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实验用禽类(鸡、鸭)——微生物学监测标准

IT圈 admin 28浏览 0评论

2024年9月26日发(作者:鲜绣梓)

实验用禽类(鸡、鸭)——微生物学监测标准

1 范围

本标准规定了实验用禽(鸡、鸭)和SPF禽蛋(胚)需要监测的微生物种类及相应微

生物的监测方法。

本标准适用于实验用禽(鸡、鸭)和禽蛋(胚)的微生物学控制。

2 规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版

本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括其随后所有的修改单)适

用于本部分,然而,鼓励根据本文件。

GB 14925-2010 实验动物 环境及设施

GB 14922.2-2011 实验动物 微生物学等级及监测

GB/T 17999 SPF 鸡 微生物学监测

GB/T 18643-2002 鸡马立克氏病诊断技术

GB/T 19167-2003 传染性囊病诊断技术

NY/T 536-2017 鸡伤寒和鸡白痢诊断技术

NY/T 553-2015 禽支原体病诊断技术

NY/T 556-2002 鸡传染性喉气管炎诊断技术

NY/T 538-2015 鸡传染性鼻炎诊断技术

NY/T 680-2003 禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验方法

NY/T 563-2016 禽霍乱(禽巴氏杆菌病)诊断技术

NY/T 772-2013 禽流感病毒RT-PCR试验方法

NY/T 1187-2019 鸡传染性贫血诊断技术

GB/T 17999.1-2008 SPF鸡 微生物学检测第一部分 SPF鸡 微生物学监测总则

T/CALAS 18-2017 实验动物 SPF鸭微生物监测总则

T/CALAS 14-2017 实验动物 SPF鸭I型鸭病毒性肝炎检测方法

1

3 术语和定义

3.1 家禽 poultry

是指人工饲养的鸟类动物,主要为了获取其肉、卵和羽毛,也有作为其他用处。一般

为雉科和鸭科动物,如鸡、鸭、鹅等,也有其他科的鸟类如火鸡、鸽、鹌鹑和各种鸣禽。

本标准中家禽仅包含鸡、鸭。

3.2 无特定病原体禽类(SPF禽) specific pathogen free poultry(SPF)

