2024年10月27日发(作者：尉迟晔)
分析检测
色谱及质谱检测技术在食品真菌毒素检测中的
应用研究
黄志强
（钟祥市公共检验检测中心，湖北钟祥 431900）
摘 要：为了检测食品中的真菌毒素，本文对其检测流程及步骤进行深入分析，并提出同时使用色谱及
质谱检测技术对粮食承储企业稻谷的真菌毒素进行检测。研究发现，在加标量为2～800
μ
g·kg
-1
时，粮食中
6种真菌毒素的平均回收率为75.5%～102.5%，批内的相对标准偏差为3.7%～9.7%，均满足食品理化检测
要求。由此可知，色谱及质谱检测技术适用于对粮食中多组分真菌毒素进行定量与定性检测。
关键词：色谱；质谱检测；真菌毒素；免疫亲和柱
Application of Chromatographic and Mass Spectrometry in
the Detection of Mycotoxins in Food
HUANG Zhiqiang
(Zhongxiang Public Inspection and Testing Center, Zhongxiang 431900, China)
Abstract:
In order to detect mycotoxins in food, this paper deeply analyzes the detection process and steps, and
proposes to simultaneously use chromatography and mass spectrometry detection technology to detect mycotoxins
in grain storage enterprises. Research has found that when adding scalars ranging from 2～800 μg·kg
-1
, the average
recoveries of six mycotoxins in grain were 75.5%～102.5%, and the relative standard deviation within the batch was
3.7%～9.7%. All of them met the requirements of food physical and chemical detection.
Keywords:
chromatography; mass spectrometry detection; mycotoxin; immunoaffinity column
真菌毒素是由真菌产生的具有毒性的次级代谢
产物，其通常会影响食品或饲料的品质和安全性，
因此对人们的健康有一定的影响。同时，真菌毒素
也是食品、农产品、药用植物及其制剂的重要污染
其中有200多种产毒丝状真菌，如曲霉属、镰刀菌
属和青霉属
[2]
。黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉等某
其中B
1
在粮食污染中较为常见，且其致癌性与毒性
最强，容易导致肝癌。因此，黄曲霉素B
1
可作为食
品安全性检验的一个重要指标。赭曲霉毒素是由鲜
绿青霉、赭曲霉等代谢产生
[3]
，其中以赭曲霉毒素A
的毒性最强，容易导致肠炎、肾病，甚至会诱发肾脏
癌变。伏马毒素是由串珠镰刀菌等霉菌代谢所产生
毒性不强，但仍会对哺乳类动物产生一定的致病性。
在适宜的环境下，真菌毒素会侵染农作物，对人与畜
的健康造成了极大的威胁
[6-7]
。高效液相色谱法（High
Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种
的定性与定量测定。然而传统的HPLC在抗干扰能
力、通用性方面上的表现较差，因此液相色谱质谱
LC-MS）技术得到了飞速发展。本文对食品中真
菌毒素的检测方法进行了深入分析，旨在为食品
中真菌毒素的安全风险评价监测提供理论与技术
支持。
源之一
[1]
。目前，已经发现了400种以上的真菌毒素，基于传统色谱的分离分析方法，可同时实现真菌毒素
些菌株产生的一种毒素，含有B
1
、G
1
等羟基化代谢物，联用技术（Liquid Chromatograph Mass Spectrometer，
1 材料与方法
的一类真菌霉毒素，其中以伏马毒素B的毒性最强
[4]
。
1.1 实验仪器
LC-20AT型高效液相色谱仪，日本SHIMADZU
单端孢霉烯族化合物是由头孢菌、镰孢菌等代谢产
生的有毒代谢物
[5]
。玉米赤霉烯酮是一种从禾谷镰孢
公司；API 4000 Q Trap质谱仪，配电喷雾离子源
和其他镰刀菌属真菌中分解出来的次生产物，虽然
