2024年5月26日发(作者:过星腾)
西南国防医药2010年2月第20卷第2期
・
.129.
论著・
家兔血浆中甘露醇浓度测定
邓晶晶,冯 云,李亭亭,尤思路
[摘要] 目的建立家兔血浆中甘露醇含量的测定方法。方法家兔血浆样品沉淀蛋白后,加入高碘酸钠使
用本法测定的血浆中的甘露醇 之氧化成为甲醛,再加入Nash试剂显色,在412 nm处采用比色法进行测定。结果
结论
在0.50~6.00 mg/ml范围内线性关系良好,相关系数r为0.9987;其平均加样回收率为97.59%,RSD为2.5l%。
采用本法测定血浆中甘露醇含量的精密度和重复性良好,并且操作简单易行。
[关键词]血浆;甘露醇;测定;比色法
中图分类号R 977.7 文献标识码A
doi:10.3969/j.issn.1004—0188.2010.02.005 文章编号 1004—0188(20lO)02—0129—03
Deterrnaination of plasma naannitol concentration in rabbits
Deng Jingjing,Feng Yun,Li Tingting,You Silu Experimental Teaching Center,School of Pharmaceutical Science,Chengdu
Medical College,Chengdu,Sichuan,610083,China
[Abstract] Objective To establish a method of determination of plasma mannnitol content in rabbits.Methods
After plasma samples from rabbits were deproteinized,mannitol was oxidated with sodium periodate and further reacted with
Nash reagent,and then its content was detected at a wavelength of 41 2 nm by colorimetry.Results Plasma mannitol level
showed a good linearity within the range of 0.50—6.00 mg/m1.The correlation coeficifent was 0.9978,the average recovery
was 97.59%.and RSD was 2.51%.Conclusion This method for measuring rabbit plasma mannitol is of good precision
and repeatability.It is feasible and easy to operate.
[Key words]plasma;mannitol;determination;colorimetry
甘露醇作为利尿药和脱水药,多年来临床广泛
稀释至100 nal定容,摇匀即得(需临用新配)]。蒸
用于降低颅内压、眼内压、利尿及防治早期急性肾功
馏水为自制高纯水。
能不全。但使用甘露醇可引起脑压反跳而致死,且
1.3实验动物健康家兔4只(四川大学实验动物
大剂量、频繁使用可产生严重的肾毒性¨ ,因此,有
中心提供),雌雄不限,体重2 kg以上。
必要对甘露醇进行血药浓度监测,以预防上述严重
不良反应。笔者按参考文献报道[2],采用比色法
2方法与结果
对实验家兔血浆中的甘露醇注射液进行了含量测定
2.1甘露醇对照品贮备液的制备精密称取甘露
及系统的方法学考察。
醇对照品适量,加蒸馏水溶解制成6 mg/ml的溶液,
1仪器与材料
1.1仪器uV一1102型紫外可见分光光度计(上
作为贮备液,冷藏备用。
2.2家兔血浆制备在家兔耳缘静脉采血后,立即
将血液转入有适量肝素(一般1 nal血液需用肝素
海天美科学仪器有限公司),80。2型离心机(上海
