2024年9月1日发(作者：力奇文)

广东医学

2020

年

10

月第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

・

2071

•

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

途径对慢性间歇低氧小鼠

脏器的影响及大株红景天对其脏器的保护作用

*

成俊芬

'

，

戴彩同

S

吴格怡

'

，

黎雄斌

'

，

林永联

'

，

梁一波'

，

陈鸣娣

*

湛江市第二人民医院'呼吸内科

，

'科教科

，

*

重症监护室(广东湛江

524000)

；

'广东医科大学研究生院(广东湛江

524000

)

【

摘要

1

目的

通过建比慢性间歇低氧小鼠模型探讨晚期糖基化终末产物

(

advanced

glycation

end

prod

­

ucts,

AGEs)

-糖基化终末产物受体

(

advanced

glycosylation

end

product

-

specific

receptor

,

RAGE

)

/

核因子-

k

B(

NF

-

k

B

)

途径与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

(

obstmetive

sleep

apnea

syndrome

,

OSAS

)

脏器损伤的关系以

及大株红景天注射液对其脏器的保护作用

〉

方法

采用酶联免疫吸附测定法

(ELISA)

检测

10

只健康对照组

小鼠(对照组)

、

11

只单纯慢性间歇低氧小鼠

(

A

组)

、

11

只慢性间歇低氧后再复氧小鼠

(B

组)

、

11

只慢性间

歇低氧后使用大株红景天注射液腹腔注射的小鼠

(

C

组)血清中

AGEs

、

白细胞介素-

6(lL-6)

、

肿瘤坏死因

子-

a(

TNF

-

a)

的表达水平

，

用

Western

Blotting

方法检测小鼠大脑及心脏中

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白的表达情

况

，

并观察经

HE

染色后组织形态学改变情况

：

结果

ELISA

结果

：

与对照组相比

，

A

组小鼠血清中

ACEs

、

IL

-6,

TNF-

a

水平显著升高

(

P

<

0.

05

)

；

与

A

组对比

，

B

组及

C

组小鼠血清

AGEs

水平有下降趋势

(

P>

0.

05)

；

与

A

组相比

，

C

组血清

IL-6

水平有所降低

(

P

<

0.

05

)

o

而

B

组及

C

组之间差异无统计学意义

(

P

>

0.

05)

；

而在血清

TNF-a

水平方面

，

B

组及

C

组均较

A

组下降

(

P<0.05)

；

而

B

组及

C

组两组间差异无统计

学意义

(

P>0.05)

。

RAGE

免疫组化结果

：

心脏组织

：

对照组小鼠

RAGE

及

NF

-

k

B

的表达最弱

；

A

组小鼠的

NF-

k

B

的表达在各组中表达最强

，

其

RAGE

蛋白表达比对照组及

B

组强

，

而与

C

组相仿

；

C

组小鼠

RAGE

及

NF-

k

B

较对照组及

B

组表达增多

大脑组织

：

A

组的

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白在各组小鼠的大脑组织中表达

最强；

对照组小鼠

RAGE

表达较少，

NF-

k

B

蛋白在各组中表达最弱

；

与

A

组相比

，

C

组的

RAGE

表达稍有减

少

，而

NF-

k

B

的表达则较其有更为明显的下降

。

HE

染色结果

：

对照组小鼠心肌组织结构清晰完整、

界限清

楚

、

排列紧密

；

而

A

组小鼠心肌组织排列紊乱，

结构

、

纹理不清

，

部分肌细胞核固缩深染

。

B

组小鼠心肌结构

较

A

组小鼠清晰,核固缩深染现象亦较其减少

，

而

C

组小鼠心肌结构较清楚

，

排列亦较紧密

。

结论

OSAS

可

引起多器官

、

组织如心脏

、

大脑组织的损害

。

OSAS

可激活

AGEs

- RAGE/NF

-

k

B

通路

，

调节炎症细胞释放

IL-6

、

TNF-a

等炎症因子

，

或是

OSAS

易合并多脏器损害的原因之一

。

大株红景天注射液有一定程度的抗

炎作用

，

可用于防治

OSAS

多脏器的损害

，

但其作用机制与

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

信号通路的激活■无明显

关系

。

【

关键词】

慢性间歇低氧

；

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

；

大株红景天；

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

【

中图分类号

】

R34

；

R364

【文献标志码)

A

DOI

：

10.

13820/j.

cnki.

gdyx.

20191714

The

effects

of

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

pathway

and

protection

of

Rhodiola

on

organs

of

mice

with

chronic

inter

­

mittent

hypoxia.

CHENG

Jun

-

fen

,

DAI

Cai

-

tong

,

WU

Ge

-yi,

LI

Xiong

-

bin

,

LIN

Yong

-

lian

,

LIANG

Yi

-

bo

,

CHEN

Ming

-

di.

*

Respiratory

Department

of

Second

People's

Hospital

of

Zhanjiang

,

Zhanjiang

524000

,

Guangdong

,

China

[

Abstract

]

Objective

To

establish

a

chronic

intermittent

hypoxic

mouse

model,

thus

to

investigate

the

correla

­

tion

between

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

pathway

and

obstructive

sleep

apnea

syndrome

(

OSAS)

and

the

protective

effect

of

Rhodiola

injection

on

mouse

organs.

Methods

The

expression

of

serum

AGEs,

IL-6

and

TNF

-

a

of

mice

were

as­

sessed

in

10

healthy

control

mice,

11

chronic

intermittent

hypoxia

(

CIH)

mice

(

Group

A

)

,

11

chronic

intermittent

hy

­

poxic

reoxygenation

mice

(

Group

B

)

,

and

11

chronic

intermittent

hypoxia

mice

which

injected

with

Rhodiola

(

Group

C

).

RAGE

and

NF

-

k

B

protein

expression

in

mouse

brain

and

heart

was

assessed

by

Western

Blotting.

Results

Compared

with

the

control

group

,

the

serum

level

of

ACEs,

IL-6

and

TNF

-

a

were

significantly

increased

in

Group

A

(

P

<

*基金项目

：

湛江市科技计划项目

(2OI5AO1O33

)

・

2072

・

广东医学

2020

年

10

月

第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

0.

05

).

Compared

with

Group

A

,

the

serum

level

of

AGEs

in

Group

B

and

C

were

reduced

(

P

>

0.

05

).

