2024年3月8日发(作者：乐正绿海)
HPV分型试剂盒
1、HPV目前市场上主要产品：
杂交法（达安19、凯普21、亚能23、透景26）；实时荧光PCR（之江13种高危分型、港龙凯普亚能13种高危不分型、达安8个型定量）；第二代杂交捕获法（HC2）等
2、操作方法：
①HPV所有厂家标本处理操作流程（包括之江生物，都大同小异）：
②HPV实验：
A、杂交法：首先加样上PCR仪做扩增，上机时间大约一个半小时左右。PCR完成后做杂交，目前市场上有手工杂交和使用杂交仪杂交。操作时间2-4个小时。
B、第二代杂交捕获法（HC2）:原理是利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测
DHA
分解
45ntin
DNA-RNA
杂交
60min
抗体
捕获
60min
化学发
光检测
30min
计算机
判读
15minfa
C、荧光定量PCR：直接上机通过荧光信号累积实时监测整个PCR进程，之江生物是用多重PCR对标本进行准确的13个高危型的具体分型，其他不具体分型。
举例之江产品:
之江八管双通道仪器（双色荧光PCR仪器都可以用）：
1112
Mix1
Mix2
Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
Mix3
Mix4
Mix5
Mix6
Mix7
Mix8
Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5
Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6
Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7
Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8
一排八管做一个标本即可具体分型!
结果判断:
HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道Ct值W
35,结果判断为
若VIC通道Ct值W
35,结果判断为
HPV56
HPV45
HPV59
HPV51
HPV52
Mix1
Mix2
Mix3
Mix4
Mix5
Mix6
Mix7
Mix8
16+56
18+45
35+59
39+51
58+52
31
33
68
HPV16
HPV18
HPV35
HPV39
HPV58
HPV31
HPV33
HPV68
1112
②四管四通道仪器（ABI7500、罗氏480、伯乐CFX96、SLAN96孔等四色荧光PCR仪器）:
A
B
C
D
Mix1
Mix2
Mix3
Mix4
Mix1 Mix1 Mix1 Mix1
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
四管做一个标本即可具体分型!
结果判断：
HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道
Ct值W35，结
若VIC通道Ct值W35，结果判断为
若6l0通道Ct值W35，结果判断为
若670通道Ct值W35，结果判断为
HPV31
HPV68
果判断为
Mixl
Mix2
Mix3
l6+56
l8+52+58+3l
35+45+33+68
39+5l+59
Mixl Mixl Mixl
HPVl6
HPVl8
HPV35
HPV39
Mixl Mixl
HPV56
HPV52
HPV45
HPV5l
Mixl Mixl Mixl
HPV58
HPV33
HPV59
Mixl Mixl Mixl Mixl
Mix4
E
F
G
H
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
3、产品分析比较：
之江HPV试剂
荧光PCR法
13种高危型具体分型
1.5-2小时
HC-II试剂
检测方法
检测HPV分型
检测时间
操作
检测过程
安全性
检测仪器
灵敏度
检测方式
检测通量
结果分析
样本类型
实验室要求
一代杂交捕获核酸检测技术
不能分型
4小时以上
简单
PCR扩增，仪器自动完成
繁琐（涉及10多种试剂配制等）
多步加液
多种试剂，操作过程接触有毒物质
分子杂交仪等专用仪器
较灵敏
不进行PCR扩增，无污染
通量高
人工阅读或需专用阅读仪及软件
生殖道分泌物、宫颈细胞等
不需
凯普HPV试剂
核酸扩增及导流杂交技术
4-8小时
25ul
lul
PCR仪器及分子杂交仪
21型
闭管反应，安全性高
PCR仪器
高灵敏
闭管检测，有效防止污染
基本已适合目前医院标本量
仪器自动分析
生殖道分泌物、宫颈细胞等
PCR实验室验收
之江HPV试剂
检测方法
检测时间
PCR反应体积
PCR扩增模板
荧光PCR法
1.5-2小时
40ul
4ul
PCR仪器 检测仪器
检测HPV型别
灵敏度
样本类型
检测方式
检测通量
结果分析
生物安全
多种混合型
高危13型
咼灵敏
生殖道分泌物、宫颈细胞等
闭管检测，有效防止污染
基本适合目前医院标本量
仪器自动分析
闭管反应，安全性高
抗干扰能力强
较灵敏
生殖道分泌物、宫颈细胞等
杂交为开放式反应，易产生交叉污染
通量高
人工阅读或需专用阅读仪及软件
杂交过程会接触有危险物质如：NBT/BCPI有毒溶液等
干扰，不宜检测
4、上海之江HPV优劣势:
• 优点：
① 闭管PCR操作，避免扩增污染
② 能够对13个高危型精确分型
③ 灵敏度高，操作简单，减少了杂交的操作程序，一个实验大约2个小时内完成
④ 针对开放荧光PCR检测系统，无需额外增加设备，有人员培训基础。
⑤ 可以相对定量：Ct值M30(+)；30>Ct值M24(++)；Ct值V24(+++)
• 缺点：
① 检测通量还比较小，每次24样本。
② 需要多色荧光PCR仪。
5、市场大约销售价格：
目前市场上两种收费政策：分型345元，定量165元。
两种产品市场销售价格分型：110-170不等，定量80元左右。
市场目前形势：分型量很小，定量市场量很大。
2024年3月8日发(作者：乐正绿海)
HPV分型试剂盒
1、HPV目前市场上主要产品：
杂交法（达安19、凯普21、亚能23、透景26）；实时荧光PCR（之江13种高危分型、港龙凯普亚能13种高危不分型、达安8个型定量）；第二代杂交捕获法（HC2）等
2、操作方法：
①HPV所有厂家标本处理操作流程（包括之江生物，都大同小异）：
②HPV实验：
A、杂交法：首先加样上PCR仪做扩增，上机时间大约一个半小时左右。PCR完成后做杂交，目前市场上有手工杂交和使用杂交仪杂交。操作时间2-4个小时。
B、第二代杂交捕获法（HC2）:原理是利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测
DHA
分解
45ntin
DNA-RNA
杂交
60min
抗体
捕获
60min
化学发
光检测
30min
计算机
判读
15minfa
C、荧光定量PCR：直接上机通过荧光信号累积实时监测整个PCR进程，之江生物是用多重PCR对标本进行准确的13个高危型的具体分型，其他不具体分型。
举例之江产品:
之江八管双通道仪器（双色荧光PCR仪器都可以用）：
1112
Mix1
Mix2
Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
Mix3
Mix4
Mix5
Mix6
Mix7
Mix8
Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5
Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6
Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7
Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8
一排八管做一个标本即可具体分型!
