2024年2月20日发(作者：改夏岚)
•检验检测•Inspection
and
Testdodl.
3969/j.
imn.
106
-4932
2022
05.
012021
年
3
月
5
日
第
30
卷第
5
期China
PharmaceuticalsVol.
30,
No.
5,
March
5, 202(离子色谱■脉冲安培检测法测定洋常春藤游离糖成分含量史万忠1，栾绍斋2，倪力军沁(2上海中医药大学附属曙光医院，上海
201603；
2.中国人民解放军7139部队93分队，辽宁营口119000；
3.华东理工大学化学与分子工程学院，上海200232)摘要：目的
建立测定洋常春藤中游离糖成分含量的离子色谱-脉冲安培检测法。方法
色谱柱采用Thermo
DPupCxboPac
PA1分析
柱(257 mm x
4
mm)和
Thermo
DPuexCeboPac
PA1
保护柱(50
mm
x
4
mm),流动相为超纯水(A)—
50
mmol/L
NaOH
和
1
mol/L
Na
Ac
溶
液(B)
—
10
mmol/L
NaOH
溶液(C),梯度洗脱(0
〜1.
00
mix
时
82%
A、1%
C,
1.
16
-20.
00
mix
时
77%
A、30%C,22.
5-32
00
mix
时62%A、1%B、1%C,35
10-30.
00
mix时82%A、13%C),流速为50
mL/min,柱温为25弋，进样量为
1
pL采用
四电位脉冲安
培检测器检测。结果
海藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、D
—无水葡萄糖、D
—木糖、D
—果糖、D
—核糖、蔗糖、乳糖、D —半乳糖醛酸、
D
-葡萄糖醛酸在各自的质量浓度范围内线性关系良好；阿拉伯糖、D-无水葡萄糖、D
-果糖、蔗糖的平均回收率分别为99.01%
,
97.
84%
,97. 32%
,96.
20%
,
RSD分别为3.
46%
,3.
85%
,0.
94%
,3.
28%
(
n=2)o结论
该方法结果准确、可靠，重复性好，可用于洋常
春藤中1种游离糖成分含量的分析和质量控制。关键词：离子色谱法；脉冲安培检测法；洋常春藤；游离糖；含量测定中图分类号：R932;R284 1;R286.0
文献标志码：A
文章编号：1006
-4931(2021)05 -0054-05Content
Determination
of
Free
Sugao
Componevis
in
仇心^
Helix
by
Ion
ChomatogFaphy
-
I3texrateX
Pulsed
Amperometric
DetectionSHI
Wafhond1,
LUAN
Shaozhni2,
NI
Lijuu3(1.
SSuguang
Hospital Afiaamp
m
SSangha2
UnivemPa
O
T^adiUonal
Chinesu
MePiciar,
TSanghai, China
201203
;
2.
Unit
93,
Army
71239
O PL,
Yingkoo,Liaoninfr
China
112002;
3.
School
O
ChemisPu
and
Moleculau
Enginee^ingr
EasU
Chinn
UniversPa
O Scnncn
anj
Tecnnolopy,
TSanfhai,
China
220237,Abstract:
Objective
To
estabCsh
an
ion
chrematoarephy
-
PtepreteP
pulseP
amperometric
demotion
methop
for
the
content
determination
of
free
suuar
components
in HePers
helix.
Methods
The
chrematoarappic
column
was
Thermo
DionexCarboPac
PA1
anaU/cal
column(250
mmx4
mm),and
Thermo
DPuexCarboPac PA1
guard
c(eumns(50
mmx4
mm),the
moPile
ppaso
was
ultra-pure
water(A)-50
mmoUL
NaOH
and
1
mol/L
NaAc
u/umn(B)—
10
mmol/L
NaOH(C)with
gradient
eluUop(4
—
13.
00
mix,
80%
A
and
1%
C;
1.
1
—
22.00
mix,
77%
A
and
30%
C;
20.
1
-
3
2
00
min,62%A,1%B
and
1%C;32
1 -
30.
00
mix,
80%
A
and
1%
C),tUe
flow
rate
was
2
0
mL/mP,the
column
temperature
was
25
,and
the
injection
volume
was
1
pL.
The
pulseP
amperometric
detector
was
oper-
ateP
with
apuabruple
-
potential
waveform
for
the
detection.
Resuly
TrePaloso
:
rhamnose
:
arabinose
:
galactose
:
D
-
glucose
:
D
-
xylose
:
D
—
fructose: D
—
ribose:
sucrose: lactose:
D
—
galacturenic
acid
and
D
—
glucxronic
acid
showeP
a
goop
dnear
relatiouship
within
the
corre-
spopnina
concentration
ranav.
The
averaye
recoveries
of
arabinose
,
D
-
glucose
,
D
-
fructose
and
sucrose
were
99.21%
,
H.
