2024年5月30日发(作者：公西诗蕊)
屎肠球菌廉价培养基的研制
李英英;陈曦;宋铁英
【摘 要】[目的]为了降低屎肠球菌微胶囊制剂的发酵成本,[方法]用自主分离的一株
屎肠球菌作为发酵菌株,用玉米和豆粕替代MRS基础培养基中的碳源和氮源,设计
不同替代比例的MRS廉价培养基,经过培养和计数,筛选出价格低廉又适合该菌株
生长的廉价培养基.[结果]玉米和豆粕作为碳源和氮源制成的替代培养基适合该屎肠
球菌生长;结合价格和培养效果,筛选出碳源50％替代、氮源100％替代的MRS-
C50 N100替代培养基为适合用于屎肠球菌工业化发酵的廉价培养基.[结论]MRS-
C50 N100替代培养基既可以极大降低屎肠球菌的发酵成本,又可以使活菌数达到
益生菌制剂要求的有效活菌量,可用于屎肠球菌微胶囊制剂的工业化生产.
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2018(046)032
【总页数】3页(P80-81,90)
【关键词】屎肠球菌;MRS,廉价培养基;饲料原料
【作 者】李英英;陈曦;宋铁英
【作者单位】福建省农业科学院生物技术研究所,福州350003;福建省农业科学院
生物技术研究所,福州350003;福建省农业科学院生物技术研究所,福州350003
【正文语种】中 文
【中图分类】S816.6
乳酸菌是动物肠道内的主要益生菌，具有促进营养物质的消化和吸收[1]，维持肠
道内微生态平衡[2]，增强机体免疫力[3]，提高生产性能[4]等作用。为解决畜牧行
业中抗生素滥用引发的药残和耐药性问题，在动物日粮中添加乳酸菌制剂等抗生素
替代物已经成为很多人的选择[5]。屎肠球菌是乳酸菌中抗逆性较强的一类菌[6]，
培养和保存条件都较为容易，是制作乳酸菌微胶囊制剂时的首选菌种[7]。在前期
研究中，我们已经筛选到一株抗逆性较强的猪源屎肠球菌，通过喷雾干燥工艺制备
成屎肠球菌微胶囊制剂，并且对制成的屎肠球菌微胶囊制剂进行了高温耐受性、耐
酸性、肠溶性、稳定性和动物田间小规模试验，证明该屎肠球菌微胶囊制剂对高温、
胃液、肠液均有较好的耐受性，并且可显著提高断乳仔猪生产性能[4]。但是前期
培养屎肠球菌使用的MRS培养基中氮源物质是蛋白胨、牛肉膏和酵母膏，价格昂
贵，造成屎肠球菌微胶囊制剂生产成本过高，难以推广。
豆粕是动物饲料配方中最主要的氮源物质，与MRS培养基中的氮源物质(蛋白胨、
酵母膏和牛肉膏)相比，豆粕价格低廉且易得[8]。若用豆粕替代MRS培养基中的
蛋白胨、酵母膏和牛肉膏，可大幅度降低屎肠球菌微胶囊制剂的生产成本。而玉米
是动物全价饲料中的碳源物质[9]，与培养基中原有的碳源(葡萄糖)相比，价格更低
且来源稳定更易获得。用豆粕和玉米作为培养基中的氮源和碳源，可以降低成本，
有利于屎肠球菌微胶囊制剂的工业化生产。本研究拟用豆粕和玉米部分或者全部替
代MRS基础培养基中的氮源和碳源成分，制成MRS替代培养基；再用前期分离
得到的屎肠球菌作为菌株，进行培养计数，最后结合价格，筛选出高效、价廉的
MRS廉价培养基，为屎肠球菌微胶囊制剂在饲料和养殖行业中的推广奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验菌株。来自福建省某猪场周边土壤自主分离到的屎肠球菌
(BBH201305001)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
(CGMCC)，菌种保藏代号：CGMCC No.8296。
1.1.2 试剂。蛋白胨，牛肉膏，酵母膏，豆粕,葡萄糖,玉米,磷酸二氢钾，乙酸钠，
硫酸镁(MgSO4 ·7H2O)，硫酸锰(MnSO4·4H2O)，柠檬酸三胺，吐温-80，稀盐
酸等。
1.2 试验方法
