2024年5月26日发(作者：凤闲静)
中国脊柱脊髓杂志２００８年第ｌ８卷第ｌ０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆｓｐｉｎｅ ａｎｄ ｉｎｏｌ ｃ０ ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０ ７７１
体外冲击波对大鼠胸段脊髓影响的初步研究
廖冬发，权毅，潘显明，邓 冰，张波，邓少林
（成都军区总医院骨科６１００８３四川省成都市）
【摘要】目的：初步探讨体外冲击波（ＥＳＷ）对大鼠胸段脊髓的影响。方法：雄性ＳＤ大鼠１２６只，随机分为４组，
直接冲击组（Ａ组，４８只），不做椎板切除手术，直接进行冲击波冲击，冲击参数：发射电压１０ｋＶ，冲击能量
０．２５０ｍＪ／ｍｍ２．冲击频率６０次／ｍｉｎ．冲击次数１Ｏ００次；手术后冲击组（Ｂ组，４８只），切除Ｔ７～Ｔ１０椎板，皮肤愈合
后行冲击波处理．参数同Ａ组；手术后不冲击组（Ｃ组，２４只），切除Ｔ７～Ｔ１０椎板，不行冲击波处理；正常对照组
（Ｄ组，６只），不进行任何处理。Ａ、Ｂ、Ｃ组又分为处理后４ｈ、８ｈ、２４ｈ、７２ｈ共４个时间点，Ｄ组不分时间点。Ａ、Ｂ、
Ｃ组处理前、后及Ｄ组行ＢＢＢ评分，并经灌注后取Ｔ７ Ｔ１０脊髓标本，切片行ＨＥ染色观察脊髓损伤情况，用免
疫组化方法观察脊髓Ｃ—ｆｏｓ蛋白的表达。结果：Ａ组和Ｂ组大鼠处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ时ＢＢＢ评分均有下降，以
８ｈ最低，分别为１６．８±０．８分和１４．５±１．０分，处理后各时间点两组间均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），Ａ组和Ｂ组８ｈ、
２４ｈ、７２ｈ时ＢＢＢ评分均明显低于Ｃ组和Ｄ组（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），但Ｃ组和Ｄ组之间无显著性差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。Ａ组和Ｂ
组ＨＥ染色均可见脊髓出血、水肿，神经元变性坏死，且Ｂ组较Ａ组损伤程度重；Ｃ组及Ｄ组未见明显脊髓损
伤表现。Ｂ组脊髓中Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达最强．其次为Ａ组，均以２４ｈ表达最强，平均光密度值分别为０．３９６￣０．００８
和０．２９３￣０．叭３，两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）：Ｃ组及Ｄ组表达均不明显，与Ａ组和Ｂ组比较有显著性差异
（Ｐ＜Ｏ．ｏ１），Ｃ组和Ｄ组之间无显著性差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。结论：发射电压ｌＯｋＶ、冲击能量０．２５０ｒｎＪ／ｍｍｚ的ＥＳＷ可造
成大鼠胸段脊髓一定程度的损伤，冲击时椎板可起到一定保护脊髓的作用。
【关键词】体外冲击波；脊髓损伤；Ｃ—ｆｏｓ；大鼠
中图分类号：Ｒ６８３．２．Ｒ４５４．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４—４０６Ｘ（２００８）一１０—０７７ｌ一０５
Ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｈｅ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｒａｔｓ／ＬＩＡＯ
Ｄｏｎｇｆａ，ＱＵＡＮ Ｙｉ，ＰＡＮ Ｘｉａｎｍｉｎｇ，ｅｔ ａｌ／／Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｐｉｎｅ ａｎｄ Ｓｐｉｎａｌ Ｃｏｒｄ。２００８，１８（１０）：７７１－
７７５
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ（ＥＳＷ）ｏｎ ｔｈｅ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｅｇｍｅｎｔｓ
ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ＥＳＷ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｕｓｉｎｇ １２６ ｍａｌｅ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）
ｒａｔｓ，ｔｈｅｓｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ：ｄｉｒｅｃｔ ｓｈｏｃｋ ｇｒｏｕｐ（Ａ，ｎ＝４８），ｓｈｏｃｋｅｄ ａｆｔｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ
ｇｒｏｕｐ（Ｂ，ｎ＝４８），ｎｏ ｓｈｏｃｋ ａｆｔｅｒ ｏｐｅｒａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ（Ｃ，ｎ＝２４），ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｄ，ｎ＝６）．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ ｗｅｒｅ ｎｏｔ
ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｌａｍｉｎｅｃｔｏｍｙ，ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｓｈｏｃｋｅｄ ｂｙ ＥＳＷ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｍａｃｈｉｎｅ ｗｉｔｈ ｗｏｒｋｉｎｇ ｖｏｌｔａｇｅ ｏｆ
１０ｋＶ．ｅｎｅｒｇｙ ｏｆ ０．２５０ｍＪ／ｍｍ ．ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ６０ ｔｉｍｅｓ ｐｅｒ ｍｉｎｕｔｅ ｆｏｒ １０００ ｔｉｍｅｓ．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｅｘｐｅｒｉ—
ｅｎｃｅｄ ｌａｍｉｎｅｃｔｏｍｙ ｆｒｏｍ ｓｅｖｅｎｔｈ ｔｏ ｎｉｎｅｔｈ，ａｎｄ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｓｈｏｃｋｅｄ ｂｙ ＥＳＷ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｍａｃｈｉｎｅ
（ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｗｏｒｋｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｇｒｏｕｐ Ａ） ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｈｅａｌｅｄ．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｃ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｄ
ｌａｍｉｎｅｃｔｏｍｙ ｆｒｏｍ ｓｅｖｅｎｔｈ ｔｏ ｎｉｎｅｔｈ，ｗｈｉｌｅ ｌｅｆｔ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｔａｃｔ．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｄ ｗｅｒｅ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｎｏ
ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎ ｗｅｒｅ ｈａｒｖｅｓｔｅｄ ａｔ ４ｈ，８ｈ，２４ｈ ａｎｄ ７２ｈ ａｆｔｅｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｄｉｓｐｏｓａｌ ｉｎ ｅａｃｈ ｅｘｐｅｒｉ—
ｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｍｏｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｎｄ ｌｉｍｂｓ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ Ｂａｓｓｏ—