84%
,第一作者：史万忠，男，博士研究生，副主任药师，研究方向为中药制剂与新药开发,（电话）（电子信箱）Uwzh@hSm/I
cm。
△通信作者:倪力军，女，博士研究生，教授，研究方向为中药物质基础与质量分析,（电话）021
-64253045（电子信箱）mjfyt@13.
cm。力衰竭专业委员会，中华心血管病杂志编辑委员会.中国心
衰竭的系统评价[J：.中国医药导报,201,1(1):11-11.[1
3:
CHEN
IGJ,LEE
MS,LIN
MK,et
ad
Blue
Oght
decreases
tansPO
力衰竭诊断和治疗指南2018LJ：.中华心血管病杂志，201,
4610）2760-789．[7：
WHICAKER
J,
TSCHABRUNN
CM,
JANG
J,
et
ad
Cardiac
MR
nope
Ha
content
in
Salvia
miOiorrhiza
hairy
roots
via
genes
rexu-
lation[J：.
Journal
of
PhotochemOtry and
PhotoPiology
B：
Biology,
Characterization
of
left
ventricular
remoPelina
in
a
suine
moPel of
2418,53:14-12[14：雷
莉，袁宇峰.左西孟旦辅助治疗对老年慢性心力衰竭患者
infarct
fofoweP
by
reperfusion
[
J
：:
Journal
of
Maynetic
Resonance
ImaaPg,2418,48（3）：808
-817.神经内分泌激素及细胞因子的影响J：海南医学院学报，
201,23(21):2921
-2924.J):
CHEN
X,WU
R,KONG
YW,et
ad
Tanshinone
Ha
xtenuates
re[16：王
艳，张
丽，刘
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2328
— 2332.[11：白凤鸣.丹参酮Ia磺酸钠的临床应用进展[J：.中国药房，
nal
damaye
in
STZ
—
induceP
diabetic
rats
via
indiPidna
oxida-
Uve
stress
and
inflammation[J:
.
Oncotarget,
201,
3((9)：
31915
-31922.(收稿日期：2020
-95
-95；修回日期：2020
-
10-03)201,23（31）：2921
-2973.[1：郑朝阳，赖仁奎,潘光明，等•丹参酮Ha磺酸钠注射液治疗心力55
2021年3月5日
第30卷第5期Vol.
30, Na.
3,
March
3,
2020•检验检测•China
PharmaceuticalsInspection
and
TestThe
method R
accurate,
aeCable
anp
repra-97.
32%
,9600%
with
RS
Do
d
3.
46%
,305%
,2. 94%
anp 308%
(
n
二
6).
Conclusion
duTbe,which
can
be
used
far
the
content
determinatiop
anp
quality
control
of
free
supar
cempopepts
in
Heierd
words：ion
chromamgraphy；mmxramd
pueed
amperometric
demcUon;
Helerd
hei;free
supar;conmnl
determinatiop常春藤为五加科常绿药用和观赏植物,《欧洲药典》
将洋常春藤Helerd
helin
L收录为药用植物4］。洋常春
藤提取物作为一种传统的祛痰药物，其提取溶剂一般为
30%
-70%乙醇，常用剂型有片剂、胶囊、泡腾片、口服液、
糖浆剂，已在欧洲多个国家获批上市4.洋常春藤中主要药
用生物活性化合物为三萜皂苷，以及其他化合物如黄酮
类、香豆素类、挥发油、维生素、糖类等。目前，对洋常春藤
中三萜皂苷、黄酮苷类、苯丙素类化学成分的研究较多，但
尚无研究糖类成分的报道4-。离子色谱法利用被测物质
的离子性进行分离和检测,能有效分析所有游离糖成分,
检测速度快，无需衍生化。阴离子交换色谱-脉冲安培检
测法分离能力强，灵敏度高,在糖及相关化合物的分析中
有独特优势［8-12］,本研究中采用此方法测定不同产地洋常
春藤游离糖的含量,并优化离子色谱条件,为后续药用部
位和药用成分的研究提供参考。现报道如下。1仪器与试药11
仪器ThermofisherlCS
-
6400型离子色谱仪（美国赛默飞
世尔科技有限公司），配置有脉冲安培检测器（工作电极
为金电极）;ML44/02型电子分析天平（精度为0.
1
mg）,
XSE103DU型电子天平（精度为0.21
mg）,均购于梅特
勒-托利多仪器
<
上海〉有限公司；do
-
3310
DTH型
超声波清洗器（上海生析超声仪器有限公司，功率为
30
W,频率为40
kHz）;有机相针式滤器（上海安谱科
学仪器有限公司）；FW177型中药粉碎机（天津泰斯特
仪器有限公司）；HW0-28型电热恒温水浴锅（上海一
恒科学仪器有限公司,UPK-I-10T型去离子水机（四
川优普超纯科技有限公司）。1.2
试药D-葡萄糖醛酸（批号为40648
-
20
004,纯度为
99.8%
）,
D-核糖（批号为44668-201302,纯度为
990%
）,海藻糖（批号为40073
-
20
001,纯度为
99.
9%
,
D-无水葡萄糖（批号为00833
-
20
307,纯
度为94.
2%
）
,
D-果糖（批号为111504
-
201703,纯度
为99.
8%,阿拉伯糖（批号为111504-220202,纯度为
99.5%
）,蔗糖（批号为0
327
-
221702
,纯度为
40.
0%
）,乳糖（批号为40053
-
201043
,纯度为
94.