（ESI）：美国ABI公司；振荡器，上海康华生化仪
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
Apr.2023
CHINA FOOD SAFETY
99
分析检测
器制造有限公司；高速离心机，美国BECKMAN公司；
1.3.3 提取液净化
为了降低探测过程中的干扰，提高实验检测的
准确度。在提取待测样本前需要进行净化处理。改进
型固相萃取法的原理与固相萃取法相似，主要方法包
括免疫亲和柱（Immunoaffinity Chromatography，ICA）
与多功能净化柱（Multifunctional Column Cleanup，
MFC）。ICA又被称为免疫亲和色谱法，其利用抗原-
抗体反应，有选择性地将被测物从复杂的环境中分离
出来，再将抗体与不溶解的固体高分子进行共价结
合，填充到色谱上
[8]
。此次实验利用免疫亲和色谱法
对样品进行纯化，取提取液32 mL上样。复合免疫亲
和柱中液体排干后，上样2 mL洗脱剂，静置3 min。
然后以每秒1滴的速度进行洗脱，并将其置于5 mL
的离心试管中，待洗脱液在复合免疫亲和柱中放净
后，取1 mL的洗脱放液，静置3 min。再以每秒1滴
的速度进行洗脱，并将收集到的洗脱液置于5 mL的
离心管中。按照
V
乙酸
∶
V
甲醇
=2∶98的混合溶液进行
两次洗脱。将所采集的洗提物在50
℃
用氮气进行干
燥处理，并用1 mL 50%甲醇进行定容，即可获得待
测液。
N-EVAP水浴氮吹仪，美国OA公司；Milli-Q超纯
水器，美国Millipore公司。
1.2 试剂与材料
黄曲霉毒素B
1
（Aflatoxin B
1
，AFB
1
）标准储备
液、呕吐毒素（Deoxynivalenol，DON）标准储备液、
玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）标准储备液、赭
曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）标准储备液、伏马
毒素B
1
（Fumonisin B
1
，FB
1
）标准储备液、伏马毒素
B
2
（Fumonisin B
2
，FB
2
）标准储备液；甲酸﹑乙酸、
甲醇和乙腈等均为色谱纯；氯化钠、氯化钾﹑磷酸
二氢钾和磷酸氢二钠等均为分析纯；What-man 934-
AH玻璃微纤维滤纸；6种毒素复合免疫亲和柱。
1.3 方法
1.3.1 分析条件
（1）色谱条件。流动相A（甲醇）、流动相B
（将1 nL甲酸和0.0 771 g的醋酸铵加水溶解后置于
1 000 mL的容量瓶中，并加入高纯水定容至刻度线
即得）
[8]
；色谱柱为C
18
（100 mm
×
2.1 mm，1.7 µm）；
柱温：40
℃
；进样量：4 µL；流速0.3 mL·min
-1
。
（2）质谱条件。离子源采用电喷雾离子源，其具
有独特的离子碰撞反应，可以有效进行元素分析。
质谱扫描方式采用多重反应监测模式，通过多个不
同的反应来监测物质的存在，可以实现多元素的检
测和分析。
1.3.2 样品提取
粮食中多组分真菌毒素的萃取溶液主要为甲醇
和乙腈等有机溶剂与水的混合溶液
[7]
。实验将两种
谷物混匀，使其粒度小于2 mm，选择
V
乙腈
∶
V
水
∶
V
甲醇
=80∶19∶1的混合液作为提取液。称取两
个25 g的粮食样品，加入100 mL的萃取剂。在
10 000 r·min
-1
以上的速度下快速均匀2 min，或在
200～300 r·min
-1
的摇床上猛烈振动30 min。然后
以4 000 r·min
-1
的速度离心5 min，将试样的上清
液放进洁净的容器中。分别向离心后的残渣中加入
100 mL的
V
水
∶
V
甲醇
=20∶80的混合溶液，再
次进行振荡操作。再以4 000 r·min
-1
的速度离心
5 min，将残余物的上清移到上述的干净的容器内，
混合摇匀为上清液。称取8 g NaCl、0.2 g KCl、0.2 g
KH
2
PO
4
，以及1.16 g Na
2
HPO
4
·12H
2
O，用800 mL的
超纯水溶解后，将其溶液定容到1 L，作为稀释液。
2 结果与分析
此次实验采用色谱及质谱检测技术对粮食承储
企业稻谷的真菌毒素进行检测。先对样品进行预处
理，用微纤维滤纸过滤，得到提取液。然后用复合
免疫亲和柱对其进行净化处理，获得待测液。最后
以50%甲醇为溶剂制备6种不同的混合标准液。如
图1所示，为6种真菌毒素的质谱多反应监测（Multiple
Reaction Monitoring，MRM）色谱图。