Ｂｅａｔｔｉｅ—Ｂｒｅａｎａｈａｎ（ＢＢＢ） ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｓｈｏｃｋｅｄ．Ｔｗｅｌｖｅ ｒａｔｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ ａｎｄ Ｂ，ｓｉｘ ｒａｔｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｃ ｗｅｒｅ
ｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ ａｔ ｅｖｅｒｙ ｐｈａｓｅ ｐｏｉｎｔｓ ｆｏｒ ｈａｒｖｅｓｔｉｎｇ Ｔ７－Ｔ１０ ｓｐｉｎａｌ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ，ｒｏｕｔｉｎｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｅｃｔｉｏｎ Ｈａｅｍａ—
ｔｏｘｙｌｉｎ—Ｅｏｓｉｎ（ＨＥ）ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ：ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ｔｏ
ｅｘａｍｉｎｅ Ｃ—ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ ＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ ａｎｄ Ｂ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｂｏｔｈ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｓｃｏｒｅ ａｔ ８ｈ ｉｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ，ｔｈｅ ＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ ｉｓ １６．８￣０．８．１４．５±１．０ ｆｏｒ ｇｒｏｕｐ Ｂ＇．Ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ ｓｃｏｒｅ ｗａｓ
第一作者简介：男（１９７５一），医学硕士，主治医师，研究方向：体外冲击波在骨科的应用、四肢骨创伤的治疗
电话：（０２８）８６５７０６２８ Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉａｏｄｏｎｇｆａ＠ｍｅｄｍａｉｌ．ｃｏｌｎ．ｃｎ
通讯作者：权毅
７７２ 中国脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第１０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＳｐｉｎｅ ａｎｄ３ｐｉ，￣ｌａ Ｃｏｒｄ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０
ｇｒｏｕｐ Ｂ＇．Ｔｈｅ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｃ ａｎｄ Ｄ ｗｅｒｅ ｃｌｏｓｅ ｗｉｔｈ ｅａｃｈ ｏｔｈｅｒ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｇｒｏｕｐ
Ｂ ａｎｄ Ａ （Ｐ＜０．０１），ａｎｄ ｔｈｅ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｇｒｏｕｐ Ａ （Ｐ＜０．０１）．Ａｆｔｅｒ ｓｈｏｃｋｅｄ
ｂｙ ＥＳＷ．ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ａｎｄ ｄｒｏｐｓｙ，ｎｅｕｒｏｎａｌ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ａｍｏｎｇ
ｇｒｏｕｐ Ａ ａｎｄ Ｂ，ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｍｏｒｅ￣ｖｅｒｅ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｏｂｖｉ—
ＯＵＳ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ ａｍｏｎｇ ｇｒｏｕｐ Ｃ ａｎｄ Ｄ．Ｔｈｅ Ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｉｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ
ｏｂｖｉｏｕｓ，ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄ ｗａｓ ｇｒｏｕｐ Ａ ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｔ ２４ｈ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉ ｇｈｅｓｔ ａｍｏｎｇ ｆｏｕｒ ｐｈａｓｅ ｐｏｉｎｔｓ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ
ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ（ＡＯＤ）ｓｃｏｒｅ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｔ ２４ｈ ｐｈａｓｅ ｐｏｉｎｔｓ ｗａｓ Ｏ．３９６＿＋０．００８，ｇｒｏｕｐ Ａ ｗａｓ Ｏ．２９３＿＋０．０１３，
ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｒｅｓｐｅｃｔ ｔｏ ＡＯＤ ｓｃｏｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ ｇｒｏｕｐ Ａ （Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｔｈｅｒｅ
ｗｅｒｅ ｎｏ ｏｂｖｉｏｕｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｍｏｎｇ ｇｒｏｕｐ Ｃ ａｎｄ Ｄ（０．１０８±Ｏ．００９ ａｎｄ ０．１０６＿＋０．００５ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ），ｗｈｉｃｈ ｈａｄ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｕｓｅｄ ｄｏｓｅ ｏｆ ＥＳＷ（ｗｏｒｋｉｎｇ
ｖｏｌｔａｇｅ ｏｆ ｌＯｋＶ，ｅｎｅｒｇｙ ｏｆ ０．２５０ｍＪ／ｍｍ。） ｍａｙ ｃａｕｓｅ ｉｎｊｕｒｙ ｔｏ ｔｈｅ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｒａｔｓ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｖｅｒｔｅｂｒａｌ ｐｌａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｌｕｍｎ ｃａｎ ｐａｒｔｌｙ ｐｒｏｔｅｃｔ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｈｏｃｋ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＥＳＷ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ；Ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ；Ｃ－ｆｏｓ；Ｒａｔ
【Ａｕｔｈｏｒ Ｓ ａｄｄｒｅｓｓ】Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ，Ｃｈｅｎｇｄｕ Ａｒｍｙ Ｇｅｎｅｒｌａ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，６１００８３，Ｃｈｉｎａ
体外冲击波（ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ，ＥＳＷ）
准大鼠Ｔ７～ＴＩＯ脊髓进行冲击。冲击参数：发射电
压１０ｋＶ．冲击能量０．２５０ｍＪ／ａｒｍ ，冲击频率６Ｏ 对骨筋膜疾病的治疗效果得到公认，临床应用逐
渐广泛。但由于其特性，ＥＳＷ若应用不当也可能
造成机体相应的损伤及并发症。目前国内外学者
均将神经、大血管等处列为其应用的禁区Ｉｌ＿２１。如
