2024年5月30日发(作者：镜若薇)

２０１０１２０１，以上药物均在南京市药品检验所进行质量检验，鉴定为合格中药饮片。柳氮磺胺吡啶片

（维柳芬）：上海三维制药有限公司，生产批号：２００９０９０２；Ｓｕｌｆａｓａｌａｚｉｎｅ：Ｓｉｇｍａ公司。

１．１．３实验试剂

５％ＴＮＢＳ溶液、ＭｃＣｏｙ’ｓ５ａ培养基、ＬＰＳ：均购Ｉ刍Ｓｉｇｍａ公司：胎牛血清（杭州四季青公司）；

ｈＴＮＦ吨（Ｐｅｐｍ

Ｔｅｃｈ公司）；兔抗ｏｃｃｌｕｄｉｎ、ｃｌａｕｄｉｎ－１多克隆抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司）；兔抗ＮＦ．ｖ，Ｂ单

克隆抗体（Ｃｅｌｌ

Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ

Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司）；兔抗ＴＬＲ４多克隆抗体（Ｓａｎｔａｃｒｕｚ公司）：鼠抗ｐ．ａｃｆｉｎ

抗体（北京四正柏公司）；Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ（ＴＲＩＴＣ）标记的二抗（Ｐｒｏｔｅｉｎ

ｔｅｃｈ公司）；辣根过氧化物酶

（｝玎廿）标记的二抗（南京晶美生物工程有限公司）：ＢＣＡ．１００蛋白质定量测定试剂盒（Ｔｈｅｒｍｏ

公司）：预先染色的蛋白分子量标准品（Ｍａｒｋｅｒ，Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ

ｌｉｆｅ

Ｓｃｉｅｃｅ公司）；化学发光法显色试剂

（ＴｈｅｒｍＯ公司）；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌｄ、室（Ｃｏｍｉｎｇ公司）

１．１．４主要仪器

ＺＦＭＱ０５０ＰＥ型超纯水器（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）；低温超速离心机（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ司）：Ｓｐｅｃｔｒａ

Ｍａｘｌ９０

酶标仪（美国ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ公司）；旋转蒸发仪（ＥＹＥＬＡ公司）：ＣＣＡ．２０低温冷却水循环泵

（巩义市予华仪器有限公司）；ＤＺＦ．６２１０真空干燥箱（上海齐欣科学仪器有限公司）；倒置显微

镜、荧光显微镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ）：电热恒温鼓风干燥箱（上海博泰实验仪器有限公司）；垂直电泳仪、

