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兔vx2声门上喉癌动物模型的建立及双颈部转移淋巴结规律的观察_

IT圈 admin 36浏览 0评论

2024年6月6日发(作者:慎秀媛)

90 ・买验研冤・ 

April 2U1Z,VOI.1U,NO.10 

表4加速实验6个月的含量 

表5长期实验24个月的含量 

4.1表1显示:①三个样品在10_2 ̄C贮存2年,颜色变化不大,色号保持 

在YG1.5以下;在(25±2)℃条件下贮存2年,色号保持在 

YG6.5以下。②随着pH升高和贮存温度升高,三个样品的颜色加深 

速度都快。 

4.2表2、表3显示pH值和温度对其含量影响不大。 

参考文献 

4.3研究结果显示,pH值和温度对地西泮注射液颜色有明显影响,建 

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典二部[s].北京:化学工业 

议在25℃以下贮藏。 

出版社,2005:180. 

兔vx2声门上喉癌动物模型的建立及双颈部转移淋巴结规律的观察 

张品 

(辽宁省锦州市中心医院耳鼻咽喉科,辽宁锦州121001) 

【摘要】目的建立兔vx2声门上喉癌动物模型并观察双颈淋巴转移规律。方法新西兰白兔60只,于会厌舌面接种O.3ml瘤组织液接种 

VX2瘤,随机数字法分成4组,每组15只,分别在接种VX2瘤珠后,于第一、二、三、四周分4批处死动物,观察声门上喉癌形成和 

颈静脉旁淋巴结转移情况。结果VX2声门上喉癌接种成功率100%。接种后声门上瘤体形成,随着时间延长瘤兔双侧颈部可检测出肿大 

淋巴结。结论声门上接种VX2肿瘤后,vx2兔成瘤率高,淋巴结转移率高,方法简单,接近人声门上喉癌的临床特征,较客观地反映了 

声门上喉癌的生物学行为,为声门上喉癌的研究提供了较理想的大型动物模型。 

【关键词】声门上喉癌;动物模型;淋巴转移;vx2 

中图分类号:R739.65 文献标识码:B 文章编号:1671-81 94(2012)10-0090-02 

声门上型喉癌是指癌肿发生于声带以上部位,包括会厌癌、室带 1 640培养液配制成组织块悬液20mL。 

癌、会厌室带癌等 ]。由于声门上区有丰富的淋巴网,因而易发生颈 1.2.3麻醉方法 

部淋巴结转移。声门上型喉癌治疗失败的主要原因是颈淋巴结的转移 实验兔60只,雌雄不限,体重2.0-30.kg。每只以1O%水合氯醛 

及复发,也是喉癌致死的主要原因 ]。对颈部隐匿性淋巴结转移的诊 (5mg/kg)进行腹腔注射。 

断和治疗现已成为声门上癌治疗成败的关键。如何术前、术中确 

1.2.4 vx2 ̄O瘤组织悬液接种 

定颈部转移灶,尽可能减少过度手术治疗给患者造成的损伤是目前研 实验兔以小儿支撑喉镜暴漏会厌,上颌窦穿刺针于会厌舌面接种 

究的热点 】。要想对颈淋巴转移的诊治有进一步的了解,就要对肿瘤 

0.3mL瘤液。 

的进展和相伴随的淋巴转移的特点做进一步的研究,即建立动物模型 1.3组织病理学检查 

进行研究。兔vx2 ̄O瘤广泛应用于各种器官的肿瘤模型,其特点是肿 在接种后第1、2、3、4周分4次处死动物, (在时间观察选择点 

瘤易于生长,生长速度快。本实验主要研究出现颈淋巴转移与时间的 

上,本次研究检测第1、2、3、4周的情况,是由于既往预实验中及 

关系以及出现转移的部位。及不同部位的癌肿双颈淋巴结转移特点。 参考其他类似实验的选择 )肉眼观察喉部肿瘤生长情况,解剖双侧 