8%
）,半乳糖（批号为100226
-
20
006,纯度为
100.0%
）
,
D-木糖（批号为01508
-
20
405,纯度为
99.
4%
,
D-半乳糖醛酸（批号为111444-221702,纯
度为43.
1%,鼠李糖（批号为11383
-201502,纯度为
98
5%
）,均购自中国食品药品检定研究院；On
Guard
RP前处理柱（上海安谱实验科技股份有限公司）；氢氧
化钠、醋酸钠均为优级纯（德国Merch公司）;试验用水为
自制去离子水。试验中所用11批次洋常春藤药材分别
采集于山东、上海、广东、江苏。经中国中医科学院中药研
究所陈士林教授鉴定为正品。采集药材的信息见表lo
表1
洋常春藤药材信息Tab.
1 Information
of
Heder
helix样品编号样品批号产地采集时间1J040731
-1江苏2216
-07
-312J040731
-2江苏2016
-07
-313J0
0
60731
-7江苏2016
-07
-314J0160802江苏2216
-08
-025J0160824
-
1江苏204-08
-246J0
1
60824
-2江苏204-08
-247SD160809山东224-08
-098SH160617上海2016
-06 -
139JS160802江苏204-08
-024GD
1
608
1
1广东204-08
-1111GD
1
60824广东204-08
-242
方法与结果2.1
色谱条件色谱柱:ThermoDiocexCarboPacPAl
分析柱（250mm
X
4
mm）
,
Thermo
DionexCarboPao
PA
1
保护柱（50
mm
X
4
mm）;检测器：四电位脉冲安培检测器,A0
-
AP自
动进样器；流动相：超纯水（A）
-50
mmo/L
NaOH和
1
mcO/L
Na
Ao
溶液（B）-
30
mmoe/L
NaOH
溶液（C）,
梯度洗脱程序见表2；柱温:23
°C
;流速:0
2
mL/min;
进样量：4
|iLo表2 离子色谱流动相梯度洗脱程序(％)Tab.
2
Gradieat
elution
proorom
of
ion
chromatoorophy(
%)时间
(mnt)ABC0.
0082.
000.204.
0013.0082.
000.
004.
004.
0070.
000.
0030.
0022.
0070.
000.
0030.
0022.
467.004.
204.
0070
0067.004.
004.
0070
482.
000.
004.
0032.
0682.00.
064.
202.2
溶液制备混合对照品溶液:取海藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半
55
•检验检测•Inspection
and
Test2021年3月5日
第30卷第5期China
Pharmaceuticals准曲线。结果见表3Vo/ 34,
No.
5,
Maoh
5,2421乳糖、D-无水葡萄糖、D-木糖、D-果糖、D-核糖、
蔗糖、乳糖、D
-半乳糖醛酸、D
-葡萄糖醛酸对照品适
表3 各被测成分线性关系考察结果(a
=
5)Tab.
2
The
linevr
relationship
of
ecch
component
( a
=
5)成分海藻糖量，精密称定，加超纯水制成每1
mL含海藻糖、鼠李糖、
阿拉伯糖、半乳糖、D
-无水葡萄糖、D-木糖、D-果
线性回归方程线性范围（Mp/mL）s0.999
70.999
70.999
50.
999
00.999
70.999
60.999
70.
999
90.999
70.999
60.999
70.
999
9糖、D
-核糖、蔗糖、乳糖、D
-半乳糖醛酸、D
-葡萄糖
醛酸分别为
0
239,1.
159,1.09,1.709,1.285,1.399,
Y
二
0.
585
1
X
+
3/
500
6Y二
0 423
1X+
0
494
94.
95
~
49.484.
64~46,364.
05
~
40.486.
83~68.28鼠李糖阿拉伯糖半乳糖0
225,1.
269,1.
270,1.
430,1.
201,1.
202
mp
的对照品
贮备液。取对照品贮备液适量，加超纯水制成每1
mL含
海藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、D-无水葡萄糖、
Y
二
2. 018
3X+
0
974
3Y二
0 5722X
+
4.
218
8Y二0
891
9X+
0
9768Y二2.
006
6X-0.
888
0D-无水葡萄糖D-木糖D-果糖D-核糖蔗糖5.14-52
405.
59
~
55.
38D
-木糖、D-果糖，D-核糖、蔗糖、乳糖、D-半乳糖
醛酸、D-葡萄糖醛酸分别为49.
48,46.
36,40.
48,
Y
二
1.291
8X-
1.4844Y
二
1.99
1X-0.1464Y二0.
n960X-10022Y二0.
891
2X+
1.789
3Y二
1.331
4X-0.
534
84.
90
~
49.75.
07
-50.6868.28,
51.40,
55.88
,
49.00,
50.68,
50.80
,
59.20,
508-50.
305.
72
~
57.
2048.
04,48.
08山8的混合对照品溶液,摇匀,采用0.
22
jxm
水系过滤膜滤过,即得。乳糖D-半乳糖醛酸D-葡萄糖醛酸4.
80~48.044.81~48.08供试品溶液:取样品粉末（过40目筛）0.5p,精密
称定,置圆底烧瓶中,加去离子水50
mL,加热回流3h
,
Y
二
1.938
8X-0.
