2024年5月25日发(作者：公羊茜茜)

胃癌细胞HGC-27与SGC-7901体外增殖和黏附能力的比较

王婷婷;王玉巧;马佰菁;韩梅;林佳静;孙伯坚

【摘 要】目的 比较两株胃癌细胞HGC-27与SGC-7901的体外增殖和黏附能力.

方法 分别培养胃癌细胞HGC-27、SGC-7901,用噻唑蓝(MTT)比色实验和流式细

胞术(FCM)比较两种细胞的体外增殖能力;用同质黏附和异质黏附实验比较两种细

胞的体外黏附能力.结果 MTT比色实验绘制,生长曲线显示SGC-7901生长较

HCC-27慢;流式细胞术结果表明SGC-7901的增殖活性低于HGC-27(P<0.05);黏

附实验中SGC-7901同质黏附强于HGC-27,异质黏附弱于HGC-27(P<0.05).结论

胃癌细胞SGC-7901的体外增殖能力和异质黏附能力低于HGC-27,同质黏附能力

高于HGC-27,提示胃癌细胞HGC-27的转移能力可能强于SGC-7901.

【期刊名称】《宁夏医科大学学报》

【年(卷),期】2010(032)002

【总页数】3页(P169-171)

【关键词】胃癌细胞;HGC-27;SGC-7901;增殖;黏附

【作 者】王婷婷;王玉巧;马佰菁;韩梅;林佳静;孙伯坚

【作者单位】宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银川,750004;宁夏

医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银川,750004;宁夏医科大学基础医学

院病原生物学与免疫学系,银川,750004;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免

疫学系,银川,750004;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银

川,750004;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银川,750004

【正文语种】中 文

【中图分类】R73-37

胃癌是消化道高发的恶性肿瘤，发病率和死亡率均位于恶性肿瘤的前列[1]。虽然

临床上对胃癌可采取手术、放疗、化疗等综合治疗措施，但很多患者仍死于肿瘤的

侵袭及转移。侵袭性与转移能力是癌细胞区别于正常细胞的最基本的特征，也是导

致患者肿瘤复发、病情恶化而最终死亡的病理基础，因此侵袭转移是影响胃癌预后

的最重要的因素[2-3]。胃癌的转移机制尚不清楚，可能与缺氧、微环境变化等多

种因素有关[4-6]。本文选取两株胃癌细胞比较其体外生长和黏附特性，为下一步

研究胃癌的转移机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料 胃癌细胞HGC-27、SGC-7901均购自中科院上海细胞库。

RPMI-1640培养基购自GIBICO公司,标准胎牛血清购自杭州四季青公司,胰蛋白酶

购自Amresco公司，96孔板及24孔培养板均购自COSTAR公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 SGC-7901培养于含 10% 胎牛血清、50μL·100 mL-1青霉素、

125μL·100 mL-1庆大霉素的RPMI-1640培养液中; HGC-27 培养于含 10% 胎

牛血清、50μL·100 mL-1青霉素、125μL·100 mL-1庆大霉素的MEM培养液中,

细胞均置于37℃,5% CO2 的孵箱中生长。

1.2.2 MTT比色法检测两种细胞的体外增殖能力 两株细胞生长于对数生长期后，

分别用0.25%胰酶消化后制成单细胞悬液，以1.0×103个·孔-1接种于96孔板中，

200μL·孔-1，设4个复孔，37℃,5% CO2 培养。分别培养1、2、3、4、5、6d

和7d计数细胞。结束培养前4h，每孔加入MTT，孵育4h后终止培养，弃去上

清液，每孔加入150μL DMSO，充分震荡混匀10min。在490nm波长的酶联免

疫检测仪上测定各孔吸光度值，以时间为横轴，吸光度值(OD)为纵轴，绘制细胞

生长曲线。

1.2.3 流式细胞术检测两种细胞的DNA倍体和细胞周期 对数生长期细胞，分别用

0.25%胰酶消化，调整细胞密度为1×106个·mL-1。以正常人外周血单个核细胞

做对照，用流式细胞仪在488nm激发光检测DNA含量，MCYCLE软件分析细胞

周期，以S期细胞所占百分比(SPF)表示细胞的增殖活性:

1.2.4 同质黏附实验 细胞以12.5×104个·mL-1接种于24孔培养板中，1mL·孔-1，

每株细胞设3个复孔，待生长至铺满孔底不留空隙，再在其上加入1.0×105

个·mL-1的相应细胞，200μL·孔-1，分别于培养60min和90min后，吸上清，

并以生理盐水洗涤未充分黏附的细胞，计数上清和洗涤液中的细胞数，即未黏附的

细胞。黏附细胞百分比(%)=(细胞总数-未黏附的细胞)/细胞总数×100%。

1.2.5 异质黏附实验 以1.0×105个·mL-1接种于24孔培养板中，200μL·孔-1，

每株细胞设3个复孔，培养3h后，吸上清，并以生理盐水洗涤未充分黏附的细胞，

计数上清和洗涤液中的细胞数，即未黏附的细胞。黏附的细胞百分比(%)=(细胞总

数-未黏附的细胞)/细胞总数×100%。

1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0软件进行统计分析，数据以均数±标准差表示，计

量资料两两比较采用两样本对数t检验，检验水平为0.05。

2 结果

2.1 MTT比色法检测两株细胞的体外增殖能力 用两株细胞连续培养7d的吸光度

值绘制生长曲线(图1)。结果显示，SGC-7901的增殖速度较HGC-27慢，二者差

异有统计学意义。

图1 MTT比色法绘制两株胃癌细胞的生长曲线

2.2 流式细胞术检测细胞DNA倍体和细胞周期 经流式细胞术检测，两株均为异倍

体细胞(图2)。SGC-7901的SPF低于HGC-27，且G0/G1比例高于HGC-

27,P<0.05。见表1。

图2 流式细胞术检测两株胃癌细胞周期

表1 流式细胞术测定两株胃癌细胞的周期分布细胞种类G0/G1G2/MSPFHGC-

2759.0±2.19.5±1.031.5±1.7SGC-790171.3±3.7∗5.2±2.2∗23.5±1.8∗

与胃癌细胞HGC-27株比较*P<0.05

2.3 两株胃癌细胞的同质黏附能力及异质黏附能力比较

两株胃癌细胞在同质黏附介质上分别生长60和90min时，SGC-7901比HGC-

27黏附细胞数高，差异有统计学意义(P<0.05)。两株胃癌细胞在24孔板上生长

3h后，SGC-7901比HGC-27的异质黏附能力弱(P<0.05)。HGC-27和SGC-

7901的黏附细胞数见表2。

表2 两株胃癌细胞黏附能力的比较细胞种类同质黏附实验细胞数/×103个

60min90min异质黏附实验细胞数/×103个HGC-

276.97±0.077.71±0.198.98±0.15SGC-

79017.67±0.12∗8.05±0.05∗8.32±0.09∗

与胃癌细胞HGC-27株比较*P<0.05

3 讨论

肿瘤的恶性程度与其细胞的生物学特性密切相关[7]，恶性程度越高的肿瘤细胞体

外生长增殖和迁徙转移能力越强；反之，恶性程度低的肿瘤细胞的体外生长增殖和

迁徙转移能力越弱。机体肿瘤转移的过程中，肿瘤细胞需脱落并侵入基质，这时同

质黏附能力下降，运动能力增加；肿瘤细胞到达特定的继发组织或器官时，通过异

质黏附作用锚定在血管和周围组织，最终形成转移。

本实验采用了两株胃癌细胞：HGC-27来源于未分化胃黏液腺癌，SGC-7901来

源于淋巴结转移的胃腺癌[8]。在MTT比色法检测两种细胞的体外增殖能力的实验

中，在连续培养的7d内，两株细胞的数量均逐渐增多，但从第2天开始，HGC-

27的增殖速度快于SGC-7901。用流式细胞术检测两株细胞的DNA倍体和细胞

周期以比较增殖活性的高低，结果表明两株均为异倍体细胞；SGC-7901的SPF

低于HGC-27，且G0/G1比例高于HGC-27，表明SGC-7901的增殖活性低于

HGC-27。在同质黏附实验中，不论生长60min还是90min，SGC-7901的同质

黏附力高于HGC-27，由于同质黏附能力高低在一定程度上反映了肿瘤细胞脱离

肿瘤能力的强弱，故HGC-27比SGC-7901更易从肿瘤细胞团中脱离，从而发生

转移。在异质黏附实验中，SGC-7901的异质黏附力低于HGC-27，由于异质黏

附能力高低在一定程度上反映了癌症细胞与其他组织、细胞黏附能力的强弱，因此

SGC-7901比HGC-27更不易与其他组织、细胞黏附，可能不易发生转移。

本实验从增殖和黏附能力检测了SGC-7901和HGC-27的差异，显示胃癌细胞

SGC-7901的体外增殖能力和异质黏附能力低于HGC-27，同质黏附能力高于

HGC-27,为下一步研究影响胃癌细胞转移的相关分子机制打下基础。

【相关文献】

[1] Ohgaki H,Matsukura N. Stomach cancer world cancer report[M]. Lyon: IARC