次／ｍｉｎ，冲击次数１０００次。Ｂ组大鼠在椎板切除
手术后确认切口皮肤完全愈合（术后７ｄ），再次麻
醉后行冲击波处理，部位及参数同Ａ组。
１．３ ＢＢＢ评分
Ｄ组大鼠在麻醉灌注前进行ＢＢＢ评分，Ａ组
果应用ＥＳＷ对脊柱区域进行治疗，是否会造成脊
髓损伤呢？关于这方面的研究报道不多。本实验通
过观察ＥＳＷ对大鼠脊髓的影响．为ＥＳＷ在临床
颈肩腰背痛治疗中的安全性评估提供实验基础。
１材料与方法
在冲击波处理前、Ｂ组在手术后冲击波处理前、Ｃ
组在手术前及Ａ、Ｂ、Ｃ组在处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ进
行ＢＢＢ评分。采用双人、双盲独立观察大鼠双后
肢的运动功能并记录。
１．４标本制备
Ａ、Ｂ、Ｃ组大鼠经相应处理后，Ａ、Ｂ组于４ｈ、
１．１动物与分组
健康雄性ＳＤ大鼠，体重２００～２５０ｇ．随机分为
４组，直接冲击组（Ａ组，４８只），不做椎板切除手
术，直接进行冲击波冲击；手术后冲击组（Ｂ组，４８
只），切除ｑ＇７一Ｔ１０椎板，皮肤愈合后行冲击波处
理；手术后不冲击组（Ｃ组，２４只），切除Ｔ７～ＴＩＯ
椎板，不行冲击波处理；正常对照组（Ｄ组，６只），
不进行任何处理。Ａ、Ｂ、Ｃ组又分为处理后４ｈ、８ｈ、
８ｈ、２４ｈ、７２ｈ各取１２只，Ｃ组各取６只大鼠，用
１％戊巴比妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）经腹腔注射麻醉后固
定，开胸后经左心室以含肝素钠生理盐水３００ｍｌ
快速灌注冲洗，待右心耳流出冲洗液体清亮后。以
４％多聚甲醛３００ｍｌ缓慢灌注直至大鼠全身僵硬。
灌注完毕后，取出Ｔ７～Ｔ１０脊髓（长约２ｃｍ）。Ｄ组
２４ｈ、７２ｈ共４个时间点，Ａ、Ｂ组每个时间点ｌ２
只，Ｃ组每个时间点６只，Ｄ组不分时间点。
１．２动物模型的建立
１．２．１手术模型的建立 将ＳＤ大鼠随机分组
后，Ｂ、Ｃ组所有大鼠术前１ｄ行后肢功能ＢＢＢ评
不分时间点，同样麻醉灌注后取出Ｔ７ Ｔ１０脊髓。
４％多聚甲醛固定后，常规脱水、石蜡包埋．于中段
横行切片，片厚５１－￣ｍ，备用。
１．５组织学检查
从每只大鼠切片中随机抽取４张行ＨＥ染
分，用１％戊巴比妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）经腹腔内注射麻
醉后，咬除 ～Ｔ１０棘突及椎板，显露该节段脊髓
后逐层缝合，肌注抗生素预防感染。
１．２．２体外冲击波处理Ａ组大鼠用ｌ％戊巴比
妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）经腹腔内注射麻醉后。将苏州产
ＣＳ一２０１２Ａ一９电磁式冲击波骨科治疗机的焦点对
色，光镜检查观察脊髓的病理形态学改变。
１．６ Ｃ—ｌｏｓ蛋白表达的检测
每只大鼠各取切片１０张，常规脱蜡脱水，
ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎ￣３次，０．３％Ｈ２０２室温下封闭内源
性过氧化物酶１０ｍｉｎ，蒸馏水冲洗后ＰＢＳ冲洗
５ｍｉｎ￣３次，热抗原修复，冷却后ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎ￣２
中国脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第１Ｏ期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｍｏｌ ｏｆＳｐｉｎｅ ａｎｄ ｓｐｉｎ０１ ｒｄ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０ ７７３
次，加５％山羊血清孵育１５ｍｉｎ，加入１：２００兔抗
２．２ ＨＥ染色
Ｃ—ｆｏｓ（武汉博士德生物有限公司），在４℃冰箱过
夜，ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎｘ３次，加入生物素化山羊抗兔
ＩｇＧ（１：２００），３７℃条件下孵育１２０ｍｉｎ，ＰＢＳ冲洗
５ｍｉｎｘ３次，显微镜控制下３。３ 一二氨基联苯胺
（ＤＡＢ）染色，苏木精复染，１／６００氨水碱化促进蓝
色表达，梯度酒精脱水，二甲苯透明后封片。每个
标本随机选取６张切片，用显微镜（放大４００倍）
观察整张切片的表达情况．阳性结果为神经细胞
呈棕黄色。每张切片随机选取６个视野，用
Ｏｌｙｍｐｕｓ ＢＸ ４１荧光显微镜采像。Ｉｍａｇｅ—Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ
６．０图像分析软件系统对Ｃ—ｆｏｓ蛋白的免疫组化
结果进行半定量分析，计算平均光密度（ＡＯＤ），结
果以Ｘ－－－Ｓ表示
１．７统计学处理
Ｄ组和Ｃ组脊髓ＨＥ染色结果大体正常，神
经元未见明显变化，无胶质细胞增生（图１、２，后
插页Ⅲ）。Ｂ组冲击后４ｈ脊髓组织明显异常，主要
表现为灰白质内有出血．可见弥散的红细胞。神经
元之间间隙增宽，结构疏松化，有轻度水肿现象，
出现少量中等程度核浓缩及碎裂的神经元（图３，
后插页Ⅲ）；随着时间增加（８ｈ，２４ｈ），损伤进一步
加剧，神经元坏死数目有增加，神经元的突起消
失，尼氏体溶解，核浓缩、溶解现象增多，可出现嗜
神经现象，胶质细胞有增生：７２ｈ时脊髓损伤程度
有减轻趋势，水肿减轻，神经元坏死数目有减少。
Ａ组脊髓神经元也表现出神经元间隙增宽．含水
增多，神经元胞浆内有少量颗粒变性和空泡变性，
出现少量中等程度神经元核深染等，与Ｂ组同时
间点比较，各时间点病变程度明显较轻，神经元坏
死数目较少（图４，后插页Ⅲ）。
２．２脊髓组织中Ｃ—ｆ０ｓ蛋白的表达
Ｃ—ｆｏｓ蛋白阳性表达在神经细胞核上．呈棕黄
采用ＳＰＳＳ １ １．５统计分析软件进行处理，对
动物后肢神经功能ＢＢＢ评分、Ｃ—ｆｏｓ ＡＯＤ值结果
采用单因素方差分析。Ｐ＜０．０５为有统计学意义。
２结果
色，圆形或卵圆形，亦有核仁和胞浆染成深褐色。
在不同时间点，脊髓中央管周围、前角、后角、侧角
均有不同程度的Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达，以中央管周围
较为集中，且此处各组差异最明显。Ｄ组和Ｃ组
脊髓灰质可见少量散在的Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达弱阳性
细胞（图５、６，后插页ＩＩ１），图像分析其ＡＯＤ值均
小于０．１５０。Ａ组处理后４ｈ可见Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达，
以前角神经元为主（图７．后插页Ⅲ），８ｈ Ｃ—ｆｏｓ蛋
２．１ ＢＢＢ评分结果
Ａ、Ｂ、Ｃ组大鼠ＢＢＢ评分结果见表１。Ｄ组大
鼠后肢ＢＢＢ评分均为２１分．Ｃ组ＢＢＢ评分达１９
分以上，基本接近正常，两组比较无显著性差异
（Ｐ＞Ｏ．０５）；Ａ组和Ｂ组冲击波处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ
的ＢＢＢ评分明显低于Ｃ组和Ｄ组（Ｐ＜０．０１）。Ｂ组
处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ评分与Ａ组比较均显著降低
（Ｐ＜０．０１）。
表１ 不同时间点Ａ、Ｂ、Ｃ组大鼠后肢运动功能ＢＢＢ
白表达增强，２４ｈ达高峰，７２ｈ表达有下降；Ｂ组阳
性表达细胞分布区域增多．主要位于中央管周围
灰质，尤以脊髓前角灰质部最为明显（图８。后插
页Ⅲ）。各组Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达情况见表２。Ａ、Ｂ组
平均光密度值与Ｃ、Ｄ组比较均有显著性差异（Ｐ＜
０．０１）。而Ｂ组Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达的平均光密度值又
明显高于Ａ组（Ｐ＜０．０１），Ｃ组与Ｄ组比较无显著
性差异（尸 Ｏ．０５）。
评分 （ ，分）
注：①与同组冲击／术前比较Ｐ＜０．０１；②与Ａ组和Ｃ组同时间
点比较Ｐ＜０．０１；③与同组术前比较Ｐ＞０．０５
表２ Ａ、Ｂ、Ｃ组不同时间点及Ｄ组脊髓组织中Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达的累积光密度值 （ ）
注：①与同时间点Ｂ组比较Ｐ＜０．０ｌ；②与同时间点ｃ组及Ｄ组比较Ｐ＜０．０ｌ；③与Ｄ组比较Ｐ＞０．０５
７７４ 中国脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第１０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎｏｌ ｏｆＳｐｉｎ￣ａｎｄ Ｓｐｉｎａｌ Ｃｏｒｄ，２００８，Ｖｏｌ・１８，Ｎｏ・１０
３讨论
３．１体外冲击波的临床应用