572
1精密度试验:精密吸取2.
2项下混合对照品溶液,
按2.
1项下色谱条件连续进样6次,测定。结果海藻糖、
鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、D
-无水葡萄糖、D
-木糖、
减压回收溶剂,残渣用去离子水溶解,转移至50
mL容
量瓶中,加去离子水至刻度,摇匀,采用0
1
22
|xm水系
过滤膜滤过,取续滤液,即得。D
-果糖、D
-核糖、蔗糖、乳糖、D
-半乳糖醛酸、D
-
葡萄糖醛酸峰面积的RSD分别为2.66%
,
2.81%
,2.3
方法学考察专属性试验:不加洋常春藤样品,直接加入去离子
水,按供试品溶液制备方法制备空白溶液,按2
•
1项下
2.
12%
,
2
98%
,
2.
98%
,
2
.
87%
,
2.
58%
,
2.
68%
,
2.61%
,
2
.
86%
,
2
64%
,
2
36%
（o
二
6）,表明仪器精密
度良好。色谱条件进样检测。结果未发现干扰洋常春藤游离糖成
分的色谱峰。离子色谱图见图io线性关系考察:取2.
2项下混合对照品溶液,依次
稀释0,2,2.
5,5,10倍,配制成系列质量浓度梯度的混
重复性试验：取样品（批号JS90731
-
1叶），按
20项下方法制备供试品溶液,按2.
1项下色谱条件分
别进样6次。结果阿拉伯糖、D
-无水葡萄糖、D
-果
合对照品溶液,按2.1项下色谱条件,精密吸取9
mL,
注入离子色谱仪,记录色谱图,以峰面积积分值（Y）为
纵坐标、对照品质量浓度（X,
Mp/mL）为横坐标绘制标糖、蔗糖峰面积的RSD分别为2.
12%
,
2.53%
,
2
.
58%
,
2.
61%
（
o二6）,表明方法重复性良好。加样回收试验:取同一批（批号JS90731
-1叶）样2海藻糖
2.鼠李糖
3.阿拉伯糖
4
.半乳糖
5.
D-葡萄糖
6.
D
-木糖
2.
D
-果糖
0
D-核糖
9.蔗糖9.乳糖
12
D-半乳糖醛酸
9
.
D-葡萄糖醛酸A.混合对照品溶液
B.供试品溶液
C.空白溶液图1
专属性试验离子色谱图0
Uedalosc
2
rdamnosc
3.
araPinosc 4
.
paloctosc 5.
D
- glucose
6
.
D
—
xylose
7.
D
-
factosc
12
.
D
-
gluchrouic
ociP0
.
D
-
ridosc
9
.
sucosc
14
.
loctosc1
2
D
-
palocturouic
ociP
A
.
MixeX
reference
solution B
.
Test
solution
C.
Blanh
solutionFiv.
1
Ion
chromatograms
foa
specificUy
tesS56
2021年3月5日
第30卷第5期Vol.
30,
No
3,
March
3,202)China
Pharmaceuticals表4
11批次洋常春藤药材中4种糖类成分含量测定结果(mg/g,
a
=2)7因荡卫•检验检测•Inspectios
and
TestTab.
4Resslts
oO
content
determination
oO
four
ssgars
in
11
batches
oO
HeUera helix(mg/g,
a
=2,序号1批号JS4073)
-1JS1
60731
-2JS1
60731
-7JS160802JS160824
-
1JS160824
-
2阿拉伯糖茎1
.
26叶D
-
无水葡萄糖D-果糖茎1.
1
4叶蔗糖茎叶茎叶2.
7)3.
335.
078
.
02O.
932).
709
.
096
.
364
.
924
.
331.
474.
274
.
1
212
.
893.
486
.
2321.
841.
900
634.
437023.304.
394.680
728.
984
.
03743.
738
.
046
.
092.
56O.
9)4.
921.
99O.
443.
72367)061.
42.
272.
770.
234
.618.
271.
341.
433.
723.
3330830526
.1127.
6727.
004
.
350D
1608090H
1606130.
553.
832.
074.
223.25893.
841.
38).02/
673.252.
OO.
391.
083.
931.
554
.
1
63.
4612
.
8427.
6728
.
98JS1608023.
887.
224
.698.
9933.
2710GD
1
608
1
1GD
1
608244.
093.
073.
433.
43209O7036.
3723.
03品6份，每份0.
25
g精密称定，置圆底烧瓶中，精密加
2.4
样品含量测定取11批次洋常春藤干燥茎和叶，依法制备供试品
入对照品贮备液(阿拉伯糖、D
-无水葡萄糖、D
-果糖
和蔗糖对照品含量分别为0007
2,0
283
0,0
42
3,溶液，过4.
22
!im水相滤膜，精密吸取4
|1L注入离子
3.
07
4me)适量,依法制备供试品溶液，精密吸取lOpcL
注入离子色谱仪，按2.
1项下色谱条件进样测定，用外
色谱仪，按2.
1项下色谱条件进样测定2次，记录色
谱图,用外标法计算样品含量。含量测定结果见表4,色
标法计算回收率。结果阿拉伯糖、D
-无水葡萄糖、D
-
果糖、蔗糖的平均回收率分别为9901%
,97.