1材料与方法 

颈部淋巴结。行病理学检查。结果:①模型一般情况:种植瘤兔6O 

1.1实验对象 只,随机数字法分成4组,每组15只,分别在接种Vx2瘤珠后,于第 

Vx2瘤珠,6O只新西兰大白兔。 

二、三、四周分4批处死动物,原位接种成功了60个。接种成功 

1.2实验方法 

率100%。观察结果:在第1周15只瘤兔中未出现颈内静脉旁淋巴结转 

1.2.1 vx2瘤的种植传代 

移。在第2周15只瘤兔中有9只瘤兔出现患侧颈内静脉旁淋巴结转移, 

VX2瘤细胞株,调配1640培养液至1×107/mL活细胞浓度,取 

对侧颈内静脉旁未见淋巴结转移,第3周1 5只瘤兔中有9只瘤兔出现 

1mL瘤细胞液注射于兔后腿外侧肌肉内,2N左右可形成实质性包 患侧内静脉旁淋巴结转移的情况,对侧颈内静脉旁有6只出现淋巴结 

块,即制成传种兔。 

转移。而在第4周14只瘤兔中患侧颈内静脉旁均出现淋巴结转移的情 

1.2.2制备组织块悬液 

况。对侧有10只出现淋巴结转移。②原发灶瘤体观察:所有肿瘤经病 

无菌条件下切取传种兔后腿实体瘤,放置于盛有20mll640液的玻 

理证实为Vx 2鳞状细胞癌. 

璃皿中,取瘤体边缘生长旺盛的组织,剪切成泥,离心沉淀后,加 2原发灶瘤体观察 

2012年4月第10卷第10期 

形态学观察:肿瘤部位明显隆起,表面粘膜糜烂,形成溃疡。病 

理学检查:光镜下观察:癌细胞排列紧密呈实体巢状,间质结缔组织 

少,高倍镜下见癌细胞大小和形态不一,胞浆丰富,淡红染色,未见 

角化珠;核大而畸形,核膜清楚,核仁明显,核分裂相多见。 

3颈部淋巴结解剖及病理学检查 

形态学观察:淋巴结较硬,无明显包膜,切面呈灰白色鱼肉状。 

光镜下观察:细胞以多边形为主。HE染色见细胞轻度嗜碱,核 

大,核质比例异常,细胞呈异型性明显,可见较多核分裂象,镜下显 

示正常淋巴结结构消失,大量肿瘤细胞浸润。 

4讨论 

实验研究・ 91 

株。它可接种在兔的肝脏、肾脏、肌肉等处 】。兔VX2模型具有: 

①其特点是性质稳定,移植成瘤率时间短,成瘤率高。②实验成本 

低于细胞培养方法,操作简单,易推广。③啮齿类动物颈外动脉管 

径小,为动脉给药等局部治疗实验带来操作困难。较大的动物有其 

无法比拟的优势,如取血量大等。④Dunne 等专门对兔颈部淋巴 

结区域引流进行了系统研究,证实其与人类颈部淋巴结分布极其相 

似。因此兔vx2声门上喉癌动物模型是研究肿瘤侵袭及淋巴结转移的 

良好模型。 

参考文献 

[1]黄选兆,汪吉宝。实用耳鼻咽喉科学[M].北京:人民卫生出版社, 

1998:204 206。 

4.1本次实验瘤珠种植部位偏于一侧目的在于观察不同时间段同侧淋 

巴结及对侧淋巴结转移出现的先后次序。本次实验表明成瘤部位最 

先在患侧出现淋巴结转移,随着瘤体的不断生长、浸润,对侧也出 

现淋巴结的转移。这也符合我们临床上声门上喉癌淋巴结的转移规 

律,声门上喉癌最先在同侧出现淋巴结转移,到中晚期双侧均出现 

淋巴结转移。 

4.2肿瘤动物模型的建立在肿瘤研究中具有重要价值,理想的动物模 

型要求在发生部位、组织学类型、生物学行为等方面尽量与所对应 

[2]刘学忠,萧世强.影响喉癌预后的因素[J]_国外医耳鼻咽喉科学 

分册,1990,14(1):28—30. 

[3】徐世影,杨蓓蓓.头颈部鳞状细胞癌颈部淋巴结微转移灶的研究 

进展[J].I临床耳鼻咽喉科杂志,2006,20(8):378—381. 