体外冲击波治疗（ＥＳＷＴ）作为近年来骨科领
域新的非侵入疗法，短短的十余年来已得到了很
大的发展。ＥＳＷ可以促进骨折愈合，治疗股骨头
无菌性坏死、肩关节钙化性肌腱炎、肱骨外上髁
炎、足底筋膜炎等顽固性骨骼肌肉系统疾病『３Ｉ４】，
取得了良好的临床治疗效果。
适当的能量选择是ＥＳＷ治疗效果的有效保
障．能量过低达不到治疗效果，能量过高可能导致
机体损伤．所以临床选择的能量既要显效又要避
免并发症，但目前各疾病的最佳治疗能量仍不能
准确确定。根据Ｒｏｍｐｅ等【ｓ１的研究，在第二中心点
（Ｓｅｃｏｎｄｆ０ｃａｌＤ０ｉｎｔ）能量密度０．０８～０．２８ｍＪ／ｍｍ 为
低能量，Ｏ．２８～０．６０ｍＪ／ｍｍ 为中能量，大于
０．６ｍＪ／ａｒｍ２为高能量。而中低能量一般不会造成
明显损伤。他们临床追踪了３００多例患者２年，使
用能量密度０．２８ｒｎＪ／ｍｍ２治疗未造成明显的肌腱
损伤。
目前认为ＥＳＷ可以通过以下机制损伤组织
细胞 】：①物理学作用。冲击波产生了强大的压
力、张力，引起细胞、组织的挫伤和灼伤作用。②空
化效应介导机制。冲击波释放后，沿着电极的椭圆
体产生气泡，在细胞内形成空泡而使细胞变形坏
死。③氧自由基的损伤作用。ＥＳＷ产生的巨大压
力和局部高温引起水分的化学变化，产生Ｈ ０ 和
多种氧自由基。④细胞内钙离子超载。冲击波损伤
组织细胞，细胞膜通透性增加．细胞外钙离子进
入，细胞内钙离子超载。
３．２冲击波治疗对脊髓的影响
随着社会的进步，生产生活方式的变革，颈肩
腰背痛发病率逐年升高，且该病反复发作。极难彻
底治愈，严重影响生活。目前虽然治疗方法繁多，
但没有特别简单有效的治疗方法。ＥＳＷ治疗骨筋
膜疾病的疗效满意 但由于其特性，如果应用不
当，也可能对机体造成相应的损伤及并发症。由于
颈肩腰背疼痛部位与脊髓毗邻紧密，可否引入冲
击波进行治疗呢？本实验通过观察ＥＳＷ对大鼠胸
段脊髓产生的影响，旨在评估引入冲击波治疗的
可行性。
本实验使用的是苏州产ＣＳ一２０１２Ａ一９电磁式
冲击波骨科治疗机，设定的发射电压为１０ｋＶ，冲
击能量为０．２５０ｍＪ／ｍｍ ，是该机正常发射能量的
上限．也是我科目前临床治疗骨骼肌肉系统疾病
的常用参数，临床使用中未造成明显的损伤及并
发症。由于经费有限，先采用了该参数进行探索性
研究，其他参数有待下一步实验。
３．２．１ 冲击波处理后大鼠脊髓功能变化 目前对
于脊髓损伤的修复及其功能评价以后肢运动功能
评分最为常用，也最为方便客观。以前多采用
Ｔａｒｌｏｖ标准［９１和运动功能联合评分法（ＣＢＳ）评分，
在Ｔａｒｌｏｖ评分的基础上，Ｂａｓｓｏ等［１Ｏｌ提出了ＢＢＢ
评分标准。该评分不是各个动作的总和，每一个分
数都有一个独立的标准．此外它包含了很多行为
特征，是目前对胸段脊髓损伤修复的功能评价较
好方法。考虑到麻醉后动物的恢复期，本实验未进
行麻醉冲击后４ｈ的评分观察。
本实验结果显示，Ｃ组ＢＢＢ评分达１９分以
上．基本接近正常．说明手术未造成脊髓明显的损
伤及功能障碍。Ａ组和Ｂ组大鼠冲击波冲击后双
后肢肌力部分下降，影响正常行走，ＢＢＢ评分明
显降低，评分最低到１３分，较Ｃ组和Ｄ组均有显
著性差异。说明冲击波对脊髓造成了一定的损伤，
进而导致大鼠后肢出现相应的功能障碍。与Ａ组
比较，Ｂ组各时间点后肢ＢＢＢ评分明显偏低，二
者之间差异有显著性（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．说明在冲击波冲
击时椎板可能有一定的阻挡冲击波作用，减轻了
冲击波对脊髓的损伤，从而表现为Ａ组大鼠后肢
运动功能强于Ｂ组。
３．２．２冲击波处理后大鼠脊髓Ｃ—ｌｏｓ蛋白的表达
情况 Ｃ—ｆｏｓ蛋白属于即刻早基因（ｉｍｍｅｄｉａｔｅ
ｅａｒｌｙ ｇｅｎｅ，ＩＭＧ）编码产物之一。当细胞受到外界
刺激时，在瞬间产生过度表达，神经元受损越重，
受外界刺激越大，需整合的胞内信息就越多，Ｃ—
ｆｏｓ基因的表达就越强ＩｌｌＩ。因此Ｃ—ｌｏｓ的表达可以
作为评价细胞超早期应激状态以及损伤、凋亡程
度的早期指标。
本实验结果显示，Ｃ组和Ｄ组大鼠脊髓灰质
中可见少量散在的Ｃ—ｌｏｓ蛋白表达弱阳性细胞。Ａ
组和Ｂ组大鼠在冲击波处理后４ｈ可见Ｃ—ｌｏｓ蛋
白表达，随时间延长表达逐渐增强，２４ｈ达高峰，
表达阳性细胞主要位于中央管周围灰质，尤以脊
髓前角灰质部最为明显．和Ｃ组、Ｄ组相比ＡＯＤ
值均有显著性差异，说明冲击波对相应冲击部位
脊髓造成了相应的损伤。而Ｂ组表达的ＡＯＤ值
又明显高于Ａ组，说明椎板骨质密度高，声阻抗
中同脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第ｌ０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆｓｐｉｎｅ ａｎｄ印ｉｎａｌ ｃ０ ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０ ７７５
大，阻挡了冲击波部分能量，保护了脊髓。
３．２－３冲击波造成脊髓损伤的可能机制 笔者认
２．Ｒｏｍｐｅ ＪＤ，Ｂｕｃｈ Ｍ，Ｇｅｒｄｅｓｍｅｙｅｒ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ
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３．Ｗａｎｇ ＣＪ，Ｗａｎｇ ＦＳ，Ｙａｎｇ ＫＤ．Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏ—
为，冲击波对脊髓的作用，不同于一般的打击、压
迫、牵拉等脊髓损伤机制。冲击波的能量经耦合剂
传递到大鼠胸背部，由于脊髓与脑脊液（声阻抗和
水分相同）的声阻抗不同，势必产生相应能量的变
ｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｐｌａｎｔａｒ ｆａｓｅｉｉｔｉｓ［Ｊ】ｌＡｍ Ｊ Ｓｐｏｒｔｓ
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４．Ｍｏｕｚｏｐｏｕｌｏｓ Ｇ，Ｓｔａｍａｔａｋｏｓ Ｍ，Ｍｏｕｚｏｐｏｕｌｏｓ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｔｒａｃｏｒ－
ｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｓｈｏｕｌｄｅｒ ｃａｌｃｉｉｆｃ ｔｅｎｄｏｎｉｔｉｓ：ａ
化，产生一定的生物学效应而造成损伤。冲击波的
压力、张力及空泡效应可能使脊髓微循环血管的
内皮细胞通透性增加．加上剪力作用和局部热量，
导致血管破裂、出血，脊髓内血流降低，导致相应
节段微循环结构和血流变化。空泡效应同时产生
大量的氧自由基．随着细胞膜通透性增加后钙离
ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｓｋｅｌｅｔａｌ Ｒａｄｉｏｌ，２００７，３６（９）：８０３－８ｌ１．
５．Ｒｏｍｐｅ ＪＤ，Ｋｉｒｋｐａｔｒｉｃｋ ＣＪ，Ｋｕｌｌｍｅｒ Ｋ，ｅｔ ａ１．Ｄｏｓｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｅｆ－
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保护的实验研究［Ｊ】．华中科技大学学报（医学版），２００７，３７（５）：
６３０－６３２．
子的进入．从而引起细胞坏死、凋亡等一系列反
应，并最终造成脊髓损伤，出现相应病理和功能的
变化。
７．Ｏｇｉｓｔｅ ＪＳ，Ｎｅｊａｔ ＲＪ，Ｒａｓｈｉｄ ＨＨ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｍａｎｎｉｔｏｌ ｉｎ
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ｌｉｔｈｏｔｒｉｐｓｙ［Ｊ］．Ｊ Ｕｒｏｌ，２００３，１６９（３）：８７５—８７７．
８．桂西青．黄建平．韩从辉．等．体外冲击波碎石术对肾细胞内钙
本实验结果表明对大鼠脊髓进行ＥＳＷ冲击
可能造成大鼠脊髓损伤。因此，应用ＥＳＷ治疗脊
柱疾患时需谨慎，至少焦点不宜直接对准脊髓进
行冲击，防止对脊髓造成损伤。但ＥＳＷ冲击的脉
冲能量、发生频率、冲击次数、治疗疗程数和间隔、
发生器不同类型等，都会对实验有很大的影响，具
体在什么条件下ＥＳＷ才能造成脊髓损伤？ＥＳＷ
通过什么机制造成脊髓相应的损伤，均有待进一
步研究和探索。
４参考文献
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ｂｕｒｓｔ ｆｉｒｉｎｇ［ＪＪ．Ｎｅｕｒｏｌ Ｓｃｉ，１９９３，ｌ３（２）：７４４—７５１．
（收稿日期：２００８—０６—２７修回１３期：２００８—０８—２７）