Compared

with

Group

A,

the

serum

level

of

IL

-

6

was

significantly

lower

in

Group

C

(

P

<

0.

05

)

；

while

there

was

no

significant

differ

­

ence

between

Group

B

and

C.

The

serum

level

of

TNF

—

a

was

significantly

lower

in

Group

B

and

C

than

in

Group

A

(

P

V

0.

05

)

;

there

was

also

no

significant

difference

between

the

Group

B

and

C

(

P

〉

0.

05

).

In

heart

tissue

,

the

expression

of

RAGE

and

NF

-

k

B

was

the

weakest

in

the

control

group

；

the

expression

of

NF

-

k

B

in

Group

A

was

the

strongest

among

the

4

groups

,

and

its

RAGE

protein

expression

was

stronger

than

control

group

and

Group

B

,

but

similar

to

Group

C.

The

expression

of

RAGE

and

NF

一

k

B

in

Group

C

was

increased

compared

with

normal

control

group

and

Group

B.

In

brain

tissue

,

RAGE

and

NF

一

k

B

proteins

were

most

strongly

expressed

in

Group

A

among

the

4

groups.

Normal

control

mice

had

less

RAGE

expression

,

and

the

NF

—

k

B

protein

was

the

weakest

expressed

among

the

4

groups.

Compared

with

Group

A

,

the

RAGE

expression

in

Group

C

was

slightly

reduced

；

but

the

expression

of

NF

一

k

B

was

significantly

lower

than

Group

A.

The

microstructure

of

myocardial

tissue

in

the

normal

control

group

was

clear

and

complete

,

with

clear

bounda

­

ries

and

close

alignment.

In

Group

A

,

the

myocardial

tissue

was

disorderly

arranged

,

the

stnjcture

and

texture

were

un

­

clear

,

with

condensed

and

deeply

stained

muscle

cells.

In

Group

B

,

it

was

clearer

than

that

of

Group

A

,

and

nuclear

py-

knosis

was

also

reduced.

The

myocardial

structure

of

Group

C

was

clearer

and

more

closely

arranged.

Conclusions

Ob

­

structive

sleep

apnea

syndrome

(

OSAS

)

can

cause

the

damage

in

multiple

organs

or

tissues

such

as

the

heart

and

brain.

The

pathway

of

AGEs

一

RAGE/NF

一

k

B

can

be

activated

to

adjust

the

release

of

inflammatory

cytokines,

including

IL

-6

and

TNF

-

a

in

OSAS,

probably

causing

the

organ

damage

in

OSAS.

The

Rhodiala

injection

has

a

certain

anti

-

inflamma

­

tory

effects

,

and

can

be

used

for

prevention

and

treatment

of

multiple

organ

damage

in

OSAS,

but

its

mechanism

is

not

as­

sociated

with

the

activation

of

AGEs

一

RAGE/NF

-

kB

pathway.

[

Key

words

]

chronic

intermittent

hypoxia

；

obstructive

sleep

apnea

syndrome

；

Rhodiala

；

AGEs

一

RAGE/NF

-

k

B

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

(

OSAS)

是临床上

通气指数以及肥胖指数等均有不同程度的改善

，

提

常见的一种睡眠呼吸障碍性疾病

，

男性成人患病率

为

3%

~7%,

女性为

2%

~5%

〔门

。

其主要特点是夜

示红景天胶囊可以改善

OSAS

患者的心功能

，

但通

过何种机制改善症状则国内外均未见报道

。

2015

年

间睡眠时频繁的呼吸暂停和通气不足

，

导致频发血

氧饱和度下降

，

突出的临床表现是睡眠打鼾伴反复

7

月至

2017

年

12

月本研究将通过建立慢性间歇低氧

小鼠模型模拟人体

OSAS

疾病

，

探讨

AGEs

-糖基化终

末产物受体

(

advanced

glycosylation

end

product

—

憋醒

，

白天精神不振伴嗜睡等,是一种发病率高并可

严重影响生活并危及生命的疾病

。

中华医学会睡眠

specific

receptor

,

RAGE

)

/

核因子

-

k

B(

NF

-

k

B)

信

号通路与

OSAS

多脏器损害的关系

，

为

OSAS

及其

并发症的防治提供更多的方向

。

在上述研究的同

呼吸障碍学组已在

2011

版中的阻塞性睡眠呼吸暂

停综合征的诊治指南⑵中提

th

：

OSAS

或可引起或

加重多脏器

、

多系统疾病的发展

，

如高血压

、

冠心病

、

心律失常

、

2

型糖尿病

、

脑血栓

、

脑出血

、

痴呆症

、

精

时

，

进一步了解大株红景天对

OSAS

脏器的作用并

探讨其中的机制

，

为其在临床上用于治疗

OSAS

多

脏器损害提供更多可靠的依据

，

亦能为我国中医药

在临床上的应用提供更多的经验及循证依据

，

对进

一步开发大株红景天的临床应用前景及弘扬我国优

神异常

、

遗尿

、

肾功能损害等

。

晚期糖基化终末产物

(

advanced

glycation

end

products

,

AGEs

)

是近年研

究的一个热点

，

它是蛋白质和脂类与还原糖在非酶

糖基化后生成的多种不同物质的统称

。

研究⑶发

秀的中医药文化有着重要的意义

。

现

，

衰老

、

高血糖

、

肾功能衰竭

、

氧化应激及炎性反应

1

材料与方法

1.1

实验动物与材料

清洁级

BALB/c

小鼠

53

等因素可促进

AGEs

的形成

。

近年来陆续有研究发

现

，

在

OSAS

患者体内亦存在有

AGEs

水平升高的现

只

，

雄性

，

体重

(

18

±2)g,

购买于广东省医学实验动

物中心[许可证号

SCXK(

粤

)

2013

-

0002

]

