2024年2月19日发(作者：杞小瑜)
天水师范学院生化学院2010—2011学年度
第二学期 生物技术专业2008级考试试题（参考答案）
（A卷） 科目：分子生物学
题目
得分
一
二
三
四
五
六
七
总分
一 名词解释（每题2分，共10分）
1．shine-dalgarno sequence：原核生物起始密码子AUG和其上游3-11个核苷酸处一段3-9个核苷酸序列，是16SrRNA结合的位点。
2．gene family：由于真核细胞的DNA都是单顺反子，许多相关的基因常常按功能成套组合，一套基因就是一个基因家族。家族中各成员的表达水平和酶活性可以很不相同，但通常是密切相关的。通常分为简单多基因家族、复杂多基因家族和发育调控的复杂多基因家族。
3．Renaturation：热变性的DNA缓慢冷却，已分开的互补链按原有碱基排列顺序借助于氢键重新配对结合，致使DNA分子的许多天然性状得以恢复的特性，称为DNA的复性（Renaturation），也称退火(annealing)。
4．RNA interference 指用双链RNA去抑制特定mRNA的翻译而使该基因编码的蛋白不被表达, 从而使研究物种出现一定的表征(phenotype)。
5．cDNA library 利用纯化的总mRNA在逆转录酶的作用下，合成互补的DNA即cDNA，再按构建基因文库的类似方法对cDNA进行克隆，由此获得的克隆总称为cDNA文库。
二、填空（每题2分，共10分）
1. 紫外线引起的DNA损伤最容易形成的是TT二聚体，这类损伤可用可见光进行修复，这种修复方式属回复修复。
2. 细菌的应急反应主要是由于氨基酸的合成全面匮乏引起，实施这一应急反应的信号是ppGpp或ppGppp，产生这一物质的诱导物是空载的tRNA。
3. 在琼脂糖凝胶电泳中，加入的指示剂有溴酚蓝和二甲苯腈蓝，其中溴酚蓝的分子量相当于300bp的dsDNA，二甲苯腈蓝的分子量相当于4Kbp的dsDNA。1
用于核酸染色的荧光染料是溴化乙锭。
4.在RNAi技术中，双链RNA来源于RNA病毒的感染、转座子的转录产物，外源导入的基因。
5. 真核生物的三种RNA聚合酶，是根据对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同来区分，其中最为敏感的是RNA polymerase Ⅱ，其功能是合成mRNA。
三、判断并改错（每题2分，不改错者不得分。共10分）
1 RNA连接酶的底物是RNA，DNA连接酶的底物是DNA（ — ）。
2 色氨酸操纵子中含有衰减子序列（ + ）。
3 原核生物RNA聚合酶全酶具有四个亚基α2ββ＇（ — ）。
4 真核生物mRNA的两端都有3ˊ羟基（ — ）。
5 有两个核酸制剂A和B，A的A260/A280=2.0，B的A260/A280=1.5，因此可判定制剂A的纯度比制剂B要高（ + ）。
四、选择题（每题2分，共20分）
1．DNA结构中，活性最高的构象是：（ B ）
A A-DNA B B-DNA C Z-DNA D 超螺旋DNA
2．提出DNA双螺旋结构模型的是：（ A ）
A Watson and crick B Aershey and chase
C Sanger and Gilbert D Smith and Berg
3．与pCAGCT互补的RNA是：（ D ）
A pAGCTA B pGTCGA C pGUCGA D pAGCUG
4．在乳操纵子中，阻遏蛋白结合的是：（ A ）
A 操纵基因 B 启动基因 C 结构基因 D 调节基因
5．组成细菌核糖体的亚基是（ B ）。
A 20S，40S B 30S，50S C 40S，60S D 50S，70S
6．对基因工程载体的描述，下列哪个不正确：（ D ）
A.都可以转入宿主细胞
B.都有限制性核酸内切酶的识别位点
C.都可以连接进目的基因