由图1可知，脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素
B
1
、伏马毒素B
1
、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A和
伏马毒素B
2
这6种真菌毒素的色谱峰峰形尖锐，分
离度好，适合进行定性定量。根据6种真菌毒素在质
谱MRM模式下的响应强度，配制出不同浓度的混合
标准溶液。按照样品前处理方法处理后，再进行测定
分析。
由表1可知，脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒
素B
1
、伏马毒素B
1
、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素
A、伏马毒素B
2
这6种真菌毒素的检出限为0.5～
50.0
μ
g·kg
-1
。取粮食承储企业稻谷的空白粮食样品，
分别添加表1中不同浓度的6种真菌毒素混合标准
此外，取混合均匀的上清液10 mL加入70 mL稀释液，
溶液，按照样品处理步骤进行操作，得到的平均回
混合均匀，再用微型滤纸滤取后，即可获得提取物。
收率与相对偏差值结果如表2所示。
100
食品安全导刊 2023年4月（下）
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
分析检测
5.0e
4
4.5e
4
6: MRM of 2 Channels ES+4.37e
4
DONAFB
1
FB
1
ZEN
OTA
FB
2
4.0e
4
3.5e
4
离
子
强
度
/
C
P
S
3.0e
4
2.5e
4
2.0e
4
2.5e
4
1.0e
4
0.5e
4
0.0e
0
3:004:005:006:007:008:009:00
时间/min
10:0011:0012:0013:0014:0015:00
图1 6种真菌毒素MRM色谱图
表1 6种真菌毒素的检出限
检测对象
AFB
1
DON
ZEN
OTA
FB
1
FB
2
决定系数
0.997 8
0.997 8
0.998 7
0.998 1
0.995 2
0.996 1
线性范围/
μ
g·kg
-1
0.5～80.0
100～8 000
20～1 400
4～160
20～800
40～1000
检出限/
μ
g·kg
-1
0.5
50.0
10.0
2.0
12.0
6.5
表2 6种真菌毒素平均回收率与相对偏差值结算结果
检测项目浓度/
μ
g·kg
-1
平均回收率/%
2
AFB
1
4
8
100
DON400
800
20
ZEN50
100
10
OTA20
80
40
FB
1
80
160
40
FB
2
60
120
92.2
85.2
83.1
102.5
102.2
93.2
85.2
80.2
78.5
79.2
78.4
83.6
75.5
76.2
80.5
80.2
82.5
86.6
相对偏差值/%
9.7
5.7
5.1
4.2
3.8
4.2
5.6
5.5
7.3
6.4
4.2
4.6
7.2
7.5
5.8
6.3
3.7
6.2
收率为75.5%～102.5%，批内的相对标准偏差为
3.7%～9.7%。实验结果表明，研究采用色谱及质谱
检测技术测得粮食承储企业稻谷的毒素结果满足食
品理化检测要求。
3 结论与讨论
为了检测食品中的真菌毒素和代谢物的污染情
况，对真菌毒素的检测流程以及各项操作步骤进行分
析，提出使用色谱及质谱检测技术对粮食承储企业稻
谷的真菌毒素进行检测。结果表明，AFB
1
、DON、
ZEN、OTA、FB
1
和FB
2
这6种真菌毒素的色谱峰峰
形尖锐，分离度好，适合进行定性定量分析，其检
出限在0.5～50.0
μ
g·kg
-1
。6种真菌毒素加标量在2～
800
μ
g·kg
-1
时，其平均回收率在75.5%～102.5%，
批内的相对标准偏差为3.7%～9.7%。这表明研
究采用色谱及质谱检测技术满足食品理化检测
要求。
参考文献
[1]胡文尧,龙美名,胡玉斐,等.食品中真菌毒素样
（下转第120页）
由表2可知，此次实验检测的粮食样品中6
种真菌毒素加标量在2～800
μ
g·kg
-1
时，平均回
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
Apr.2023
CHINA FOOD SAFETY
101
分析检测
生态调节相关的具体的发生机制进一步探究。
参考文献
[1]张强,林菲菲,罗顺斌,等.2015—2019年丽水
地区细菌性腹泻病原分布及耐药性分析[J].上海预防医
学,2022,34(9):879-883.