结果判断:
HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道Ct值W
35,结果判断为
若VIC通道Ct值W
35,结果判断为
HPV56
HPV45
HPV59
HPV51
HPV52
Mix1
Mix2
Mix3
Mix4
Mix5
Mix6
Mix7
Mix8
16+56
18+45
35+59
39+51
58+52
31
33
68
HPV16
HPV18
HPV35
HPV39
HPV58
HPV31
HPV33
HPV68
1112
②四管四通道仪器（ABI7500、罗氏480、伯乐CFX96、SLAN96孔等四色荧光PCR仪器）:
A
B
C
D
Mix1
Mix2
Mix3
Mix4
Mix1 Mix1 Mix1 Mix1
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
四管做一个标本即可具体分型!
结果判断：
HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道
Ct值W35，结
若VIC通道Ct值W35，结果判断为
若6l0通道Ct值W35，结果判断为
若670通道Ct值W35，结果判断为
HPV31
HPV68
果判断为
Mixl
Mix2
Mix3
l6+56
l8+52+58+3l
35+45+33+68
39+5l+59
Mixl Mixl Mixl
HPVl6
HPVl8
HPV35
HPV39
Mixl Mixl
HPV56
HPV52
HPV45
HPV5l
Mixl Mixl Mixl
HPV58
HPV33
HPV59
Mixl Mixl Mixl Mixl
Mix4
E
F
G
H
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4
Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2
Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
Mix4 Mix4 Mix4 Mix4
3、产品分析比较：
之江HPV试剂
荧光PCR法
13种高危型具体分型
1.5-2小时
HC-II试剂
检测方法
检测HPV分型
检测时间
操作
检测过程
安全性
检测仪器
灵敏度
检测方式
检测通量
结果分析
样本类型
实验室要求
一代杂交捕获核酸检测技术
不能分型
4小时以上
简单
PCR扩增，仪器自动完成
繁琐（涉及10多种试剂配制等）
多步加液
多种试剂，操作过程接触有毒物质
分子杂交仪等专用仪器
较灵敏
不进行PCR扩增，无污染
通量高
人工阅读或需专用阅读仪及软件
生殖道分泌物、宫颈细胞等
不需
凯普HPV试剂
核酸扩增及导流杂交技术
4-8小时
25ul
lul
PCR仪器及分子杂交仪
21型
闭管反应，安全性高
PCR仪器
高灵敏
闭管检测，有效防止污染
基本已适合目前医院标本量
仪器自动分析
生殖道分泌物、宫颈细胞等
PCR实验室验收
之江HPV试剂
检测方法
检测时间
PCR反应体积
PCR扩增模板
荧光PCR法
1.5-2小时
40ul
4ul
PCR仪器 检测仪器
检测HPV型别
灵敏度
样本类型
检测方式
检测通量
结果分析
生物安全
多种混合型
高危13型
咼灵敏
生殖道分泌物、宫颈细胞等
闭管检测，有效防止污染
基本适合目前医院标本量
仪器自动分析
闭管反应，安全性高
抗干扰能力强
较灵敏
生殖道分泌物、宫颈细胞等
杂交为开放式反应，易产生交叉污染
通量高
人工阅读或需专用阅读仪及软件
杂交过程会接触有危险物质如：NBT/BCPI有毒溶液等
干扰，不宜检测
4、上海之江HPV优劣势:
• 优点：
① 闭管PCR操作，避免扩增污染
② 能够对13个高危型精确分型
③ 灵敏度高，操作简单，减少了杂交的操作程序，一个实验大约2个小时内完成
④ 针对开放荧光PCR检测系统，无需额外增加设备，有人员培训基础。
⑤ 可以相对定量：Ct值M30(+)；30>Ct值M24(++)；Ct值V24(+++)
• 缺点：
① 检测通量还比较小，每次24样本。
② 需要多色荧光PCR仪。
5、市场大约销售价格：
目前市场上两种收费政策：分型345元，定量165元。
两种产品市场销售价格分型：110-170不等，定量80元左右。
市场目前形势：分型量很小，定量市场量很大。