0.1~0.2 nag)作为抗凝剂的离心管内,并轻轻摇匀,
手术器材厂),XW一80型漩涡混合器(上海第一医
离心,分离血浆与血细胞,弃去下层血细胞,取上层
学院仪器厂),HH.2型恒温水浴锅(上海常思工贸
有限公司)。
血浆冷冻保存待用。
2.3甘露醇血浆样品前处理在含有甘露醇对照
1.2试剂高碘酸钠、三氯醋酸、硫代硫酸钠、醋酸
铵、乙酰丙酮、冰醋酸均为分析纯。20%甘露醇注射
液(国药准字H3023037,石家庄四药有限公司),甘
品或甘露醇注射液的家兔血浆内加入10%三氯醋
酸0.2 ml,漩涡混匀后离心,分取上清液0.2 ml置
于另一10 ml试管中,加入0.015 mol/L高碘酸钠盐
露醇对照品(中国药品生物制品检定所)。10%三
氯醋酸溶液,0.015 mol/L高碘酸钠盐酸溶液,0.1
mol/L硫代硫酸钠溶液,Nash试剂[称取醋酸铵15 g
置于100 nal容量瓶中,加入约7O ml蒸馏水溶解后,
加冰醋酸和乙酰丙酮各0.2 nal后振摇,再加蒸馏水
酸溶液1.0 nal,漩涡混匀后,室温放置10 nain,加入
0.1 mol/L硫代硫酸钠溶液2.0 ml,混匀后加入Nash
试剂4.0 ml,并在53℃水浴中保温15 min,放冷至室
温,待用。
2.4标准曲线的绘制 将2.1项下的甘露醇对照
品贮备液依次稀释成为6.00、3.00、2.50、2.00、
作者单位:610083,成都医学院药学院实验教学中心
1.50、1.00、0.50 mg/ml,分别取上述浓度的甘露醇
西南国防医药2010年2月第20卷第2期 ・13l・
加入0.1 moL/L硫代硫酸钠溶液,则是为了除去血 上所述,比色法测定血浆中甘露醇浓度快速、简便、准
浆溶液中过量的高碘酸钠 。
在2005版中国药典中收载的甘露醇注射液的含
确,适用于甘露醇血药浓度的测定。
【参考文献】
【1] Orlowski J.Mannitol crosses the blood—brainbarrier in Reye,s
量测定采用的是氧化还原滴定法,虽然该法操作更为
简单,且成本更低,但灵敏度很低,而本研究的样品为
血浆样品,其具有药物浓度低、干扰成分多的特点,因
此,无法使用滴定分析法准确测定含量。也有文献报
Syndrome[J].Pediatric Research,1982,16:338—339
[2] 刘新云,涂自良,王启斌,等比色法测定兔血浆中甘露醇浓度
J].医药导报,2004,23(11):861—862.
道采用液相色谱法 进行甘露醇含量测定,虽然色谱
分析法在灵敏度方面有明显优势,但实验成本较高,
操作更为复杂,而作为利尿脱水药的甘露醇在血液中
浓度较高,比色分析法的灵敏度已能达到样品分析的
要求,而且比色分析法操作简单快速、成本较低。综
[3] 曾经泽.生物药物分析[M].北京:北京医科大学/中国协和医
科大学联合出版社,1998:57—58.
[4] 董晓东,候宛玲,苏绍哲,等.高效液相色谱法测定葡萄糖和甘
露醇[J].分析化学,2000,28(5):656—657.
(收稿日期:2009—10—19)
・
个案・
碘扫描甲状腺部位仍有较多摄碘组织残留,基本可以认为”
分化型甲癌术后患者4次” I“清甲”无效1例
张王峰,袁梦晖
[关键词]分化型甲状腺癌;” I;治疗
中图分类号R 736 文献标识码B
文章编号1004—0188(2010)02—0131一ol
doi:10.3969/j.issn.1004—0188.2010.02.059
I“清甲”治疗无效。因无其他有效治疗方法,在患者要求下,
给予第4次 I 5.55 GBq(150 mCi)治疗,5个月后复查甲状
腺摄碘率3 h 4.36%,24 h 7.98%,SPECT全身碘扫描颈部
甲状腺部位仍有较多摄碘组织残留。
讨论 甲状腺癌按病理类型分为:乳头状腺癌、滤泡状
腺癌、未分化癌、髓样癌及混合性癌,其中乳头状腺癌、滤泡
状腺癌属分化型,分化型甲状腺癌具有浓缩碘、合成和释放