[2]单子鸿,李情情,王舒颖,等.粪便钙卫蛋白联
合血清降钙素原对儿童细菌感染性腹泻和病毒感染性腹
泻的鉴别诊断价值[J].国际检验医学杂志,2021,42(24):
3018-3021.
[3]王柳,李淑芳.炎调方对脓毒症大鼠肠道微生态环
境的影响研究[J].中国中医急症,2021,30(11):1916-1919.
[4]刘芬,谢思玲,刘振云,等.六堡茶水提物对
小鼠腹泻及肠道菌群的影响[J].食品安全质量检测学
（b）小鼠血清VIP水平
##表示与正常组相比差异极显著，
P
＜0.01；*表示与模
型组相比差异显著，
P
＜0.05，**表示与模型组相比差异极显
著，
P
＜0.01。
报,2021,12(23):9165-9170.
[5]高健梅.呼吸系统危重症患者抗生素相关腹泻的临
床观察[J].中国医药指南,2017,15(3):52-53.
[6]傅骏青,于艳艳,田洪芸,等.我国蜂蜜抽检中真
实性检验标准现状[J].食品工业,2022,43(11):242-246.
[7]刘相坤.养蜂须知:蜂蜜的作用[J].中国蜂
业,2020,71(2):23.
[8]欧阳军.不同蜜源蜂蜜的医疗保健功效[J].中国蜂
业,2018,69(12):50-52.
[9]WEI W,WU X M,LI mental methodology
of pharmacology[M].Beijing: People
’
s Medical Publishing
House,2010.
[10]曹玲芝,马利芹,王丽叶,等.建立动物腹泻模型
的研究进展[J].安徽农业科学,2008,36(26):11383-11385.
[11]姜雪萍,谷仿丽,刘枫,等.水苏多糖对小鼠胃肠
道调节作用研究[J].皖西学院学报,2016,32(2):16-18.
图4 各组小鼠胃动素、血管活性肠肽含量
3 结论与讨论
综上所述，本试验采用注射大肠埃希菌溶液，采
用大肠埃希菌注射塑造相关性腹泻小鼠模型，通过测
定各组小鼠体质量、腹泻率和腹泻指数、小肠推进率
和血清胃肠激素含量，发现FFJH可以改善大肠杆菌
所致腹泻小鼠的体重、腹泻率及血清胃肠激素等相关
指标，对机体有一定的修复作用。本研究也存在一定
不足之处，实验虽然证明了FFJH可以通过其专用特
性及改善肠道微生态能够改善腹泻，却并未对肠道微
（上接第101页）
制品呕吐毒素污染水平快速测定中的应用[J].食品科
学,2019,40(2):293-297.
[6]李波,刘秀斌,曾建国.真菌毒素与隐蔽型真菌毒
素研究进展[J].饲料研究,2020,43(4):94-98.
[7]张明珠,张丽芬,陈复生,等.玉米醇溶蛋白的超
声辅助酶法提取工艺及不同提取方法对其结构和功能特性
的影响[J].中国油脂,2021,46(4):26-32.
[8]张媛媛,胡燕珍,黄斌,等.以离子液体为流动相
添加剂在天然产物色谱分析中的应用研究进展[J].药物分
析杂志,2022,42(10):1690-1696.
品前处理方法的研究进展[J].色谱,2020,38(3):307-316.
[2]李凤华,李作华,杨丽,等.药食同源中药材中16种
真菌毒素的测定与分析[J].食品工业科技,2022,43(9):268-275.
[3]叶林链,王少敏,周恒,等.高效液相荧光色谱法测
定坤宝丸中赭曲霉毒素A[J].中成药,2022,44(4):1264-1266.
[4]李琴珵,石洁,何康来,等.化学防控玉米蛀穗害
虫对减轻拟轮枝镰孢穗腐病及伏马毒素的作用[J].中国农
业科学,2021,54(17):3702-3711.