ｔｈｏｔｒｉｐｓｙ）ｉｎ ｎｍｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｆＪ］．Ｃｌｉｎ Ｏ￣ｈｏｐ，２００１，
３８７：２２—４Ｏ．
（英文编审 蒋 欣）
（本文编辑李伟霞）
《实用骨科杂志》征订启事
《实用骨科杂志》是中国科技核心期刊，中国科技论文统计源期刊。１９９４年创刊．月刊，由山西医科大学第二医院承
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2024年5月26日发(作者：凤闲静)
中国脊柱脊髓杂志２００８年第ｌ８卷第ｌ０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆｓｐｉｎｅ ａｎｄ ｉｎｏｌ ｃ０ ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０ ７７１
体外冲击波对大鼠胸段脊髓影响的初步研究
廖冬发，权毅，潘显明，邓 冰，张波，邓少林
（成都军区总医院骨科６１００８３四川省成都市）
【摘要】目的：初步探讨体外冲击波（ＥＳＷ）对大鼠胸段脊髓的影响。方法：雄性ＳＤ大鼠１２６只，随机分为４组，
直接冲击组（Ａ组，４８只），不做椎板切除手术，直接进行冲击波冲击，冲击参数：发射电压１０ｋＶ，冲击能量
０．２５０ｍＪ／ｍｍ２．冲击频率６０次／ｍｉｎ．冲击次数１Ｏ００次；手术后冲击组（Ｂ组，４８只），切除Ｔ７～Ｔ１０椎板，皮肤愈合
后行冲击波处理．参数同Ａ组；手术后不冲击组（Ｃ组，２４只），切除Ｔ７～Ｔ１０椎板，不行冲击波处理；正常对照组
（Ｄ组，６只），不进行任何处理。Ａ、Ｂ、Ｃ组又分为处理后４ｈ、８ｈ、２４ｈ、７２ｈ共４个时间点，Ｄ组不分时间点。Ａ、Ｂ、
Ｃ组处理前、后及Ｄ组行ＢＢＢ评分，并经灌注后取Ｔ７ Ｔ１０脊髓标本，切片行ＨＥ染色观察脊髓损伤情况，用免
疫组化方法观察脊髓Ｃ—ｆｏｓ蛋白的表达。结果：Ａ组和Ｂ组大鼠处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ时ＢＢＢ评分均有下降，以
８ｈ最低，分别为１６．８±０．８分和１４．５±１．０分，处理后各时间点两组间均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），Ａ组和Ｂ组８ｈ、
２４ｈ、７２ｈ时ＢＢＢ评分均明显低于Ｃ组和Ｄ组（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），但Ｃ组和Ｄ组之间无显著性差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。Ａ组和Ｂ
组ＨＥ染色均可见脊髓出血、水肿，神经元变性坏死，且Ｂ组较Ａ组损伤程度重；Ｃ组及Ｄ组未见明显脊髓损
伤表现。Ｂ组脊髓中Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达最强．其次为Ａ组，均以２４ｈ表达最强，平均光密度值分别为０．３９６￣０．００８
和０．２９３￣０．叭３，两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）：Ｃ组及Ｄ组表达均不明显，与Ａ组和Ｂ组比较有显著性差异
（Ｐ＜Ｏ．ｏ１），Ｃ组和Ｄ组之间无显著性差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。结论：发射电压ｌＯｋＶ、冲击能量０．２５０ｒｎＪ／ｍｍｚ的ＥＳＷ可造
成大鼠胸段脊髓一定程度的损伤，冲击时椎板可起到一定保护脊髓的作用。
【关键词】体外冲击波；脊髓损伤；Ｃ—ｆｏｓ；大鼠
中图分类号：Ｒ６８３．２．Ｒ４５４．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４—４０６Ｘ（２００８）一１０—０７７ｌ一０５
Ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｈｅ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｒａｔｓ／ＬＩＡＯ
Ｄｏｎｇｆａ，ＱＵＡＮ Ｙｉ，ＰＡＮ Ｘｉａｎｍｉｎｇ，ｅｔ ａｌ／／Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｐｉｎｅ ａｎｄ Ｓｐｉｎａｌ Ｃｏｒｄ。２００８，１８（１０）：７７１－
７７５
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ（ＥＳＷ）ｏｎ ｔｈｅ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｅｇｍｅｎｔｓ
ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ＥＳＷ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｕｓｉｎｇ １２６ ｍａｌｅ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）
ｒａｔｓ，ｔｈｅｓｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ：ｄｉｒｅｃｔ ｓｈｏｃｋ ｇｒｏｕｐ（Ａ，ｎ＝４８），ｓｈｏｃｋｅｄ ａｆｔｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ
ｇｒｏｕｐ（Ｂ，ｎ＝４８），ｎｏ ｓｈｏｃｋ ａｆｔｅｒ ｏｐｅｒａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ（Ｃ，ｎ＝２４），ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｄ，ｎ＝６）．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ ｗｅｒｅ ｎｏｔ
ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｌａｍｉｎｅｃｔｏｍｙ，ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｓｈｏｃｋｅｄ ｂｙ ＥＳＷ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｍａｃｈｉｎｅ ｗｉｔｈ ｗｏｒｋｉｎｇ ｖｏｌｔａｇｅ ｏｆ
１０ｋＶ．ｅｎｅｒｇｙ ｏｆ ０．２５０ｍＪ／ｍｍ ．ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｏｆ ６０ ｔｉｍｅｓ ｐｅｒ ｍｉｎｕｔｅ ｆｏｒ １０００ ｔｉｍｅｓ．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｅｘｐｅｒｉ—
ｅｎｃｅｄ ｌａｍｉｎｅｃｔｏｍｙ ｆｒｏｍ ｓｅｖｅｎｔｈ ｔｏ ｎｉｎｅｔｈ，ａｎｄ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｓｈｏｃｋｅｄ ｂｙ ＥＳＷ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｍａｃｈｉｎｅ
（ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｗｏｒｋｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｇｒｏｕｐ Ａ） ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｈｅａｌｅｄ．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｃ ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｄ
ｌａｍｉｎｅｃｔｏｍｙ ｆｒｏｍ ｓｅｖｅｎｔｈ ｔｏ ｎｉｎｅｔｈ，ｗｈｉｌｅ ｌｅｆｔ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｔａｃｔ．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｄ ｗｅｒｅ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｎｏ
ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎ ｗｅｒｅ ｈａｒｖｅｓｔｅｄ ａｔ ４ｈ，８ｈ，２４ｈ ａｎｄ ７２ｈ ａｆｔｅｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｄｉｓｐｏｓａｌ ｉｎ ｅａｃｈ ｅｘｐｅｒｉ—
ｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｍｏｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｎｄ ｌｉｍｂｓ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ Ｂａｓｓｏ—
Ｂｅａｔｔｉｅ—Ｂｒｅａｎａｈａｎ（ＢＢＢ） ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｓｈｏｃｋｅｄ．Ｔｗｅｌｖｅ ｒａｔｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ ａｎｄ Ｂ，ｓｉｘ ｒａｔｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｃ ｗｅｒｅ
ｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ ａｔ ｅｖｅｒｙ ｐｈａｓｅ ｐｏｉｎｔｓ ｆｏｒ ｈａｒｖｅｓｔｉｎｇ Ｔ７－Ｔ１０ ｓｐｉｎａｌ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ，ｒｏｕｔｉｎｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｅｃｔｉｏｎ Ｈａｅｍａ—
ｔｏｘｙｌｉｎ—Ｅｏｓｉｎ（ＨＥ）ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ：ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ｔｏ
ｅｘａｍｉｎｅ Ｃ—ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ ＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ ａｎｄ Ｂ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｂｏｔｈ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｓｃｏｒｅ ａｔ ８ｈ ｉｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ，ｔｈｅ ＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ ｉｓ １６．８￣０．８．１４．５±１．０ ｆｏｒ ｇｒｏｕｐ Ｂ＇．Ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ ｓｃｏｒｅ ｗａｓ
第一作者简介：男（１９７５一），医学硕士，主治医师，研究方向：体外冲击波在骨科的应用、四肢骨创伤的治疗
电话：（０２８）８６５７０６２８ Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉａｏｄｏｎｇｆａ＠ｍｅｄｍａｉｌ．ｃｏｌｎ．ｃｎ
通讯作者：权毅
７７２ 中国脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第１０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＳｐｉｎｅ ａｎｄ３ｐｉ，￣ｌａ Ｃｏｒｄ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０
ｇｒｏｕｐ Ｂ＇．Ｔｈｅ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｃ ａｎｄ Ｄ ｗｅｒｅ ｃｌｏｓｅ ｗｉｔｈ ｅａｃｈ ｏｔｈｅｒ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｇｒｏｕｐ
Ｂ ａｎｄ Ａ （Ｐ＜０．０１），ａｎｄ ｔｈｅ ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｇｒｏｕｐ Ａ （Ｐ＜０．０１）．Ａｆｔｅｒ ｓｈｏｃｋｅｄ
ｂｙ ＥＳＷ．ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ａｎｄ ｄｒｏｐｓｙ，ｎｅｕｒｏｎａｌ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ａｍｏｎｇ
ｇｒｏｕｐ Ａ ａｎｄ Ｂ，ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｍｏｒｅ￣ｖｅｒｅ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ａ．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｏｂｖｉ—
ＯＵＳ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ ａｍｏｎｇ ｇｒｏｕｐ Ｃ ａｎｄ Ｄ．Ｔｈｅ Ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｉｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ
ｏｂｖｉｏｕｓ，ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄ ｗａｓ ｇｒｏｕｐ Ａ ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｔ ２４ｈ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉ ｇｈｅｓｔ ａｍｏｎｇ ｆｏｕｒ ｐｈａｓｅ ｐｏｉｎｔｓ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ
ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ（ＡＯＤ）ｓｃｏｒｅ ｏｆ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｔ ２４ｈ ｐｈａｓｅ ｐｏｉｎｔｓ ｗａｓ Ｏ．３９６＿＋０．００８，ｇｒｏｕｐ Ａ ｗａｓ Ｏ．２９３＿＋０．０１３，
ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｒｅｓｐｅｃｔ ｔｏ ＡＯＤ ｓｃｏｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ ｇｒｏｕｐ Ａ （Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｔｈｅｒｅ
ｗｅｒｅ ｎｏ ｏｂｖｉｏｕｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｍｏｎｇ ｇｒｏｕｐ Ｃ ａｎｄ Ｄ（０．１０８±Ｏ．００９ ａｎｄ ０．１０６＿＋０．００５ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ），ｗｈｉｃｈ ｈａｄ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｕｓｅｄ ｄｏｓｅ ｏｆ ＥＳＷ（ｗｏｒｋｉｎｇ
ｖｏｌｔａｇｅ ｏｆ ｌＯｋＶ，ｅｎｅｒｇｙ ｏｆ ０．２５０ｍＪ／ｍｍ。） ｍａｙ ｃａｕｓｅ ｉｎｊｕｒｙ ｔｏ ｔｈｅ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎ ｒａｔｓ，ａｎｄ ｔｈｅ
ｖｅｒｔｅｂｒａｌ ｐｌａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｌｕｍｎ ｃａｎ ｐａｒｔｌｙ ｐｒｏｔｅｃｔ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｈｏｃｋ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＥＳＷ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ；Ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ；Ｃ－ｆｏｓ；Ｒａｔ
【Ａｕｔｈｏｒ Ｓ ａｄｄｒｅｓｓ】Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ，Ｃｈｅｎｇｄｕ Ａｒｍｙ Ｇｅｎｅｒｌａ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，６１００８３，Ｃｈｉｎａ