[4】刘险峰,任乐荣,苏广彦,等.兔vx2H ̄瘤细胞系的建立及其生物 

学特性的观察[J]冲华病理学杂志,2005,34(10):661—663. 

[5】Rous P,Kidd JG,Smith WE.Experiments on the cause of rabbit 

Carci—noma derived from virus.induced papillomas[J].J Exp Med. 

1952,96(2):159—174. 

的人类肿瘤相似。目前喉癌裸鼠动物模型研究较多,但由于所移植 

的肿瘤均表现为血源性转移,所以裸鼠中移植的喉癌模型对于研究 

颈淋巴转移意义不大。兔VX2 ̄@瘤是一种来源于Shope病毒致乳头 

瘤恶变形成的鳞状上皮细胞恶性肿瘤,属于鳞状细胞癌。1940年建 

株保存经72次传代培养后建立起来的仍可在兔体内种植的肿瘤细胞 

[6]Dunne AA,Plehn S,Schulz S,et a1.Lymph node topography of the 

head and neck in New Zealand White rabbits[J].Lab Anim,2003,37 

(1):37—43. 

左旋精氨酸对家兔右冠状动脉缺血再灌注心律失常的作用研究 

张宏颖 

(郑州市第二人民医院心内科,河南郑州450006) 

【摘要】目的探讨左旋精氨酸对家兔右冠状动脉缺血再灌注心率失常的作用。方法将试验用家兔32只随机进行分组,观察组16只家兔 

进行缺血30min,再灌注120min;对照组先注射左旋精氨酸,缺血30min,再灌注120min,对两组家兔的情况进行观察记录。对记录结 

果进行回顾性分析,总结左旋精氨酸的作用。结果在两组家兔的缺血期,伴随着缺血时间的延长,两组家兔的心律失常分数均发生上升, 

就是发生心律失常的情况越来越严重,但观察组明显好于对照组组;在再灌注期,两组的心律失常情况逐渐好转,但观察组明显好于对照 

组。结论使用左旋精氨酸对由于缺血导致的心律失常有缓解的作用。 

【关键词】左旋精氨酸;家免;右冠状动脉缺血;心律失常 

中图分类号:R541.4 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2012)10-0091-02 

左旋精氨酸为一氧化氮前身物质,是由一氧化氮的合成酶作用产 

生NO的因子,临床可以抑制血小板凝集,对单核球的黏附以及浸润 

进行抑制,还可同时抑制血管平滑肌细胞发生增生,临床左旋精氨酸 

还可以用来改善血胆固醇出现明显升高的患者出现冠状动脉以及末梢 

循环内皮功能的异常现象治疗,来改善由于任何得到心血管疾病而诱 

发的血管内皮的功能异常情况Ⅲ。本文对32只家兔进行分组研究左旋 

精氨酸对右冠状动脉缺血再灌注的作用的实验资料,进行回顾性分析 

发现,使用左旋精氨酸对由于缺血导致的心律失常有缓解的作用,现 

报道如下。 

1.2动物模型分组 

将试验用家兔32只随机进行分组,两组家兔在数量、重量、雌雄 

比例、健康情况等方面没有显著性差异,具有可比性。观察组16只家 

兔进行缺血30min,再灌注120min;对照组先注射左旋精氨酸,缺血 

30min,再灌注120min,对两组家兔的情况进行观察记录。 

1_3观察项目 

观察两组家兔的在缺血期和再灌注期的心律失常评分情况。 

1.4观察评价标准 

O分:实验对象不发生心律失常。0.5分:实验对象发生窦性的心 

律不齐,和窦房传导阻滞。1分:实验对象发生房性心律失常,偶然 

1材料与方法 

Ii1动物模型的建立 

出现早搏,房室传导阻滞。2分:实验对象发生二联律、三联律或者 

频发性的室性早搏。3分:实验对象发生短暂性的室性心动过速,同 

时多源性的室性早搏。4分:实验对象发生室性过速。5分:实验对象 

发生室颤,死亡。 

选取32只健康的家兔,麻醉后放在手术台上面,对手术区域进行去 

毛、消毒。在胸骨的正中进行手术切开,分离脂肪和外膜后,暴露家 

兔的右冠脉,用蚊氏钳对右冠脉进行夹闭,手术全程进行心电监护 1。 

2024年6月6日发(作者:慎秀媛)