1.2.1 MRS基础培养基配制。蛋白胨10‰，牛肉膏10‰ ，酵母膏4‰ ，葡萄
糖20‰,磷酸二氢钾2‰，乙酸钠5‰，硫酸镁0.2‰，硫酸锰0.05‰，柠檬酸
三胺2‰，吐温-80 1‰，pH 5.7，121 ℃、15 min灭菌。
1.2.2 MRS替代培养基配制及筛选。利用与MRS基础培养基中氮源含量相当的豆
粕替代原有的氮源物质(蛋白胨，牛肉膏和酵母膏)制成MRS替代培养基，替代比
例为50%记作MRS-N50，全部替代时记作MRS-N100；同样，用玉米替代培养
基中的碳源物质(葡萄糖)，50%替代时记作MRS-C50，全部替代时记作MRS-
C100，以此类推。
配制替代培养基时先进行氮源或碳源单替代，设置50%和100%两个梯度进行替
代，即MRS-C50、MRS-C100、MRS-N50、MRS-N100 4个配方，接种菌株进
行培养计数；根据单替代的结果设计氮源碳源双替代配方，同样接种菌株进行培养
计数；结合双替代配方培养计数的结果以及培养基的价格，筛选出价格低廉又适合
屎肠球菌生长的替代配方。
1.2.3 培养计数。取保藏的屎肠球菌接种于MRS培养基中，37 ℃、180 r/min 培
养16～20 h，制备成种子液。以基础培养基为对照组，替代培养基为实验组，每
组设3个平行，接种10%的种子液后37 ℃、180 rpm/min 培养20～24 h，涂
板计数。
2 结果与分析
2.1 氮源和碳源单替代培养计数的结果 用豆粕和玉米进行单替代制成廉价培养基，
培养计数的结果如表1所示，替代培养基MRS-C50、MRS-C100和MRS-N50
培养计数的结果均高于MRS基础培养基，仅MRS-N100的结果略低于基础培养
基。但4种替代培养基中，MRS-N100的价格最低。
表1 氮源碳源单替代培养基培养计数结果及培养基价格比较Table 1
Comparisons of the culture count result and price for substituting
mediums with alternative nitrogen or carbon sourceMRSMRS-C50MRS-
C100MRS-N50MRS-N100活菌数Viable count∥lg
cfu/mL9.39±0.229.70±0.2410.03±0.089.44±0.228.90±0.13价格百分比Price
percentage∥%10099.8699.7253.096.18
2.2 氮源单替代及氮源碳源双替代培养基培养计数的结果 表2为氮源单替代及氮
源碳源双替代培养基培养计数的结果，MRS-N50和MRS-C50N50 2种氮源半替
代培养基的培养计数结果高于MRS基础培养基，而MRS-N100和MRS-
C50N1002种氮源全替代培养基的结果略低于MRS基础培养基。同时，在氮源替
代比例相同时，用玉米进行氮源替代培养计数的结果比不进行碳源替代的结果更高，
即MRS-C50N50高于MRS-N50，MRS-C50N100高于MRS-N100。
表2 氮源单替代及氮源碳源双替代培养基培养计数结果及培养基价格比较
Table 2 Comparisons of the culture count result and price for substituting
mediums with alternative nitrogen source or alternative nitrogen and
carbon source
MRSMRS-N50MRS-N100MRS-C50N50MRS-C50N100活菌数Viable
count∥lg cfu/mL9.46±0.139.51±0.179.00±0.089.72±0.079.01±0.13价格百分