2
D.都是环状双链DNA分子
E.都有筛选标志
7．RNA电泳转移后与探针杂交叫作：（ B ）
rnblot rnblot nblot t ot
8．一个mRNA的部分顺序和密码的编号是:( B )
140 141 142 143 144 145 146
CAGCUCCGGUAGUAAAACAGC
以此mRNA为模板，经翻译生成多肽链含有的氨基酸为:
A. 141 B. 142 C. 143 D. 144
9．真核生物基因组中没有：（ C ）
A.内含子 B.外显子 C.转录因子
D.插入序列 E.高度重复序列
10．真核生物中有3种RNA聚合酶，分别叫Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。主要根据对α-鹅膏蕈碱（α-amanitine）的敏感性不同来区别。其中对α-鹅膏蕈碱最为敏感的是（ B ）。
A．RNA聚合酶Ⅰ B. RNA聚合酶Ⅱ C. RNA聚合酶Ⅲ D. RNA聚合酶Ⅱ和酶Ⅲ
五、写出下列简写或单词的中文名称（每题1分，共10分）
1．Exon 外显子
2．Pseudogene 假基因
3．SV40 猿猴病毒40
4．Cosmid 粘粒
5．Denaturation 变性
6．excision repair 切除修复
7．Inclusion body 包涵体
8．antisense strand 反义链
9．monocistronic mRNA 单顺反子mRNA
10．Deletion 缺失
六、简答题（每题10分，共30分）
1．全长为100Kbp的dsDNA，将5ˊ末端标记后，经不完全水解得到4个具3
放射性的片断，分别为：100、70、60、18，完全水解后的电泳片断为：42、30、18、10。绘制其物理图谱。
2．简述检测DNA溶液纯度的方法和原理？
用O.D260/280nm的比值，鉴定核酸的纯度，因DNA在280nm处的OD值是260nm处OD值的一半。DNA接近1.8,RNA接近2.0时较纯。比值偏高，酚类物质污染较多，比值偏低（<1.8）说明有Pr污染。
3．说出在末端终止法测序中，引物的作用？
（1）在DNA聚合酶的作用下，将dNTP 或ddNTP加到引物的3′-OH末端。
（2）保证所测DNA序列的特异性和准确性。
七、实验分析题（10分）
限制性内切核酸酶BamHⅠ和PstⅠ切割某一DNA序列，结果如下：
↓
5ˊ--GGATCC--3ˊ BamHⅠ --G GATCC--
3ˊ--C CTAGG--5ˊ ————→ --C CTAG G--
↑
↓
5ˊ--CTGCAG--3ˊ PstⅠ --CTGCA G--
3ˊ--GACGTC--5ˊ————→ --G ACGTC--
↑
1指出被切割DNA分子的5ˊ端和3ˊ端。○（1分）
2如果将切割后的DNA同DNA聚合酶、4种dNTP在一起温育，这些DNA○的末端会有什么样的变化？（3分）
3经过○2中的反应后，还能用T4 ○DNA 连接酶将BamHⅠ和PstⅠ末端连接起来吗？（3分）
4经过连接后的DNA还能形成BamHⅠ和PstⅠ的位点吗？（3分） ○答：
1 ↓ ○5ˊ--GGATCC--3ˊ BamHⅠ 5ˊ--G GATCC--3ˊ
3ˊ--C CTAGG--5ˊ ————→ 3ˊ--C CTAG G--5ˊ
↑
↓
5ˊ--CTGCAG--3ˊ PstⅠ 5ˊ--CTGCA G--3ˊ
3ˊ--GACGTC--5ˊ————→ 3ˊ--G ACGTC--5ˊ
↑
2 BamHⅠ：
○ 5ˊ--GGATC GATCC--3ˊ
4
3ˊ--C CTAG CTAGG--5ˊ
PstⅠ：
5ˊ--CTGCA G--3ˊ
3ˊ--G ACGTC--5ˊ
3能。 ○4不能形成BamHⅠ的位点，但能形成PstⅠ的位点。
○5
2024年2月19日发(作者：杞小瑜)
