2024年5月22日发(作者:让艾)
各公司哺乳细胞表达载体比较
Invitrogen公司
pcDNA=CMV; pEF=EF-1a; pUb=Ub;-TOPO=TOPO克隆,/Gateway;-His/V5/myc tagged;抗性Neo/Zeo/Hyg/Bsd
载体名称
pcDNA5/FRT/V5
-His-TOPO
pEF5/FRT/V5-D
ST
pEF5/FRT/V5-D-
TOPO
pSecTag/FRT/V5
-His-TOPO
pcDNA5/FRT
分子增强内含
启动子
量 子 子
5.2 CMV
7.5 EF-1a
V5
5.8
5.2
CMV
/ / /
V5,6*Igk信号,分泌表达
His 融合蛋白
RNA
聚合酶
N端
Tag
C端
Tag
V5,6*
His
特殊序列
中止poly抗性检测表达方
复制起始 克隆 纯化
序列 A 筛选 方法 式
TOPO Ni
稳定
Bsd
Neo
Bsd
备注
有
BGH pUC
Gatewa
抗V5
y
抗体
Hyg
检测
TOPO
Ni
酶切
Neo
形成相同基因的
细胞;必须和Fip
重组表达载体
pOG44共转染Fip
细胞
pcDNA3.2/V5-G
W/D-TOPO
pcDNA6.2/V5-G
W/D-TOPO
pcDNA3.2-DEST
CMV / / T7 V5 attB1,attB2 / TK pUC
CMV /
pcDNA6.2-DEST
/ T7 V5
attR1,attR2;ccdB;C
/
mR
f1,pUC,SV
TK
40
瞬时/
稳定
1 / 7
各公司哺乳细胞表达载体比较
pcDNA3.1/nV5-
DEST
pcDNA3.2-DEST
40
pDEST26
pDEST27
7.1 V5
attR1,attR2;ccdB;C
mR;TEV用于切割
V5抗原
BGH
pUC
SV4f1,pUC,SV
0 40
Neo
7.1
7.6
8.1
V5,6*
His
attR1,attR2;ccdB;C
6*His
mR
GST
Ni
Ni
GST
无需酶切,连接即
可完成基因克隆
pcDNA3.1-E, pcDNA4/HisMAX-E 载体在原来基础上增加了 -E
pcDNA4/HisMa
x
pcDNA4/HisMa
x-TOPO
pcDNA3.1[+/-]
pcDNA3.1/Zeo[+
/-]
pcDNA3.1/Hyg[+
/-]
Echo
f1,pUC,SV
BGH Zeo
40
5.3
CMV
5.3
5.4
SP16
/
3
T7
6*His,
Xpress
EK /
Xpres
Ni
s
瞬时/
有多种ORF
稳定
TOPO
5 CM
CMV /
V
5.6
T7 /
/
/
Neo
f1,pUC,SV
BGH
40
Zeo
Hyg
瞬时/
无tag的载体
稳定
pcDNA3.1,4,6/Hi5.5-5
s A,B,C .0
CM
CMV /
V
pcDNA3.1,4,6/V5.5-5
5-His A,B,C .0
T7
6*His,
Xpress
EK /
V5,6*
有
His
3.1=
f1,pUC,SVNeo,
BGH
40 4=Ze
o,6=
共22个载体,分
瞬时/
别具有不同启动
稳定
子、抗性、抗原tag
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2024年5月22日发(作者:让艾)
各公司哺乳细胞表达载体比较
Invitrogen公司
pcDNA=CMV; pEF=EF-1a; pUb=Ub;-TOPO=TOPO克隆,/Gateway;-His/V5/myc tagged;抗性Neo/Zeo/Hyg/Bsd
载体名称
pcDNA5/FRT/V5
-His-TOPO
pEF5/FRT/V5-D
ST
pEF5/FRT/V5-D-
TOPO
pSecTag/FRT/V5
-His-TOPO
pcDNA5/FRT
分子增强内含
启动子
量 子 子
5.2 CMV
7.5 EF-1a
V5
5.8
5.2
CMV
/ / /
V5,6*Igk信号,分泌表达
His 融合蛋白
RNA
聚合酶
N端
Tag
C端
Tag
V5,6*
His
特殊序列
中止poly抗性检测表达方
复制起始 克隆 纯化
序列 A 筛选 方法 式
TOPO Ni
稳定
Bsd
Neo
Bsd
备注
有
BGH pUC
Gatewa
抗V5
y
抗体
Hyg
检测
TOPO
Ni
酶切
Neo
形成相同基因的
细胞;必须和Fip
重组表达载体
pOG44共转染Fip
细胞
pcDNA3.2/V5-G
W/D-TOPO
pcDNA6.2/V5-G
W/D-TOPO
pcDNA3.2-DEST
CMV / / T7 V5 attB1,attB2 / TK pUC
CMV /
pcDNA6.2-DEST
/ T7 V5
attR1,attR2;ccdB;C
/
mR
f1,pUC,SV
TK
40
瞬时/
稳定
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各公司哺乳细胞表达载体比较
pcDNA3.1/nV5-
DEST
pcDNA3.2-DEST
40
pDEST26
pDEST27
7.1 V5
attR1,attR2;ccdB;C
mR;TEV用于切割
V5抗原
BGH
pUC
SV4f1,pUC,SV
0 40
Neo
7.1
7.6
8.1
V5,6*
His
attR1,attR2;ccdB;C
6*His
mR
GST
Ni
Ni
GST
无需酶切,连接即
可完成基因克隆
pcDNA3.1-E, pcDNA4/HisMAX-E 载体在原来基础上增加了 -E
pcDNA4/HisMa
x
pcDNA4/HisMa
x-TOPO
pcDNA3.1[+/-]
pcDNA3.1/Zeo[+
/-]
pcDNA3.1/Hyg[+
/-]
Echo
f1,pUC,SV
BGH Zeo
40
5.3
CMV
5.3
5.4
SP16
/
3
T7
6*His,
Xpress
EK /
Xpres
Ni
s
瞬时/
有多种ORF
稳定
TOPO
5 CM
CMV /
V
5.6
T7 /
/
/
Neo
f1,pUC,SV
BGH
40
Zeo
Hyg
瞬时/
无tag的载体
稳定
pcDNA3.1,4,6/Hi5.5-5
s A,B,C .0
CM
CMV /
V
pcDNA3.1,4,6/V5.5-5
5-His A,B,C .0
T7
6*His,
Xpress
EK /
V5,6*
有
His
3.1=
f1,pUC,SVNeo,
BGH
40 4=Ze
o,6=
共22个载体,分
瞬时/
别具有不同启动
稳定
子、抗性、抗原tag
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