Press,2003:197.

[2] 齐菲菲,贺福初,姜颖. 肿瘤转移研究的现状与趋势[J]. 生物化学与生物物理进

展,2009,36(10):1244-1251.

[3] Zeng ZR,Hu PJ,Hu S,et al. Association of interleukin 1B gene polymorphism and gastric

cancers in high and low prevalence regions in China [J].Gut,2003,52(12):1684-1689.

[4] Cecilia Sahlgren,Maria V,Gustafsson,Shaobo Jin,et al. Notch signaling mediates

hypoxia-induced tumor cell migration and invasion[J]. PNAS,2008,105(17):692-697.

[5] Shipitsin M,Polyak K. The cancer stem cell hypothesis: in search of

definitions,markers,and relevance[J]. Lab Invest,2008,88(5): 459-463.

[6] 张磊,王效民. 基质细胞与肿瘤发生发展之间的关系[J]. 中国癌症杂志,2009,19(10): 788-792.

[7] Song IH. Cancer metastasis and metastasis suppressors[J]. Korean J

Gastroenterol,2004,43:1-7.

[8] 林超鸿,富志民,刘亚伦,等. 人体胃癌细胞株SGC-7901的建立[J].肿瘤,1981,2(1) :1-3.

2024年5月25日发(作者：公羊茜茜)

胃癌细胞HGC-27与SGC-7901体外增殖和黏附能力的比较

王婷婷;王玉巧;马佰菁;韩梅;林佳静;孙伯坚

【摘 要】目的 比较两株胃癌细胞HGC-27与SGC-7901的体外增殖和黏附能力.

方法 分别培养胃癌细胞HGC-27、SGC-7901,用噻唑蓝(MTT)比色实验和流式细

胞术(FCM)比较两种细胞的体外增殖能力;用同质黏附和异质黏附实验比较两种细

胞的体外黏附能力.结果 MTT比色实验绘制,生长曲线显示SGC-7901生长较

HCC-27慢;流式细胞术结果表明SGC-7901的增殖活性低于HGC-27(P<0.05);黏

附实验中SGC-7901同质黏附强于HGC-27,异质黏附弱于HGC-27(P<0.05).结论

胃癌细胞SGC-7901的体外增殖能力和异质黏附能力低于HGC-27,同质黏附能力

高于HGC-27,提示胃癌细胞HGC-27的转移能力可能强于SGC-7901.

【期刊名称】《宁夏医科大学学报》

【年(卷),期】2010(032)002

【总页数】3页(P169-171)

【关键词】胃癌细胞;HGC-27;SGC-7901;增殖;黏附

【作 者】王婷婷;王玉巧;马佰菁;韩梅;林佳静;孙伯坚

【作者单位】宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银川,750004;宁夏

医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银川,750004;宁夏医科大学基础医学

院病原生物学与免疫学系,银川,750004;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免

疫学系,银川,750004;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银

川,750004;宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,银川,750004

【正文语种】中 文

【中图分类】R73-37

胃癌是消化道高发的恶性肿瘤，发病率和死亡率均位于恶性肿瘤的前列[1]。虽然

临床上对胃癌可采取手术、放疗、化疗等综合治疗措施，但很多患者仍死于肿瘤的

侵袭及转移。侵袭性与转移能力是癌细胞区别于正常细胞的最基本的特征，也是导

致患者肿瘤复发、病情恶化而最终死亡的病理基础，因此侵袭转移是影响胃癌预后

的最重要的因素[2-3]。胃癌的转移机制尚不清楚，可能与缺氧、微环境变化等多

种因素有关[4-6]。本文选取两株胃癌细胞比较其体外生长和黏附特性，为下一步

研究胃癌的转移机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料 胃癌细胞HGC-27、SGC-7901均购自中科院上海细胞库。