天水师范学院生化学院2010—2011学年度
第二学期 生物技术专业2008级考试试题（参考答案）
（A卷） 科目：分子生物学
题目
得分
一
二
三
四
五
六
七
总分
一 名词解释（每题2分，共10分）
1．shine-dalgarno sequence：原核生物起始密码子AUG和其上游3-11个核苷酸处一段3-9个核苷酸序列，是16SrRNA结合的位点。
2．gene family：由于真核细胞的DNA都是单顺反子，许多相关的基因常常按功能成套组合，一套基因就是一个基因家族。家族中各成员的表达水平和酶活性可以很不相同，但通常是密切相关的。通常分为简单多基因家族、复杂多基因家族和发育调控的复杂多基因家族。
3．Renaturation：热变性的DNA缓慢冷却，已分开的互补链按原有碱基排列顺序借助于氢键重新配对结合，致使DNA分子的许多天然性状得以恢复的特性，称为DNA的复性（Renaturation），也称退火(annealing)。
4．RNA interference 指用双链RNA去抑制特定mRNA的翻译而使该基因编码的蛋白不被表达, 从而使研究物种出现一定的表征(phenotype)。
5．cDNA library 利用纯化的总mRNA在逆转录酶的作用下，合成互补的DNA即cDNA，再按构建基因文库的类似方法对cDNA进行克隆，由此获得的克隆总称为cDNA文库。
二、填空（每题2分，共10分）
1. 紫外线引起的DNA损伤最容易形成的是TT二聚体，这类损伤可用可见光进行修复，这种修复方式属回复修复。
2. 细菌的应急反应主要是由于氨基酸的合成全面匮乏引起，实施这一应急反应的信号是ppGpp或ppGppp，产生这一物质的诱导物是空载的tRNA。
3. 在琼脂糖凝胶电泳中，加入的指示剂有溴酚蓝和二甲苯腈蓝，其中溴酚蓝的分子量相当于300bp的dsDNA，二甲苯腈蓝的分子量相当于4Kbp的dsDNA。1
用于核酸染色的荧光染料是溴化乙锭。
4.在RNAi技术中，双链RNA来源于RNA病毒的感染、转座子的转录产物，外源导入的基因。
5. 真核生物的三种RNA聚合酶，是根据对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同来区分，其中最为敏感的是RNA polymerase Ⅱ，其功能是合成mRNA。
三、判断并改错（每题2分，不改错者不得分。共10分）
1 RNA连接酶的底物是RNA，DNA连接酶的底物是DNA（ — ）。
2 色氨酸操纵子中含有衰减子序列（ + ）。
3 原核生物RNA聚合酶全酶具有四个亚基α2ββ＇（ — ）。
4 真核生物mRNA的两端都有3ˊ羟基（ — ）。
5 有两个核酸制剂A和B，A的A260/A280=2.0，B的A260/A280=1.5，因此可判定制剂A的纯度比制剂B要高（ + ）。
四、选择题（每题2分，共20分）
1．DNA结构中，活性最高的构象是：（ B ）
A A-DNA B B-DNA C Z-DNA D 超螺旋DNA
2．提出DNA双螺旋结构模型的是：（ A ）
A Watson and crick B Aershey and chase
C Sanger and Gilbert D Smith and Berg
3．与pCAGCT互补的RNA是：（ D ）
A pAGCTA B pGTCGA C pGUCGA D pAGCUG
4．在乳操纵子中，阻遏蛋白结合的是：（ A ）
A 操纵基因 B 启动基因 C 结构基因 D 调节基因
5．组成细菌核糖体的亚基是（ B ）。
A 20S，40S B 30S，50S C 40S，60S D 50S，70S
6．对基因工程载体的描述，下列哪个不正确：（ D ）
A.都可以转入宿主细胞
B.都有限制性核酸内切酶的识别位点
C.都可以连接进目的基因
2
D.都是环状双链DNA分子
E.都有筛选标志