转膜仪（Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司）．

１．２方法

１．２．１体外实验

１．２．１．１中药清膏制备

按成人用量，称取上述清肠化湿方ｌ付，共８７９，单味药物地榆４５９，分别投入提取罐中，浸泡，

煎煮２次，合并药液，予旋转蒸发仪中蒸发，减压浓缩，真空干燥箱中干燥成药物细粉。称取清肠

化湿方清膏２６．４３９，即浸青量３０．４％．地榆清青１３９，即浸青量２８．９％．

１．２．１．２实验分组

实验分为７组：空白对照组：加入含２％ＦＢＳ的ＭｃＣｏｙ’Ｓ

５ａ培养基孵育２４ｄ，时：模型对照组：予

ｈＴＮＦ－ａ（２０ｎｇ／ｍ１）孵育１２ｄ＇时后，再予ＬＰＳ（１ｕｇ／ｍ１）（１】孵育１５ｄ，时；实验组：上述药物干预的基

础上，分别加入ＳＡＳＰ（２ｒａＭ）［２１、清肠化湿方低剂量（１００ｎｇ／ｍ１）、清肠化湿方中剂量（１ｐｇ／ｍ１）、

清肠化湿方高剂量（１０９９／ｍ１）、地榆（１００ｐｇ／ｍ１）孵育２４ｄ，时。

１．２．１．３

ＭＴＴ法检测不同浓度药物对ＨＴ－２９细胞生长的影响

取对数生长期ＨＴ－２９细胞．按ｌ×ｌＯ＇／孔的浓度同时接种于２块９６孔培养板中，每孔２００ｌｄ，待细胞

生长至８０％融合时，更换为分别含有上述浓度药物的培养基继续培养，培养结束前４ｈ，加入浓度为

５ｍｇ／ｍｌ的ＭＴｌ，寄液２０１【１１，４ｈ后吸弃培养基，每孔加）ｋｌＯＯ％ＤＭＳＯ溶液１５０ｔｄ溶解甲瓒颗粒，酶标仪

测定４９０ｒｉｍ吸光度（Ａ值）。分别在２４ｈ和４８ｈ各测定一次生长情况，两个时间点分别设立阴性对照

组和Ｉ％ＤＭＳＯ阳性对照组，各组均设３个复孔。

１．２．１．４巨噬细胞趋化实验

取健康成年小鼠，腹腔注射ｌＯｍｌ预冷无菌ＰＢＳ，脱颈椎处死，沿腹中线剪开，滴管吸取注入的

ＰＢＳ，ＮＨ４ＣＩ祛除红细胞，２０００ｒｐｍ，离心。ＭｃＣｏｙ’ｓ

５ａ＋１０％ＦＢＳ培养基将分离提取的小鼠腹腔巨

噬细胞重悬，调整细胞密度为ｌ×１０６／ｍｌ，每孔４００¨１加．３～ｔｒａｎｓｗｅｌｌ＿ｌ＝室，下室为每孔ｌｍｌ预处理１２ｈ的

ＨＴ－２９细胞，置入培养箱中，共培养１５ｈ。

将ｔｒａｎｓｗｅｌｌ／］、室取出后用ＰＢＳ清洗，湿棉签擦净小室上表面细胞，自然风干，于０．１％结晶紫中

浸泡３０ｍｉｎ，ＰＢＳ漂净，１０％醋酸溶液洗脱结晶紫，于５８０ｎｍ测定光吸收值（ＯＤ）．以空白对照组

细胞ＯＤ为参照，分别按公式计算各组细胞趋化指数。趋化指数＝（实验组细胞ＯＤ值，对照组细胞ＯＤ

值）×１００％．

１．２．１．５免疫细胞荧光检测ＨＴ－２９细胞卜Ｂｖ，Ｂ、ＴＬＲ４蛋白

调整ＨＴ－２９细胞密度为２×１０５，种植于预先放置有灭菌盖玻片的２４孔板中，３７＂Ｃ培养１６－１８ｈ细胞

融合至７０％－８０％，加／入，２０ｎｇ／ｍｌＴＮＦ．ａ孵育１２ｈ，ＮＦ．ｖ，Ｂ组细胞加入Ｉｔｔｇ／ｍｌ

ＬＰＳ继续诱导１５ｍｉｎ，ＴＬＲ４

组细胞加入ｌｔｔｇ／ｍｌ

ＬＰＳ诱导１５ｈ，实验组同时进行药物干预。

实验结束后，弃上清培养基，预冷的ＰＢＳ洗３次，４％多聚甲醛固定３０

ｍｉｎ，ＰＢＳ洗涤３次×５

ｍｉｎ，

０．２％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００破膜１５ｍｉｎ，ＰＢＳ洗涤３次ｘ５

ｍｉｎ，５％ＢＳＡ封闭ｌｈ，加入按ｌ：５０稀释的一抗３７＂Ｃ湿

盒内孵育２ｈ，ＰＢＳ洗涤３次ｘ５ｍｉｎ，加入ｌ：５０稀释的ＴＲＩＴＣ标记的二抗室温避光孵育３０ｍｉｎ，ＰＢＳ洗