经人工饲育,除清洁级实验用禽应排除的寄生虫外,不携带主要潜在感染或条件致病

以及对科学实验干扰大的寄生虫,用于科学研究、教学、生产、检定及其他科学实验的禽

类。

3.3 普通级实验用禽类(普通禽) conventional experimental poultry

经人工饲育,不携带人畜共患病和烈性传染病病原体,用于科学研究、教学、生产、

检定及其他科学实验的禽类。

3.4 饲养单元 raising unit

相同饲养环境内的最小禽饲养设备,如一台禽饲养隔离器或屏障环境内的一个饲养房

间。

4 检测样品种类

根据所采用的监测方法,检测样品包括血清、抗凝血、蛋、羽髓、咽拭子或泄殖腔拭

子等。

5 监测项目及其方法

5.1 监测项目的分类

5.1.1 必须检测项目:在进行实验动物质量评价时必须检测的项目。

5.1.2 必要检测项目:在引进种禽(蛋)时、怀疑有某种疾病流行时必须检测的项目。

5.2 监测项目及其方法

5.2.1 SPF鸡微生物监测项目及方法见表1,依据细菌、支原体和病毒顺序排列。

2

表1 SPF鸡的微生物学监测项目及其方法

序号

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

病原微生物

鸡白痢沙门氏菌Salmonella pullorum

副鸡禽杆菌(鸡嗜血杆菌)Haemophilus paragallinarum

多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida

鸡毒支原体Mycoplasma gallisepticum

滑液支原体Mycoplasma synoviae

禽流感病毒Avian Influenza Virus

新城疫病毒Newcastle Disease Virus

传染性支气管炎病毒Infectious Bronchitis Virus

传染性喉气管炎病毒Infectious Laryngotracheisis Virus

鸡传染性法氏囊病病毒Infectious Bursal Disease Virus

淋巴白血病病毒Lymphoid Leukosis Virus

网状内皮增生症病毒Reticuloendotheliosis Virus

马立克氏病病毒Marek’s Disease Virus

鸡传染性贫血病毒Chicken Infectious Anemia Virus

禽呼肠孤病毒(病毒性关节炎)Avian Reovirus

禽脑脊髓炎病毒Avian Encephlomyelitis Virus

禽腺病毒Ⅰ群Avian Adenovirus GroupⅠ

禽腺病毒Ⅲ群Avian Adenovirus Group Ⅲ

禽痘病毒Fowl Pox Virus

检测方法

SPA,IA,TA

SPA,IA,ELISA

CO,AGP,IA

SPA,HI,ELISA

SPA,HI,ELISA

AGP,HI,ELISA,RT-PCR

HI,ELISA

ELISA,SN,AGP,HI

ELISA,AGP,SN

AGP,ELISA,SN

ELISA

ELISA,AGP

AGP

ELISA,IFA,PCR

AGP,ELISA

ELISA,AGP,EST,SN

AGP

HI,ELISA

CO,AGP

要求

注1:表中排在第一位的为首选方法

注2:“●”为必须检测项目,要求阴性;“○”为必要检测项目,要求阴性

注3:SPA-血清平板凝集试验;EST-胚敏感试验;IA-病原体分离;SN-血清中和试验;AGP琼脂扩散试验;

HI血凝抑制试验;IFA间接免疫荧光试验;ELISA-酶联免疫吸附试验;TA-试管凝集试验;CO-临床观

察;RT-PCR逆转录聚合酶链式反应;PCR-聚合酶链式反应

注4:副鸡禽杆菌(鸡嗜血杆菌)的检测方法见NY/T 538-2002、多杀性巴氏杆菌的检测方法见NY/T 563-2002、

禽流感病毒RT-PCR检测方法见NY/T 772-2004、鸡传染性贫血病毒的PCR检测方法见NY/T 1187-2006

5.2.2 普通鸡检测项目包括:鸡白痢沙门氏菌、鸡嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、鸡毒支原

体、禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、鸡传染性法

3

氏囊病病毒、马立克氏病毒、禽呼肠孤病毒(病毒性关节炎)、禽脑脊髓炎病毒、禽腺病

毒Ⅰ群、禽腺病毒Ⅲ群、禽痘病毒,检测方法参照表1。

5.2.3 SPF鸭微生物监测项目及其依据标准见表2。

表2 SPF鸭的微生物学监测项目及依据标准

序号 病原微生物 依据标准

GB/T 17999.8 第8部分:SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验

1 沙门氏菌 Salmonella

OIE《陆生动物卫生法典》2.7.5

多杀性巴氏杆菌

2

Pasteurella multocida

鸭疫里默氏杆菌

3

Riemerella anatipestifer

网状内皮组织增生症病毒

4

Reticulo endoheliosis virus

禽腺病毒Ⅲ群

5

Avain adenovirus Ⅲ group

鸭肝炎病毒

6

Duck hepatitis virus

鸭肠炎病毒

7

Duck enteritis virus

禽流感病毒

8

Avian influenza virus

新城疫病毒

9

Newcastle disease virus

鸭坦布苏病毒

10

Duck Tembusu Virus

鸭呼肠孤病毒

11

Duck Reovirus

注:“●”为必须检测项目,要求阴性;“○”为必要检测项目,要求阴性

DB35/T 1327-2013和DB37/T3821-2019 ●

NY/T 3233-2018 ●

GB/T 16550 ●

GB/T 18936 ●

GB/T 22332-2018和OIE《陆生动物卫生法典》2.7.10 ●

NY/T 554和OIE《陆生动物卫生法典》2.7.9 ●

NY/T 551 ●

NY/T 1247 ●

SN/T 4556-2016 ●

NY/T 563和OIE《陆生动物卫生法典》2.7.11 ○

要求

4

5.2.4 普通鸭微生物监测项目包括:沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、鸭肝

炎病毒、鸭肠炎病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、鸭坦布苏病毒、鸭呼肠孤病毒,检测方

法参照表2。

6 监测程序

6.1 监测前的准备

对被检禽编号,临床观察禽群健康状况。

6.2 样品采集

6.2.1 采集鸡蛋进行开产后鸡的禽脑脊髓炎病毒抗体监测和淋巴白细胞病病毒监测。

6.2.2 沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、禽流感病毒和新城疫病毒监测可采集肛拭子。