甲状腺激素的功能,约占甲状腺癌的80%以上,其恶性程度
虽 高,但易发生广泛性转移。对分化型甲状腺癌先行次全
切手术,再行” I内照射治疗,利用”‘I所发射出的射线有效
地破坏残余组织及转移灶…已为医学界共识。李尧梅等
病例男性,67岁,因乳头状甲状腺癌术后1个月,欲
行…I“清甲”治疗入院。入院查体:体温36.8℃,脉搏65次/
min,呼吸20次/min,血压120/75 mmHg。心肺未见异常,腹
平坦,无压痛、反跳痛及肌紧张,未扪及明显包块结节,肝脾
未触及,肝肾无叩痛。专科检查:甲状腺未触及,颈部甲状腺
部位见一约10 cm新鲜手术愈合线,愈合佳,颈部、颌下、锁
骨上等处未触及肿大淋巴结。人院检查:(1)甲状腺功能5
项:TSH 20.05 mlU/L,FT 0.67 pmo ̄I ,FT4 3.26 pmol/1 ,T3
对73例分化型甲状腺癌 I“清甲”治疗观察发现,” I一次
“清甲”率可达77%以上,其余23%不完全清除。多数情况
下,次全切手术加2~3次” I治疗可以完全清除甲状腺组
织;少数情况下,由于残余甲状腺组织对 I不敏感,摄碘率
较低,影响“清甲”效果,SPECT全身碘扫描颈部甲状腺组织
也显影不良。本例患者甲状腺摄碘率较高,每次治疗后全身
碘扫描颈部有较多摄碘组织残留,5—6个月后复查”。I“清
甲”又几乎没有效果,比较罕见。分析可能原因:(1)患者残
留甲状腺组织对…I产生耐受,每次虽然能摄取” l,但对” I
电离辐射生物效应不敏感;(2)重复治疗时” I剂量过小,没
起到应有治疗作用,反而刺激甲状腺增生;(3)射线治疗导
致部分甲状腺组织纤维化,在TSH促进下,其余甲状腺组织
反应性增生;(4)患者 I治疗前后空腹时间不够,影响治疗
效果。” I“清甲”治疗体会:(1)患者” I治疗前后准备要严
格;(2)” I重复治疗剂量要加大,第2次应给予5.55 GBq
0.28 nmo ̄L,T 16.24 nmol/L;(2)甲状腺超声双叶甲状腺
大部缺如,仅见少量甲状腺组织残留;(3)甲状腺摄碘率:3 h
5.62%,24 h 9.05%;(4)心电图:窦性心动过缓;(5)血常
规:白细胞6.7 x 10 /I ,中性粒细胞63%,红细胞
5.1×10 /L,血红蛋白146 g/L,血小板180×10 /L。其余
检测项目(一)。
患者术前未发现转移灶,术后来行甲状腺素替代治疗并
低碘饮食,符合” I治疗条件。进行相关准备后,给予患者
”。I 3
7 GBq(100 mCi),嘱2 h后方可进食,服用…I当天多
.
饮水,口服维生素C片及酸性食物,常规给予强的松
30 mg/d,13服l W。服” I后l W行SPECT全身碘扫描,见
甲状腺部位有较多摄碘组织残留,其余部位未见明显摄碘组
织。 I治疗后1 W,开始甲状腺素替代治疗,嘱患者4个月后
复查。4个月后复查甲状腺摄碘率较治疗前无明显变化,
SPECT全身碘扫描仍见甲状腺部位有较多摄碘组织残留。
进行相关准备后,于首次 I治疗后5个月给予患者第2
次 I 4.44 GBq(120 mCi)治疗。因未能达到“清甲”目的,
于2次 I治疗后6个月给予患者第3次”’I 4.44 GBq(120
(150 mCi)治疗,以免没起到治疗作用,反而刺激甲状腺;
(3)” I治疗后1 W后应补充一定量甲状腺素,避免由于体内
甲状腺激素缺乏而引起甲状腺组织反应性增生。
【参考文献】
[1] 周申,_f浩卅,叶维新,等.核医学[M].4版.北京:人民卫生
出版社.2000:2l4.
[2] 李尧梅,刘海娜,王宇峰,等.” 1‘清[{i”治疗分化型甲状腺癌
的临床应用观察 J].徐州医学院学报,2008,28(2):118—120.
mCi)治疗。5个月后复查甲状腺摄碘率仍较高,SPECT全身
作者单位:530021南宁,解放军303医院甲亢中心(张王峰);第p={l_
军医大学唐都医院核医学科(袁梦晖)
(收稿日期:2009-09・25)
2024年5月26日发(作者:过星腾)
西南国防医药2010年2月第20卷第2期
・
.129.