比Price percentage∥%10053.096.1852.956.04
2.3 氮源碳源双替代培养基培养计数的结果 表3为氮源碳源双替代培养基培养计
数的结果，3种替代培养基计数结果从高到低依次是MRS-C50N50、MRS-
C50N75、MRS-C50N100，其中MRS-C50N50和MRS-C50N75的培养计数结
果比基础MRS培养基略高，而MRS-C50N100的结果则略低。3种双替代培养
基中MRS-C50N50最适合菌株生长，但MRS-C50N100价格最低。
表3 氮源碳源双替代培养基培养计数结果及培养基价格比较Table 3
Comparisons of the culture count result and price for substituting
mediums with alternative nitrogen and carbon sourceMRSMRS-
C50N50MRS-C50N75MRS-C50N100活菌数Viable count∥lg
cfu/mL9.29±0.209.48±0.149.32±0.259.06±0.39价格百分比Price
percentage∥%10052.9529.506.04
3 讨论
3.1 氮源和碳源单替代试验 豆粕和玉米是配合饲料中主要的氮源和碳源，与MRS
培养基中氮源和碳源物质相比，不仅价格低廉，而且来源更稳定。若用其替代
MRS培养基中的氮源和碳源物质，可降低MRS培养基的制作成本，有利于屎肠
球菌微胶囊制剂的工业化生产和其在养殖行业中的推广应用。用豆粕和玉米进行单
替代制成廉价培养基培养计数的结果中，碳源半替代、全替代及氮源半替代后培养
计数的结果均高于MRS基础培养基，仅氮源全替代的结果略低于基础培养基。因
此，认为用豆粕和玉米作为氮源和碳源制成替代培养基适合该菌株生长。
4种替代培养基MRS-C50、MRS-C100、MRS-N50和MRS-N100价格分别是
MRS基础培养基的99.86%、99.72%、53.09%和6.18%，可以看出，氮源替代
对培养基的价格影响远大于碳源替代对培养基价格的影响。同时，豆粕和玉米作为
培养基原料的主要缺点是二者不溶于水，若将基础培养基中的氮源和碳源物质均用
豆粕和玉米全替代，制成的培养基会过于黏稠，不利于菌株培养。因此，从价格方
面考虑，在进一步设计替代配方时，优先考虑氮源替代，且将碳源替代比例设置为
50%。
3.2 氮源单替代及氮源碳源双替代试验 氮源单替代及氮源碳源双替代培养基培养
计数的结果，MRS-N50和MRS-C50N50 2种氮源半替代培养基的培养计数结果
高于MRS基础培养基，而MRS-N100和MRS-C50N100 2种氮源全替代培养基
的结果略低于MRS基础培养基，说明氮源半替代后制成的培养基比全替代培养基
更适合该屎肠球菌生长。试验结果还显示，MRS-C50N50高于MRS-N50，
MRS-C50N100高于MRS-N100，说明当氮源替代量相同时，用玉米替代葡萄糖
作为培养基的碳源更有利于该菌株生长。因此，我们认为：碳源替代方面，用玉米
50%替代葡萄糖，既可以降低培养基的价格，又利于菌株生长，同时也不会使制
成的替代培养基因过于黏稠而不利于菌株培养；而氮源替代方面，用豆粕50%替
代原有氮源比100%替代更适合菌株生长，但100%替代可极大程度降低培养基价
格。因此，在进一步实验时，采用碳源50%替代、氮源替代比例设置成50%、75%
和100%三个梯度，进行廉价培养基的筛选。
3.3 氮源碳源双替代试验 氮源碳源双替代培养基培养计数的结果，3种替代培养基
计数结果从高到低依次是MRS-C50N50、MRS-C50N75、MRS-C50N100，其