[5]沈飞,刘潇,裴斐,等.ATR-FTIR在小麦及其
120
食品安全导刊 2023年4月（下）
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
2024年10月27日发(作者：尉迟晔)
分析检测
色谱及质谱检测技术在食品真菌毒素检测中的
应用研究
黄志强
（钟祥市公共检验检测中心，湖北钟祥 431900）
摘 要：为了检测食品中的真菌毒素，本文对其检测流程及步骤进行深入分析，并提出同时使用色谱及
质谱检测技术对粮食承储企业稻谷的真菌毒素进行检测。研究发现，在加标量为2～800
μ
g·kg
-1
时，粮食中
6种真菌毒素的平均回收率为75.5%～102.5%，批内的相对标准偏差为3.7%～9.7%，均满足食品理化检测
要求。由此可知，色谱及质谱检测技术适用于对粮食中多组分真菌毒素进行定量与定性检测。
关键词：色谱；质谱检测；真菌毒素；免疫亲和柱
Application of Chromatographic and Mass Spectrometry in
the Detection of Mycotoxins in Food
HUANG Zhiqiang
(Zhongxiang Public Inspection and Testing Center, Zhongxiang 431900, China)
Abstract:
In order to detect mycotoxins in food, this paper deeply analyzes the detection process and steps, and
proposes to simultaneously use chromatography and mass spectrometry detection technology to detect mycotoxins
in grain storage enterprises. Research has found that when adding scalars ranging from 2～800 μg·kg
-1
, the average
recoveries of six mycotoxins in grain were 75.5%～102.5%, and the relative standard deviation within the batch was
3.7%～9.7%. All of them met the requirements of food physical and chemical detection.
Keywords:
chromatography; mass spectrometry detection; mycotoxin; immunoaffinity column
真菌毒素是由真菌产生的具有毒性的次级代谢
产物，其通常会影响食品或饲料的品质和安全性，
因此对人们的健康有一定的影响。同时，真菌毒素
也是食品、农产品、药用植物及其制剂的重要污染
其中有200多种产毒丝状真菌，如曲霉属、镰刀菌
属和青霉属
[2]
。黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉等某
其中B
1
在粮食污染中较为常见，且其致癌性与毒性
最强，容易导致肝癌。因此，黄曲霉素B
1
可作为食
品安全性检验的一个重要指标。赭曲霉毒素是由鲜
绿青霉、赭曲霉等代谢产生
[3]
，其中以赭曲霉毒素A
的毒性最强，容易导致肠炎、肾病，甚至会诱发肾脏
癌变。伏马毒素是由串珠镰刀菌等霉菌代谢所产生
毒性不强，但仍会对哺乳类动物产生一定的致病性。
在适宜的环境下，真菌毒素会侵染农作物，对人与畜
的健康造成了极大的威胁
[6-7]
。高效液相色谱法（High
Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种
的定性与定量测定。然而传统的HPLC在抗干扰能
力、通用性方面上的表现较差，因此液相色谱质谱
LC-MS）技术得到了飞速发展。本文对食品中真
菌毒素的检测方法进行了深入分析，旨在为食品
中真菌毒素的安全风险评价监测提供理论与技术
支持。
源之一
[1]
。目前，已经发现了400种以上的真菌毒素，基于传统色谱的分离分析方法，可同时实现真菌毒素
些菌株产生的一种毒素，含有B
1
、G
1
等羟基化代谢物，联用技术（Liquid Chromatograph Mass Spectrometer，
1 材料与方法
的一类真菌霉毒素，其中以伏马毒素B的毒性最强
[4]
。
1.1 实验仪器
LC-20AT型高效液相色谱仪，日本SHIMADZU
单端孢霉烯族化合物是由头孢菌、镰孢菌等代谢产
生的有毒代谢物
