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅＲｅｓｅａｒｃｈ，ｔｈｅＴｈｉｒｄＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，

ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＡｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅａｎｄＮｅｕｒｏｌｏｇｙｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１００５３，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐｔｏｆＡｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅａｎｄ

，ｔｈｅＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１０００５，Ｃｈｉｎａ）Ｍｏｘｉｂｕｓｔｉｏｎ

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｉｍ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅ

ｒｏｌｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｔｙｐｅｓａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔ

ｓｉｔｅｓｉｎｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍｉｃｅ．

Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｍｏｄｅｌ

ｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｂｙｉｎｊｅｃｔｉｎｇＰＧＥｆｔｅｒｐｌａｎｔａｒｉｎｃｉｓｉｏｎ

２

ａ

ｒｅｃｏｖｅｒｙ．ＰａｒｔＩ：Ｃ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄ

ｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌ（Ｃｏｎ），ｓｈａｍｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ（ｓＨＰ）

ａｎｄｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ（ＨＰ）ｇｒｏｕｐｓｔｏｄｅｔｅｃｔｍｅ

ｃｈａｎｉｃａｌｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓ，ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｐａｉｎｓｃｏｒｅｓａｎｄ

ａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｕｒｓ；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏ

ｄｅｔｅｃｔｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎＰ２Ｘ３ＲａｎｄＰ２Ｘ７Ｒｐｒｏｔｅｉｎｅｘ

ｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅａｆｆｅｃｔｅｄＬ３－５ｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉｏｎ

（ＤＲＧ）ａｎｄｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎ（ＳＣＤＨ）．ＰａｒｔＩＩ：

Ｃ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏＣｏｎｇｒｏｕｐ，

ＨＰ＋ｓａｌｉｎｅｇｒｏｕｐ，ＨＰ＋Ｐ２Ｘ３Ｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｇｒｏｕｐｏｒ

ＨＰ＋Ｐ２Ｘ７Ｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｇｒｏｕｐｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆ

ａｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｕｂｔｙｐｅｓｏｆｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｓ

ｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｏｎｍｅｃｈａｎｉｃａｌｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄｉｎｍｉｃｅ．Ｒ

ｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｍｉｃｅ，ｉｎｃｉｓｉｏｎｐａｉｎｍｉｃｅｉｎｊｅｃｔｅｄ

ｈｏｗｅｄａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｉｎｍｅｃｈａｎｉｃａｌｗｉｔｈＰＧＥ

２

ｓ

ｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄａｎｄａｍａｒｋｅｄｉｎｃｒｅａｓｅｉｎｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ

ｐａｉｎｓｃｏｒｅ（Ｐ＜００５），ａｎｄｄｉｄｎｏｔｓｈｏｗａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅ

ｂｅｈａｖｉｏｕｒ（Ｐ＞００５）．ＡｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇＰ２Ｘ３Ｒｂｌｏｃｋｅｄ

ｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ，

ｗｈｉｌｅａｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇＰ２Ｘ７Ｒｈａｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔ．

Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｐ２Ｘ３ＲｉｎＤＲＧｍａｙｂｅｏｎｅｏｆｔｈｅｋｅｙ

ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍ

ｉｎｇ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ；ｄｏｒ

ｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａ；ｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎ；ｐｕｒｉｎｏｃｅｐ

ｔｏｒｓ；Ｐ２Ｘ３Ｒ；Ｐ２Ｘ７Ｒ

2024年4月26日发(作者：是元冬)

··１２８２

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）：１２８２～８

背根神经节嘌呤受体亚型Ｐ２Ｘ３Ｒ介导小鼠术后急－慢痛转化

甄思佳

１

，赵　贝

１

，郑博习

１

，田书心

１

，徐　婷

１

，吴茗慧

１

，房军帆

１

，

，２，２

周　杰

２

，杜俊英

１

，徐　驰

１

，方剑乔

１

，梁　宜

１

（１．浙江中医药大学第三临床医学院针灸神经生物学实验室，浙江杭州　３１００５３；

２．浙江中医药大学附属第三医院针灸科，浙江杭州　３１０００５）

ｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２０９０６５

文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０７－１２８２－０７

中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２２８５；Ｒ３９２１１；Ｒ４４１１；Ｒ６１９９

摘要：目的　探讨不同部位不同嘌呤受体亚型在小鼠切口术

后痛转化中的作用差异。方法　足底切口恢复后注射ＰＧＥ

２

构建术后痛转化模型。第一部分：Ｃ５７ＢＬ／６小鼠随机分为对

照（Ｃｏｎ）组、假敏化（ｓＨＰ）组、敏化（ＨＰ）组，检测机械痛阈、

自发痛评分和焦虑样行为；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测患侧Ｌ３－５背

ＤＲＧ）和脊髓背角（ＳＣＤＨ）中Ｐ２Ｘ３Ｒ和Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋根神经节（

白表达变化。第二部分：Ｃ５７ＢＬ／６小鼠随机分为Ｃｏｎ组、ＨＰ

＋生理盐水组、ＨＰ＋Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂组或ＨＰ＋Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂

组，观察拮抗不同亚型嘌呤受体对小鼠机械痛阈的影响。结

果　与正常小鼠相比，切口痛小鼠注射ＰＧＥ后机械痛阈明

２

显下降，自发痛评分明显增加（Ｐ＜００５），未表现出焦虑样

行为（Ｐ＞００５），且Ｐ２Ｘ３Ｒ蛋白在ＤＲＧ中表达明显增多（Ｐ

＜００５），在ＳＣＤＨ中未检出，而Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白在ＤＲＧ和ＳＣ

Ｐ＞００５）。拮抗Ｐ２Ｘ３Ｒ能阻断ＤＨ各组中表达均无差异（

术后痛转化的产生，而拮抗Ｐ２Ｘ７Ｒ无明显影响。结论　切

口痛小鼠经ＰＧＥ不伴发焦虑

２

诱导可出现急慢性痛的转化，

样情绪，ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ３Ｒ可能是参与术后痛转化的关键受体

之一。

关键词：术后痛转化；背根神经节；脊髓背角；嘌呤受体；

Ｐ２Ｘ３Ｒ；Ｐ２Ｘ７Ｒ

发生率逐年升高，已然成为一个棘手的临床问题。

切口痛作为一种手术操作引起的术后急性创伤，治

疗不当会转变成术后慢性疼痛，严重影响患者的生

活质量。一项关于术后慢性疼痛发生率及患者满意

１］

度的权威调查显示

［

，８６％的患者会产生术后疼

痛，７４％的患者这种疼痛会延长至出院后。急性组

织损伤使神经元变得敏感，在损伤愈合后形成一种

启动状态，在暴露于小剂量炎症介质时即可产生放

大的伤害性反应，从而延长疼痛时间，逐渐形成慢性

疼痛，该类现象被称为痛转化，痛觉敏化诱发模型

（ＨｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃＰｒｉｍｉｎｇ，ＨＰ）是研究痛转化的经典模

型。如能有效阻断急性损伤向慢性疼痛的转化，将

有利于慢性疼痛的控制和治疗。

　　Ｐ２Ｘ受体（Ｐ２ＸＲ）是一种配体门控离子通道，

与三磷酸腺苷（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＡＴＰ）结合后

２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、激活发挥作用，在脊椎动物中有Ｐ

Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、Ｐ２Ｘ６、Ｐ２Ｘ７等７种亚型，在背根神经

ＤｏｒｓａｌＲｏｏｔＧａｎｇｌｉｏｎ，ＤＲＧ）、脊髓背角（Ｓｐｉｎａｌ节（

ＣｏｒｄＤｏｒｓａｌＨｏｒｎ，ＳＣＤＨ）等多种组织和细胞中均有

广泛表达。其中Ｐ２Ｘ３受体（Ｐ２Ｘ３Ｒ）和Ｐ２Ｘ７受体

（Ｐ２Ｘ７Ｒ）被报道参与切口疼痛、神经病理性疼痛、

２－４］

炎症性疼痛等多种疼痛的发生和维持

［

。已有研

究报道，ＤＲＧ中代谢型谷氨酸受体５（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ

开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：

ｇｌｕｔａｍａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒ５，ｍＧｌｕＲ５）－蛋白激酶Ｃｅｐｓｉｌｏｎ

（ＰｒｏｔｅｉｎＫｉｎａｓｅｓＣｅｐｓｉｌｏｎ，ＰＫＣ）信号通路参与介

导角叉菜胶痛转化、ＳＣＤＨ中的

氨基丁酸Ａ受体

（ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄＡｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧＡＢＡＡＲ）参与介导

５－６］

白细胞介素６（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）痛转化

［

。但

　　随着外科手术的快速发展，患者术后疼痛症状

收稿日期：２０２３－０２－２０，修回日期：２０２３－０４－２０

基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２１７４４９０）；浙江省自然

科学基金（ＮｏＬＹ１９Ｈ２７０００３，ＬＱ１８Ｈ２７０００１）

作者简介：甄思佳（１９９７－），女，硕士生，研究方向：针灸镇痛作用机

Ｅｍａｉｌ：ｚｓｊ１８２７６９＠１６３．ｃｏｍ；制，

１９８３－），男，博士，副研究员，研究方向：神经药徐　驰（

理学，通讯作者，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｃｈｉ＠ｚｃｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；

梁　宜（１９８０－），女，博士，研究员，博士生导师，研究方

向：针灸镇痛效应规律及其转化应用，通信作者，Ｅｍａｉｌ：

ｌｉａｎｇｙｉｗｗｗ＠ｚｃｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

是，目前关于介导术后痛转化关键物质仍不十分清

楚，Ｐ２Ｘ３Ｒ和Ｐ２Ｘ７Ｒ作为疼痛相关受体虽参与急性

疼痛，但是是否参与术后痛转化尚未可知。因此，本

研究旨在ＤＲＧ和ＳＣＤＨ两个水平探讨Ｐ２Ｘ３Ｒ和

Ｐ２Ｘ７Ｒ在术后痛转化小鼠中的作用。

１　材料与方法

１．１　材料　

１．１．１　实验动物　本研究使用ＳＰＦ级健康雄性

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

··１２８３

Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，体质量（２０－２５）ｇ，购于中国科学院

上海实验动物中心，由浙江中医药大学实验动物中

心饲养，许可证号：ＳＣＸＫ（沪）２００８００１６。饲养期间

给予啮齿类动物标准颗粒饲料（由中国科学院实验

１２ｈ循环灯光，室温动物中心提供）并自由饮水，

（２３±２）℃。

１．１．２　试剂与仪器　异氟烷（中国瑞沃德，Ｒ５１０

２２）、前列腺素ＥｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥ，ＰＧＥ（美国

２

（

２２

）

Ｓｉｇｍａ，Ｐ５６４０－１ｍｇ）、兔抗Ｐ２Ｘ３Ｒ（美国Ａｌｏｍｏｎｅ，

ＡＰＲ０１６）、兔抗Ｐ２Ｘ７Ｒ（美国Ａｌｏｍｏｎｅ，ＡＰＲ００４）、兔

抗ＧＡＰＤＨ（美国ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，３６８３ｓ）、

Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂Ａ３１７４９１（Ａ３１，美国Ｓｉｇｍａ，Ａ２９７９－５

）、Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂Ａ７４０００３（Ａ７４，美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ，ｍｇ