涤３次ｘ１０

ｒａｉｎ，抗荧光淬灭封片液封片，荧光显微镜观察并拍照。红色荧光为阳性染色，用ｌｍａｇｅＰｒｏ

Ｐｌｕｓ软件进行图像分析。计数入核细胞数目，观察ｍ媚活化情况，计算阳性细胞百分率。用平均

荧光强度统计ＴＬＲ４蛋白表达情况。

１．２．２体内实验

１．２．２．１动物造模及分组

采用ＴＮＢＳ灌肠法制作ＵＣ大鼠模型。造模型前禁食＇２４ｈ，随机留取ｌＯ只动物作为空白对照组，

其余大鼠１０％水合氯醛（０．３ｍＬ／１００９）腹腔注射麻醉；用１６号大鼠灌胃针轻轻从肛门插入，推入ＴＮＢＳ

溶液（１００ｍｇ／ｋｇＴＮＢＳ＋５０％乙醇０．２５ｍＬ），捏紧肛门提尾倒立３ｍｉｎ后，放回笼中自然苏醒，随机

分为清肠化湿方组、ＳＡＳＰ组、模型组，常规饲养。

１．２．２．２药物制备及干预

大鼠按１０倍成人用量给药，即清肠化湿方按１３９／ｋｇ用蒸馏水配成质量浓度为１．３９／ｍＬ悬液；柳

氮磺胺吡啶片按１．０９／ｋｇ用蒸馏水配成质量浓度为０．１砂ｎＬ溶液，给药体积为１０ｍＬ／ｋｇ。正常对照组及

模型组给等体积蒸馏水，每日１次，连续１０ｄ。

１．２．２．３标本留取

用冷生理盐水冲洗干净，锄甲醛固定，进行肉眼大体形态评分，肠组织一部分石蜡包埋，撇续切

片，ＨＥ染色镜下评价炎症和溃疡，另—部分．７０℃冻存，用于结肠组织中ｏｃｃｌｕｄｉｎ、ｃｌａｕｄｉｎ－１的检测。

１．２．２．４

末次给药２４ｈ后，脱颈椎法处死大鼠，取肛门至盲肠部结肠（约８ｃ：Ｉｎ），沿肠系膜纵轴剪开，

Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测结肠组织中ｏｃｃｌｕｄｉｎ、ｃｌａｕｄｉｎ－１蛋白的含量

收集组织，在液氮中研磨成细粉状，蛋白质裂解液裂解，冰浴中超声破碎，４＂Ｃ、１２０００ｒｐｍ

离，ｔＭ５ｍｉｎ。取上清液，即为原始总蛋白。ＢＣＡ法进行蛋白定量。取１０ＩＩｌ蛋白上清液，按４：ｌ加入５倍上

样缓冲液，沸水浴，煮５ｍｍ，点样于ｌＯ多矗和１５％聚丙烯酰胺凝胶进行ＳＤＩｓ－ＰＡＧＥ电泳，起始电压８０Ｖ，待

溴酚兰达到浓缩胶时，更换电压至１２０Ｖ，直到电泳结束。剪取与凝胶大小一致的ＰＶＤＦ膜，按照海绵垫

．３张滤纸撮庵ｂＰＶＤＦＪ獒３张滤缚海绵垫的顺序制备夹层物，注意排尽气泡，放入盛有转膜缓冲液的槽

中，稳ｆｆｔ２５０ｍＡ转膜９０分钟。取出ＰＶＤＦ膜，５％脱脂奶粉室温封闭２ｈ。加入１：２００稀释的一抗，４＂Ｃ反应

过夜。ＴＢｓｌ镖洗３次ｘ５ｍｉｎ。加入羊抗知ｇＧ．｝珏心（１：１００００），室温孵育１．５ｈ，ＴＢＳ碟洗３次ｘ

１５ｍｉｎ。

ＥＣＬ显色，暗房中曝光２ｒｎｉｎ．相应蛋白表达值为条带的灰度值除以阳甜∞内参校正。

１．３统计学处理应用ＳＰＳＳ

１７．０统计软件．各实验独立重复兰３次，计量资料以（ｘ士ｓ）表示，

两组间比较采用ｔ－ｔｅｓｔ，多组问比较采用Ｏｎｅｗａｙ－ＡＮＯＶＡ．统计作图采用ＧｒａｐｈＰａｄ

Ｐｒｉｓｍ５．

２结果

２．１不同浓度的实验药物对ＨＴ－２９细胞生长的影响

本实验采用的是Ｍ．ｒｒ法，从加药后的２４ｈ后开始观察，结果显示不同浓度药物与细胞共培养４８

小时，细胞增殖良好，差异有统计学意义（Ｐ如．０５）。除Ｉ％ＤＭＳＯ阳性对照组外，各剂量组与空白对

照组比较，生长趋势一致，各组间差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５），有明显增殖的趋势。见图１．