论著・
家兔血浆中甘露醇浓度测定
邓晶晶,冯 云,李亭亭,尤思路
[摘要] 目的建立家兔血浆中甘露醇含量的测定方法。方法家兔血浆样品沉淀蛋白后,加入高碘酸钠使
用本法测定的血浆中的甘露醇 之氧化成为甲醛,再加入Nash试剂显色,在412 nm处采用比色法进行测定。结果
结论
在0.50~6.00 mg/ml范围内线性关系良好,相关系数r为0.9987;其平均加样回收率为97.59%,RSD为2.5l%。
采用本法测定血浆中甘露醇含量的精密度和重复性良好,并且操作简单易行。
[关键词]血浆;甘露醇;测定;比色法
中图分类号R 977.7 文献标识码A
doi:10.3969/j.issn.1004—0188.2010.02.005 文章编号 1004—0188(20lO)02—0129—03
Deterrnaination of plasma naannitol concentration in rabbits
Deng Jingjing,Feng Yun,Li Tingting,You Silu Experimental Teaching Center,School of Pharmaceutical Science,Chengdu
Medical College,Chengdu,Sichuan,610083,China
[Abstract] Objective To establish a method of determination of plasma mannnitol content in rabbits.Methods
After plasma samples from rabbits were deproteinized,mannitol was oxidated with sodium periodate and further reacted with
Nash reagent,and then its content was detected at a wavelength of 41 2 nm by colorimetry.Results Plasma mannitol level
showed a good linearity within the range of 0.50—6.00 mg/m1.The correlation coeficifent was 0.9978,the average recovery
was 97.59%.and RSD was 2.51%.Conclusion This method for measuring rabbit plasma mannitol is of good precision
and repeatability.It is feasible and easy to operate.
[Key words]plasma;mannitol;determination;colorimetry
甘露醇作为利尿药和脱水药,多年来临床广泛
稀释至100 nal定容,摇匀即得(需临用新配)]。蒸
用于降低颅内压、眼内压、利尿及防治早期急性肾功
馏水为自制高纯水。
能不全。但使用甘露醇可引起脑压反跳而致死,且
1.3实验动物健康家兔4只(四川大学实验动物
大剂量、频繁使用可产生严重的肾毒性¨ ,因此,有
中心提供),雌雄不限,体重2 kg以上。
必要对甘露醇进行血药浓度监测,以预防上述严重
不良反应。笔者按参考文献报道[2],采用比色法
2方法与结果
对实验家兔血浆中的甘露醇注射液进行了含量测定
2.1甘露醇对照品贮备液的制备精密称取甘露
及系统的方法学考察。
醇对照品适量,加蒸馏水溶解制成6 mg/ml的溶液,
1仪器与材料
1.1仪器uV一1102型紫外可见分光光度计(上
作为贮备液,冷藏备用。
2.2家兔血浆制备在家兔耳缘静脉采血后,立即
将血液转入有适量肝素(一般1 nal血液需用肝素
海天美科学仪器有限公司),80。2型离心机(上海