90 ・买验研冤・ 

April 2U1Z,VOI.1U,NO.10 

表4加速实验6个月的含量 

表5长期实验24个月的含量 

4.1表1显示:①三个样品在10_2 ̄C贮存2年,颜色变化不大,色号保持 

在YG1.5以下;在(25±2)℃条件下贮存2年,色号保持在 

YG6.5以下。②随着pH升高和贮存温度升高,三个样品的颜色加深 

速度都快。 

4.2表2、表3显示pH值和温度对其含量影响不大。 

参考文献 

4.3研究结果显示,pH值和温度对地西泮注射液颜色有明显影响,建 

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典二部[s].北京:化学工业 

议在25℃以下贮藏。 

出版社,2005:180. 

兔vx2声门上喉癌动物模型的建立及双颈部转移淋巴结规律的观察 

张品 

(辽宁省锦州市中心医院耳鼻咽喉科,辽宁锦州121001) 

【摘要】目的建立兔vx2声门上喉癌动物模型并观察双颈淋巴转移规律。方法新西兰白兔60只,于会厌舌面接种O.3ml瘤组织液接种 

VX2瘤,随机数字法分成4组,每组15只,分别在接种VX2瘤珠后,于第一、二、三、四周分4批处死动物,观察声门上喉癌形成和 

颈静脉旁淋巴结转移情况。结果VX2声门上喉癌接种成功率100%。接种后声门上瘤体形成,随着时间延长瘤兔双侧颈部可检测出肿大 

淋巴结。结论声门上接种VX2肿瘤后,vx2兔成瘤率高,淋巴结转移率高,方法简单,接近人声门上喉癌的临床特征,较客观地反映了 

声门上喉癌的生物学行为,为声门上喉癌的研究提供了较理想的大型动物模型。 

【关键词】声门上喉癌;动物模型;淋巴转移;vx2 

中图分类号:R739.65 文献标识码:B 文章编号:1671-81 94(2012)10-0090-02 

声门上型喉癌是指癌肿发生于声带以上部位,包括会厌癌、室带 1 640培养液配制成组织块悬液20mL。 

癌、会厌室带癌等 ]。由于声门上区有丰富的淋巴网,因而易发生颈 1.2.3麻醉方法 

部淋巴结转移。声门上型喉癌治疗失败的主要原因是颈淋巴结的转移 实验兔60只,雌雄不限,体重2.0-30.kg。每只以1O%水合氯醛 

及复发,也是喉癌致死的主要原因 ]。对颈部隐匿性淋巴结转移的诊 (5mg/kg)进行腹腔注射。 

断和治疗现已成为声门上癌治疗成败的关键。如何术前、术中确 

1.2.4 vx2 ̄O瘤组织悬液接种 

定颈部转移灶,尽可能减少过度手术治疗给患者造成的损伤是目前研 实验兔以小儿支撑喉镜暴漏会厌,上颌窦穿刺针于会厌舌面接种 

究的热点 】。要想对颈淋巴转移的诊治有进一步的了解,就要对肿瘤 

0.3mL瘤液。 

的进展和相伴随的淋巴转移的特点做进一步的研究,即建立动物模型 1.3组织病理学检查 

进行研究。兔vx2 ̄O瘤广泛应用于各种器官的肿瘤模型,其特点是肿 在接种后第1、2、3、4周分4次处死动物, (在时间观察选择点 

瘤易于生长,生长速度快。本实验主要研究出现颈淋巴转移与时间的 

上,本次研究检测第1、2、3、4周的情况,是由于既往预实验中及 

关系以及出现转移的部位。及不同部位的癌肿双颈淋巴结转移特点。 参考其他类似实验的选择 )肉眼观察喉部肿瘤生长情况,解剖双侧 

1材料与方法 

颈部淋巴结。行病理学检查。结果:①模型一般情况:种植瘤兔6O 

1.1实验对象 只,随机数字法分成4组,每组15只,分别在接种Vx2瘤珠后,于第 