３７０１）、ＢＣＡ试剂盒（中国碧云天，Ｐ００１０）、ＥＣＬ试

剂盒（中国Ｂｉｏｓｈａｒｐ，ＢＬ５２０Ａ）。

　　纤毛机械刺激针（美国ＳｔｏｅｌｔｉｎｇＣｏ，ＮＣ１２７７５）、

恒温手术台（美国Ｈａｒｖａｒｄ）、移动呼吸麻醉机（中国

瑞沃德，Ｒ５３０ＩＥ）、高架十字迷宫（中国瑞沃德），旷

场（中国瑞沃德），ＡＮＹｍａｚｅ动物行为视频跟踪系

统（美国Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ），高速低温组织研磨仪（中国塞

ＫＺＦ）、电泳－转印系统（美国ＢｉｏＲａｄ）、台维尔，

Ⅲ



式高速冷冻离心机（美国ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｓｏｒｖａｌｌ

）、酶标仪（美国ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ，ＢｉｏｆｕｇｅＳｔｒａｔｏｓ

ＳｐｅｃｔｒａＭａｘＭ４）、凝胶成像系统（美国ＳａｎＪｏｓｅ，

ＦＲ１１２３）。

１．２　方法　

１．２．１　动物造模　切口敏化（ＨｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃＰｒｉｍｉｎｇ，

ＨＰ）组的实验小鼠采用单侧足底切口联合术后足背

注射ＰＧＥ％异

２

建立切口术后痛转化模型。采用１

－１

００ｍＬ·ｍｉｎ氧气流量进行气体麻醉小氟烷以５

和消毒）及术后１５ｄ手术侧足爪足背注射等量生理

盐水；ｓＨＰ组行假切口处理及注射ＰＧＥ；ＨＰ组按照

２

造模方法行足底切口术并注射ＰＧＥ。

２

　　第二部分实验中分两个批次开展。第一批次选

用２０只小鼠完全随机分为Ｃｏｎ组（ｎ＝８）、ＨＰ＋ＮＳ

组（ｎ＝６）、ＨＰ＋Ａ３１（切口痛敏化＋Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂，

ｎ＝６）组。Ｃｏｎ组操作同前；ＨＰ＋ＮＳ和ＨＰ＋Ａ３１组

均行痛转化造模，并分别在注射ＰＧＥ０ｍｉｎ足

２

前１

３１７４９１（５０

Ｌ，１００ｎｍｏｌ·背注射生理盐水或Ａ

－１［］

Ｌ）

８

。第二批次选用２２只小鼠完全随机分为

Ｃｏｎ组（ｎ＝９）、ＨＰ＋ＮＳ组（ｎ＝６）、ＨＰ＋Ａ７４组（切

口痛敏化＋Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂，ｎ＝７），ＨＰ＋Ａ７４组行痛

ＧＥ０ｍｉｎ足背注射转化造模，在注射Ｐ

２

前１

－１

Ａ７４０００３（５０

Ｌ，１００ｎｍｏｌ·Ｌ），余二组操作同前。

１．２．３　机械痛阈检测（ｐａｗｗｉｔｈｄｒａｗａｌｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓ，