0

小鼠

象⑷

，

但在

OSAS

患者中血清

AGEs

的增加是否与

OSAS

的高心血管风险有关仍有待研究

。

红景天是

多年生草本植物

，

常生长在高原地区

，

其全草均可入

IL-6

ELISA

试剂盒

、

小鼠

AGEs

ELISA

试剂盒和小

鼠

TNF-«

ELISA

试剂盒购于北京诚林生物科技有

药

，

在其基础上提取的大株红景天注射液现已在临

床上被广泛应用

，

具有活血化瘀

、

清热解毒等功效

。

限公司

；

兔抗小鼠

RAGE

抗体购于美国

SANTA-

CRUZ

公司

；

兔抗小鼠

NF-

k

B

抗体购于美国

SIG

­

MA

公司

；

兔抗小鼠

B

-

actin

抗体购于美国

SANTA

­

CRUZ

公司

o

梁光彬等⑸在研究观察

60

例应用红景天胶囊治疗

OSAS

患者,发现患者心功能指标

、

睡眠呼吸暂停低

广东医学

2020

年

10

月第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

•

2073

•

1

-

2

动物建模与分组

将

53

只雄性

BALB/c

小鼠

规喂养

，模型组小鼠放置于间歇低氧舱内

（

图

1

）

,

每

随机分为正常对照组

（

对照组

）

15

只和间歇低氧模

天间歇低氧

8

h,

共

6

周

，

建立慢性间歇性低氧小鼠

型组

（

模型组

）

38

只

。

对照组小鼠在普通环境下常

模型以模拟人体

OSAS

。

k

s

量计

ft

氮气

流量计

S-

A

空气

增加

N?

使

0

2

含量降低

，

以低氧-再氧合为一

化物酶标记的检测抗体,封膜后再温育

1

h,

反应

，

个循环

，

循环总时间为

8

min,

首先向低氧舱内输入

显色后加入终止液

,450

nm

波长测量吸光度

（

0D

浓度为

99%

的氮气

（

约

60

s

）

，

舱内氧浓度逐渐降至

值

）

，

以标准品浓度绘制标准曲线

，

计算样品

IL-6

、

8.5%

，

在此浓度维持

240

s

后

，

通过排除

N?

和输入

的含量

。

空气

（

约

60

s

）

使动物舱内

0

2

浓度逐渐升至

21%,

1.3.3

Western

blot

将

-

80

七取出的组织解冻

、

去

并持续

120

s

。

实验周期为

6

周

，

每周

7

d,

每天间歇

除残余血液

，

用液氮将其研磨成粉末，

加入适量含

低氧时间为

8

h

（

09

：

00~

17

：

00

）

。

PMSF

的细胞裂解液

，

离心后提取出组织蛋白

。

用

第

6

周时随机选取模型组及对照组小鼠各

5

BCA

法蛋白测定

，

计算出各样品蛋白的实际浓度

。

配

只,抽取心脏动脉血行血气分析检测造模是否成功

。

置

10%

分离胶及

5%

浓缩胶

，

插上梳子

，

制成

SDS-

造模成功后

，

将模型组随机分

A

、

B

、

C

三组各

11

只

，

PDGE

凝胶

，

加入

1

x

电泳缓冲液

，

将处理好的蛋白和

B

组终止间歇低氧条件

，

恢复普通环境喂养

，

模拟改

MARK

依序加样

，

恒压

80

V

电泳

30

min,

将样品压

善通气治疗

4

周

，

A

及

C

组继续予每天

8

h

间歇低

成窄带后调整为

120

V

电泳

90

min,

转膜

，

洗膜

、

封

氧

，

在上述条件下,

C

组小鼠每天予腹腔注射治疗量

闭

，

剪下目的蛋白及内参条带置于稀释后的一抗中

大株红景天注射液[剂量

：

52

mg/

（

kg

•

d

）

]4

周

，

B

、

（

RAGE

抗体

：

1

：

500

；

NF-

k

B

抗体

：

l

：

500

；

p-actin

抗

C

组及对照组同时予同体积的生理盐水腹腔注射

4

体

：

1

：

1

000

）

4T

摇床孵育过夜

，

复温

，

洗膜

，

将膜放

周

。

即造模成功后

，

将模型组随机分为

3

组

：

A

组

置于辣根过氧化物酶标记的羊抗兔

IgG

二抗中

（

间歇低氧

+

生理盐水

）

、

B

组

（

复氧

+

生理盐水

）

、

C

（

1

：

1

000

）

室温下慢摇孵育

1

h,

洗膜

，

配置

ECL

发

组

（

间歇低氧

+

大株红景天

）

。

对照组及

A

、

B

、

C

各

光液

,

用凝胶成像系统曝光并分析结果

。

组在各自不同条件下继续喂养

4

周

。

1.3

取材与检测方法

1.3.4

HE

病理学检查

将浸泡在

10%

中性甲醛

1.3.

1

取材

各组均于

10

周后处死

，

麻醉小鼠后

溶液中的组织制成石蜡切片

，

厚度为

4

pm

。

经脱

蜡

、

水化

、

苏木精染色

、

分化水液

、

氨水返蓝

、

伊红复

抽取血液置于

EP

管内

，

4

七冰箱内静置

4

h

后离心

10

min,

提取上清液于

-80T

保存

，

待用

ELISA

方法

染

、

脱水

、

透明

、

封皮后,置于光学显微镜中观察各组

检测白细胞介素

-6

（

IL-6

）

、

肿瘤坏死因子

-

a

心脏组织及大脑组织的病理变化

。

（

TNF-a

）

及

AGEs

水平

。

同时

，

心脏采血后立即予

1.4

统计学方法

SPSS

19.

0

统计软件

，

ELISA

结

断头处死,解剖小鼠大脑

、

心脏组织,将部分小鼠心

果以表示

；

采用

t

检验比较正态分布资料两组

脏组织及左侧大脑置于液氮中迅速冻存

，

待用

间的差异

;

采用单因素方差分析

（

AN0VA

）

中的最小

Western

Blot

检测

RAGE

、

NF

-

k

B

蛋白的表达

；

取小

显著差异法

LSD

（

方差齐时

）

或

Tamhane's

T2

（

方差

鼠右侧大脑及剩余心脏组织浸泡于

10%

中性甲醛

不齐时

）

比较正态分布资料多组间的差异

；

非正态

溶液固定,待行病理组织

HE

染色

。

分布资料则采用秩和检验比较组间差异

。

以戸＜

1.3.2

ELISA

稀释标准品

，

在待测样品孔中加入

0.

05

为差异有统计学意义

。

样品稀释液

40

“

L,

再加待测样品

10

jjl

L,

用封板膜

2

结果

封板后置于恒温箱内反应

1

h,

洗板,加入辣根过氧

2.