Vx2瘤珠,6O只新西兰大白兔。 

二、三、四周分4批处死动物,原位接种成功了60个。接种成功 

1.2实验方法 

率100%。观察结果:在第1周15只瘤兔中未出现颈内静脉旁淋巴结转 

1.2.1 vx2瘤的种植传代 

移。在第2周15只瘤兔中有9只瘤兔出现患侧颈内静脉旁淋巴结转移, 

VX2瘤细胞株,调配1640培养液至1×107/mL活细胞浓度,取 

对侧颈内静脉旁未见淋巴结转移,第3周1 5只瘤兔中有9只瘤兔出现 

1mL瘤细胞液注射于兔后腿外侧肌肉内,2N左右可形成实质性包 患侧内静脉旁淋巴结转移的情况,对侧颈内静脉旁有6只出现淋巴结 

块,即制成传种兔。 

转移。而在第4周14只瘤兔中患侧颈内静脉旁均出现淋巴结转移的情 

1.2.2制备组织块悬液 

况。对侧有10只出现淋巴结转移。②原发灶瘤体观察:所有肿瘤经病 

无菌条件下切取传种兔后腿实体瘤,放置于盛有20mll640液的玻 

理证实为Vx 2鳞状细胞癌. 

璃皿中,取瘤体边缘生长旺盛的组织,剪切成泥,离心沉淀后,加 2原发灶瘤体观察 

2012年4月第10卷第10期 

形态学观察:肿瘤部位明显隆起,表面粘膜糜烂,形成溃疡。病 

理学检查:光镜下观察:癌细胞排列紧密呈实体巢状,间质结缔组织 

少,高倍镜下见癌细胞大小和形态不一,胞浆丰富,淡红染色,未见 

角化珠;核大而畸形,核膜清楚,核仁明显,核分裂相多见。 

3颈部淋巴结解剖及病理学检查 

形态学观察:淋巴结较硬,无明显包膜,切面呈灰白色鱼肉状。 

光镜下观察:细胞以多边形为主。HE染色见细胞轻度嗜碱,核 

大,核质比例异常,细胞呈异型性明显,可见较多核分裂象,镜下显 

示正常淋巴结结构消失,大量肿瘤细胞浸润。 

4讨论 

实验研究・ 91 

株。它可接种在兔的肝脏、肾脏、肌肉等处 】。兔VX2模型具有: 

①其特点是性质稳定,移植成瘤率时间短,成瘤率高。②实验成本 

低于细胞培养方法,操作简单,易推广。③啮齿类动物颈外动脉管 

径小,为动脉给药等局部治疗实验带来操作困难。较大的动物有其 

无法比拟的优势,如取血量大等。④Dunne 等专门对兔颈部淋巴 

结区域引流进行了系统研究,证实其与人类颈部淋巴结分布极其相 

似。因此兔vx2声门上喉癌动物模型是研究肿瘤侵袭及淋巴结转移的 

良好模型。 

参考文献 

[1]黄选兆,汪吉宝。实用耳鼻咽喉科学[M].北京:人民卫生出版社, 

1998:204 206。 

4.1本次实验瘤珠种植部位偏于一侧目的在于观察不同时间段同侧淋 

巴结及对侧淋巴结转移出现的先后次序。本次实验表明成瘤部位最 

先在患侧出现淋巴结转移,随着瘤体的不断生长、浸润,对侧也出 

现淋巴结的转移。这也符合我们临床上声门上喉癌淋巴结的转移规 

律,声门上喉癌最先在同侧出现淋巴结转移,到中晚期双侧均出现 

淋巴结转移。 

4.2肿瘤动物模型的建立在肿瘤研究中具有重要价值,理想的动物模 

型要求在发生部位、组织学类型、生物学行为等方面尽量与所对应 

[2]刘学忠,萧世强.影响喉癌预后的因素[J]_国外医耳鼻咽喉科学 

分册,1990,14(1):28—30. 

[3】徐世影,杨蓓蓓.头颈部鳞状细胞癌颈部淋巴结微转移灶的研究 

进展[J].I临床耳鼻咽喉科杂志,2006,20(8):378—381. 

[4】刘险峰,任乐荣,苏广彦,等.兔vx2H ̄瘤细胞系的建立及其生物 

学特性的观察[J]冲华病理学杂志,2005,34(10):661—663. 