ＰＷＴｓ）　测量前，各组小鼠适应环境３ｄ。测量时，

在一个安静、温度维持在（２０～２５）℃的房间进行。

测定前，将小鼠分别放置在具有金属丝网地板的透

３

明有机塑料箱（８×１０×１０ｃｍ）中，其足部可暴露于

铁丝网眼中，待其安静后（即停止梳理毛发和探索

性活动，约３０ｍｉｎ），用不同力量的ｖｏｎＦｒｅｙｈａｉｒ

（００２、００４、００７、０１６、０４、０６、１、１４ｇ和２ｇ）。

从０４ｇ刺激强度开始，垂直刺激小鼠左后爪足底

中部，避开小鼠足垫，向小鼠足底施加压力至ｖｏｎ

Ｆｒｅｙｈａｉｒ轻微弯曲并持续５ｓ，若小鼠出现缩腿或舔

足反应则为阳性反应，记为“Ｘ”并给予相邻小一级

ｏｎＦｒｅｙｈａｉｒ刺激不能引力度的刺激。当该力度的ｖ

起阳性反应时，则记为“Ｏ”并给予相邻大一级力度

的纤维刺激，每次刺激间隔３０ｓ。由此可得到一串

以“Ｏ”或“Ｘ”组合的序列，以第一次出现“Ｘ”的前

Ｏ”作为起点，选择包括该起点的连续６次的一次“

刺激反应，作为推算５０％ＭＷＴ的关键序列。

１．２．４　自发痛行为检测（ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｐａｉｎｓｃａｌｅ）　

［９］

采用Ｍｉｙａｋａｗａ等的方法。测量前，各组小鼠适应

鼠，输出浓度为１％的异氟烷通过鼻子麻痹小鼠，碘

伏消毒足底皮肤后，在左后爪上做一约５ｍｍ长纵

形切口，用镊子抬起足底肌腱并纵向切开，用

５－０

缝合线缝合皮肤，常规消毒并于术后４８ｈ后拆线；

切口痛术后１５ｄ（实验小鼠机械痛阈恢复至正常）

［７］

时于手术侧足爪足背活射ＰＧＥ（１００ｎｇ／２５

Ｌ）。

２

测量环境３ｄ。测量时，在一个安静、温度维持在

（２０～２５）℃的房间进行。正式测定前，将小鼠放置

在独立有机玻璃容器内适应２０ｍｉｎ，然后连续观察

并记录其行为５ｍｉｎ。本研究使用的量表为：０＝手

术侧爪正常按压在地板上；１＝爪子轻轻地放在地板

上；２＝只有爪子的内侧被压在地板上；３＝只有脚后

跟压在地板上，后爪倒置；４＝整个爪子抬起；５＝动

物舔了舔受伤的爪子。采用最大尺度数估计实验小

鼠自发疼痛相关行为。

１．２．５　高架十字迷宫检测（ＥｌｅｖａｔｅｄＰｌｕｓＭａｚｅ，

ＥＰＭ）　测试前，各组小鼠在一个安静的房间中适应

　　对照（ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｃｏｎ）组小鼠进行假切口（即进行

相同的麻醉和消毒），对照注射相同剂量的生理盐

水（ｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅ，ＮＳ）。

　　切口假敏化（ｓｈａｍＨｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃＰｒｉｍｉｎｇ，ｓＨＰ）

组小鼠进行假切口（同Ｃｏｎ组小鼠），注射相同剂量

ＧＥ（同ＨＰ组小鼠）。的Ｐ

２

１．２．２　分组与处理　第一部分实验，将１８只小鼠

完全随机分为Ｃｏｎ组（ｎ＝６）、ｓＨＰ组（ｎ＝６）、ＨＰ组

（ｎ＝６）。Ｃｏｎ组小鼠行假切口处理（仅相同的麻醉

·１２８４·

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

１ｈ，房间的温度维持在（２０～２５）℃，且房间环境较

暗并无直射光线。高架十字迷宫包括两个张开的手

臂（开放臂）（长３０ｃｍ，宽６ｃｍ），和两个封闭的手

臂（闭合臂）（长３０ｃｍ，宽６ｃｍ，高１５ｃｍ）和一个中

ｍ，宽６ｃｍ），高架十字迷宫放置在距心区域（长６ｃ

离房间地板３５ｃｍ的高度处。每只动物的行为都由

安装在仪器上方的摄像机记录下来，这样就可以通

过一个闭路电视电路在另一个房间进行监控。将小

鼠放于高架十字迷宫中心区域，适应３０ｓ后记录５

小鼠的活动，５ｍｉｎ后取出小鼠。仪器的地板用ｍｉｎ

蘸取１０％酒精的纸巾擦拭。使用ＡＮＹｍａｚｅ软件

记录并分析数据：将高架十字迷宫分为开放臂、闭合

臂以及中心区域，分析小鼠的运动总距离以及开放

臂运动时间。

１．２．６　旷场检测（Ｏｐｅｎｆｉｅｌｄｔｅｓｔ，ＯＦＴ）　测试前，

各组小鼠在一个安静的房间中适应１ｈ，房间的温度

维持在（２０～２５）℃，且房间环境较暗并无直射光线。

旷场设备由覆盖着黑色不透水胶木的木材制成，是一

个长宽高均为４０ｃｍ的正方形箱体。每只动物的行

为都由安装在仪器上方的摄像机记录下来，这样就可

以通过一个闭路电视电路在另一个房间进行监控。

每只小鼠被放置在旷场的中心，适应３０ｓ后记录５

ｍｉｎ小鼠的活动，结束后取出小鼠。仪器的地板是用

０％酒精的纸巾擦拭的。使用ＡＮＹｍａｚｅ软件蘸取１

记录并分析数据：将旷场等分为１６个正方形区域边

长为１０ｃｍ，中心４个设置为中心区，其他为周围区，

分析小鼠的运动总距离以及中心区时间。

１．２．７　取材及样本处理　本实验于注射ＰＧＥ

２

后

２４ｈ检测完ＰＷＴｓ后，进行取材。用３％戊巴比妥钠

－１

０１５ｍＬ·１００ｇ）腹腔注射麻醉小鼠，暴露心脏，（

左心室、升主动脉用４℃预冷的生理盐水快速灌注，

快速取出患侧Ｌ３－５ＤＲＧ和ＳＣＤＨ，置入－８０℃冰

箱中保存。

１．２．８　免疫印迹法检测　将Ｌ３－５ＤＲＧ和ＳＣＤＨ

放入ＲＩＰＡ裂解液中超声粉碎，离心：１４０００ｒ·

－１

ｍｉｎ，４℃、５ｍｉｎ，取上清液，ＢＣＡ蛋白定量。取

１５

ｇ蛋白上样，８％ＳＤＳＰＡＧＥ电泳后转印至

ＰＶＤＦ膜，５％脱脂奶粉室温封闭１ｈ，分别用ＴＢＳＴ

稀释好的一抗：兔抗Ｐ２Ｘ３Ｒ、兔抗Ｐ２Ｘ７Ｒ和兔抗

ＧＡＰＤＨ抗体（浓度１∶１０００），４℃孵育过夜（１６～

１８ｈ），用ＴＢＳＴ稀释好的辣根过氧化物酶标记的山

羊抗兔二抗（浓度１∶５０００）室温孵育２ｈ，ＥＣＬ试剂

盒显色后拍照，计算条带的平均吸光度值。

１．３　统计学分析　应用Ｇｒａｐｈｐａｄ软件进行统计学

珋

分析。计量资料以ｘ±ｓ表示。痛行为学数据比较

采用ＴｗｏｗａｙＡＮＯＶＡ结合ｐｏｓｔｈｏｃＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ′ｓ，情

绪行为学以及免疫印迹数据比较采用Ｏｎｅｗａｙ

ＡＮＯＶＡ。

２　结果

２．１　各组小鼠ＰＷＴｓ比较　如Ｆｉｇ１所示，术前各

珋

＃



Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＣｏｎｇｒｏｕｐ；

＃

Ｐ＜

００１ｖｓｔｈｅｓＨＰｇｒｏｕｐ．（Ｎｕｍｂｅｒｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：２，ｎ＝１８）