[5]
。玉米赤霉烯酮是一种从禾谷镰孢
公司；API 4000 Q Trap质谱仪，配电喷雾离子源
和其他镰刀菌属真菌中分解出来的次生产物，虽然
（ESI）：美国ABI公司；振荡器，上海康华生化仪
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
Apr.2023
CHINA FOOD SAFETY
99
分析检测
器制造有限公司；高速离心机，美国BECKMAN公司；
1.3.3 提取液净化
为了降低探测过程中的干扰，提高实验检测的
准确度。在提取待测样本前需要进行净化处理。改进
型固相萃取法的原理与固相萃取法相似，主要方法包
括免疫亲和柱（Immunoaffinity Chromatography，ICA）
与多功能净化柱（Multifunctional Column Cleanup，
MFC）。ICA又被称为免疫亲和色谱法，其利用抗原-
抗体反应，有选择性地将被测物从复杂的环境中分离
出来，再将抗体与不溶解的固体高分子进行共价结
合，填充到色谱上
[8]
。此次实验利用免疫亲和色谱法
对样品进行纯化，取提取液32 mL上样。复合免疫亲
和柱中液体排干后，上样2 mL洗脱剂，静置3 min。
然后以每秒1滴的速度进行洗脱，并将其置于5 mL
的离心试管中，待洗脱液在复合免疫亲和柱中放净
后，取1 mL的洗脱放液，静置3 min。再以每秒1滴
的速度进行洗脱，并将收集到的洗脱液置于5 mL的
离心管中。按照
V
乙酸
∶
V
甲醇
=2∶98的混合溶液进行
两次洗脱。将所采集的洗提物在50
℃
用氮气进行干
燥处理，并用1 mL 50%甲醇进行定容，即可获得待
测液。
N-EVAP水浴氮吹仪，美国OA公司；Milli-Q超纯
水器，美国Millipore公司。
1.2 试剂与材料
黄曲霉毒素B
1
（Aflatoxin B
1
，AFB
1
）标准储备
液、呕吐毒素（Deoxynivalenol，DON）标准储备液、
玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）标准储备液、赭
曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）标准储备液、伏马
毒素B
1
（Fumonisin B
1
，FB
1
）标准储备液、伏马毒素
B
2
（Fumonisin B
2
，FB
2
）标准储备液；甲酸﹑乙酸、
甲醇和乙腈等均为色谱纯；氯化钠、氯化钾﹑磷酸
二氢钾和磷酸氢二钠等均为分析纯；What-man 934-
AH玻璃微纤维滤纸；6种毒素复合免疫亲和柱。
1.3 方法
1.3.1 分析条件
（1）色谱条件。流动相A（甲醇）、流动相B
（将1 nL甲酸和0.0 771 g的醋酸铵加水溶解后置于
1 000 mL的容量瓶中，并加入高纯水定容至刻度线
即得）
[8]
；色谱柱为C
18
（100 mm
×
2.1 mm，1.7 µm）；
柱温：40
℃
；进样量：4 µL；流速0.3 mL·min
-1
。
（2）质谱条件。离子源采用电喷雾离子源，其具
有独特的离子碰撞反应，可以有效进行元素分析。
质谱扫描方式采用多重反应监测模式，通过多个不
同的反应来监测物质的存在，可以实现多元素的检
测和分析。
1.3.2 样品提取
粮食中多组分真菌毒素的萃取溶液主要为甲醇
和乙腈等有机溶剂与水的混合溶液
[7]
。实验将两种
谷物混匀，使其粒度小于2 mm，选择
V
乙腈
∶
V
水
∶
V
甲醇
=80∶19∶1的混合液作为提取液。称取两
个25 g的粮食样品，加入100 mL的萃取剂。在
10 000 r·min
-1
以上的速度下快速均匀2 min，或在
200～300 r·min
-1
的摇床上猛烈振动30 min。然后
以4 000 r·min
-1
的速度离心5 min，将试样的上清
液放进洁净的容器中。分别向离心后的残渣中加入
100 mL的
V
水
∶
V
甲醇
=20∶80的混合溶液，再
次进行振荡操作。再以4 000 r·min
-1
的速度离心
5 min，将残余物的上清移到上述的干净的容器内，
混合摇匀为上清液。称取8 g NaCl、0.2 g KCl、0.2 g
KH
2
PO
4
，以及1.16 g Na
2
HPO
4
·12H
2
O，用800 mL的
超纯水溶解后，将其溶液定容到1 L，作为稀释液。
2 结果与分析
此次实验采用色谱及质谱检测技术对粮食承储
企业稻谷的真菌毒素进行检测。先对样品进行预处
理，用微纤维滤纸过滤，得到提取液。然后用复合
免疫亲和柱对其进行净化处理，获得待测液。最后
以50%甲醇为溶剂制备6种不同的混合标准液。如
图1所示，为6种真菌毒素的质谱多反应监测（Multiple