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2024年5月30日发(作者：镜若薇)

２０１０１２０１，以上药物均在南京市药品检验所进行质量检验，鉴定为合格中药饮片。柳氮磺胺吡啶片

（维柳芬）：上海三维制药有限公司，生产批号：２００９０９０２；Ｓｕｌｆａｓａｌａｚｉｎｅ：Ｓｉｇｍａ公司。

１．１．３实验试剂

５％ＴＮＢＳ溶液、ＭｃＣｏｙ’ｓ５ａ培养基、ＬＰＳ：均购Ｉ刍Ｓｉｇｍａ公司：胎牛血清（杭州四季青公司）；

ｈＴＮＦ吨（Ｐｅｐｍ

Ｔｅｃｈ公司）；兔抗ｏｃｃｌｕｄｉｎ、ｃｌａｕｄｉｎ－１多克隆抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司）；兔抗ＮＦ．ｖ，Ｂ单

克隆抗体（Ｃｅｌｌ

Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ

Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司）；兔抗ＴＬＲ４多克隆抗体（Ｓａｎｔａｃｒｕｚ公司）：鼠抗ｐ．ａｃｆｉｎ

抗体（北京四正柏公司）；Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ（ＴＲＩＴＣ）标记的二抗（Ｐｒｏｔｅｉｎ

ｔｅｃｈ公司）；辣根过氧化物酶

（｝玎廿）标记的二抗（南京晶美生物工程有限公司）：ＢＣＡ．１００蛋白质定量测定试剂盒（Ｔｈｅｒｍｏ

公司）：预先染色的蛋白分子量标准品（Ｍａｒｋｅｒ，Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ

ｌｉｆｅ

Ｓｃｉｅｃｅ公司）；化学发光法显色试剂

（ＴｈｅｒｍＯ公司）；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌｄ、室（Ｃｏｍｉｎｇ公司）

１．１．４主要仪器

ＺＦＭＱ０５０ＰＥ型超纯水器（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）；低温超速离心机（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ司）：Ｓｐｅｃｔｒａ

Ｍａｘｌ９０

酶标仪（美国ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ公司）；旋转蒸发仪（ＥＹＥＬＡ公司）：ＣＣＡ．２０低温冷却水循环泵

（巩义市予华仪器有限公司）；ＤＺＦ．６２１０真空干燥箱（上海齐欣科学仪器有限公司）；倒置显微

镜、荧光显微镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ）：电热恒温鼓风干燥箱（上海博泰实验仪器有限公司）；垂直电泳仪、