1

慢性间歇低氧小鼠造模情况因抽取小鼠左

•

2074

•

广东医学

2020

年

10

月第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

心室动脉血操作较精细

，

小鼠耐受性亦较低

，

谷易在

操作过程中死亡

，

在随机抽取的对照组及模型组各

5

只小鼠中

，

有

2

只对照组小鼠及

1

只模型组小鼠

在操作过程中死亡

，

未能抽及动脉血,而在剩余的小

鼠中

，

其动脉血气分析提示

，

模型组小鼠动脉血氧饱

和度较对照组小鼠明显降低

，

说明慢性间歇低氧小

鼠的模型是成功的

。

见表

1

。

表

I

对照组与模型组小鼠血气分析结果

V±.s

组别

n

动脉血氧饱和度

(％)

对照组

3

73.02

±11.4

模型组

4

53.33

±9.02

2.2

各组小鼠中血清

AGEs

水平的表达情况

对

照组小鼠血清

AGEs

水平为

(

432.

7

±92.

99)

ng/L,

而

A

组为

(527.5

±97.53

)

ng/L,

可见与对照组相

比,

A

组小鼠血清

AGEs

水平明显升高

，

差异有统计

学意义

(

P=0.031

7)

；

而

C

组及

B

组的小鼠血清

AGEs

水平分别为

(

524.

4

±

69.

73

)

ng/L

和

(481.

7

±

63.43)ng/L,

与

A

组的相比

，

均有下降的趋势

，

但差

异无统计学意义

(

P

>0.

05)

;

与对照组相比

，

C

组仍

明显升高,且差异有统计学意义

(

P

=0.044

8)

。

见

图

2

。

3

/3

U

)

S

U

D

V

A

一

s

_

注

：

*与对照组比较

P<0.

05

图

2

各组小鼠血清

AGEs

水平的比较

2.3

各组小鼠中血清

IL

-6

水平的表达情况

A

组小鼠血清

II,

-

6

水平为

(110.3

±

15.

10)pg/mL,

较对照组小鼠的

(

84.

85

±17.41

)pg/mL

比较明显升

高

，

差异有统计学意义

(

P=0.006

7)

；

B

组及

C

组小

鼠的血清

1L

-6

水平分别为

(101.8

±17.

35)

pg/mL

和

(92.43

±19.04)

pg/mL,

均较对照组升高

，

但仅

B

组

小鼠与对照组相比差异有统计学意义

(

P

=0.037

8)

；

而与

A

组相比,

C

组血清

IL-6

水平有所降低

，

且差

异有统计学意义

(

P

=0.032

8)

。

见图

3

。

2.4

小鼠血清

TNF

-

a

水平的表达

对照组小鼠

血清

TNF-

a

水平为

(

445.

8

±89.

50)

ng/L,A

组小

注:与对照组比较

，

*P<0.05.

**P<0.01

；

A

与

A

组相比

P<0.

05

图

3

各组小鼠血清

IL-6

水平的比较

鼠为

(

584.

5

±76.

36)

ng/L,A

组较对照组小鼠明显

升高

，

差异有统计学意义

(

P=0.()02

8)

；

B

组及

C

组

小鼠血清

TNF-a

水平分别为

(484.

1

±ll&4)ng/L

fn(502.8

±100.0)

ng/L,

均较

A

组明显下降

，

且差

异均有统计学意义

(P

=0.041

7,0.

048

8)

o

见图

4

。

800

r

注

：

*

与对照组比较

P<0.01；A

与

A

组比较

P<0.05

图

4

各组小鼠血清

TNF-a

水平的比较

2.5

心脏组织

HE

染色

对照组小鼠心肌组织结

构清晰完整

、

界限清楚

、

排列紧密

；

而

A

组小鼠心肌

组织排列紊乱

，

结构

、

纹理不清

，

部分肌细胞核固缩

深染

。

B

组小鼠心肌结构较

A

组清晰

，

核固缩深染

现象较

A

组减少

，

而

C

组小鼠心肌结构较清楚

，

排

列亦较紧密

。

见图

5

。

2.6

大脑组织

HE

染色

正常对照组小鼠脑组织

细胞数量较多

，

胞质均质红染

，

核大且圆

，

核仁清晰,

血管较多且粗大

，

神经纤维纵横交错致密;

A

组脑组

织细胞数量减少较明显

，排列紊乱

、

稀疏

，

部分细胞

核固缩深染,呈紫蓝色梭形

，

绝大多数细胞有核仁碎

裂现象

，

血管较少且细

，

神经纤维较对照组稀疏

。

B

组及

C

组脑组织细胞较

A

组有所增多.排列较

A

组

紧密

，

核固缩深染现象较

A

组有所减轻

。

而与

B

组

相比,

C

组的神经纤维排列更紧密

，

余形态变化差别

不明显

。

见图

6

。

广东医学

2020

年

10

月

第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

•

2075

•

注

：

A

：

对照组；

B

：

A

组

；

C

：

B

组

；

D

：

C

组

图

5

心脏组织

HE

染色图片

(

400

x)

注:

A

：

对照组

；

B

：

A

组；

C

：

B

组

；

D

：

C

组

图

6

大脑组织

HE

染色图片

(400

x

)

2.7

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白在小鼠心脏组织中的

表达

对照组小鼠心脏组织中

RAGE

及

NF-

k

B

的

各组的表达中是最弱的

，

A

组小鼠心脏组织中的

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白均表达最强

，

比对照组明显

增多

，

且差异均有统计学意义

(P<0.

05)

,

而

A

组与

表达最弱,

A

组小鼠的

NF-

k

B

的表达在各组中表

达最强

，

其

RAGE

蛋白表达比对照组及

B

组强

，而

与

C

组相仿

；

C

组小鼠

RAGE

及

NF-

k

B

均较对照

组及

B

组表达增多

。

见表

2

和图

7

、

8

。

B

组

、

C

组相比

，

其表达则差异无统计学意义

(

P>

0.

05)

；

C

组的

RAGE

及

NF-

k

B

的表达均较

B

组有

所增多

，但差异无统计学意义

(P>0.

05)

o

见表

2

对照组中小鼠心脏组织中

RAGE

及

NF-

k

B

在

和图

7

、

8

。

•

2076

•

广东医学

2020

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10

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41

卷第

20

期

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Medical

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Oct.

2020,

Vol.

41,

No.