0.1~0.2 nag)作为抗凝剂的离心管内,并轻轻摇匀,
手术器材厂),XW一80型漩涡混合器(上海第一医
离心,分离血浆与血细胞,弃去下层血细胞,取上层
学院仪器厂),HH.2型恒温水浴锅(上海常思工贸
有限公司)。
血浆冷冻保存待用。
2.3甘露醇血浆样品前处理在含有甘露醇对照
1.2试剂高碘酸钠、三氯醋酸、硫代硫酸钠、醋酸
铵、乙酰丙酮、冰醋酸均为分析纯。20%甘露醇注射
液(国药准字H3023037,石家庄四药有限公司),甘
品或甘露醇注射液的家兔血浆内加入10%三氯醋
酸0.2 ml,漩涡混匀后离心,分取上清液0.2 ml置
于另一10 ml试管中,加入0.015 mol/L高碘酸钠盐
露醇对照品(中国药品生物制品检定所)。10%三
氯醋酸溶液,0.015 mol/L高碘酸钠盐酸溶液,0.1
mol/L硫代硫酸钠溶液,Nash试剂[称取醋酸铵15 g
置于100 nal容量瓶中,加入约7O ml蒸馏水溶解后,
加冰醋酸和乙酰丙酮各0.2 nal后振摇,再加蒸馏水
酸溶液1.0 nal,漩涡混匀后,室温放置10 nain,加入
0.1 mol/L硫代硫酸钠溶液2.0 ml,混匀后加入Nash
试剂4.0 ml,并在53℃水浴中保温15 min,放冷至室
温,待用。
2.4标准曲线的绘制 将2.1项下的甘露醇对照
品贮备液依次稀释成为6.00、3.00、2.50、2.00、
作者单位:610083,成都医学院药学院实验教学中心
1.50、1.00、0.50 mg/ml,分别取上述浓度的甘露醇
西南国防医药2010年2月第20卷第2期 ・13l・
加入0.1 moL/L硫代硫酸钠溶液,则是为了除去血 上所述,比色法测定血浆中甘露醇浓度快速、简便、准
浆溶液中过量的高碘酸钠 。
在2005版中国药典中收载的甘露醇注射液的含
确,适用于甘露醇血药浓度的测定。
【参考文献】
【1] Orlowski J.Mannitol crosses the blood—brainbarrier in Reye,s
量测定采用的是氧化还原滴定法,虽然该法操作更为
简单,且成本更低,但灵敏度很低,而本研究的样品为
血浆样品,其具有药物浓度低、干扰成分多的特点,因
此,无法使用滴定分析法准确测定含量。也有文献报
Syndrome[J].Pediatric Research,1982,16:338—339
[2] 刘新云,涂自良,王启斌,等比色法测定兔血浆中甘露醇浓度
J].医药导报,2004,23(11):861—862.
道采用液相色谱法 进行甘露醇含量测定,虽然色谱
分析法在灵敏度方面有明显优势,但实验成本较高,
操作更为复杂,而作为利尿脱水药的甘露醇在血液中
浓度较高,比色分析法的灵敏度已能达到样品分析的
要求,而且比色分析法操作简单快速、成本较低。综
[3] 曾经泽.生物药物分析[M].北京:北京医科大学/中国协和医
科大学联合出版社,1998:57—58.
[4] 董晓东,候宛玲,苏绍哲,等.高效液相色谱法测定葡萄糖和甘
露醇[J].分析化学,2000,28(5):656—657.
(收稿日期:2009—10—19)
・
个案・
碘扫描甲状腺部位仍有较多摄碘组织残留,基本可以认为”
分化型甲癌术后患者4次” I“清甲”无效1例
张王峰,袁梦晖
[关键词]分化型甲状腺癌;” I;治疗
中图分类号R 736 文献标识码B
文章编号1004—0188(2010)02—0131一ol
doi:10.3969/j.issn.1004—0188.2010.02.059
I“清甲”治疗无效。因无其他有效治疗方法,在患者要求下,
给予第4次 I 5.55 GBq(150 mCi)治疗,5个月后复查甲状
腺摄碘率3 h 4.36%,24 h 7.98%,SPECT全身碘扫描颈部
甲状腺部位仍有较多摄碘组织残留。
讨论 甲状腺癌按病理类型分为:乳头状腺癌、滤泡状
腺癌、未分化癌、髓样癌及混合性癌,其中乳头状腺癌、滤泡
状腺癌属分化型,分化型甲状腺癌具有浓缩碘、合成和释放