84%
,
谱图见图2o2.5
样品含量分析97. 32%
,
96.
20%
,
RSD
分别为
3.
46%
,
3.
83%
,根据11批次洋常春藤药材中4种游离糖成分含量
测定结果，按不同药用部位和不同产地分类汇总并计算
2.
94%
,3.
23%(a
=
6)o4种游离糖成分含量,详见表5。可见，不同产地和部位
(茎或叶)洋常春藤中的游离糖成分主要为阿拉伯糖、
D
-无水葡萄糖、D
-果糖和蔗糖4种。不同部位比较
显示，茎中D-无水葡萄糖和D-果糖含量均高于叶
中，茎中阿拉伯糖和蔗糖含量均低于叶中;不同产地比
较显示，上海产的阿拉伯糖含量最高，江苏产的D-无
水葡萄糖和D-果糖含量最高，广东产的蔗糖含量最
高;广东产洋常春藤(茎+叶)中4种游离糖成分总含量
Q/pC最高,平均总含量为82.
27
mg/g,蔗糖含量为67.
46%
,
占比最高。表5
不同产地和部位洋常春藤药材游离糖成分含量测定结果
(
mggg)Tab.
5
Content
of free
ssgar
components in
Heuera
helic
fromdiffereat
places
of
origin
and
different
parts(mg/g)分类部位阿拉伯糖4.
770
50D-无水葡萄糖D
-
果糖蔗糖29
.
1
04
.
1
24
.
9722
.
29茎+叶茎14.
97&
936
.
0216.
549
.
464.
881•阿拉伯糖
2.
D-无水葡萄糖
3.
D-果糖
4.蔗糖叶2.
874.
351.
284.
5810.
67A.茎
B叶产地4.
sucrose江苏山东图2
样品含量测定离子色谱图).arabinose
2.
D
-
glucose
7.
7012.
8414.
44
3)40
,
029
.
623.
D
-
fructose
B
.
Leof上海广东7
.
093.
987.
96A.
Stem
4.62Fig.
2
Ion
chromatogroms
for
content
determination
of
somples53.
4757
•检验检测•/nspecths
and
Test2021
年
3
月
5
日
第
30
卷第
5
期China
PharmaceuticalsVol.
30,
No.
5,
March
5, 202(3
讨论糖类的检测方法主要有气相色谱法山-04、高效毛
细管电泳法⑴-1」、高效液相色谱法g等。气相色谱法要
求待测物在分析条件下可气化，且不分解;高效毛细管
电泳法和高效液相色谱法均采用紫外检测器，要求待测
物有紫外吸收。由于糖类大都无足够的挥发性,且无吸
光基团，故上述3种分析方法都需先对其进行衍生化，
操作烦琐，结果重复性差,不利于开展大批量精准检测。
虽然高效液相色谱法也可以采用示差检测器，无需衍生
化，但其灵敏度较低,且受温度和流动相影响较大，稳定
性和重复性都欠佳。本研究中采用梯度洗脱程序，通过梯度淋洗改变流
动相的pH,使各成分有效分离。糖类为pKx在5-1
的弱酸，其中半乳糖、果糖、木糖、葡萄糖的pKx值分别
为5.
35,16.
03,16.
19,16.
28,在高pH淋洗液中均会
部分或全部以阴离子形式存在，可在阴离子交换柱上保
留并得到分离。当100
moI/L
NaOH溶液（流动相C）比
例大于25%时,保留时间缩短，由于半乳糖和葡萄糖属
差相异构体和位置异构体,半乳糖和葡萄糖不能完全分
离；低于5%时，半乳糖和葡萄糖可完全分离；低于
25%时，核糖和蔗糖不能完全分离。试验发现，如果初始
时间段流动相C比例过低，后续提高流动相C比例，核
糖和蔗糖仍不能完全分离。为使各成分达到分离要求，
故设置初始流动相C比例为5%，并梯度提高至
30%
;糖醛酸类物质保留相对较长，醋酸根具有比氢氧
根更强的淋洗能力，故提高醋酸根浓度洗脱出糖醛酸类
物质。最终确定梯度洗脱条件。本研究中比较了洋常春藤药材供试品溶液制备中
不同药材粒径（过1,20,40,66目筛）、不同料液比（1
：50,
1
:
10,1
：200,
m/V）和不同加热回流提取时间（1,2,
3,4
I的提取效果，最终确定最佳提取条件。试验结果显示，洋常春藤茎和叶中均含有4种游
离糖成分（阿拉伯糖、D-无水葡萄糖、D-果糖和蔗
糖）。茎和叶部位的4种游离糖中，蔗糖和D-无水
葡萄糖含量较高，其次为D-果糖，阿拉伯糖含量最
低；不同产地洋常春藤中，各游离糖成分的含量有明
显差异。综上所述，本方法可全面评价洋常春藤中发挥作用
的药效物质及对其中有效提取部位进行质量控制，分离
能力强，灵敏度高，可为后续用药部位和药用成分内控
指标的建立提供参考。参考文献[1:
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mono
—
and
di
saccharides
in
mild
and
mild
proPucts
by
high
—
performance
anion
—
exchanae
chromatograppy
with
pulseP
amperometric
demctPn[J： ：
Anam/ca
Chimica
Acta,
2003,
485(()：
43
-49.[1：
CAI
Y,
LIN
J,
SHI
Y,
et
ad
DetermixaUon
of
several
supars
in
serum
by
high
—
performance
anion
—
exchanae
chromatograppy
with
pulseP
amperometric
demcXop[J：
-
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—
MATUTE
A),
HERNANDEZ
—
HERNANDEZ
O,
RODRIGUEZ
—
SANCHEZ
S,
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Derivatization
of
carboPyPrates
for
GC
and
GC
—
MS
analyses
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J
Chrematogr
B
Analyt Technot
BiomeP Life
SuR201,879(1 -
13
:
126 -
140.[19：
MICTERMAYR
S,
BONES
J, GUTTMAN
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UnravePna
the
gmco
—
puzzle:
GUcan
structure
identiOcation
by
capillary
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AnUyUcal
Chemistry,
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HROBO
OVA
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LEHOTAY
J,
ICmARIA
J,
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al.