20

表

2

归一化处理后的各组小鼠心脏组织

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白灰度值

x

±s

NF-

k

B

蛋白

组别

n

RAGE

蛋白

1.032

±0. 173

1.638

±0.241

*

对照组

A

组

10

11

1.008

±0.067

1.587

±0.215

*

1.

160

±0.

176

B

组

11

11

1.423

±0.

162

1.562

±0.

189

C

组

1.385

±0.

194

注

：

*

与对照组比较

P<0.

05

A

2.0n

L

5

图

7

RAGE

及

NF-

k

B

在各组小鼠心脏组织的表达情况

B

2.0-1

1

U

E

A

1

甲

艺

5

L0

-

-

0

r

i

0

5

-

o5

.

.

.

O0

-

a0

■

I

>

注:

A

：

RAGE

；

B

：

NF-

k

B

；

*

P<0.

05

图

8

RAGE

及

NF

-

k

B

蛋白在各组小鼠心脏组织中表达的统计结果

t

■

一

2.8

RAGE

及

NF

-

k

B

蛋白在小鼠大脑组织中的

表达在各组小鼠的大脑组织中

，

对照组小鼠

3

讨论

3.

1

小鼠间歇缺氧模型的建立

OSAS

动物模型

的构建中

，

主要以啮齿类动物为实验对象⑷

，

如大

鼠

、

小鼠等小动物常用于构建低氧模型

，

犬

、

猪

、

兔

、

RAGE

及

NF

-

k

B

的表达均较少

，

而

A

组的

RAGE

及

NF-

K

B

蛋白的表达则最强

，

与对照组相比差异

均有统计学意义

(P

rage

<0.05,P

nf

_

k

B

<0.01)

；

与

A

组相比

，

C

组的

RAGE

表达稍有减少，

而

NF-

k

B

的表达则较其有更为明显的下降

(

P<0.05)

。

C

组

猫

、

猴等较大型动物亦常被用于

OSAS

的造模

，

但主

要是通过一定程度地阻塞上气道来模拟

OSAS

患者

形态学上的改变

，

但因这些动物体型较大

，

费用较昂

与

B

组相比

，

两种蛋白的表达差异无统计学意义

(P>0.05)

。

见表

3

和图

9

、

10

。

表

3

归一化处理后的各组小鼠大脑组织中

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白灰度值

贵

，

难以形成规模性的研究

。

OSAS

最根本的病理

生理特点是长期的慢性间歇性低氧

，

因此

，

在以往的

研究中

，

有国内外学者⑺通过往复运动式低氧舱

、

X

±

S

NF-

k

B

蛋白

低压低氧舱

、

低

。

2

高

C0

2

箱等方法建立

OSAS

动物

组别

对照组

A

组

n

RAGE

蛋白

模型

，

但都因实验设备要求高

、

操作复杂

、

重复性差

、

不能排除干扰因素及准确反映常压下缺氧的情况而

10

11

1.029

±0.

134

1.470

土

0.217

*

1.

144

±0.

158

1.012

±0.

197

1.754

±0.

166**

1.267

±0.249

1.350

±0.

154*

B

组

C

组

11

11

1.332

±0.206

逐渐被摒弃

。

目前建立

OSAS

动物模型应用最广泛

的方法是通过常压混合气体箱⑷

，

在常压的状态

下

,

通过改变箱内气体各成分的浓度

、

比例来建立低

氧环境

。

根据不同的实验要求及目的

，

可调节箱内

低氧的程度及持续时间

，

现认为最低氧浓度多控制

为

5%

-

10%

[9

-'

0]

为佳

，

低氧-再氧合周期可从

30s~8min

不等

。

这种方法操作方便简捷,可控性

强

，

重复性高,虽不能完全复制人体

OSAS

气道狭窄

的形态学改变

，

但能较好地复制

OSAS

患者缺氧-

再氧合的病理生理变化

。

3.2

慢性间歇缺氧小鼠心脏及大脑组织的病理变

图

9

RAGE

及

N

F-

k

B

在各组小鼠大脑组织中的表达情况

化本实验通过对比

A

组及对照组小鼠的心脏及

广东医学

2020

年

10

月第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

.

No.

20

•

2077

•

20

2

0

L5

L0

05

00

■

I

>

u

-§

e

L

5

L

0

0

5

a

0

、

CL

CQ

¥

4

N

注

：

A

：

RAGE

；

B

：

NF-

k

B

；

*

P<0.

05

；

**

P<0.

01

图

10

各组小鼠大脑组织中

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白表达的统计结果

大脑组织的形态变化

，

发现在心肌组织中

，

对照组小

97.

53)

ng/L,

而正常对照组小鼠仅为

(

432.

7

±

92.

99)

ng/L,

可见

A

组的小鼠较对照组是明显升高

的,且差异有统计学意义

(

P<0.05)

。

这也证实了

鼠的心肌组织结构完整清晰

、

界限清楚

、排列紧密;

而

A

组小鼠心肌组织排列紊乱

，

结构

、

纹理不清

，

部

分肌细胞核固缩深染

。同样地

，在脑组织中

，

A

组脑

组织细胞数量较对照组小鼠明显减少,且排列紊乱

、

OSAS

这种疾病是可促进

AGEs

的产生的

，

与上述相

关研究结果相符

。

原因可能是

OSAS

本质是一种慢

性间歇低氧性疾病

，

类似缺血

/

再灌注的损伤机制,

稀疏,部分细胞核固缩深染

，

呈紫蓝色梭形,绝大多

数细胞有核仁碎裂现象,血管较少且细

,神经纤维较

产生一系列的氧化应激及炎症反应

，

而氧化应激

对照组稀疏

。

说明了慢性间歇低氧可对大脑及心脏

及炎性反应等因素是可促进

AGEs

形成的

，

因此可

在

OSAS

患者体内发现血清

AGEs

水平病理性的

组织造成形态上的损害

，

这也进一步验证了

OSAS

患者可引起多脏器损伤及易并发多种慢性疾病的

升高

。

这一观点

，

而这与

OSAS

的慢性间歇低氧导致的氧

化应激及炎症改变等一系列的病理生理变化密切

相关

。

3.3.2

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

途径对慢性间歇低

氧小鼠的影响

AGEs

在不同的器官组织有不同的

的致病机制

，

它的许多效应大多是通过结合相关受

3.3

AGEs-RAGE/NF

-

k

B

途径与慢性间歇低氧

小鼠的关系

体而实现,而晚期糖基化终末产物受体

(RAGE)

则

是研究最多且与其亲和性较高的一个受体

，

在

AGEs

3.3.