甲状腺激素的功能,约占甲状腺癌的80%以上,其恶性程度
虽 高,但易发生广泛性转移。对分化型甲状腺癌先行次全
切手术,再行” I内照射治疗,利用”‘I所发射出的射线有效
地破坏残余组织及转移灶…已为医学界共识。李尧梅等
病例男性,67岁,因乳头状甲状腺癌术后1个月,欲
行…I“清甲”治疗入院。入院查体:体温36.8℃,脉搏65次/
min,呼吸20次/min,血压120/75 mmHg。心肺未见异常,腹
平坦,无压痛、反跳痛及肌紧张,未扪及明显包块结节,肝脾
未触及,肝肾无叩痛。专科检查:甲状腺未触及,颈部甲状腺
部位见一约10 cm新鲜手术愈合线,愈合佳,颈部、颌下、锁
骨上等处未触及肿大淋巴结。人院检查:(1)甲状腺功能5
项:TSH 20.05 mlU/L,FT 0.67 pmo ̄I ,FT4 3.26 pmol/1 ,T3
对73例分化型甲状腺癌 I“清甲”治疗观察发现,” I一次
“清甲”率可达77%以上,其余23%不完全清除。多数情况
下,次全切手术加2~3次” I治疗可以完全清除甲状腺组
织;少数情况下,由于残余甲状腺组织对 I不敏感,摄碘率
较低,影响“清甲”效果,SPECT全身碘扫描颈部甲状腺组织
也显影不良。本例患者甲状腺摄碘率较高,每次治疗后全身
碘扫描颈部有较多摄碘组织残留,5—6个月后复查”。I“清
甲”又几乎没有效果,比较罕见。分析可能原因:(1)患者残
留甲状腺组织对…I产生耐受,每次虽然能摄取” l,但对” I
电离辐射生物效应不敏感;(2)重复治疗时” I剂量过小,没
起到应有治疗作用,反而刺激甲状腺增生;(3)射线治疗导
致部分甲状腺组织纤维化,在TSH促进下,其余甲状腺组织
反应性增生;(4)患者 I治疗前后空腹时间不够,影响治疗
效果。” I“清甲”治疗体会:(1)患者” I治疗前后准备要严
格;(2)” I重复治疗剂量要加大,第2次应给予5.55 GBq
0.28 nmo ̄L,T 16.24 nmol/L;(2)甲状腺超声双叶甲状腺
大部缺如,仅见少量甲状腺组织残留;(3)甲状腺摄碘率:3 h
5.62%,24 h 9.05%;(4)心电图:窦性心动过缓;(5)血常
规:白细胞6.7 x 10 /I ,中性粒细胞63%,红细胞
5.1×10 /L,血红蛋白146 g/L,血小板180×10 /L。其余
检测项目(一)。
患者术前未发现转移灶,术后来行甲状腺素替代治疗并
低碘饮食,符合” I治疗条件。进行相关准备后,给予患者
”。I 3
7 GBq(100 mCi),嘱2 h后方可进食,服用…I当天多
.
饮水,口服维生素C片及酸性食物,常规给予强的松
30 mg/d,13服l W。服” I后l W行SPECT全身碘扫描,见
甲状腺部位有较多摄碘组织残留,其余部位未见明显摄碘组
织。 I治疗后1 W,开始甲状腺素替代治疗,嘱患者4个月后
复查。4个月后复查甲状腺摄碘率较治疗前无明显变化,
SPECT全身碘扫描仍见甲状腺部位有较多摄碘组织残留。
进行相关准备后,于首次 I治疗后5个月给予患者第2
次 I 4.44 GBq(120 mCi)治疗。因未能达到“清甲”目的,
于2次 I治疗后6个月给予患者第3次”’I 4.44 GBq(120
(150 mCi)治疗,以免没起到治疗作用,反而刺激甲状腺;
(3)” I治疗后1 W后应补充一定量甲状腺素,避免由于体内
甲状腺激素缺乏而引起甲状腺组织反应性增生。
【参考文献】
[1] 周申,_f浩卅,叶维新,等.核医学[M].4版.北京:人民卫生
出版社.2000:2l4.
[2] 李尧梅,刘海娜,王宇峰,等.” 1‘清[{i”治疗分化型甲状腺癌
的临床应用观察 J].徐州医学院学报,2008,28(2):118—120.
mCi)治疗。5个月后复查甲状腺摄碘率仍较高,SPECT全身
作者单位:530021南宁,解放军303医院甲亢中心(张王峰);第p={l_
军医大学唐都医院核医学科(袁梦晖)
(收稿日期:2009-09・25)