HPLC
demrmiiUUou
of
saccharides
af/p
pre
—
column
derivatization
in
honey
samples [
J ：
.
Cesha
Sloe
Farm
,
2013,60
(
3
,
：
132
—
13.(收稿日期：2020
-04-0(；修回日期：2020
-95
-26)
2024年2月20日发(作者：改夏岚)
•检验检测•Inspection
and
Testdodl.
3969/j.
imn.
106
-4932
2022
05.
012021
年
3
月
5
日
第
30
卷第
5
期China
PharmaceuticalsVol.
30,
No.
5,
March
5, 202(离子色谱■脉冲安培检测法测定洋常春藤游离糖成分含量史万忠1，栾绍斋2，倪力军沁(2上海中医药大学附属曙光医院，上海
201603；
2.中国人民解放军7139部队93分队，辽宁营口119000；
3.华东理工大学化学与分子工程学院，上海200232)摘要：目的
建立测定洋常春藤中游离糖成分含量的离子色谱-脉冲安培检测法。方法
色谱柱采用Thermo
DPupCxboPac
PA1分析
柱(257 mm x
4
mm)和
Thermo
DPuexCeboPac
PA1
保护柱(50
mm
x
4
mm),流动相为超纯水(A)—
50
mmol/L
NaOH
和
1
mol/L
Na
Ac
溶
液(B)
—
10
mmol/L
NaOH
溶液(C),梯度洗脱(0
〜1.
00
mix
时
82%
A、1%
C,
1.
16
-20.
00
mix
时
77%
A、30%C,22.
5-32
00
mix
时62%A、1%B、1%C,35
10-30.
00
mix时82%A、13%C),流速为50
mL/min,柱温为25弋，进样量为
1
pL采用
四电位脉冲安
培检测器检测。结果
海藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、D
—无水葡萄糖、D
—木糖、D
—果糖、D
—核糖、蔗糖、乳糖、D —半乳糖醛酸、
D
-葡萄糖醛酸在各自的质量浓度范围内线性关系良好；阿拉伯糖、D-无水葡萄糖、D
-果糖、蔗糖的平均回收率分别为99.01%
,
97.
84%
,97. 32%
,96.
20%
,
RSD分别为3.
46%
,3.
85%
,0.
94%
,3.
28%
(
n=2)o结论
该方法结果准确、可靠，重复性好，可用于洋常
春藤中1种游离糖成分含量的分析和质量控制。关键词：离子色谱法；脉冲安培检测法；洋常春藤；游离糖；含量测定中图分类号：R932;R284 1;R286.0
文献标志码：A
文章编号：1006
-4931(2021)05 -0054-05Content
Determination
of
Free
Sugao
Componevis
in
仇心^
Helix
by
Ion
ChomatogFaphy
-
I3texrateX
Pulsed
Amperometric
DetectionSHI
Wafhond1,
LUAN
Shaozhni2,
NI
Lijuu3(1.
SSuguang
Hospital Afiaamp
m
SSangha2
UnivemPa
O
T^adiUonal
Chinesu
MePiciar,
TSanghai, China
201203
;
2.
Unit
93,
Army
71239
O PL,
Yingkoo,Liaoninfr
China
112002;
3.
School
O
ChemisPu
and
Moleculau
Enginee^ingr
EasU
Chinn
UniversPa
O Scnncn
anj
Tecnnolopy,
TSanfhai,
China
220237,Abstract:
Objective
To
estabCsh
an
ion
chrematoarephy
-
PtepreteP
pulseP
amperometric
demotion
methop
for
the
content
determination
of
free
suuar
components
in HePers
helix.
Methods
The
chrematoarappic
column
was
Thermo
DionexCarboPac
PA1
anaU/cal
column(250
mmx4
mm),and
Thermo
DPuexCarboPac PA1
guard
c(eumns(50
mmx4
mm),the
moPile
ppaso
was
ultra-pure
water(A)-50
mmoUL
NaOH
and
1
mol/L
NaAc
u/umn(B)—
10
mmol/L
NaOH(C)with
gradient
eluUop(4
—
13.