6.2.3 禽流感病毒、鸡毒支原体、滑液囊支原体和副鸡嗜血杆菌监测可采集咽拭子。

6.2.4 禽流感病毒、新城疫病毒、禽腺病毒Ⅲ群和鸭疫里默氏杆菌监测可采集血清。

6.2.5 淋巴白血病病毒、网状内皮增生症病毒、鸡传染性贫血病毒、多杀性巴氏杆菌和鸭

疫里默氏杆菌监测可采集全血。

6.2.6 马立克氏病毒监测可采集羽髓。

6.2.7 鸡的所有病原微生物均可采集血清进行抗体监测(参见附录D)。

6.2.8 鸭的所有病原微生物均可采集泄殖腔拭子进行抗原监测。

6.2.9 根据使用的检测方式采集相应的脏器组织。

6.2.10 禽蛋监测取卵黄进行监测。

6.2.11 监测过程应遵循生物安全相关规定,按GB19489规定执行。

6.3 采样比例

6.3.1 未开产鸡,对所有饲养单位进行全部项目的监测,每个饲养单位按10%的比例抽样,

每个隔离器至少抽检1羽。

6.3.2 利用胚敏感试验对生产鸡进行禽脑脊髓炎病毒监测时,每个饲养单元送检鸡蛋的个

数占母鸡数量的10%。

6.3.3 采集鸡蛋对开产鸡进行淋巴白血病病毒感染监测时,每个饲养单元送检鸡蛋的个数

占母鸡数量的30%。

6.3.4 对所有饲养单元的鸭进行全部项目的检测,每个饲养单元按15%的比例抽样。

5

6.4 检测频率

6.4.1 实验用鸡首次监测从8~10周龄开始,常规监测时,每隔4~8周,监测本文件规定

的所有项目。有特定病原微生物感染危险时,随时进行相关项目的检测。

6.4.2 实验用鸭首次检测从4~8周龄开始。鸭每代次至少检测2次。

6.5 取/送方法

取/送检样品应编号并标识、冰盒包装、低温送达检测单位,并附送检单,写明禽群名

称、禽群数量、样品名称、监测要求及样品数量等。

7 结果判定

所有监测项目均为阴性的、判为合格。检测结果若有一项以上(含一项)为阳性,则

判为不合格。

6

附 录 A

禽痘的临床观察检测方法

A.1 禽痘是鸡的一种传播缓慢的病毒病,肉眼观察,存在皮肤型和白喉型两种临床表现型

(症状)。

A.2 皮肤型(干痘):在冠、肉髯和其他无羽毛部位发生小结节至球形的疣状块,皮肤呈

増生性病变。

A.3 白喉型(湿痘):在黏膜上产生轻微隆起的白色不透明结节,迅速増大变成黄色白喉

膜病变,遍布于口腔、食道、喉和气管黏膜等部位。

A.4 出现上述症状之一的鸡群,即疑似感染禽痘病毒,应釆取其他方法进行复核性监测。

7

2024年9月26日发(作者:鲜绣梓)

实验用禽类(鸡、鸭)——微生物学监测标准

1 范围

本标准规定了实验用禽(鸡、鸭)和SPF禽蛋(胚)需要监测的微生物种类及相应微

生物的监测方法。

本标准适用于实验用禽(鸡、鸭)和禽蛋(胚)的微生物学控制。

2 规范性引用文件

下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版

本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括其随后所有的修改单)适

用于本部分,然而,鼓励根据本文件。

GB 14925-2010 实验动物 环境及设施

GB 14922.2-2011 实验动物 微生物学等级及监测

GB/T 17999 SPF 鸡 微生物学监测

GB/T 18643-2002 鸡马立克氏病诊断技术

GB/T 19167-2003 传染性囊病诊断技术

NY/T 536-2017 鸡伤寒和鸡白痢诊断技术

NY/T 553-2015 禽支原体病诊断技术

NY/T 556-2002 鸡传染性喉气管炎诊断技术

NY/T 538-2015 鸡传染性鼻炎诊断技术

NY/T 680-2003 禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验方法

NY/T 563-2016 禽霍乱(禽巴氏杆菌病)诊断技术

NY/T 772-2013 禽流感病毒RT-PCR试验方法

NY/T 1187-2019 鸡传染性贫血诊断技术

GB/T 17999.1-2008 SPF鸡 微生物学检测第一部分 SPF鸡 微生物学监测总则

T/CALAS 18-2017 实验动物 SPF鸭微生物监测总则

T/CALAS 14-2017 实验动物 SPF鸭I型鸭病毒性肝炎检测方法

1

3 术语和定义

3.1 家禽 poultry

是指人工饲养的鸟类动物,主要为了获取其肉、卵和羽毛,也有作为其他用处。一般

为雉科和鸭科动物,如鸡、鸭、鹅等,也有其他科的鸟类如火鸡、鸽、鹌鹑和各种鸣禽。

本标准中家禽仅包含鸡、鸭。

3.2 无特定病原体禽类(SPF禽) specific pathogen free poultry(SPF)