体外冲击波（ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ，ＥＳＷ）
准大鼠Ｔ７～ＴＩＯ脊髓进行冲击。冲击参数：发射电
压１０ｋＶ．冲击能量０．２５０ｍＪ／ａｒｍ ，冲击频率６Ｏ 对骨筋膜疾病的治疗效果得到公认，临床应用逐
渐广泛。但由于其特性，ＥＳＷ若应用不当也可能
造成机体相应的损伤及并发症。目前国内外学者
均将神经、大血管等处列为其应用的禁区Ｉｌ＿２１。如
次／ｍｉｎ，冲击次数１０００次。Ｂ组大鼠在椎板切除
手术后确认切口皮肤完全愈合（术后７ｄ），再次麻
醉后行冲击波处理，部位及参数同Ａ组。
１．３ ＢＢＢ评分
Ｄ组大鼠在麻醉灌注前进行ＢＢＢ评分，Ａ组
果应用ＥＳＷ对脊柱区域进行治疗，是否会造成脊
髓损伤呢？关于这方面的研究报道不多。本实验通
过观察ＥＳＷ对大鼠脊髓的影响．为ＥＳＷ在临床
颈肩腰背痛治疗中的安全性评估提供实验基础。
１材料与方法
在冲击波处理前、Ｂ组在手术后冲击波处理前、Ｃ
组在手术前及Ａ、Ｂ、Ｃ组在处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ进
行ＢＢＢ评分。采用双人、双盲独立观察大鼠双后
肢的运动功能并记录。
１．４标本制备
Ａ、Ｂ、Ｃ组大鼠经相应处理后，Ａ、Ｂ组于４ｈ、
１．１动物与分组
健康雄性ＳＤ大鼠，体重２００～２５０ｇ．随机分为
４组，直接冲击组（Ａ组，４８只），不做椎板切除手
术，直接进行冲击波冲击；手术后冲击组（Ｂ组，４８
只），切除ｑ＇７一Ｔ１０椎板，皮肤愈合后行冲击波处
理；手术后不冲击组（Ｃ组，２４只），切除Ｔ７～ＴＩＯ
椎板，不行冲击波处理；正常对照组（Ｄ组，６只），
不进行任何处理。Ａ、Ｂ、Ｃ组又分为处理后４ｈ、８ｈ、
８ｈ、２４ｈ、７２ｈ各取１２只，Ｃ组各取６只大鼠，用
１％戊巴比妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）经腹腔注射麻醉后固
定，开胸后经左心室以含肝素钠生理盐水３００ｍｌ
快速灌注冲洗，待右心耳流出冲洗液体清亮后。以
４％多聚甲醛３００ｍｌ缓慢灌注直至大鼠全身僵硬。
灌注完毕后，取出Ｔ７～Ｔ１０脊髓（长约２ｃｍ）。Ｄ组
２４ｈ、７２ｈ共４个时间点，Ａ、Ｂ组每个时间点ｌ２
只，Ｃ组每个时间点６只，Ｄ组不分时间点。
１．２动物模型的建立
１．２．１手术模型的建立 将ＳＤ大鼠随机分组
后，Ｂ、Ｃ组所有大鼠术前１ｄ行后肢功能ＢＢＢ评
不分时间点，同样麻醉灌注后取出Ｔ７ Ｔ１０脊髓。
４％多聚甲醛固定后，常规脱水、石蜡包埋．于中段
横行切片，片厚５１－￣ｍ，备用。
１．５组织学检查
从每只大鼠切片中随机抽取４张行ＨＥ染
分，用１％戊巴比妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）经腹腔内注射麻
醉后，咬除 ～Ｔ１０棘突及椎板，显露该节段脊髓
后逐层缝合，肌注抗生素预防感染。
１．２．２体外冲击波处理Ａ组大鼠用ｌ％戊巴比
妥钠（５０ｍｇ／ｋｇ）经腹腔内注射麻醉后。将苏州产
ＣＳ一２０１２Ａ一９电磁式冲击波骨科治疗机的焦点对
色，光镜检查观察脊髓的病理形态学改变。
１．６ Ｃ—ｌｏｓ蛋白表达的检测
每只大鼠各取切片１０张，常规脱蜡脱水，
ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎ￣３次，０．３％Ｈ２０２室温下封闭内源
性过氧化物酶１０ｍｉｎ，蒸馏水冲洗后ＰＢＳ冲洗
５ｍｉｎ￣３次，热抗原修复，冷却后ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎ￣２
中国脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第１Ｏ期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｍｏｌ ｏｆＳｐｉｎｅ ａｎｄ ｓｐｉｎ０１ ｒｄ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０ ７７３
次，加５％山羊血清孵育１５ｍｉｎ，加入１：２００兔抗
２．２ ＨＥ染色
Ｃ—ｆｏｓ（武汉博士德生物有限公司），在４℃冰箱过
夜，ＰＢＳ冲洗５ｍｉｎｘ３次，加入生物素化山羊抗兔
ＩｇＧ（１：２００），３７℃条件下孵育１２０ｍｉｎ，ＰＢＳ冲洗
５ｍｉｎｘ３次，显微镜控制下３。３ 一二氨基联苯胺
（ＤＡＢ）染色，苏木精复染，１／６００氨水碱化促进蓝
色表达，梯度酒精脱水，二甲苯透明后封片。每个
标本随机选取６张切片，用显微镜（放大４００倍）
观察整张切片的表达情况．阳性结果为神经细胞
呈棕黄色。每张切片随机选取６个视野，用
Ｏｌｙｍｐｕｓ ＢＸ ４１荧光显微镜采像。Ｉｍａｇｅ—Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ
６．０图像分析软件系统对Ｃ—ｆｏｓ蛋白的免疫组化
结果进行半定量分析，计算平均光密度（ＡＯＤ），结
果以Ｘ－－－Ｓ表示
１．７统计学处理
Ｄ组和Ｃ组脊髓ＨＥ染色结果大体正常，神
经元未见明显变化，无胶质细胞增生（图１、２，后
插页Ⅲ）。Ｂ组冲击后４ｈ脊髓组织明显异常，主要
表现为灰白质内有出血．可见弥散的红细胞。神经
元之间间隙增宽，结构疏松化，有轻度水肿现象，
出现少量中等程度核浓缩及碎裂的神经元（图３，
后插页Ⅲ）；随着时间增加（８ｈ，２４ｈ），损伤进一步
加剧，神经元坏死数目有增加，神经元的突起消
失，尼氏体溶解，核浓缩、溶解现象增多，可出现嗜
神经现象，胶质细胞有增生：７２ｈ时脊髓损伤程度
有减轻趋势，水肿减轻，神经元坏死数目有减少。
Ａ组脊髓神经元也表现出神经元间隙增宽．含水
增多，神经元胞浆内有少量颗粒变性和空泡变性，
出现少量中等程度神经元核深染等，与Ｂ组同时
间点比较，各时间点病变程度明显较轻，神经元坏
死数目较少（图４，后插页Ⅲ）。
２．２脊髓组织中Ｃ—ｆ０ｓ蛋白的表达
Ｃ—ｆｏｓ蛋白阳性表达在神经细胞核上．呈棕黄
采用ＳＰＳＳ １ １．５统计分析软件进行处理，对
动物后肢神经功能ＢＢＢ评分、Ｃ—ｆｏｓ ＡＯＤ值结果
采用单因素方差分析。Ｐ＜０．０５为有统计学意义。
２结果
色，圆形或卵圆形，亦有核仁和胞浆染成深褐色。
在不同时间点，脊髓中央管周围、前角、后角、侧角
均有不同程度的Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达，以中央管周围
较为集中，且此处各组差异最明显。Ｄ组和Ｃ组
脊髓灰质可见少量散在的Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达弱阳性
细胞（图５、６，后插页ＩＩ１），图像分析其ＡＯＤ值均
小于０．１５０。Ａ组处理后４ｈ可见Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达，
以前角神经元为主（图７．后插页Ⅲ），８ｈ Ｃ—ｆｏｓ蛋
２．１ ＢＢＢ评分结果
Ａ、Ｂ、Ｃ组大鼠ＢＢＢ评分结果见表１。Ｄ组大
鼠后肢ＢＢＢ评分均为２１分．Ｃ组ＢＢＢ评分达１９
分以上，基本接近正常，两组比较无显著性差异
（Ｐ＞Ｏ．０５）；Ａ组和Ｂ组冲击波处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ
的ＢＢＢ评分明显低于Ｃ组和Ｄ组（Ｐ＜０．０１）。Ｂ组
处理后８ｈ、２４ｈ、７２ｈ评分与Ａ组比较均显著降低
（Ｐ＜０．０１）。
表１ 不同时间点Ａ、Ｂ、Ｃ组大鼠后肢运动功能ＢＢＢ
白表达增强，２４ｈ达高峰，７２ｈ表达有下降；Ｂ组阳
性表达细胞分布区域增多．主要位于中央管周围
灰质，尤以脊髓前角灰质部最为明显（图８。后插
页Ⅲ）。各组Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达情况见表２。Ａ、Ｂ组
平均光密度值与Ｃ、Ｄ组比较均有显著性差异（Ｐ＜
０．０１）。而Ｂ组Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达的平均光密度值又
明显高于Ａ组（Ｐ＜０．０１），Ｃ组与Ｄ组比较无显著
性差异（尸 Ｏ．０５）。
评分 （ ，分）
注：①与同组冲击／术前比较Ｐ＜０．０１；②与Ａ组和Ｃ组同时间
点比较Ｐ＜０．０１；③与同组术前比较Ｐ＞０．０５
表２ Ａ、Ｂ、Ｃ组不同时间点及Ｄ组脊髓组织中Ｃ—ｆｏｓ蛋白表达的累积光密度值 （ ）
注：①与同时间点Ｂ组比较Ｐ＜０．０ｌ；②与同时间点ｃ组及Ｄ组比较Ｐ＜０．０ｌ；③与Ｄ组比较Ｐ＞０．０５
７７４ 中国脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第１０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎｏｌ ｏｆＳｐｉｎ￣ａｎｄ Ｓｐｉｎａｌ Ｃｏｒｄ，２００８，Ｖｏｌ・１８，Ｎｏ・１０