7．RNA电泳转移后与探针杂交叫作：（ B ）
rnblot rnblot nblot t ot
8．一个mRNA的部分顺序和密码的编号是:( B )
140 141 142 143 144 145 146
CAGCUCCGGUAGUAAAACAGC
以此mRNA为模板，经翻译生成多肽链含有的氨基酸为:
A. 141 B. 142 C. 143 D. 144
9．真核生物基因组中没有：（ C ）
A.内含子 B.外显子 C.转录因子
D.插入序列 E.高度重复序列
10．真核生物中有3种RNA聚合酶，分别叫Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。主要根据对α-鹅膏蕈碱（α-amanitine）的敏感性不同来区别。其中对α-鹅膏蕈碱最为敏感的是（ B ）。
A．RNA聚合酶Ⅰ B. RNA聚合酶Ⅱ C. RNA聚合酶Ⅲ D. RNA聚合酶Ⅱ和酶Ⅲ
五、写出下列简写或单词的中文名称（每题1分，共10分）
1．Exon 外显子
2．Pseudogene 假基因
3．SV40 猿猴病毒40
4．Cosmid 粘粒
5．Denaturation 变性
6．excision repair 切除修复
7．Inclusion body 包涵体
8．antisense strand 反义链
9．monocistronic mRNA 单顺反子mRNA
10．Deletion 缺失
六、简答题（每题10分，共30分）
1．全长为100Kbp的dsDNA，将5ˊ末端标记后，经不完全水解得到4个具3
放射性的片断，分别为：100、70、60、18，完全水解后的电泳片断为：42、30、18、10。绘制其物理图谱。
2．简述检测DNA溶液纯度的方法和原理？
用O.D260/280nm的比值，鉴定核酸的纯度，因DNA在280nm处的OD值是260nm处OD值的一半。DNA接近1.8,RNA接近2.0时较纯。比值偏高，酚类物质污染较多，比值偏低（<1.8）说明有Pr污染。
3．说出在末端终止法测序中，引物的作用？
（1）在DNA聚合酶的作用下，将dNTP 或ddNTP加到引物的3′-OH末端。
（2）保证所测DNA序列的特异性和准确性。
七、实验分析题（10分）
限制性内切核酸酶BamHⅠ和PstⅠ切割某一DNA序列，结果如下：
↓
5ˊ--GGATCC--3ˊ BamHⅠ --G GATCC--
3ˊ--C CTAGG--5ˊ ————→ --C CTAG G--
↑
↓
5ˊ--CTGCAG--3ˊ PstⅠ --CTGCA G--
3ˊ--GACGTC--5ˊ————→ --G ACGTC--
↑
1指出被切割DNA分子的5ˊ端和3ˊ端。○（1分）
2如果将切割后的DNA同DNA聚合酶、4种dNTP在一起温育，这些DNA○的末端会有什么样的变化？（3分）
3经过○2中的反应后，还能用T4 ○DNA 连接酶将BamHⅠ和PstⅠ末端连接起来吗？（3分）
4经过连接后的DNA还能形成BamHⅠ和PstⅠ的位点吗？（3分） ○答：
1 ↓ ○5ˊ--GGATCC--3ˊ BamHⅠ 5ˊ--G GATCC--3ˊ
3ˊ--C CTAGG--5ˊ ————→ 3ˊ--C CTAG G--5ˊ
↑
↓
5ˊ--CTGCAG--3ˊ PstⅠ 5ˊ--CTGCA G--3ˊ
3ˊ--GACGTC--5ˊ————→ 3ˊ--G ACGTC--5ˊ
↑
2 BamHⅠ：
○ 5ˊ--GGATC GATCC--3ˊ
4
3ˊ--C CTAG CTAGG--5ˊ
PstⅠ：
5ˊ--CTGCA G--3ˊ
3ˊ--G ACGTC--5ˊ
3能。 ○4不能形成BamHⅠ的位点，但能形成PstⅠ的位点。
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