经人工饲育,除清洁级实验用禽应排除的寄生虫外,不携带主要潜在感染或条件致病

以及对科学实验干扰大的寄生虫,用于科学研究、教学、生产、检定及其他科学实验的禽

类。

3.3 普通级实验用禽类(普通禽) conventional experimental poultry

经人工饲育,不携带人畜共患病和烈性传染病病原体,用于科学研究、教学、生产、

检定及其他科学实验的禽类。

3.4 饲养单元 raising unit

相同饲养环境内的最小禽饲养设备,如一台禽饲养隔离器或屏障环境内的一个饲养房

间。

4 检测样品种类

根据所采用的监测方法,检测样品包括血清、抗凝血、蛋、羽髓、咽拭子或泄殖腔拭

子等。

5 监测项目及其方法

5.1 监测项目的分类

5.1.1 必须检测项目:在进行实验动物质量评价时必须检测的项目。

5.1.2 必要检测项目:在引进种禽(蛋)时、怀疑有某种疾病流行时必须检测的项目。

5.2 监测项目及其方法

5.2.1 SPF鸡微生物监测项目及方法见表1,依据细菌、支原体和病毒顺序排列。

2

表1 SPF鸡的微生物学监测项目及其方法

序号

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

病原微生物

鸡白痢沙门氏菌Salmonella pullorum

副鸡禽杆菌(鸡嗜血杆菌)Haemophilus paragallinarum

多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida

鸡毒支原体Mycoplasma gallisepticum

滑液支原体Mycoplasma synoviae

禽流感病毒Avian Influenza Virus

新城疫病毒Newcastle Disease Virus

传染性支气管炎病毒Infectious Bronchitis Virus

传染性喉气管炎病毒Infectious Laryngotracheisis Virus

鸡传染性法氏囊病病毒Infectious Bursal Disease Virus

淋巴白血病病毒Lymphoid Leukosis Virus

网状内皮增生症病毒Reticuloendotheliosis Virus

马立克氏病病毒Marek’s Disease Virus

鸡传染性贫血病毒Chicken Infectious Anemia Virus

禽呼肠孤病毒(病毒性关节炎)Avian Reovirus

禽脑脊髓炎病毒Avian Encephlomyelitis Virus

禽腺病毒Ⅰ群Avian Adenovirus GroupⅠ

禽腺病毒Ⅲ群Avian Adenovirus Group Ⅲ

禽痘病毒Fowl Pox Virus

检测方法

SPA,IA,TA

SPA,IA,ELISA

CO,AGP,IA

SPA,HI,ELISA

SPA,HI,ELISA

AGP,HI,ELISA,RT-PCR

HI,ELISA

ELISA,SN,AGP,HI

ELISA,AGP,SN

AGP,ELISA,SN

ELISA

ELISA,AGP

AGP

ELISA,IFA,PCR

AGP,ELISA

ELISA,AGP,EST,SN

AGP

HI,ELISA

CO,AGP

要求

注1:表中排在第一位的为首选方法

注2:“●”为必须检测项目,要求阴性;“○”为必要检测项目,要求阴性

注3:SPA-血清平板凝集试验;EST-胚敏感试验;IA-病原体分离;SN-血清中和试验;AGP琼脂扩散试验;

HI血凝抑制试验;IFA间接免疫荧光试验;ELISA-酶联免疫吸附试验;TA-试管凝集试验;CO-临床观

察;RT-PCR逆转录聚合酶链式反应;PCR-聚合酶链式反应

注4:副鸡禽杆菌(鸡嗜血杆菌)的检测方法见NY/T 538-2002、多杀性巴氏杆菌的检测方法见NY/T 563-2002、

禽流感病毒RT-PCR检测方法见NY/T 772-2004、鸡传染性贫血病毒的PCR检测方法见NY/T 1187-2006

5.2.2 普通鸡检测项目包括:鸡白痢沙门氏菌、鸡嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、鸡毒支原