RPMI-1640培养基购自GIBICO公司,标准胎牛血清购自杭州四季青公司,胰蛋白酶

购自Amresco公司，96孔板及24孔培养板均购自COSTAR公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 SGC-7901培养于含 10% 胎牛血清、50μL·100 mL-1青霉素、

125μL·100 mL-1庆大霉素的RPMI-1640培养液中; HGC-27 培养于含 10% 胎

牛血清、50μL·100 mL-1青霉素、125μL·100 mL-1庆大霉素的MEM培养液中,

细胞均置于37℃,5% CO2 的孵箱中生长。

1.2.2 MTT比色法检测两种细胞的体外增殖能力 两株细胞生长于对数生长期后，

分别用0.25%胰酶消化后制成单细胞悬液，以1.0×103个·孔-1接种于96孔板中，

200μL·孔-1，设4个复孔，37℃,5% CO2 培养。分别培养1、2、3、4、5、6d

和7d计数细胞。结束培养前4h，每孔加入MTT，孵育4h后终止培养，弃去上

清液，每孔加入150μL DMSO，充分震荡混匀10min。在490nm波长的酶联免

疫检测仪上测定各孔吸光度值，以时间为横轴，吸光度值(OD)为纵轴，绘制细胞

生长曲线。

1.2.3 流式细胞术检测两种细胞的DNA倍体和细胞周期 对数生长期细胞，分别用

0.25%胰酶消化，调整细胞密度为1×106个·mL-1。以正常人外周血单个核细胞

做对照，用流式细胞仪在488nm激发光检测DNA含量，MCYCLE软件分析细胞

周期，以S期细胞所占百分比(SPF)表示细胞的增殖活性:

1.2.4 同质黏附实验 细胞以12.5×104个·mL-1接种于24孔培养板中，1mL·孔-1，

每株细胞设3个复孔，待生长至铺满孔底不留空隙，再在其上加入1.0×105

个·mL-1的相应细胞，200μL·孔-1，分别于培养60min和90min后，吸上清，

并以生理盐水洗涤未充分黏附的细胞，计数上清和洗涤液中的细胞数，即未黏附的

细胞。黏附细胞百分比(%)=(细胞总数-未黏附的细胞)/细胞总数×100%。

1.2.5 异质黏附实验 以1.0×105个·mL-1接种于24孔培养板中，200μL·孔-1，

每株细胞设3个复孔，培养3h后，吸上清，并以生理盐水洗涤未充分黏附的细胞，

计数上清和洗涤液中的细胞数，即未黏附的细胞。黏附的细胞百分比(%)=(细胞总

数-未黏附的细胞)/细胞总数×100%。

1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0软件进行统计分析，数据以均数±标准差表示，计

量资料两两比较采用两样本对数t检验，检验水平为0.05。

2 结果

2.1 MTT比色法检测两株细胞的体外增殖能力 用两株细胞连续培养7d的吸光度

值绘制生长曲线(图1)。结果显示，SGC-7901的增殖速度较HGC-27慢，二者差

异有统计学意义。

图1 MTT比色法绘制两株胃癌细胞的生长曲线

2.2 流式细胞术检测细胞DNA倍体和细胞周期 经流式细胞术检测，两株均为异倍

体细胞(图2)。SGC-7901的SPF低于HGC-27，且G0/G1比例高于HGC-

27,P<0.05。见表1。

图2 流式细胞术检测两株胃癌细胞周期

表1 流式细胞术测定两株胃癌细胞的周期分布细胞种类G0/G1G2/MSPFHGC-

2759.0±2.19.5±1.031.5±1.7SGC-790171.3±3.7∗5.2±2.2∗23.5±1.8∗

与胃癌细胞HGC-27株比较*P<0.05

2.3 两株胃癌细胞的同质黏附能力及异质黏附能力比较

两株胃癌细胞在同质黏附介质上分别生长60和90min时，SGC-7901比HGC-

27黏附细胞数高，差异有统计学意义(P<0.05)。两株胃癌细胞在24孔板上生长

3h后，SGC-7901比HGC-27的异质黏附能力弱(P<0.05)。HGC-27和SGC-

7901的黏附细胞数见表2。

表2 两株胃癌细胞黏附能力的比较细胞种类同质黏附实验细胞数/×103个

60min90min异质黏附实验细胞数/×103个HGC-

276.97±0.077.71±0.198.98±0.15SGC-

79017.67±0.12∗8.05±0.05∗8.32±0.09∗

与胃癌细胞HGC-27株比较*P<0.05

3 讨论

肿瘤的恶性程度与其细胞的生物学特性密切相关[7]，恶性程度越高的肿瘤细胞体

外生长增殖和迁徙转移能力越强；反之，恶性程度低的肿瘤细胞的体外生长增殖和

迁徙转移能力越弱。机体肿瘤转移的过程中，肿瘤细胞需脱落并侵入基质，这时同

质黏附能力下降，运动能力增加；肿瘤细胞到达特定的继发组织或器官时，通过异

质黏附作用锚定在血管和周围组织，最终形成转移。

本实验采用了两株胃癌细胞：HGC-27来源于未分化胃黏液腺癌，SGC-7901来

源于淋巴结转移的胃腺癌[8]。在MTT比色法检测两种细胞的体外增殖能力的实验

中，在连续培养的7d内，两株细胞的数量均逐渐增多，但从第2天开始，HGC-

27的增殖速度快于SGC-7901。用流式细胞术检测两株细胞的DNA倍体和细胞

周期以比较增殖活性的高低，结果表明两株均为异倍体细胞；SGC-7901的SPF

低于HGC-27，且G0/G1比例高于HGC-27，表明SGC-7901的增殖活性低于

HGC-27。在同质黏附实验中，不论生长60min还是90min，SGC-7901的同质

黏附力高于HGC-27，由于同质黏附能力高低在一定程度上反映了肿瘤细胞脱离

肿瘤能力的强弱，故HGC-27比SGC-7901更易从肿瘤细胞团中脱离，从而发生

转移。在异质黏附实验中，SGC-7901的异质黏附力低于HGC-27，由于异质黏

附能力高低在一定程度上反映了癌症细胞与其他组织、细胞黏附能力的强弱，因此

SGC-7901比HGC-27更不易与其他组织、细胞黏附，可能不易发生转移。

本实验从增殖和黏附能力检测了SGC-7901和HGC-27的差异，显示胃癌细胞

SGC-7901的体外增殖能力和异质黏附能力低于HGC-27，同质黏附能力高于

HGC-27,为下一步研究影响胃癌细胞转移的相关分子机制打下基础。

【相关文献】

[1] Ohgaki H,Matsukura N. Stomach cancer world cancer report[M]. Lyon: IARC

Press,2003:197.

[2] 齐菲菲,贺福初,姜颖. 肿瘤转移研究的现状与趋势[J]. 生物化学与生物物理进

展,2009,36(10):1244-1251.

[3] Zeng ZR,Hu PJ,Hu S,et al. Association of interleukin 1B gene polymorphism and gastric

cancers in high and low prevalence regions in China [J].Gut,2003,52(12):1684-1689.

[4] Cecilia Sahlgren,Maria V,Gustafsson,Shaobo Jin,et al. Notch signaling mediates

hypoxia-induced tumor cell migration and invasion[J]. PNAS,2008,105(17):692-697.

[5] Shipitsin M,Polyak K. The cancer stem cell hypothesis: in search of

definitions,markers,and relevance[J]. Lab Invest,2008,88(5): 459-463.

[6] 张磊,王效民. 基质细胞与肿瘤发生发展之间的关系[J]. 中国癌症杂志,2009,19(10): 788-792.

[7] Song IH. Cancer metastasis and metastasis suppressors[J]. Korean J

Gastroenterol,2004,43:1-7.

[8] 林超鸿,富志民,刘亚伦,等. 人体胃癌细胞株SGC-7901的建立[J].肿瘤,1981,2(1) :1-3.