1

血清

AGEs

在慢性间歇低氧小鼠中的变化

介导的病变中起主要作用

。

RAGE

是一种跨膜受

体,亦是免疫球蛋白超家族的多配体受体中的一员,

在体内分布非常广泛

，

在成年人体内

，

RAGE

主要分

AGEs

是蛋白质和脂类非酶糖基化反应启动后的

一系列化学反应后所形成的一类化合物的总称

，

本

身不具有反应活性

，

其主要包括有竣甲基赖氨酸

布在免疫细胞

、

神经元细胞

、

星形胶质细胞

、

心肌细

胞

、

内皮细胞

、

血管平滑肌细胞和癌细胞中

，

但在正

常人中

,RAGE

是低水平表达的

，

当细胞或组织局部

(CML)

、

蛋白质交联后产物等

。

它在体内中多从氧

化应激过程中产生

，

亦可通过外源性途径(主要为

饮食)获得

，

其常积聚在组织中

，

并可随着年龄的增

长而增加⑴

］

。

AGEs

在多种疾病的发生发展过程中

岀现

RAGE

-配体或炎症因子聚集时

，

可

RAGE

的

表达将大大增加

〔

⑷

。

许多研究

I

”

)

表明

，

NF-

k

B

的

有着非常重要的作用

，

并且已有研究

［

⑵发现

，

在

激活在

RAGE-

配体的致病机制中起着非常重要的

作用

。

NF-

k

B

是一种核转录因子,在机体内广泛

OSAS

患者体内同样有

AGEs

水平的升高

，

并且提出

OASA

本身可能是影响血清

AGEs

水平高低的因素

之一

。

虽与糖尿病患者相比其增高水平不明显

，

但

存在,在感染

、

炎症反应和

DNA

损伤等刺激下可对

相关的基因进行转录调控

。

NF-

k

B

以异源性或同

源性二聚体形式存在于胞浆中

，

最常见的二聚体形

式为

P65

和

P50

组成的异源性二聚体

。

一般情况

OSAS

患者血清中

AGEs

水平确实较正常增高

，

并且

在使用

CAPA

治疗后的患者

AGEs

较未治疗前有所

下降

。

国外研究证明

AGEs

的血清水平增高与睡眠

呼吸障碍的严重程度有关

I

⑶

。

在本实验中

，

予间歇

下

,

NF-

k

B

与抑制性蛋白

I

k

B

结合而失去活性

，而

在受到毒素

、

氧自由基

、

缺氧

、

缺血

、

脂多糖以及白细

胞介素等因素的刺激后

，

可与

I

k

B

分离而重新获得

低氧

10

周后的

A

组小鼠血清

AGEs

水平

(

527.