中MRS-C50N50和MRS-C50N75的培养计数结果比基础MRS培养基略高，而
MRS-C50N100的结果则略低，3种双替代培养基中MRS-C50N50最适合菌株
生长。随着氮源替代比例增加，得到的活菌数略有下降，但活菌数仍可达到109
cfu/mL，仍高于益生菌制剂要求的有效活菌量[10]。
MRS-C50N50、MRS-C50N75、MRS-C50N100 3种双替代培养基的价格分别
为基础培养基的53%、30%、7%。结合三者的计数结果可知，MRS-C50N100
可以极大降低培养基的成本，同时活菌得率可达到益生菌制剂要求的有效活菌量。
因此，建议选择MRS-C50N100替代培养基进行屎肠球菌工业化发酵，制备屎肠
球菌微胶囊制剂。
4 结论
该研究用饲料原料中的玉米和豆粕替代MRS基础培养基中的碳源和氮源，经过培
养和计数，证明二者作为氮源和碳源制成的替代培养基适合屎肠球菌生长。
进一步试验中，从营养和价格两个方面综合考虑，筛选适合进行工业化发酵屎肠球
菌的MRS廉价培养基，最终确定了碳源替代比例为50%；而氮源方面，当替代
量达到100%时培养基的价格可大幅度降低，而活菌得率仅会略有下降，仍可达到
益生菌制剂要求的有效活菌量。因此，选择MRS-C50N100替代培养基进行屎肠
球菌发酵，在保证活菌得率的情况下，可以极大降低乳酸菌制剂的制作成本，有利
于屎肠球菌微胶囊制剂的工业化生产和其在养殖行业的推广应用。
参考文献
【相关文献】
[1] 王福强.牙鲆肠道益生菌的分离鉴定及其应用研究[D].北京:中国农业大学,2004.
[2] 马治宇.乳酸菌及其培养液对肉鸡生产性能、肠道菌群及肠道结构的影响[D].杨凌:西北农林科技
大学,2008.
[3] 于晨龙.传统乳制品中益生乳酸菌筛选及免疫调节功能的研究[D].呼和浩特:内蒙古农业大
学,2014.
[4] 李英英,陈曦,宋铁英.屎肠球菌微胶囊制剂的稳定性及对断乳仔猪生产性能的影响[J].福建畜牧兽
医,2016,38(2):14-17.
[5] 王宗伟,陈飞.绿色饲料添加剂——乳酸菌在肉鸡生产中的研究进展[J].饲料博览,2011(8):38-41.
[6] 葛龙,李波.屎肠球菌在饲用微生态制剂中的研究与应用[J].饲料与畜牧,2013(6):57-59.
[7] 刘扬科,李希.日粮中添加屎肠球菌对断奶仔猪生产性能及腹泻率的影响[J].饲料与畜
牧,2013(4):65-66.
[8] CRESWELL need an additional protein meal support soybean meal: What will if
be?[J].Asian poultry magazine,2012(4):22-24.
[9] 贾涛.猪用配合饲料的配制：猪用配合饲料的配制[J].猪业科学,2012,29(12):32-36.
[10] 蔡辉益,霍启光.饲用微生物添加剂研究与应用进展[J].饲料工业,1993,14(4):7-12.
2024年5月30日发(作者：公西诗蕊)
屎肠球菌廉价培养基的研制
李英英;陈曦;宋铁英
【摘 要】[目的]为了降低屎肠球菌微胶囊制剂的发酵成本,[方法]用自主分离的一株
屎肠球菌作为发酵菌株,用玉米和豆粕替代MRS基础培养基中的碳源和氮源,设计
不同替代比例的MRS廉价培养基,经过培养和计数,筛选出价格低廉又适合该菌株
生长的廉价培养基.[结果]玉米和豆粕作为碳源和氮源制成的替代培养基适合该屎肠
球菌生长;结合价格和培养效果,筛选出碳源50％替代、氮源100％替代的MRS-
C50 N100替代培养基为适合用于屎肠球菌工业化发酵的廉价培养基.[结论]MRS-
C50 N100替代培养基既可以极大降低屎肠球菌的发酵成本,又可以使活菌数达到
益生菌制剂要求的有效活菌量,可用于屎肠球菌微胶囊制剂的工业化生产.