转膜仪（Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司）．

１．２方法

１．２．１体外实验

１．２．１．１中药清膏制备

按成人用量，称取上述清肠化湿方ｌ付，共８７９，单味药物地榆４５９，分别投入提取罐中，浸泡，

煎煮２次，合并药液，予旋转蒸发仪中蒸发，减压浓缩，真空干燥箱中干燥成药物细粉。称取清肠

化湿方清膏２６．４３９，即浸青量３０．４％．地榆清青１３９，即浸青量２８．９％．

１．２．１．２实验分组

实验分为７组：空白对照组：加入含２％ＦＢＳ的ＭｃＣｏｙ’Ｓ

５ａ培养基孵育２４ｄ，时：模型对照组：予

ｈＴＮＦ－ａ（２０ｎｇ／ｍ１）孵育１２ｄ＇时后，再予ＬＰＳ（１ｕｇ／ｍ１）（１】孵育１５ｄ，时；实验组：上述药物干预的基

础上，分别加入ＳＡＳＰ（２ｒａＭ）［２１、清肠化湿方低剂量（１００ｎｇ／ｍ１）、清肠化湿方中剂量（１ｐｇ／ｍ１）、

清肠化湿方高剂量（１０９９／ｍ１）、地榆（１００ｐｇ／ｍ１）孵育２４ｄ，时。

１．２．１．３

ＭＴＴ法检测不同浓度药物对ＨＴ－２９细胞生长的影响

取对数生长期ＨＴ－２９细胞．按ｌ×ｌＯ＇／孔的浓度同时接种于２块９６孔培养板中，每孔２００ｌｄ，待细胞

生长至８０％融合时，更换为分别含有上述浓度药物的培养基继续培养，培养结束前４ｈ，加入浓度为

５ｍｇ／ｍｌ的ＭＴｌ，寄液２０１【１１，４ｈ后吸弃培养基，每孔加）ｋｌＯＯ％ＤＭＳＯ溶液１５０ｔｄ溶解甲瓒颗粒，酶标仪

测定４９０ｒｉｍ吸光度（Ａ值）。分别在２４ｈ和４８ｈ各测定一次生长情况，两个时间点分别设立阴性对照

组和Ｉ％ＤＭＳＯ阳性对照组，各组均设３个复孔。

１．２．１．４巨噬细胞趋化实验

取健康成年小鼠，腹腔注射ｌＯｍｌ预冷无菌ＰＢＳ，脱颈椎处死，沿腹中线剪开，滴管吸取注入的

ＰＢＳ，ＮＨ４ＣＩ祛除红细胞，２０００ｒｐｍ，离心。ＭｃＣｏｙ’ｓ

５ａ＋１０％ＦＢＳ培养基将分离提取的小鼠腹腔巨

噬细胞重悬，调整细胞密度为ｌ×１０６／ｍｌ，每孔４００¨１加．３～ｔｒａｎｓｗｅｌｌ＿ｌ＝室，下室为每孔ｌｍｌ预处理１２ｈ的

ＨＴ－２９细胞，置入培养箱中，共培养１５ｈ。

将ｔｒａｎｓｗｅｌｌ／］、室取出后用ＰＢＳ清洗，湿棉签擦净小室上表面细胞，自然风干，于０．１％结晶紫中

浸泡３０ｍｉｎ，ＰＢＳ漂净，１０％醋酸溶液洗脱结晶紫，于５８０ｎｍ测定光吸收值（ＯＤ）．以空白对照组

细胞ＯＤ为参照，分别按公式计算各组细胞趋化指数。趋化指数＝（实验组细胞ＯＤ值，对照组细胞ＯＤ

值）×１００％．

１．２．１．５免疫细胞荧光检测ＨＴ－２９细胞卜Ｂｖ，Ｂ、ＴＬＲ４蛋白

调整ＨＴ－２９细胞密度为２×１０５，种植于预先放置有灭菌盖玻片的２４孔板中，３７＂Ｃ培养１６－１８ｈ细胞

融合至７０％－８０％，加／入，２０ｎｇ／ｍｌＴＮＦ．ａ孵育１２ｈ，ＮＦ．ｖ，Ｂ组细胞加入Ｉｔｔｇ／ｍｌ

ＬＰＳ继续诱导１５ｍｉｎ，ＴＬＲ４

组细胞加入ｌｔｔｇ／ｍｌ

ＬＰＳ诱导１５ｈ，实验组同时进行药物干预。

实验结束后，弃上清培养基，预冷的ＰＢＳ洗３次，４％多聚甲醛固定３０

ｍｉｎ，ＰＢＳ洗涤３次×５

ｍｉｎ，

０．２％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００破膜１５ｍｉｎ，ＰＢＳ洗涤３次ｘ５

ｍｉｎ，５％ＢＳＡ封闭ｌｈ，加入按ｌ：５０稀释的一抗３７＂Ｃ湿

盒内孵育２ｈ，ＰＢＳ洗涤３次ｘ５ｍｉｎ，加入ｌ：５０稀释的ＴＲＩＴＣ标记的二抗室温避光孵育３０ｍｉｎ，ＰＢＳ洗

涤３次ｘ１０