３讨论
３．１体外冲击波的临床应用
体外冲击波治疗（ＥＳＷＴ）作为近年来骨科领
域新的非侵入疗法，短短的十余年来已得到了很
大的发展。ＥＳＷ可以促进骨折愈合，治疗股骨头
无菌性坏死、肩关节钙化性肌腱炎、肱骨外上髁
炎、足底筋膜炎等顽固性骨骼肌肉系统疾病『３Ｉ４】，
取得了良好的临床治疗效果。
适当的能量选择是ＥＳＷ治疗效果的有效保
障．能量过低达不到治疗效果，能量过高可能导致
机体损伤．所以临床选择的能量既要显效又要避
免并发症，但目前各疾病的最佳治疗能量仍不能
准确确定。根据Ｒｏｍｐｅ等【ｓ１的研究，在第二中心点
（Ｓｅｃｏｎｄｆ０ｃａｌＤ０ｉｎｔ）能量密度０．０８～０．２８ｍＪ／ｍｍ 为
低能量，Ｏ．２８～０．６０ｍＪ／ｍｍ 为中能量，大于
０．６ｍＪ／ａｒｍ２为高能量。而中低能量一般不会造成
明显损伤。他们临床追踪了３００多例患者２年，使
用能量密度０．２８ｒｎＪ／ｍｍ２治疗未造成明显的肌腱
损伤。
目前认为ＥＳＷ可以通过以下机制损伤组织
细胞 】：①物理学作用。冲击波产生了强大的压
力、张力，引起细胞、组织的挫伤和灼伤作用。②空
化效应介导机制。冲击波释放后，沿着电极的椭圆
体产生气泡，在细胞内形成空泡而使细胞变形坏
死。③氧自由基的损伤作用。ＥＳＷ产生的巨大压
力和局部高温引起水分的化学变化，产生Ｈ ０ 和
多种氧自由基。④细胞内钙离子超载。冲击波损伤
组织细胞，细胞膜通透性增加．细胞外钙离子进
入，细胞内钙离子超载。
３．２冲击波治疗对脊髓的影响
随着社会的进步，生产生活方式的变革，颈肩
腰背痛发病率逐年升高，且该病反复发作。极难彻
底治愈，严重影响生活。目前虽然治疗方法繁多，
但没有特别简单有效的治疗方法。ＥＳＷ治疗骨筋
膜疾病的疗效满意 但由于其特性，如果应用不
当，也可能对机体造成相应的损伤及并发症。由于
颈肩腰背疼痛部位与脊髓毗邻紧密，可否引入冲
击波进行治疗呢？本实验通过观察ＥＳＷ对大鼠胸
段脊髓产生的影响，旨在评估引入冲击波治疗的
可行性。
本实验使用的是苏州产ＣＳ一２０１２Ａ一９电磁式
冲击波骨科治疗机，设定的发射电压为１０ｋＶ，冲
击能量为０．２５０ｍＪ／ｍｍ ，是该机正常发射能量的
上限．也是我科目前临床治疗骨骼肌肉系统疾病
的常用参数，临床使用中未造成明显的损伤及并
发症。由于经费有限，先采用了该参数进行探索性
研究，其他参数有待下一步实验。
３．２．１ 冲击波处理后大鼠脊髓功能变化 目前对
于脊髓损伤的修复及其功能评价以后肢运动功能
评分最为常用，也最为方便客观。以前多采用
Ｔａｒｌｏｖ标准［９１和运动功能联合评分法（ＣＢＳ）评分，
在Ｔａｒｌｏｖ评分的基础上，Ｂａｓｓｏ等［１Ｏｌ提出了ＢＢＢ
评分标准。该评分不是各个动作的总和，每一个分
数都有一个独立的标准．此外它包含了很多行为
特征，是目前对胸段脊髓损伤修复的功能评价较
好方法。考虑到麻醉后动物的恢复期，本实验未进
行麻醉冲击后４ｈ的评分观察。
本实验结果显示，Ｃ组ＢＢＢ评分达１９分以
上．基本接近正常．说明手术未造成脊髓明显的损
伤及功能障碍。Ａ组和Ｂ组大鼠冲击波冲击后双
后肢肌力部分下降，影响正常行走，ＢＢＢ评分明
显降低，评分最低到１３分，较Ｃ组和Ｄ组均有显
著性差异。说明冲击波对脊髓造成了一定的损伤，
进而导致大鼠后肢出现相应的功能障碍。与Ａ组
比较，Ｂ组各时间点后肢ＢＢＢ评分明显偏低，二
者之间差异有显著性（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．说明在冲击波冲
击时椎板可能有一定的阻挡冲击波作用，减轻了
冲击波对脊髓的损伤，从而表现为Ａ组大鼠后肢
运动功能强于Ｂ组。
３．２．２冲击波处理后大鼠脊髓Ｃ—ｌｏｓ蛋白的表达
情况 Ｃ—ｆｏｓ蛋白属于即刻早基因（ｉｍｍｅｄｉａｔｅ
ｅａｒｌｙ ｇｅｎｅ，ＩＭＧ）编码产物之一。当细胞受到外界
刺激时，在瞬间产生过度表达，神经元受损越重，
受外界刺激越大，需整合的胞内信息就越多，Ｃ—
ｆｏｓ基因的表达就越强ＩｌｌＩ。因此Ｃ—ｌｏｓ的表达可以
作为评价细胞超早期应激状态以及损伤、凋亡程
度的早期指标。
本实验结果显示，Ｃ组和Ｄ组大鼠脊髓灰质
中可见少量散在的Ｃ—ｌｏｓ蛋白表达弱阳性细胞。Ａ
组和Ｂ组大鼠在冲击波处理后４ｈ可见Ｃ—ｌｏｓ蛋
白表达，随时间延长表达逐渐增强，２４ｈ达高峰，
表达阳性细胞主要位于中央管周围灰质，尤以脊
髓前角灰质部最为明显．和Ｃ组、Ｄ组相比ＡＯＤ
值均有显著性差异，说明冲击波对相应冲击部位
脊髓造成了相应的损伤。而Ｂ组表达的ＡＯＤ值
又明显高于Ａ组，说明椎板骨质密度高，声阻抗
中同脊柱脊髓杂志２００８年第１８卷第ｌ０期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆｓｐｉｎｅ ａｎｄ印ｉｎａｌ ｃ０ ，２００８，Ｖｏ１．１８，Ｎｏ．１０ ７７５
大，阻挡了冲击波部分能量，保护了脊髓。
３．２－３冲击波造成脊髓损伤的可能机制 笔者认
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为，冲击波对脊髓的作用，不同于一般的打击、压
迫、牵拉等脊髓损伤机制。冲击波的能量经耦合剂
传递到大鼠胸背部，由于脊髓与脑脊液（声阻抗和
水分相同）的声阻抗不同，势必产生相应能量的变
ｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｐｌａｎｔａｒ ｆａｓｅｉｉｔｉｓ［Ｊ】ｌＡｍ Ｊ Ｓｐｏｒｔｓ
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化，产生一定的生物学效应而造成损伤。冲击波的
压力、张力及空泡效应可能使脊髓微循环血管的
内皮细胞通透性增加．加上剪力作用和局部热量，
导致血管破裂、出血，脊髓内血流降低，导致相应
节段微循环结构和血流变化。空泡效应同时产生
大量的氧自由基．随着细胞膜通透性增加后钙离
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ｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅｓ ｏｎ ｒａｂｂｉｔ ｔｅｎｄｏ ａｃｈｉｌｌｉｓ：ａ ｓｏｎｏｇｒａｐｈｉｅ
ａｎｄ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｊ Ｂｏｎｅ Ｊｏｉｎｔ Ｓｕｒｇ Ｂｒ，１９９８，８Ｏ（３）：
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保护的实验研究［Ｊ】．华中科技大学学报（医学版），２００７，３７（５）：
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子的进入．从而引起细胞坏死、凋亡等一系列反
应，并最终造成脊髓损伤，出现相应病理和功能的
变化。
７．Ｏｇｉｓｔｅ ＪＳ，Ｎｅｊａｔ ＲＪ，Ｒａｓｈｉｄ ＨＨ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｍａｎｎｉｔｏｌ ｉｎ
ａｌｌｅｖｉａｔｉｎｇ ｒｅｎａｌ ｉｎｊｕｒｙ ｄｕｒｉｎｇ ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ ｓｈｏｃｋ ｗａｖｅ
ｌｉｔｈｏｔｒｉｐｓｙ［Ｊ］．Ｊ Ｕｒｏｌ，２００３，１６９（３）：８７５—８７７．
８．桂西青．黄建平．韩从辉．等．体外冲击波碎石术对肾细胞内钙
本实验结果表明对大鼠脊髓进行ＥＳＷ冲击
可能造成大鼠脊髓损伤。因此，应用ＥＳＷ治疗脊
柱疾患时需谨慎，至少焦点不宜直接对准脊髓进
行冲击，防止对脊髓造成损伤。但ＥＳＷ冲击的脉
冲能量、发生频率、冲击次数、治疗疗程数和间隔、
发生器不同类型等，都会对实验有很大的影响，具
体在什么条件下ＥＳＷ才能造成脊髓损伤？ＥＳＷ
通过什么机制造成脊髓相应的损伤，均有待进一
步研究和探索。
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ＮＡ ｂｙ ｋｉｎｄｌｅｄ ｓｅｉｚｕｒｅｓ：ｃｏｍｐｌｅｘ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ ｎｅｕｒｏｎａｌ
ｂｕｒｓｔ ｆｉｒｉｎｇ［ＪＪ．Ｎｅｕｒｏｌ Ｓｃｉ，１９９３，ｌ３（２）：７４４—７５１．
（收稿日期：２００８—０６—２７修回１３期：２００８—０８—２７）
ｔｈｏｔｒｉｐｓｙ）ｉｎ ｎｍｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｆＪ］．Ｃｌｉｎ Ｏ￣ｈｏｐ，２００１，
３８７：２２—４Ｏ．
（英文编审 蒋 欣）
（本文编辑李伟霞）
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