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2018(046)032
【总页数】3页(P80-81,90)
【关键词】屎肠球菌;MRS,廉价培养基;饲料原料
【作 者】李英英;陈曦;宋铁英
【作者单位】福建省农业科学院生物技术研究所,福州350003;福建省农业科学院
生物技术研究所,福州350003;福建省农业科学院生物技术研究所,福州350003
【正文语种】中 文
【中图分类】S816.6
乳酸菌是动物肠道内的主要益生菌，具有促进营养物质的消化和吸收[1]，维持肠
道内微生态平衡[2]，增强机体免疫力[3]，提高生产性能[4]等作用。为解决畜牧行
业中抗生素滥用引发的药残和耐药性问题，在动物日粮中添加乳酸菌制剂等抗生素
替代物已经成为很多人的选择[5]。屎肠球菌是乳酸菌中抗逆性较强的一类菌[6]，
培养和保存条件都较为容易，是制作乳酸菌微胶囊制剂时的首选菌种[7]。在前期
研究中，我们已经筛选到一株抗逆性较强的猪源屎肠球菌，通过喷雾干燥工艺制备
成屎肠球菌微胶囊制剂，并且对制成的屎肠球菌微胶囊制剂进行了高温耐受性、耐
酸性、肠溶性、稳定性和动物田间小规模试验，证明该屎肠球菌微胶囊制剂对高温、
胃液、肠液均有较好的耐受性，并且可显著提高断乳仔猪生产性能[4]。但是前期
培养屎肠球菌使用的MRS培养基中氮源物质是蛋白胨、牛肉膏和酵母膏，价格昂
贵，造成屎肠球菌微胶囊制剂生产成本过高，难以推广。
豆粕是动物饲料配方中最主要的氮源物质，与MRS培养基中的氮源物质(蛋白胨、
酵母膏和牛肉膏)相比，豆粕价格低廉且易得[8]。若用豆粕替代MRS培养基中的
蛋白胨、酵母膏和牛肉膏，可大幅度降低屎肠球菌微胶囊制剂的生产成本。而玉米
是动物全价饲料中的碳源物质[9]，与培养基中原有的碳源(葡萄糖)相比，价格更低
且来源稳定更易获得。用豆粕和玉米作为培养基中的氮源和碳源，可以降低成本，
有利于屎肠球菌微胶囊制剂的工业化生产。本研究拟用豆粕和玉米部分或者全部替
代MRS基础培养基中的氮源和碳源成分，制成MRS替代培养基；再用前期分离
得到的屎肠球菌作为菌株，进行培养计数，最后结合价格，筛选出高效、价廉的
MRS廉价培养基，为屎肠球菌微胶囊制剂在饲料和养殖行业中的推广奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验菌株。来自福建省某猪场周边土壤自主分离到的屎肠球菌
(BBH201305001)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
(CGMCC)，菌种保藏代号：CGMCC No.8296。
1.1.2 试剂。蛋白胨，牛肉膏，酵母膏，豆粕,葡萄糖,玉米,磷酸二氢钾，乙酸钠，
硫酸镁(MgSO4 ·7H2O)，硫酸锰(MnSO4·4H2O)，柠檬酸三胺，吐温-80，稀盐
酸等。
1.2 试验方法
1.2.1 MRS基础培养基配制。蛋白胨10‰，牛肉膏10‰ ，酵母膏4‰ ，葡萄
糖20‰,磷酸二氢钾2‰，乙酸钠5‰，硫酸镁0.2‰，硫酸锰0.05‰，柠檬酸
三胺2‰，吐温-80 1‰，pH 5.7，121 ℃、15 min灭菌。
1.2.2 MRS替代培养基配制及筛选。利用与MRS基础培养基中氮源含量相当的豆
粕替代原有的氮源物质(蛋白胨，牛肉膏和酵母膏)制成MRS替代培养基，替代比
例为50%记作MRS-N50，全部替代时记作MRS-N100；同样，用玉米替代培养
基中的碳源物质(葡萄糖)，50%替代时记作MRS-C50，全部替代时记作MRS-
C100，以此类推。
配制替代培养基时先进行氮源或碳源单替代，设置50%和100%两个梯度进行替
代，即MRS-C50、MRS-C100、MRS-N50、MRS-N100 4个配方，接种菌株进
行培养计数；根据单替代的结果设计氮源碳源双替代配方，同样接种菌株进行培养
计数；结合双替代配方培养计数的结果以及培养基的价格，筛选出价格低廉又适合