ｒａｉｎ，抗荧光淬灭封片液封片，荧光显微镜观察并拍照。红色荧光为阳性染色，用ｌｍａｇｅＰｒｏ

Ｐｌｕｓ软件进行图像分析。计数入核细胞数目，观察ｍ媚活化情况，计算阳性细胞百分率。用平均

荧光强度统计ＴＬＲ４蛋白表达情况。

１．２．２体内实验

１．２．２．１动物造模及分组

采用ＴＮＢＳ灌肠法制作ＵＣ大鼠模型。造模型前禁食＇２４ｈ，随机留取ｌＯ只动物作为空白对照组，

其余大鼠１０％水合氯醛（０．３ｍＬ／１００９）腹腔注射麻醉；用１６号大鼠灌胃针轻轻从肛门插入，推入ＴＮＢＳ

溶液（１００ｍｇ／ｋｇＴＮＢＳ＋５０％乙醇０．２５ｍＬ），捏紧肛门提尾倒立３ｍｉｎ后，放回笼中自然苏醒，随机

分为清肠化湿方组、ＳＡＳＰ组、模型组，常规饲养。

１．２．２．２药物制备及干预

大鼠按１０倍成人用量给药，即清肠化湿方按１３９／ｋｇ用蒸馏水配成质量浓度为１．３９／ｍＬ悬液；柳

氮磺胺吡啶片按１．０９／ｋｇ用蒸馏水配成质量浓度为０．１砂ｎＬ溶液，给药体积为１０ｍＬ／ｋｇ。正常对照组及

模型组给等体积蒸馏水，每日１次，连续１０ｄ。

１．２．２．３标本留取

用冷生理盐水冲洗干净，锄甲醛固定，进行肉眼大体形态评分，肠组织一部分石蜡包埋，撇续切

片，ＨＥ染色镜下评价炎症和溃疡，另—部分．７０℃冻存，用于结肠组织中ｏｃｃｌｕｄｉｎ、ｃｌａｕｄｉｎ－１的检测。

１．２．２．４

末次给药２４ｈ后，脱颈椎法处死大鼠，取肛门至盲肠部结肠（约８ｃ：Ｉｎ），沿肠系膜纵轴剪开，

Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测结肠组织中ｏｃｃｌｕｄｉｎ、ｃｌａｕｄｉｎ－１蛋白的含量

收集组织，在液氮中研磨成细粉状，蛋白质裂解液裂解，冰浴中超声破碎，４＂Ｃ、１２０００ｒｐｍ

离，ｔＭ５ｍｉｎ。取上清液，即为原始总蛋白。ＢＣＡ法进行蛋白定量。取１０ＩＩｌ蛋白上清液，按４：ｌ加入５倍上

样缓冲液，沸水浴，煮５ｍｍ，点样于ｌＯ多矗和１５％聚丙烯酰胺凝胶进行ＳＤＩｓ－ＰＡＧＥ电泳，起始电压８０Ｖ，待

溴酚兰达到浓缩胶时，更换电压至１２０Ｖ，直到电泳结束。剪取与凝胶大小一致的ＰＶＤＦ膜，按照海绵垫

．３张滤纸撮庵ｂＰＶＤＦＪ獒３张滤缚海绵垫的顺序制备夹层物，注意排尽气泡，放入盛有转膜缓冲液的槽

中，稳ｆｆｔ２５０ｍＡ转膜９０分钟。取出ＰＶＤＦ膜，５％脱脂奶粉室温封闭２ｈ。加入１：２００稀释的一抗，４＂Ｃ反应

过夜。ＴＢｓｌ镖洗３次ｘ５ｍｉｎ。加入羊抗知ｇＧ．｝珏心（１：１００００），室温孵育１．５ｈ，ＴＢＳ碟洗３次ｘ

１５ｍｉｎ。

ＥＣＬ显色，暗房中曝光２ｒｎｉｎ．相应蛋白表达值为条带的灰度值除以阳甜∞内参校正。

１．３统计学处理应用ＳＰＳＳ

１７．０统计软件．各实验独立重复兰３次，计量资料以（ｘ士ｓ）表示，

两组间比较采用ｔ－ｔｅｓｔ，多组问比较采用Ｏｎｅｗａｙ－ＡＮＯＶＡ．统计作图采用ＧｒａｐｈＰａｄ

Ｐｒｉｓｍ５．

２结果

２．１不同浓度的实验药物对ＨＴ－２９细胞生长的影响

本实验采用的是Ｍ．ｒｒ法，从加药后的２４ｈ后开始观察，结果显示不同浓度药物与细胞共培养４８

小时，细胞增殖良好，差异有统计学意义（Ｐ如．０５）。除Ｉ％ＤＭＳＯ阳性对照组外，各剂量组与空白对

照组比较，生长趋势一致，各组间差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５），有明显增殖的趋势。见图１．

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