组小鼠患侧ＰＷＴｓ差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。

与同期Ｃｏｎ组相比，ＨＰ组小鼠术后１－１０ｄ时

ＰＷＴｓ均明显降低（Ｐ＜００５），于术后１４ｄ恢复至

正常（Ｐ＞００５）。所有小鼠于术后ｄ１５手术侧足爪

足背注射ＰＧＥ

２

诱发痛转化，ｓＨＰ组和ＨＰ组小鼠

ＰＷＴｓ于ＰＧＥ

２

注射后４ｈ时均明显低于同期Ｃｏｎ组

（Ｐ＜００５）；于ＰＧＥ

２

注射后２４ｈ，与同期Ｃｏｎ组相

比，ＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ仍维持较低水平，明显低于同

期Ｃｏｎ组（Ｐ＜００５），ｓＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ则恢复正

常，与同期Ｃｏｎ组差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。

２．２　各组小鼠自发痛变化　如Ｆｉｇ２所示，术前各

组小鼠患侧自发痛评分差异无统计学意义（Ｐ＞

００５）。与同期Ｃｏｎ组相比，ＨＰ组小鼠术后１～１０

ｄ时自发痛评分均明显升高（Ｐ＜００５），于术后１４

ｄ恢复至正常（Ｐ＞００５）。所有小鼠于术后ｄ１５手

术侧足爪足背注射ＰＧＥ

２

诱发痛转化，ｓＨＰ组和ＨＰ

组小鼠于ＰＧＥ

２

注射后４ｈ时均明显高于同期Ｃｏｎ

组（Ｐ＜００５）；于ＰＧＥ

２

注射后２４ｈ，与同期Ｃｏｎ组

相比，ＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ仍维持较高水平，明显高于

同期Ｃｏｎ组（Ｐ＜００５），ｓＨＰ组小鼠ＰＷＴｓ则恢复正

常，与同期Ｃｏｎ组差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。

２．３　各组小鼠焦虑样情绪变化　如Ｆｉｇ３所示，注

射ＰＧＥ

２

后２４ｈ，采用高架十字迷宫和旷场实验观

察小鼠焦虑样情绪。高架十字迷宫实验结果显示，

与同期Ｃｏｎ组相比，ｓＨＰ组和ＨＰ组小鼠进入开放

臂时间和总运动距离均无差异（Ｐ＞００５）（Ｆｉｇ３Ａ，

Ｂ）。旷场实验结果显示，与Ｃｏｎ组相比，ｓＨＰ组和

ＨＰ组小鼠进入中心区域时间和总运动距离无差异

（Ｐ＞００５）（Ｆｉｇ３Ｃ，Ｄ）。以上结果显示，术后痛转

化小鼠未产生焦虑样情绪。

·１２８６·

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

２．４　各组小鼠ＤＲＧ和ＳＣＤＨ中Ｐ２Ｘ３Ｒ、Ｐ２Ｘ７Ｒ

蛋白表达　如Ｆｉｇ４所示，注射ＰＧＥ４ｈ，３组小

２

后２

鼠患侧ＤＲＧ以及ＳＣＤＨ中Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白表达均无明

显差异（Ｐ＞００５）（Ｆｉｇ４Ａ，Ｃ）。与同期Ｃｏｎ组相

ＨＰ组小鼠患侧ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ３Ｒ蛋白表达明显增比，

高（Ｐ＜００５），而ｓＨＰ组小鼠ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ３Ｒ则无明

显差异（Ｆｉｇ４Ｂ）。由于Ｐ２Ｘ３Ｒ在ＳＣＤＨ中表达较少，

免疫印迹检测未显示出Ｐ２Ｘ３Ｒ条带（Ｆｉｇ４Ｄ）。

２．５　注射Ｐ２Ｘ３Ｒ和Ｐ２Ｘ７Ｒ抑制剂对小鼠ＰＷＴｓ

的影响　如Ｆｉｇ５所示，术后１４ｄ各组小鼠患侧

ＰＷＴｓ无差异（Ｐ＞００５）。于术后ｄ１５，实验小鼠手

术侧足爪足背先后注射特异性拮抗剂和ＰＧＥ，ＨＰ

２

ＧＥ、２４ｈ时均明显高于＋Ａ３１组小鼠于Ｐ

２

注射后４

同期ＨＰ＋ＮＳ组（Ｐ＜００５）（Ｆｉｇ５Ｂ）。与同期ＨＰ

＋ＮＳ组相比，ＨＰ＋Ａ７４组小鼠ＰＷＴｓ则无差异（Ｐ

＞００５）（Ｆｉｇ５Ｃ）。

Ｆｉｇ４　ＣｈａｎｇｅｓｏｆＰ２Ｘ３ＲａｎｄＰ２Ｘ７ＲｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＬ３－５

珋

ＣＤＨａｍｏｎｇｇｒｏｕｐｓｏｆｍｉｃｅ（ｘ±ｓ，ｎ＝６）ＤＲＧ，Ｓ

　　Ａ：Ｐ２Ｘ７ＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＤＲＧ；Ｂ：Ｐ２Ｘ３ＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＤＲＧ；Ｃ：Ｐ２Ｘ７Ｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎ

＃

；Ｄ：Ｐ２Ｘ３ＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＳＣＤＨ．



Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＣｏｎｇｒｏｕｐ；

＃

Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＳＣＤＨ

（Ｎｕｍｂｅｒｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：２，ｎ＝１８）ｓＨＰｇｒｏｕｐ．

珋

（ｘ±ｓ，ｎ＝６；ＢＣｏｎ：ｎ＝８；ＣＣｏｎ：ｎ＝９，ＨＰ＋Ａ７４：ｎ＝７）ｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓｉｎｍｉｃｅ

Ｌｅｆｔ：Ｆ＝８８０８，Ｒｉｇｈｔ：Ｆ＝１２０６．



Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＣｏｎｇｒｏｕｐ；

▲▲

Ｐ＜００１ｖｓｔｈｅＨＰ＋ＮＳｇｒｏｕｐ．（Ｎｕｍｂｅｒｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：２，ｎ＝４２）