5

±

•

2078

•

广东医学

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10

月

第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

转录调节的能力

，

最终导致一系列炎症因子及趋化

因子如

IL

-6

、

TNF

-

a

、

GM

-

CSF

等的表达上调及

细胞坏死和细胞凋亡

。

AGEs

与血管内皮细胞表面

的

RAGE

结合后

，

在体内外均可引起

NF

-

k

B

P

65

mRNA

和抗原表达增加,

NF

-

k

B

持续活化

，

而

NF

_

k

B

的活化

，

可引起大量促炎细胞因子

（

IL

-6

、

TNF

-

a

等

）

、

生长因子和黏附因子等的表达和释放

，从而

引起复杂的生物学效应

。

RAGE

作为

AGEs

在细胞

表面的信号转导受体

，

可激活细胞内部各种信号转

导机制

，

如磷酸肌醇

-3

激酶

（

PI3K

）

、

P38

MAPK

、

MAPK/Erkl

,2

、

JNK/SAPK

、

rho

-

GTP

酶及

JAK/

STAT

等信号途径

,

大多通过活化

NF

-

k

B

这个具多

项调节功能的枢纽放大或级联一系列炎症反应

，

对

机体造成损害

。

因此

，

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

通路

是

RAGE

与

AGEs

相互作用后具有代表性的一种信

号转导途径

3

〕

。

近年来已在

OSAS

患者的体内发

现

AGEs

水平较正常健康人是升高的

，

相关研究口

发现

，

间歇缺氧可导致核转录因子的显著上调

。

OSAS

患者的慢性间断性低氧血症可引起血清中

IL-6

、

CRP

等水平增高

，

刺激循环中可溶性黏附分

子如

ICAM

-1

、

VCAM

-

1

表达增加网

。

因此可推

测

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

信号通路在

OSAS

患者体

内是存在的

，

且对其起着一定的损害作用

。

本实验取各组小鼠心脏及大脑组织检测其

RAGE

及

NF

-

k

B

蛋白的表达情况

，

结果显示:在小

鼠心脏组织中

，

对照组小鼠

RAGE

及

NF

-

k

B

的表

达最弱

，

而

A

组的

RAGE

及

NF-

k

B

的表达在各组

中表达最强;在小鼠的大脑组织中,

A

组的

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白的表达在各组小鼠的仍是最强

。

由此

可见,

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白在

OSAS

疾病中表达是

上调的

。

此外

，

通过检测由

NF-

k

B

转录调控的相

关炎症因子

IL-6

及

TNF

-

a

的表达情况

，

发现

A

组小鼠血清

IL-6

、

TNF-a

及水平均较正常对照组

小鼠明显升高

，

两组间差异有统计学意义

（

P

<

0.01

）

,

说明了在

OSAS

患者体内

IL-6

、

TNF-a

表

达亦是上调的

。

因此,

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

信号通路在

0S-

AS

患者体内是存在的

：

OSAS

由于其慢性间歇缺氧

的本质

，

可上调

AGEs

及

RAGE

蛋白的表达

，

两者结

合后可激活氧化应激

，

使活性氧簇生成增多,活性氧

簇可通过

PI3K

、

P38

MAPK,MAPK/Erkl

,2

等途径活

化

N

F-

k

B,NF

-

k

B

将信号传导入细胞核内

，

进而

调控及转录下游的相关炎症信号

，

导致炎症反应的

持续活化及放大

，

对各组织器官造成持续的损害

。

3.4

大株红景天及改善通气对慢性间歇低氧小鼠

的影响红景天是一种多年生草本植物

，

生长在高

原无污染地带

，

能够补气清肺

、

益智养心

，

是一味作

用广泛的中药

，

而大株红景天注射液则是在红景天

基础上提炼而成的注射液

，

其主要活性部分为红景

天昔

，

有着众多的药理作用

。

谢亮等

〔

切通过实验研

究认为

，

红景天的脑保护作用机制可能与其改善缺

血脑组织能量代谢

，

清除自由基和抗氧化作用有关

。

经过提炼而成的大株红景天可通过减轻心肌的氧化

应激反应程度

、

降低脂质过氧化物的形成及减少一

氧化氮的合成

，

对缺血再灌注的心肌起一定的保护

作用

〔

叩

。

因此

，

我们猜测大株红景天可用于防治

OSAS

的多脏器损害

。

本实验在慢性间歇缺氧

6

周

后的小鼠身上腹腔注射治疗剂量的大株红景天注射

液

4

周

，

结果显示

，

在大脑组织中

，

C

组小鼠神经元

较

A

组有所增多

，

神经纤维排列较紧密

，

核固缩深

染现象亦较其减少

。

而在心脏组织中

，

A

组小鼠心

肌组织排列紊乱

，

结构

、

纹理不清

，

部分肌细胞核固

缩深染;

C

组小鼠心肌结构较清楚

，

排列亦较紧密

。

而纠正缺氧后的慢性间歇低氧小鼠

（

B

组

）

在心脏

及大脑组织中亦有类似的病理改变

，

均较

A

组有所

改善

。

因此

，

纠正缺氧状态及给予大株红景天注射

液均可减轻慢性间歇低氧小鼠心脏

、

大脑组织的损

害

，

而大株红景天给药方便

，

疗效基本与

CAPA

相

仿

，

或可在临床上用于

OSAS

多脏器损害的防治

。

有研究

㈤

］

表明

，

红景天可降低血液中

C

反应蛋

白等炎症介质的水平

，

说明了其具有一定的抗炎作

用

。而在本研究中

，

C

组小鼠血清

IL-6

、

TNF-a

的水平较

A

组小鼠低,且差异有统计学意义

，

说明

了大株红景天注射液在慢性间歇低氧小鼠中是有一

定的抗炎作用的

，

这与上述研究结果相符

。

而在

RAGE

及

NF

-

k

B

蛋白表达方面

，

小鼠心脏组织中

，

C

组

RAGE

的表达与

A

组相仿

，

但

NF

-

k

B

表达较

其减少

，

而在大脑组织中

，

大株红景天组的

RAGE

表达较

A

组稍有减少

，

而

NF

-

k

B

表达则较其有更

为明显的下降

。

另外

，

各组小鼠血清

AGEs

结果显

示

，

虽

C

组小鼠有较

A

组降低的趋势

，

但组间的差

异却无统计学意义

。

提示大株红景天并不能通过下

调

AGEs

及

RAGE

的表达来对慢性间歇低氧小鼠起

保护作用

。

综上所述

,

OSAS

可引起多器官

、

组织如心脏

、

大

脑组织的损害。

OSAS

可激活

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

通路

，

调节炎症细胞释放

IL-6

、

TNF_a

等炎症因

子

，

或是

OSAS

易合并多脏器损害的原因之一

。

而

广东医学

2020

年

10

月

第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

•

2079

・

大株红景天注射液有一定程度的抗炎作用

，

可用于

防治

OSAS

多脏器的损害

，

但其作用机制与

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

信号通路的激活无明显关系

。

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of

obstructive

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and

metaregres

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18

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the

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formation

and

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advanced

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end

products

(

AGEs)

in

vitro

by

coupling

to

the

hypoxanthine/xanlhine

oxidase

assay

system

[

J

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The

proinflam-

matory

RAGE/NF

-

k

B

pathway

is

involved

in

neuronal

damage

and

reactive

gliosis

in

a

model

of

sleep

apnea

by

intemiittent

hy-

poxiaf

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intennittent

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of

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end

products

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and

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glycation

end

products

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nondiabetic

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with

obstructive

sleep

apnea

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2015

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19

(3)

:

827

-833.

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Mokhlesi

B

,

Gozal

D.

In

the

fight

against

advanced

glycation

end

-

products

(

AGEs

)

,

you

should

treat

OSA,

shouldn't

you?

[J].

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,

Kiuru

一

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S,

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Investigation

of

AGE

,

their

receptor

and

NF

一

kappaB

activation

and

apoptosis

in

patients

with

ATTR

and

Gelsol

in

amyloidosis

[

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His-

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N

,

Ray

R

,

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bond

formation

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RAGE

V

domain

facilitates

its

functionally

rele

­

vant

dimerization[

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2017,

38(2)

：

161

-162.

(收稿日期

:2019

-06

-03

编辑

：

杜冠辉)

2024年9月1日发(作者：力奇文)

广东医学

2020

年

10

月第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

・

2071

•

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

途径对慢性间歇低氧小鼠

脏器的影响及大株红景天对其脏器的保护作用

*

成俊芬

'

，

戴彩同

S

吴格怡

'

，

黎雄斌

'

，

林永联

'

，

梁一波'

，

陈鸣娣

*

湛江市第二人民医院'呼吸内科

，

'科教科

，

*

重症监护室(广东湛江

524000)

；

'广东医科大学研究生院(广东湛江

524000

)

【

摘要

1

目的

通过建比慢性间歇低氧小鼠模型探讨晚期糖基化终末产物

(

advanced

glycation

end

prod

­

ucts,

AGEs)

-糖基化终末产物受体

(

advanced

glycosylation

end

product

-

specific

receptor

,

RAGE

)

/

核因子-

k

B(

NF

-

k

B

)

途径与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

(

obstmetive

sleep

apnea

syndrome

,

OSAS

)

脏器损伤的关系以

及大株红景天注射液对其脏器的保护作用

〉

方法

采用酶联免疫吸附测定法

(ELISA)

检测

10

只健康对照组

小鼠(对照组)

、

11

只单纯慢性间歇低氧小鼠

(

A

组)

、

11

只慢性间歇低氧后再复氧小鼠

(B

组)

、

11

只慢性间

歇低氧后使用大株红景天注射液腹腔注射的小鼠

(

C

组)血清中

AGEs

、

白细胞介素-

6(lL-6)

、

肿瘤坏死因

子-

a(

TNF

-

a)

的表达水平

，

用

Western

Blotting

方法检测小鼠大脑及心脏中

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白的表达情

况

，

并观察经

HE

染色后组织形态学改变情况

：

结果

ELISA

结果

：

与对照组相比

，

A

组小鼠血清中

ACEs

、

IL

-6,

TNF-

a

水平显著升高

(

P

<

0.