Reaction Monitoring，MRM）色谱图。
由图1可知，脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素
B
1
、伏马毒素B
1
、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A和
伏马毒素B
2
这6种真菌毒素的色谱峰峰形尖锐，分
离度好，适合进行定性定量。根据6种真菌毒素在质
谱MRM模式下的响应强度，配制出不同浓度的混合
标准溶液。按照样品前处理方法处理后，再进行测定
分析。
由表1可知，脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒
素B
1
、伏马毒素B
1
、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素
A、伏马毒素B
2
这6种真菌毒素的检出限为0.5～
50.0
μ
g·kg
-1
。取粮食承储企业稻谷的空白粮食样品，
分别添加表1中不同浓度的6种真菌毒素混合标准
此外，取混合均匀的上清液10 mL加入70 mL稀释液，
溶液，按照样品处理步骤进行操作，得到的平均回
混合均匀，再用微型滤纸滤取后，即可获得提取物。
收率与相对偏差值结果如表2所示。
100
食品安全导刊 2023年4月（下）
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
分析检测
5.0e
4
4.5e
4
6: MRM of 2 Channels ES+4.37e
4
DONAFB
1
FB
1
ZEN
OTA
FB
2
4.0e
4
3.5e
4
离
子
强
度
/
C
P
S
3.0e
4
2.5e
4
2.0e
4
2.5e
4
1.0e
4
0.5e
4
0.0e
0
3:004:005:006:007:008:009:00
时间/min
10:0011:0012:0013:0014:0015:00
图1 6种真菌毒素MRM色谱图
表1 6种真菌毒素的检出限
检测对象
AFB
1
DON
ZEN
OTA
FB
1
FB
2
决定系数
0.997 8
0.997 8
0.998 7
0.998 1
0.995 2
0.996 1
线性范围/
μ
g·kg
-1
0.5～80.0
100～8 000
20～1 400
4～160
20～800
40～1000
检出限/
μ
g·kg
-1
0.5
50.0
10.0
2.0
12.0
6.5
表2 6种真菌毒素平均回收率与相对偏差值结算结果
检测项目浓度/
μ
g·kg
-1
平均回收率/%
2
AFB
1
4
8
100
DON400
800
20
ZEN50
100
10
OTA20
80
40
FB
1
80
160
40
FB
2
60
120
92.2
85.2
83.1
102.5
102.2
93.2
85.2
80.2
78.5
79.2
78.4
83.6
75.5
76.2
80.5
80.2
82.5
86.6
相对偏差值/%
9.7
5.7
5.1
4.2
3.8
4.2
5.6
5.5
7.3
6.4
4.2
4.6
7.2
7.5
5.8
6.3
3.7
6.2
收率为75.5%～102.5%，批内的相对标准偏差为
3.7%～9.7%。实验结果表明，研究采用色谱及质谱
检测技术测得粮食承储企业稻谷的毒素结果满足食
品理化检测要求。
3 结论与讨论
为了检测食品中的真菌毒素和代谢物的污染情
况，对真菌毒素的检测流程以及各项操作步骤进行分
析，提出使用色谱及质谱检测技术对粮食承储企业稻
谷的真菌毒素进行检测。结果表明，AFB
1
、DON、
ZEN、OTA、FB
1
和FB
2
这6种真菌毒素的色谱峰峰
形尖锐，分离度好，适合进行定性定量分析，其检
出限在0.5～50.0
μ
g·kg
-1
。6种真菌毒素加标量在2～
800
μ
g·kg
-1
时，其平均回收率在75.5%～102.5%，
批内的相对标准偏差为3.7%～9.7%。这表明研
究采用色谱及质谱检测技术满足食品理化检测
要求。
参考文献
[1]胡文尧,龙美名,胡玉斐,等.食品中真菌毒素样
（下转第120页）
由表2可知，此次实验检测的粮食样品中6
种真菌毒素加标量在2～800
μ
g·kg
-1
时，平均回
Copyright©博看网. All Rights Reserved.
Apr.2023
CHINA FOOD SAFETY
101
分析检测
生态调节相关的具体的发生机制进一步探究。
参考文献
[1]张强,林菲菲,罗顺斌,等.2015—2019年丽水
地区细菌性腹泻病原分布及耐药性分析[J].上海预防医
学,2022,34(9):879-883.