屎肠球菌生长的替代配方。
1.2.3 培养计数。取保藏的屎肠球菌接种于MRS培养基中，37 ℃、180 r/min 培
养16～20 h，制备成种子液。以基础培养基为对照组，替代培养基为实验组，每
组设3个平行，接种10%的种子液后37 ℃、180 rpm/min 培养20～24 h，涂
板计数。
2 结果与分析
2.1 氮源和碳源单替代培养计数的结果 用豆粕和玉米进行单替代制成廉价培养基，
培养计数的结果如表1所示，替代培养基MRS-C50、MRS-C100和MRS-N50
培养计数的结果均高于MRS基础培养基，仅MRS-N100的结果略低于基础培养
基。但4种替代培养基中，MRS-N100的价格最低。
表1 氮源碳源单替代培养基培养计数结果及培养基价格比较Table 1
Comparisons of the culture count result and price for substituting
mediums with alternative nitrogen or carbon sourceMRSMRS-C50MRS-
C100MRS-N50MRS-N100活菌数Viable count∥lg
cfu/mL9.39±0.229.70±0.2410.03±0.089.44±0.228.90±0.13价格百分比Price
percentage∥%10099.8699.7253.096.18
2.2 氮源单替代及氮源碳源双替代培养基培养计数的结果 表2为氮源单替代及氮
源碳源双替代培养基培养计数的结果，MRS-N50和MRS-C50N50 2种氮源半替
代培养基的培养计数结果高于MRS基础培养基，而MRS-N100和MRS-
C50N1002种氮源全替代培养基的结果略低于MRS基础培养基。同时，在氮源替
代比例相同时，用玉米进行氮源替代培养计数的结果比不进行碳源替代的结果更高，
即MRS-C50N50高于MRS-N50，MRS-C50N100高于MRS-N100。
表2 氮源单替代及氮源碳源双替代培养基培养计数结果及培养基价格比较
Table 2 Comparisons of the culture count result and price for substituting
mediums with alternative nitrogen source or alternative nitrogen and
carbon source
MRSMRS-N50MRS-N100MRS-C50N50MRS-C50N100活菌数Viable
count∥lg cfu/mL9.46±0.139.51±0.179.00±0.089.72±0.079.01±0.13价格百分
比Price percentage∥%10053.096.1852.956.04
2.3 氮源碳源双替代培养基培养计数的结果 表3为氮源碳源双替代培养基培养计
数的结果，3种替代培养基计数结果从高到低依次是MRS-C50N50、MRS-
C50N75、MRS-C50N100，其中MRS-C50N50和MRS-C50N75的培养计数结
果比基础MRS培养基略高，而MRS-C50N100的结果则略低。3种双替代培养
基中MRS-C50N50最适合菌株生长，但MRS-C50N100价格最低。
表3 氮源碳源双替代培养基培养计数结果及培养基价格比较Table 3
Comparisons of the culture count result and price for substituting
mediums with alternative nitrogen and carbon sourceMRSMRS-
C50N50MRS-C50N75MRS-C50N100活菌数Viable count∥lg
cfu/mL9.29±0.209.48±0.149.32±0.259.06±0.39价格百分比Price
percentage∥%10052.9529.506.04
3 讨论