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

·１２８７·

３　讨论

　　术后急性疼痛治疗不当可以发展为术后慢性疼

７］

痛，严重影响患者的生活质量。Ｉｎｙａｎｇ等

［

采用足

菜胶和ＩＬ１但不能抑制

诱导的机械性痛觉过敏，

ＰＧＥ

２

诱导的机械性痛觉过敏。故本研究推断拮抗

Ｐ２Ｘ７Ｒ不能逆转术后痛转化的原因可能与Ｐ２Ｘ７Ｒ

介导疼痛的时效性、模型特异性有关。此外Ｋａｎｅｌ

１８］

ｌｏｐｏｕｌｏｓ等

［

研究表明，不同嘌呤受体亚型对ＡＴＰ

ＧＥ底切口作为第一刺激，恢复后足背注射Ｐ

２

成功

建立了术后急性痛向慢性痛转化的经典模型。有研

１０］

究报道

［

，切口术后小鼠伤害感受器和脊髓神经发

具有不同的敏感性，Ｐ２Ｘ１和Ｐ２Ｘ３具有最高的敏感

性并能迅速完全脱敏；Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ４和Ｐ２Ｘ５具有中

２Ｘ７Ｒ需要在更高浓度的等的敏感性并脱敏；而Ｐ

ＡＴＰ下才被激活，并且不脱敏。因此，Ｐ２Ｘ３Ｒ和

Ｐ２Ｘ７Ｒ对ＡＴＰ的敏感性和脱敏动力学差异可能是

两者在术后痛转化中作用差异的原因之一。

　　综上所述，ＤＲＧ神经元中Ｐ２Ｘ３Ｒ的激活介导

了小鼠切口术后急性疼痛向慢性疼痛的转化，ＤＲＧ

和ＳＣＤＨ中的Ｐ２Ｘ７Ｒ未参与小鼠术后痛转化的过

程，该结果为临床预防术后急性痛向术后慢性痛转

化提供了重要的方向。

参考文献：

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ｎａｔｉｏｎａｌｓｕｒｖｅｙ［Ｊ］．ＣｕｒｒＭｅｄＲｅｓＯｐｉｎ，２０１４，３０（１）：１４９－６０．

［２］　ＧａｏＹＨ，ＬｉＣＷ，ＷａｎｇＪＹ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ

ｏｎｔｈｅｃｅｒｖｉｃｏｓｐｉｎａｌＰ２Ｘ７ｒｅｃｅｐｔｏｒ／ｆｒａｃｔａｌｋｉｎｅ／ＣＸ３ＣＲ１ｓｉｇｎａｌｉｎｇ

ｐａｔｈｗａｙｉｎａｒａｔｎｅｃｋｉｎｃｉｓｉｏｎｐａｉｎｍｏｄｅｌ［Ｊ］．ＰｕｒｉｎｅｒｇｉｃＳｉｇｎａｌ，

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ＴＲＰＶ１ｉｎｔｈｅｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａｏｆａｄｕｌｔｒａｔｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐａｔｈｏ

ｌｏｇｉｃａｌｐａｉｎｓ［Ｊ］．ＭｏｌＰａｉｎ，２０２１，１７：１－１４．

［４］　陆　帆，傅燕璐，高银平，等．Ｐ２Ｘ７受体参与疼痛调节机制的

Ｊ］．中国药理学通报，２０１９，３５（１２）：１６２９－３２．研究进展［

［４］　ＬｕＦ，ＦｕＹＬ，ＧａｏＹＰ，ｅｔａｌ．ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆＰ２Ｘ７ｒｅｃｅｐ

ｔｏｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐａｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌＢｕｌｌ，２０１９，

３５（１２）：１６２９－３２．

［５］　ＫｉｍＪＹ，ＭｅｇａｔＳ，ＭｏｙＪＫ，ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｌｉｇｉｎ２ｒｅｇｕｌａｔｅｓｓｐｉｎａｌ

ＧＡＢＡｅｒｇｉｃｐｌａｓｔｉｃｉｔｙｉｎｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ，ａｍｏｄｅｌｏｆｔｈｅｔｒａｎ

ｓｉｔｉｏｎｆｒｏｍａｃｕｔｅｔｏｃｈｒｏｎｉｃｐａｉｎ［Ｊ］．Ｐａｉｎ，２０１６，１５７（６）：１３１４

－２４．

［６］　ＷａｎｇＳ，ＤｕＪＹ，ＳｈａｏＦＢ，ｅｔａｌ．Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｒｅｇｕｌａｔｅｓ

ｐａｉｎｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅｍＧｌｕＲ５ＰＫＣｅｐｓｉｌｏｎｓｉｇｎａｌｉｎｇ

ｐａｔｈｗａｙｉｎｔｈｅｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａ［Ｊ］．ＪＰａｉｎＲｅｓ，２０２０，１３：１４７１

－８３．

［７］　ＩｎｙａｎｇＫＥ，ＢｕｒｔｏｎＭＤ，ＳｚａｂｏＰａｒｄｉＴ，ｅｔａｌ．ＩｎｄｉｒｅｃｔＡＭｐａｃ

ｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅａｃｔｉｖａｔｏｒｓｐｒｅｖｅｎｔｉｎｃｉｓｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｈｙｐｅｒａｌ

ｇｅｓｉａａｎｄｂｌｏｃｋｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ，ｗｈｅｒｅａｓｐｏｓｉｔｉｖｅａｌｌｏｓｔｅｒｉｃ

ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓｂｌｏｃｋｏｎｌｙｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＥｘｐＴ

ｈｅｒ，２０１９，３７１（１）：１３８－５０．

［８］　ＦｅｉＸＹ，ＨｅＸＦ，ＴａｉＺＸ，ｅｔａｌ．Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅａｌｌｅｖｉａｔｅｓ

ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎｉｎｒａｔｓｂｙｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇＰ２Ｘ３ｒｅｃｅｐｔｏｒｅｘ

［Ｊ］．ＰｕｒｉｎｅｒｇｉｃＳｉｇｎａｌ，２０２０，１６ｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａ

生可塑性变化，并维持启动状态（对炎症介质敏感

性增加），当足背注射ＰＧＥ诱发出长时间的疼

２

时，

痛，被认为是术后急性疼痛转化为术后慢性疼痛。

本研究结果证实，小鼠切口恢复后注射ＰＧＥ，２４ｈ

２

仍维持低水平的机械痛阈以及高水平的自发痛评

分，推测与小鼠切口术后伤害感受器对炎症介质的

敏感性增加有关。

　　临床上，慢性疼痛通常伴随焦虑、抑郁等情绪变

化，然而术后痛转化短期内是否会伴发焦虑情绪尚

无实验研究报道。有研究表明，切口痛大鼠会产生

焦虑样行为，随着疼痛的消失其焦虑样行为也随之

１１］

消失

［

。而本研究显示注射ＰＧＥ４ｈ小鼠未

２

后２

产生焦虑样行为，与单纯切口痛术后的焦虑表现不

１２］

一致。Ｇｕｉｄａ等

［

报道，ＳＮＩ造模后１４ｄ小鼠会产

１３］

生焦虑样行为。Ｇａｓｐａｒ等

［

报道了在注射１００

Ｌ

ＣＦＡ（结核分枝杆菌１００ｇ·Ｌ）２１ｄ后大鼠出现

焦虑样行为，等剂量ＣＦＡ（丁酸分枝杆菌）注射，Ｐａｒ

１４］

等

［

结果显示，大鼠出现焦虑样行为甚至需要ｅｎｔ

－１

２８ｄ。因此，推测是由于焦虑情绪大多在慢性痛的

中后期出现，而本研究在注射ＰＧＥ４ｈ检测，处

２

后２

于痛转化早期，故痛转化小鼠未产生焦虑样改变。

　　本研究主要聚焦不同层面嘌呤受体在术后痛转

化中的作用展开研究，结果显示术后痛转化小鼠

Ｐ２Ｘ３Ｒ蛋白表达在ＤＲＧ水平增加，足背注射

Ｐ２Ｘ３Ｒ拮抗剂明显提高小鼠机械痛阈，这与过往多

１５－１６］１５］

种痛转化模型研究结果相一致

［

。Ｊｏｒｇｅ等

［

报道，在角叉菜胶致敏的大鼠中，阻断Ｐ２Ｘ３Ｒ逆转

了ＰＧＥａｉｇｅ

２

诱导的急性肌痛向慢性肌痛的转化。Ｐ

１６］

等

［

的研究结果显示，在ＩＬ６介导的痛转化模型

ＩＬ６阶段抑制Ｐ２Ｘ３／４可阻断雄性小鼠痛转化中，

的产生。此外，本研究显示Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白表达在

ＤＲＧ和ＳＣＤＨ中均未变化，足背注射Ｐ２Ｘ７Ｒ拮抗剂

２］

无明显变化，这与Ｇａｏ等

［

的颈部切口疼痛研究结

果一致。其研究显示颈部切口术后４ｈＣ２－５ＳＣ

ＤＨ中Ｐ２Ｘ７Ｒ基因与蛋白表达水平无明显变化，而

术后２４ｈ后Ｐ２Ｘ７Ｒ蛋白表达增加，提示Ｐ２Ｘ７Ｒ介

导了早期的颈部切口疼痛。近年Ｎｅｖｅｓ等

［１７］

的研

究表明，阻断大鼠ＤＲＧ中Ｐ２Ｘ７Ｒ可降低ＣＦＡ、角叉

·１２８８·

（４）：４９１－５０２．

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０２３Ｊｕｌ；３９（７）

６１０．

［１４］ＰａｒｅｎｔＡＪ，ＢｅａｕｄｅｔＮ，ＢｅａｕｄｒｙＨ，ｅｔａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅ

ｂｅｈａｖｉｏｒｓｉｎｒａｔｓｅｘｐｅｒｉｅｎｃｉｎｇｃｈｒｏｎｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｐａｉｎ［Ｊ］．Ｂｅ

ｈａｖＢｒａｉｎＲｅｓ，２０１２，２２９（１）：１６０－７．

［１５］ＪｏｒｇｅＣＯ，ｄｅＡｚａｍｂｕｊａＧ，ＧｏｍｅｓＢＢ，ｅｔａｌ．Ｐ２Ｘ３ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ

ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｆｒｏｍａｃｕｔｅｔｏｃｈｒｏｎｉｃｍｕｓｃｌｅｐａｉｎ［Ｊ］．Ｐｕ

，２０２０，１６（３）：４０３－１４．ｒｉｎｅｒｇｉｃＳｉｇｎａｌ

［１６］ＰａｉｇｅＣ，ＭａｒｕｔｈｙＧＢ，ＭｅｊｉａＧ，ｅｔａｌ．ＳｐｉｎａｌｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＰ２ＸＲ

，ｂｕｔｎｏｔｆｅｏｒｐ３８ｓｉｇｎａｌｉｎｇｄｉｓｒｕｐｔｓｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍａｌｅ

ｍａｌｅ，ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２０１８，１０（３８５）：１３３－４２．

［１７］ＮｅｖｅｓＡＦ，ＦａｒｉａｓＦＨ，ｄｅＭａｇａｌｈａｅｓＳＦ，ｅｔａｌ．Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｉｎ

ｆｌａｍｍａｔｏｒｙｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉａｄｅｐｅｎｄｓｏｎＰ２Ｘ７ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎｓａｔｅｌｌｉｔｅｇｌｉ

ａｌｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＰｈｙｓｉｏｌ，２０２０，２５（１１）：４７３．

［１８］ＫａｎｅｌｌｏｐｏｕｌｏｓＪＭ，ＡｌｍｅｉｄａｄａＳｉｌｖａＣＬＣ，ＲｕｕｔｅｌＢｏｕｄｉｎｏｔＳ，

ｅｔａｌ．ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｔｈｅＰ２Ｘ４ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ａｎ

［Ｊ］．ＦｒｏｎｔＩｍｍｕｎｏｌ，２０２１，２５（１２）：ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ

６４５８３４．

［９］　ＭｉｙａｋａｗａＴ，ＴｅｒａｓｈｉｍａＹ，ＴａｋｅｂａｙａｓｈｉＴ，ｅｔａｌ．Ｔｒａｎｓｉｅｎｔｒｅ

ｃｅｐｔｏｒｐｏｔｅｎｔｉａｌａｎｋｙｒｉｎ１ｉｎｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎ

ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎｉｎｎｅｒｖｅｒｏｏｔｃｏｎｓｔｒｉｃｔｉｏｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＭｏｌＰａｉｎ，

２０１４，１０（５８）：２－１１．

［１０］ＳｕｎＹ，ＳａｈｂａｉｅＰ，ＬｉａｎｇＤＹ，ｅｔａｌ．Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｐｉ

［Ｊ］．ｎａｌＣＸＣＲ２ｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｉｎｃｉｓｉｏｎａｌｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎｍｉｃｅ

Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，２０１３，１１９（５）：１１９８－２０８．

［１１］ＫｏｕｙａＦ，ＩｑｂａｌＺ，ＣｈａｒｅｎＤ，ｅｔａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅｂｅ

ｈａｖｉｏｕｒｉｎａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆａｃｕｔｅｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｐａｉｎ［Ｊ］．ＥｕｒＪＡｎ

ａｅｓｔｈｅｓｉｏｌ，２０１５，３２（４）：２４２－７．

［１２］ＧｕｉｄａＦ，ＤｅＧｒｅｇｏｒｉｏＤ，ＰａｌａｚｚｏＥ，ｅｔａｌ．Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ，ｂｉｏｃｈｅｍｉ

ｃａｌａｎｄｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｉｎｓｐａｒｅｄｎｅｒｖｅｉｎｊｕｒｙｍｏｄｅｌ

ｏｆｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃｐａｉｎ［Ｊ］．ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉ，２０２０，２１（９）：３３９６．

［１３］ＧａｓｐａｒＪＣ，ＨｅａｌｙＣ，ＦｅｒｄｏｕｓｉＭＩ，ｅｔａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｂｌｏｃｋ

ａｄｅｏｆＰＰＡＲａｌｐｈａｅｘａｃｅｒｂａｔｅｓｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｐａｉｎｒｅｌａｔｅｄｉｍｐａｉｒ

［Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅｓ，２０２１，９（６）：ｍｅｎｔｏｆｓｐａｔｉａｌｍｅｍｏｒｙｉｎｒａｔｓ

ＤｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉｏｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｔｙｐｅＰ２Ｘ３Ｒｍｅｄｉａｔｅｓ

ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍｉｃｅ

１１１１１１１

２１１１，２１，２

ＺＨＯＵＪｉｅ，ＤＵＪｕｎｙｉｎｇ，ＸＵＣｈｉ，ＦＡＮＧＪｉａｎｑｉａｏ，ＬＩＡＮＧＹｉ

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｉｍ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅ

ｒｏｌｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｔｙｐｅｓａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔ

ｓｉｔｅｓｉｎｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｉｎｍｉｃｅ．

Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇｍｏｄｅｌ

ｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｂｙｉｎｊｅｃｔｉｎｇＰＧＥｆｔｅｒｐｌａｎｔａｒｉｎｃｉｓｉｏｎ

２

ａ

ｒｅｃｏｖｅｒｙ．ＰａｒｔＩ：Ｃ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄ

ｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌ（Ｃｏｎ），ｓｈａｍｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ（ｓＨＰ）

ａｎｄｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ（ＨＰ）ｇｒｏｕｐｓｔｏｄｅｔｅｃｔｍｅ

ｃｈａｎｉｃａｌｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓ，ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｐａｉｎｓｃｏｒｅｓａｎｄ

ａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅｂｅｈａｖｉｏｕｒｓ；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏ

ｄｅｔｅｃｔｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎＰ２Ｘ３ＲａｎｄＰ２Ｘ７Ｒｐｒｏｔｅｉｎｅｘ

ｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅａｆｆｅｃｔｅｄＬ３－５ｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉｏｎ

（ＤＲＧ）ａｎｄｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎ（ＳＣＤＨ）．ＰａｒｔＩＩ：

Ｃ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏＣｏｎｇｒｏｕｐ，

ＨＰ＋ｓａｌｉｎｅｇｒｏｕｐ，ＨＰ＋Ｐ２Ｘ３Ｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｇｒｏｕｐｏｒ

ＨＰ＋Ｐ２Ｘ７Ｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｇｒｏｕｐｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆ

ａｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｕｂｔｙｐｅｓｏｆｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｓ

ｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｏｎｍｅｃｈａｎｉｃａｌｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄｉｎｍｉｃｅ．Ｒ

ｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｍｉｃｅ，ｉｎｃｉｓｉｏｎｐａｉｎｍｉｃｅｉｎｊｅｃｔｅｄ

ｈｏｗｅｄａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｉｎｍｅｃｈａｎｉｃａｌｗｉｔｈＰＧＥ

２

ｓ

ｐａｉｎｔｈｒｅｓｈｏｌｄａｎｄａｍａｒｋｅｄｉｎｃｒｅａｓｅｉｎｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ

ｐａｉｎｓｃｏｒｅ（Ｐ＜００５），ａｎｄｄｉｄｎｏｔｓｈｏｗａｎｘｉｅｔｙｌｉｋｅ

ｂｅｈａｖｉｏｕｒ（Ｐ＞００５）．ＡｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇＰ２Ｘ３Ｒｂｌｏｃｋｅｄ

ｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ，

ｗｈｉｌｅａｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇＰ２Ｘ７Ｒｈａｄｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔ．

Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｐ２Ｘ３ＲｉｎＤＲＧｍａｙｂｅｏｎｅｏｆｔｈｅｋｅｙ

ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍ

ｉｎｇ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅｈｙｐｅｒａｌｇｅｓｉｃｐｒｉｍｉｎｇ；ｄｏｒ

ｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉａ；ｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｄｏｒｓａｌｈｏｒｎ；ｐｕｒｉｎｏｃｅｐ

ｔｏｒｓ；Ｐ２Ｘ３Ｒ；Ｐ２Ｘ７Ｒ

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背根神经节嘌呤受体亚型P2X3R介导小鼠术后急—慢痛转化

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