05

)

；

与

A

组对比

，

B

组及

C

组小鼠血清

AGEs

水平有下降趋势

(

P>

0.

05)

；

与

A

组相比

，

C

组血清

IL-6

水平有所降低

(

P

<

0.

05

)

o

而

B

组及

C

组之间差异无统计学意义

(

P

>

0.

05)

；

而在血清

TNF-a

水平方面

，

B

组及

C

组均较

A

组下降

(

P<0.05)

；

而

B

组及

C

组两组间差异无统计

学意义

(

P>0.05)

。

RAGE

免疫组化结果

：

心脏组织

：

对照组小鼠

RAGE

及

NF

-

k

B

的表达最弱

；

A

组小鼠的

NF-

k

B

的表达在各组中表达最强

，

其

RAGE

蛋白表达比对照组及

B

组强

，

而与

C

组相仿

；

C

组小鼠

RAGE

及

NF-

k

B

较对照组及

B

组表达增多

大脑组织

：

A

组的

RAGE

及

NF-

k

B

蛋白在各组小鼠的大脑组织中表达

最强；

对照组小鼠

RAGE

表达较少，

NF-

k

B

蛋白在各组中表达最弱

；

与

A

组相比

，

C

组的

RAGE

表达稍有减

少

，而

NF-

k

B

的表达则较其有更为明显的下降

。

HE

染色结果

：

对照组小鼠心肌组织结构清晰完整、

界限清

楚

、

排列紧密

；

而

A

组小鼠心肌组织排列紊乱，

结构

、

纹理不清

，

部分肌细胞核固缩深染

。

B

组小鼠心肌结构

较

A

组小鼠清晰,核固缩深染现象亦较其减少

，

而

C

组小鼠心肌结构较清楚

，

排列亦较紧密

。

结论

OSAS

可

引起多器官

、

组织如心脏

、

大脑组织的损害

。

OSAS

可激活

AGEs

- RAGE/NF

-

k

B

通路

，

调节炎症细胞释放

IL-6

、

TNF-a

等炎症因子

，

或是

OSAS

易合并多脏器损害的原因之一

。

大株红景天注射液有一定程度的抗

炎作用

，

可用于防治

OSAS

多脏器的损害

，

但其作用机制与

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

信号通路的激活■无明显

关系

。

【

关键词】

慢性间歇低氧

；

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

；

大株红景天；

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

【

中图分类号

】

R34

；

R364

【文献标志码)

A

DOI

：

10.

13820/j.

cnki.

gdyx.

20191714

The

effects

of

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

pathway

and

protection

of

Rhodiola

on

organs

of

mice

with

chronic

inter

­

mittent

hypoxia.

CHENG

Jun

-

fen

,

DAI

Cai

-

tong

,

WU

Ge

-yi,

LI

Xiong

-

bin

,

LIN

Yong

-

lian

,

LIANG

Yi

-

bo

,

CHEN

Ming

-

di.

*

Respiratory

Department

of

Second

People's

Hospital

of

Zhanjiang

,

Zhanjiang

524000

,

Guangdong

,

China

[

Abstract

]

Objective

To

establish

a

chronic

intermittent

hypoxic

mouse

model,

thus

to

investigate

the

correla

­

tion

between

AGEs

-

RAGE/NF

-

k

B

pathway

and

obstructive

sleep

apnea

syndrome

(

OSAS)

and

the

protective

effect

of

Rhodiola

injection

on

mouse

organs.

Methods

The

expression

of

serum

AGEs,

IL-6

and

TNF

-

a

of

mice

were

as­

sessed

in

10

healthy

control

mice,

11

chronic

intermittent

hypoxia

(

CIH)

mice

(

Group

A

)

,

11

chronic

intermittent

hy

­

poxic

reoxygenation

mice

(

Group

B

)

,

and

11

chronic

intermittent

hypoxia

mice

which

injected

with

Rhodiola

(

Group

C

).

RAGE

and

NF

-

k

B

protein

expression

in

mouse

brain

and

heart

was

assessed

by

Western

Blotting.

Results

Compared

with

the

control

group

,

the

serum

level

of

ACEs,

IL-6

and

TNF

-

a

were

significantly

increased

in

Group

A

(

P

<

*基金项目

：

湛江市科技计划项目

(2OI5AO1O33

)

・

2072

・

广东医学

2020

年

10

月

第

41

卷第

20

期

Guangdong

Medical

Journal

Oct.

2020,

Vol.

41

,

No.

20

0.

05

).

Compared

with

Group

A

,

the

serum

level

of

AGEs

in

Group

B

and

C

were

reduced

(

P

>

0.

05

).

Compared

with

Group

A,

the

serum

level

of

IL

-

6

was

significantly

lower

in

Group

C

(

P

<

0.

05

)

；

while

there

was

no

significant

differ

­

ence

between

Group

B

and

C.

The

serum

level

of

TNF

—

a

was

significantly

lower

in

Group

B

and

C

than

in

Group

A

(

P

V

0.

05

)

;

there

was

also

no

significant

difference

between

the

Group

B

and

C

(

P

〉

0.

05

).

In

heart

tissue

,

the

expression

of

RAGE

and

NF

-

k

B

was

the

weakest

in

the

control

group

；

the

expression

of

NF

-

k

B

in

Group

A

was

the

strongest

among

the

4

groups

,

and

its

RAGE

protein

expression

was

stronger

than

control

group

and

Group

B

,

but

similar

to

Group

C.

The

expression

of

RAGE

and

NF

一

k

B

in

Group

C

was

increased

compared

with

normal

control

group

and

Group

B.

In

brain

tissue

,

RAGE

and

NF

一

k

B

proteins

were

most

strongly

expressed

in

Group

A

among

the

4

groups.

Normal

control

mice

had

less

RAGE

expression

,

and

the

NF

—

k

B

protein

was

the

weakest

expressed

among

the

4

groups.

Compared

with

Group

A

,

the

RAGE

expression

in

Group

C

was

slightly

reduced

；

but