3.1 氮源和碳源单替代试验 豆粕和玉米是配合饲料中主要的氮源和碳源，与MRS
培养基中氮源和碳源物质相比，不仅价格低廉，而且来源更稳定。若用其替代
MRS培养基中的氮源和碳源物质，可降低MRS培养基的制作成本，有利于屎肠
球菌微胶囊制剂的工业化生产和其在养殖行业中的推广应用。用豆粕和玉米进行单
替代制成廉价培养基培养计数的结果中，碳源半替代、全替代及氮源半替代后培养
计数的结果均高于MRS基础培养基，仅氮源全替代的结果略低于基础培养基。因
此，认为用豆粕和玉米作为氮源和碳源制成替代培养基适合该菌株生长。
4种替代培养基MRS-C50、MRS-C100、MRS-N50和MRS-N100价格分别是
MRS基础培养基的99.86%、99.72%、53.09%和6.18%，可以看出，氮源替代
对培养基的价格影响远大于碳源替代对培养基价格的影响。同时，豆粕和玉米作为
培养基原料的主要缺点是二者不溶于水，若将基础培养基中的氮源和碳源物质均用
豆粕和玉米全替代，制成的培养基会过于黏稠，不利于菌株培养。因此，从价格方
面考虑，在进一步设计替代配方时，优先考虑氮源替代，且将碳源替代比例设置为
50%。
3.2 氮源单替代及氮源碳源双替代试验 氮源单替代及氮源碳源双替代培养基培养
计数的结果，MRS-N50和MRS-C50N50 2种氮源半替代培养基的培养计数结果
高于MRS基础培养基，而MRS-N100和MRS-C50N100 2种氮源全替代培养基
的结果略低于MRS基础培养基，说明氮源半替代后制成的培养基比全替代培养基
更适合该屎肠球菌生长。试验结果还显示，MRS-C50N50高于MRS-N50，
MRS-C50N100高于MRS-N100，说明当氮源替代量相同时，用玉米替代葡萄糖
作为培养基的碳源更有利于该菌株生长。因此，我们认为：碳源替代方面，用玉米
50%替代葡萄糖，既可以降低培养基的价格，又利于菌株生长，同时也不会使制
成的替代培养基因过于黏稠而不利于菌株培养；而氮源替代方面，用豆粕50%替
代原有氮源比100%替代更适合菌株生长，但100%替代可极大程度降低培养基价
格。因此，在进一步实验时，采用碳源50%替代、氮源替代比例设置成50%、75%
和100%三个梯度，进行廉价培养基的筛选。
3.3 氮源碳源双替代试验 氮源碳源双替代培养基培养计数的结果，3种替代培养基
计数结果从高到低依次是MRS-C50N50、MRS-C50N75、MRS-C50N100，其
中MRS-C50N50和MRS-C50N75的培养计数结果比基础MRS培养基略高，而
MRS-C50N100的结果则略低，3种双替代培养基中MRS-C50N50最适合菌株
生长。随着氮源替代比例增加，得到的活菌数略有下降，但活菌数仍可达到109
cfu/mL，仍高于益生菌制剂要求的有效活菌量[10]。
MRS-C50N50、MRS-C50N75、MRS-C50N100 3种双替代培养基的价格分别
为基础培养基的53%、30%、7%。结合三者的计数结果可知，MRS-C50N100
可以极大降低培养基的成本，同时活菌得率可达到益生菌制剂要求的有效活菌量。
因此，建议选择MRS-C50N100替代培养基进行屎肠球菌工业化发酵，制备屎肠
球菌微胶囊制剂。
4 结论
该研究用饲料原料中的玉米和豆粕替代MRS基础培养基中的碳源和氮源，经过培
养和计数，证明二者作为氮源和碳源制成的替代培养基适合屎肠球菌生长。
进一步试验中，从营养和价格两个方面综合考虑，筛选适合进行工业化发酵屎肠球
菌的MRS廉价培养基，最终确定了碳源替代比例为50%；而氮源方面，当替代
量达到100%时培养基的价格可大幅度降低，而活菌得率仅会略有下降，仍可达到
益生菌制剂要求的有效活菌量。因此，选择MRS-C50N100替代培养基进行屎肠
球菌发酵，在保证活菌得率的情况下，可以极大降低乳酸菌制剂的制作成本，有利
于屎肠球菌微胶囊制剂的工业化生产和其在养殖行业的推广应用。
参考文献
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