00
mix,
80%
A
and
1%
C;
1.
1
—
22.00
mix,
77%
A
and
30%
C;
20.
1
-
3
2
00
min,62%A,1%B
and
1%C;32
1 -
30.
00
mix,
80%
A
and
1%
C),tUe
flow
rate
was
2
0
mL/mP,the
column
temperature
was
25
,and
the
injection
volume
was
1
pL.
The
pulseP
amperometric
detector
was
oper-
ateP
with
apuabruple
-
potential
waveform
for
the
detection.
Resuly
TrePaloso
:
rhamnose
:
arabinose
:
galactose
:
D
-
glucose
:
D
-
xylose
:
D
—
fructose: D
—
ribose:
sucrose: lactose:
D
—
galacturenic
acid
and
D
—
glucxronic
acid
showeP
a
goop
dnear
relatiouship
within
the
corre-
spopnina
concentration
ranav.
The
averaye
recoveries
of
arabinose
,
D
-
glucose
,
D
-
fructose
and
sucrose
were
99.21%
,
H.
84%
,第一作者：史万忠，男，博士研究生，副主任药师，研究方向为中药制剂与新药开发,（电话）（电子信箱）Uwzh@hSm/I
cm。
△通信作者:倪力军，女，博士研究生，教授，研究方向为中药物质基础与质量分析,（电话）021
-64253045（电子信箱）mjfyt@13.
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MK,et
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Blue
Oght
decreases
tansPO
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J,
TSCHABRUNN
CM,
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J,
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ad
Cardiac
MR
nope
Ha
content
in
Salvia
miOiorrhiza
hairy
roots
via
genes
rexu-
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Characterization
of
left
ventricular
remoPelina
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a
suine
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fofoweP
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STZ
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diabetic
rats
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Uve
stress
and
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Oncotarget,
201,
3((9)：
31915
-31922.(收稿日期：2020
-95
-95；修回日期：2020
-
10-03)201,23（31）：2921
-2973.[1：郑朝阳，赖仁奎,潘光明，等•丹参酮Ha磺酸钠注射液治疗心力55
2021年3月5日
第30卷第5期Vol.
30, Na.
3,
March
3,
2020•检验检测•China
PharmaceuticalsInspection
and
TestThe
method R
accurate,
aeCable
anp
repra-97.
32%
,9600%
with
RS
Do
d
3.
46%
,305%
,2. 94%
anp 308%
(
n
二
6).
Conclusion
duTbe,which
can
be
used
far
the
content
determinatiop
anp
quality
control
of
free
supar
cempopepts
in
Heierd
words：ion
chromamgraphy；mmxramd
pueed
amperometric
demcUon;
Helerd
hei;free
supar;conmnl
determinatiop常春藤为五加科常绿药用和观赏植物,《欧洲药典》
将洋常春藤Helerd
helin
L收录为药用植物4］。洋常春
藤提取物作为一种传统的祛痰药物，其提取溶剂一般为
30%
-70%乙醇，常用剂型有片剂、胶囊、泡腾片、口服液、
糖浆剂，已在欧洲多个国家获批上市4.洋常春藤中主要药
用生物活性化合物为三萜皂苷，以及其他化合物如黄酮
类、香豆素类、挥发油、维生素、糖类等。目前，对洋常春藤
中三萜皂苷、黄酮苷类、苯丙素类化学成分的研究较多，但
尚无研究糖类成分的报道4-。离子色谱法利用被测物质
的离子性进行分离和检测,能有效分析所有游离糖成分,
检测速度快，无需衍生化。阴离子交换色谱-脉冲安培检
测法分离能力强，灵敏度高,在糖及相关化合物的分析中
有独特优势［8-12］,本研究中采用此方法测定不同产地洋常
春藤游离糖的含量,并优化离子色谱条件,为后续药用部
位和药用成分的研究提供参考。现报道如下。1仪器与试药11
仪器ThermofisherlCS
-
6400型离子色谱仪（美国赛默飞
世尔科技有限公司），配置有脉冲安培检测器（工作电极
为金电极）;ML44/02型电子分析天平（精度为0.
1
mg）,
XSE103DU型电子天平（精度为0.21
mg）,均购于梅特
勒-托利多仪器
<
上海〉有限公司；do
-
3310
DTH型
超声波清洗器（上海生析超声仪器有限公司，功率为
30
W,频率为40
kHz）;有机相针式滤器（上海安谱科
学仪器有限公司）；FW177型中药粉碎机（天津泰斯特
仪器有限公司）；HW0-28型电热恒温水浴锅（上海一
恒科学仪器有限公司,UPK-I-10T型去离子水机（四
川优普超纯科技有限公司）。1.2
试药D-葡萄糖醛酸（批号为40648
-
20
004,纯度为
99.8%
）,
D-核糖（批号为44668-201302,纯度为
990%
）,海藻糖（批号为40073
-
20
001,纯度为
99.
9%
,
D-无水葡萄糖（批号为00833
-
20
307,纯
度为94.
2%
）
,
D-果糖（批号为111504
-
201703,纯度
为99.