[5】Rous P,Kidd JG,Smith WE.Experiments on the cause of rabbit 

Carci—noma derived from virus.induced papillomas[J].J Exp Med. 

1952,96(2):159—174. 

的人类肿瘤相似。目前喉癌裸鼠动物模型研究较多,但由于所移植 

的肿瘤均表现为血源性转移,所以裸鼠中移植的喉癌模型对于研究 

颈淋巴转移意义不大。兔VX2 ̄@瘤是一种来源于Shope病毒致乳头 

瘤恶变形成的鳞状上皮细胞恶性肿瘤,属于鳞状细胞癌。1940年建 

株保存经72次传代培养后建立起来的仍可在兔体内种植的肿瘤细胞 

[6]Dunne AA,Plehn S,Schulz S,et a1.Lymph node topography of the 

head and neck in New Zealand White rabbits[J].Lab Anim,2003,37 

(1):37—43. 

左旋精氨酸对家兔右冠状动脉缺血再灌注心律失常的作用研究 

张宏颖 

(郑州市第二人民医院心内科,河南郑州450006) 

【摘要】目的探讨左旋精氨酸对家兔右冠状动脉缺血再灌注心率失常的作用。方法将试验用家兔32只随机进行分组,观察组16只家兔 

进行缺血30min,再灌注120min;对照组先注射左旋精氨酸,缺血30min,再灌注120min,对两组家兔的情况进行观察记录。对记录结 

果进行回顾性分析,总结左旋精氨酸的作用。结果在两组家兔的缺血期,伴随着缺血时间的延长,两组家兔的心律失常分数均发生上升, 

就是发生心律失常的情况越来越严重,但观察组明显好于对照组组;在再灌注期,两组的心律失常情况逐渐好转,但观察组明显好于对照 

组。结论使用左旋精氨酸对由于缺血导致的心律失常有缓解的作用。 

【关键词】左旋精氨酸;家免;右冠状动脉缺血;心律失常 

中图分类号:R541.4 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2012)10-0091-02 

左旋精氨酸为一氧化氮前身物质,是由一氧化氮的合成酶作用产 

生NO的因子,临床可以抑制血小板凝集,对单核球的黏附以及浸润 

进行抑制,还可同时抑制血管平滑肌细胞发生增生,临床左旋精氨酸 

还可以用来改善血胆固醇出现明显升高的患者出现冠状动脉以及末梢 

循环内皮功能的异常现象治疗,来改善由于任何得到心血管疾病而诱 

发的血管内皮的功能异常情况Ⅲ。本文对32只家兔进行分组研究左旋 

精氨酸对右冠状动脉缺血再灌注的作用的实验资料,进行回顾性分析 

发现,使用左旋精氨酸对由于缺血导致的心律失常有缓解的作用,现 

报道如下。 

1.2动物模型分组 

将试验用家兔32只随机进行分组,两组家兔在数量、重量、雌雄 

比例、健康情况等方面没有显著性差异,具有可比性。观察组16只家 

兔进行缺血30min,再灌注120min;对照组先注射左旋精氨酸,缺血 

30min,再灌注120min,对两组家兔的情况进行观察记录。 

1_3观察项目 

观察两组家兔的在缺血期和再灌注期的心律失常评分情况。 

1.4观察评价标准 

O分:实验对象不发生心律失常。0.5分:实验对象发生窦性的心 

律不齐,和窦房传导阻滞。1分:实验对象发生房性心律失常,偶然 

1材料与方法 

Ii1动物模型的建立 

出现早搏,房室传导阻滞。2分:实验对象发生二联律、三联律或者 

频发性的室性早搏。3分:实验对象发生短暂性的室性心动过速,同 

时多源性的室性早搏。4分:实验对象发生室性过速。5分:实验对象 

发生室颤,死亡。 

选取32只健康的家兔,麻醉后放在手术台上面,对手术区域进行去 

毛、消毒。在胸骨的正中进行手术切开,分离脂肪和外膜后,暴露家 

兔的右冠脉,用蚊氏钳对右冠脉进行夹闭,手术全程进行心电监护 1。 

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