[2]单子鸿,李情情,王舒颖,等.粪便钙卫蛋白联
合血清降钙素原对儿童细菌感染性腹泻和病毒感染性腹
泻的鉴别诊断价值[J].国际检验医学杂志,2021,42(24):
3018-3021.
[3]王柳,李淑芳.炎调方对脓毒症大鼠肠道微生态环
境的影响研究[J].中国中医急症,2021,30(11):1916-1919.
[4]刘芬,谢思玲,刘振云,等.六堡茶水提物对
小鼠腹泻及肠道菌群的影响[J].食品安全质量检测学
（b）小鼠血清VIP水平
##表示与正常组相比差异极显著，
P
＜0.01；*表示与模
型组相比差异显著，
P
＜0.05，**表示与模型组相比差异极显
著，
P
＜0.01。
报,2021,12(23):9165-9170.
[5]高健梅.呼吸系统危重症患者抗生素相关腹泻的临
床观察[J].中国医药指南,2017,15(3):52-53.
[6]傅骏青,于艳艳,田洪芸,等.我国蜂蜜抽检中真
实性检验标准现状[J].食品工业,2022,43(11):242-246.
[7]刘相坤.养蜂须知:蜂蜜的作用[J].中国蜂
业,2020,71(2):23.
[8]欧阳军.不同蜜源蜂蜜的医疗保健功效[J].中国蜂
业,2018,69(12):50-52.
[9]WEI W,WU X M,LI mental methodology
of pharmacology[M].Beijing: People
’
s Medical Publishing
House,2010.
[10]曹玲芝,马利芹,王丽叶,等.建立动物腹泻模型
的研究进展[J].安徽农业科学,2008,36(26):11383-11385.
[11]姜雪萍,谷仿丽,刘枫,等.水苏多糖对小鼠胃肠
道调节作用研究[J].皖西学院学报,2016,32(2):16-18.
图4 各组小鼠胃动素、血管活性肠肽含量
3 结论与讨论
综上所述，本试验采用注射大肠埃希菌溶液，采
用大肠埃希菌注射塑造相关性腹泻小鼠模型，通过测
定各组小鼠体质量、腹泻率和腹泻指数、小肠推进率
和血清胃肠激素含量，发现FFJH可以改善大肠杆菌
所致腹泻小鼠的体重、腹泻率及血清胃肠激素等相关
指标，对机体有一定的修复作用。本研究也存在一定
不足之处，实验虽然证明了FFJH可以通过其专用特
性及改善肠道微生态能够改善腹泻，却并未对肠道微
（上接第101页）
制品呕吐毒素污染水平快速测定中的应用[J].食品科
学,2019,40(2):293-297.
[6]李波,刘秀斌,曾建国.真菌毒素与隐蔽型真菌毒
素研究进展[J].饲料研究,2020,43(4):94-98.
[7]张明珠,张丽芬,陈复生,等.玉米醇溶蛋白的超
声辅助酶法提取工艺及不同提取方法对其结构和功能特性
的影响[J].中国油脂,2021,46(4):26-32.
[8]张媛媛,胡燕珍,黄斌,等.以离子液体为流动相
添加剂在天然产物色谱分析中的应用研究进展[J].药物分
析杂志,2022,42(10):1690-1696.
品前处理方法的研究进展[J].色谱,2020,38(3):307-316.
[2]李凤华,李作华,杨丽,等.药食同源中药材中16种
真菌毒素的测定与分析[J].食品工业科技,2022,43(9):268-275.
[3]叶林链,王少敏,周恒,等.高效液相荧光色谱法测
定坤宝丸中赭曲霉毒素A[J].中成药,2022,44(4):1264-1266.
[4]李琴珵,石洁,何康来,等.化学防控玉米蛀穗害
虫对减轻拟轮枝镰孢穗腐病及伏马毒素的作用[J].中国农
业科学,2021,54(17):3702-3711.
[5]沈飞,刘潇,裴斐,等.ATR-FTIR在小麦及其
120
食品安全导刊 2023年4月（下）
Copyright©博看网. All Rights Reserved.