体、禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、鸡传染性法

3

氏囊病病毒、马立克氏病毒、禽呼肠孤病毒(病毒性关节炎)、禽脑脊髓炎病毒、禽腺病

毒Ⅰ群、禽腺病毒Ⅲ群、禽痘病毒,检测方法参照表1。

5.2.3 SPF鸭微生物监测项目及其依据标准见表2。

表2 SPF鸭的微生物学监测项目及依据标准

序号 病原微生物 依据标准

GB/T 17999.8 第8部分:SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验

1 沙门氏菌 Salmonella

OIE《陆生动物卫生法典》2.7.5

多杀性巴氏杆菌

2

Pasteurella multocida

鸭疫里默氏杆菌

3

Riemerella anatipestifer

网状内皮组织增生症病毒

4

Reticulo endoheliosis virus

禽腺病毒Ⅲ群

5

Avain adenovirus Ⅲ group

鸭肝炎病毒

6

Duck hepatitis virus

鸭肠炎病毒

7

Duck enteritis virus

禽流感病毒

8

Avian influenza virus

新城疫病毒

9

Newcastle disease virus

鸭坦布苏病毒

10

Duck Tembusu Virus

鸭呼肠孤病毒

11

Duck Reovirus

注:“●”为必须检测项目,要求阴性;“○”为必要检测项目,要求阴性

DB35/T 1327-2013和DB37/T3821-2019 ●

NY/T 3233-2018 ●

GB/T 16550 ●

GB/T 18936 ●

GB/T 22332-2018和OIE《陆生动物卫生法典》2.7.10 ●

NY/T 554和OIE《陆生动物卫生法典》2.7.9 ●

NY/T 551 ●

NY/T 1247 ●

SN/T 4556-2016 ●

NY/T 563和OIE《陆生动物卫生法典》2.7.11 ○

要求

4

5.2.4 普通鸭微生物监测项目包括:沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌、鸭肝

炎病毒、鸭肠炎病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、鸭坦布苏病毒、鸭呼肠孤病毒,检测方

法参照表2。

6 监测程序

6.1 监测前的准备

对被检禽编号,临床观察禽群健康状况。

6.2 样品采集

6.2.1 采集鸡蛋进行开产后鸡的禽脑脊髓炎病毒抗体监测和淋巴白细胞病病毒监测。

6.2.2 沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、禽流感病毒和新城疫病毒监测可采集肛拭子。

6.2.3 禽流感病毒、鸡毒支原体、滑液囊支原体和副鸡嗜血杆菌监测可采集咽拭子。

6.2.4 禽流感病毒、新城疫病毒、禽腺病毒Ⅲ群和鸭疫里默氏杆菌监测可采集血清。

6.2.5 淋巴白血病病毒、网状内皮增生症病毒、鸡传染性贫血病毒、多杀性巴氏杆菌和鸭

疫里默氏杆菌监测可采集全血。

6.2.6 马立克氏病毒监测可采集羽髓。

6.2.7 鸡的所有病原微生物均可采集血清进行抗体监测(参见附录D)。

6.2.8 鸭的所有病原微生物均可采集泄殖腔拭子进行抗原监测。

6.2.9 根据使用的检测方式采集相应的脏器组织。

6.2.10 禽蛋监测取卵黄进行监测。

6.2.11 监测过程应遵循生物安全相关规定,按GB19489规定执行。

6.3 采样比例

6.3.1 未开产鸡,对所有饲养单位进行全部项目的监测,每个饲养单位按10%的比例抽样,

每个隔离器至少抽检1羽。

6.3.2 利用胚敏感试验对生产鸡进行禽脑脊髓炎病毒监测时,每个饲养单元送检鸡蛋的个

数占母鸡数量的10%。

6.3.3 采集鸡蛋对开产鸡进行淋巴白血病病毒感染监测时,每个饲养单元送检鸡蛋的个数

占母鸡数量的30%。

6.3.4 对所有饲养单元的鸭进行全部项目的检测,每个饲养单元按15%的比例抽样。

5

6.4 检测频率

6.4.1 实验用鸡首次监测从8~10周龄开始,常规监测时,每隔4~8周,监测本文件规定

的所有项目。有特定病原微生物感染危险时,随时进行相关项目的检测。

6.4.2 实验用鸭首次检测从4~8周龄开始。鸭每代次至少检测2次。

6.5 取/送方法

取/送检样品应编号并标识、冰盒包装、低温送达检测单位,并附送检单,写明禽群名

称、禽群数量、样品名称、监测要求及样品数量等。

7 结果判定

所有监测项目均为阴性的、判为合格。检测结果若有一项以上(含一项)为阳性,则

判为不合格。

6

附 录 A

禽痘的临床观察检测方法

A.1 禽痘是鸡的一种传播缓慢的病毒病,肉眼观察,存在皮肤型和白喉型两种临床表现型

(症状)。

A.2 皮肤型(干痘):在冠、肉髯和其他无羽毛部位发生小结节至球形的疣状块,皮肤呈

増生性病变。

A.3 白喉型(湿痘):在黏膜上产生轻微隆起的白色不透明结节,迅速増大变成黄色白喉

膜病变,遍布于口腔、食道、喉和气管黏膜等部位。

A.4 出现上述症状之一的鸡群,即疑似感染禽痘病毒,应釆取其他方法进行复核性监测。

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