8%,阿拉伯糖（批号为111504-220202,纯度为
99.5%
）,蔗糖（批号为0
327
-
221702
,纯度为
40.
0%
）,乳糖（批号为40053
-
201043
,纯度为
94.
8%
）,半乳糖（批号为100226
-
20
006,纯度为
100.0%
）
,
D-木糖（批号为01508
-
20
405,纯度为
99.
4%
,
D-半乳糖醛酸（批号为111444-221702,纯
度为43.
1%,鼠李糖（批号为11383
-201502,纯度为
98
5%
）,均购自中国食品药品检定研究院；On
Guard
RP前处理柱（上海安谱实验科技股份有限公司）；氢氧
化钠、醋酸钠均为优级纯（德国Merch公司）;试验用水为
自制去离子水。试验中所用11批次洋常春藤药材分别
采集于山东、上海、广东、江苏。经中国中医科学院中药研
究所陈士林教授鉴定为正品。采集药材的信息见表lo
表1
洋常春藤药材信息Tab.
1 Information
of
Heder
helix样品编号样品批号产地采集时间1J040731
-1江苏2216
-07
-312J040731
-2江苏2016
-07
-313J0
0
60731
-7江苏2016
-07
-314J0160802江苏2216
-08
-025J0160824
-
1江苏204-08
-246J0
1
60824
-2江苏204-08
-247SD160809山东224-08
-098SH160617上海2016
-06 -
139JS160802江苏204-08
-024GD
1
608
1
1广东204-08
-1111GD
1
60824广东204-08
-242
方法与结果2.1
色谱条件色谱柱:ThermoDiocexCarboPacPAl
分析柱（250mm
X
4
mm）
,
Thermo
DionexCarboPao
PA
1
保护柱（50
mm
X
4
mm）;检测器：四电位脉冲安培检测器,A0
-
AP自
动进样器；流动相：超纯水（A）
-50
mmo/L
NaOH和
1
mcO/L
Na
Ao
溶液（B）-
30
mmoe/L
NaOH
溶液（C）,
梯度洗脱程序见表2；柱温:23
°C
;流速:0
2
mL/min;
进样量：4
|iLo表2 离子色谱流动相梯度洗脱程序(％)Tab.
2
Gradieat
elution
proorom
of
ion
chromatoorophy(
%)时间
(mnt)ABC0.
0082.
000.204.
0013.0082.
000.
004.
004.
0070.
000.
0030.
0022.
0070.
000.
0030.
0022.
467.004.
204.
0070
0067.004.
004.
0070
482.
000.
004.
0032.
0682.00.
064.
202.2
溶液制备混合对照品溶液:取海藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半
55
•检验检测•Inspection
and
Test2021年3月5日
第30卷第5期China
Pharmaceuticals准曲线。结果见表3Vo/ 34,
No.
5,
Maoh
5,2421乳糖、D-无水葡萄糖、D-木糖、D-果糖、D-核糖、
蔗糖、乳糖、D
-半乳糖醛酸、D
-葡萄糖醛酸对照品适
表3 各被测成分线性关系考察结果(a
=
5)Tab.
2
The
linevr
relationship
of
ecch
component
( a
=
5)成分海藻糖量，精密称定，加超纯水制成每1
mL含海藻糖、鼠李糖、
阿拉伯糖、半乳糖、D
-无水葡萄糖、D-木糖、D-果
线性回归方程线性范围（Mp/mL）s0.999
70.999
70.999
50.
999
00.999
70.999
60.999
70.
999
90.999
70.999
60.999
70.
999
9糖、D
-核糖、蔗糖、乳糖、D
-半乳糖醛酸、D
-葡萄糖
醛酸分别为
0
239,1.
159,1.09,1.709,1.285,1.399,
Y
二
0.
585
1
X
+
3/
500
6Y二
0 423
1X+
0
494
94.
95
~
49.484.
64~46,364.
05
~
40.486.
83~68.28鼠李糖阿拉伯糖半乳糖0
225,1.
269,1.
270,1.
430,1.
201,1.
202
mp
的对照品
贮备液。取对照品贮备液适量，加超纯水制成每1
mL含
海藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、D-无水葡萄糖、
Y
二
2. 018
3X+
0
974
3Y二
0 5722X
+
4.
218
8Y二0
891
9X+
0
9768Y二2.
006
6X-0.
888
0D-无水葡萄糖D-木糖D-果糖D-核糖蔗糖5.14-52
405.
59
~
55.
38D
-木糖、D-果糖，D-核糖、蔗糖、乳糖、D-半乳糖
醛酸、D-葡萄糖醛酸分别为49.
48,46.
36,40.
48,
Y
二
1.291
8X-
1.4844Y
二
1.99
1X-0.1464Y二0.
n960X-10022Y二0.
891
2X+
1.789
3Y二
1.331
4X-0.
534
84.
90
~
49.75.
07
-50.6868.28,
51.40,
55.88
,
49.00,
50.68,
50.80
,
59.20,
508-50.
305.
72
~
57.
2048.
04,48.
08山8的混合对照品溶液,摇匀,采用0.
22
jxm
水系过滤膜滤过,即得。乳糖D-半乳糖醛酸D-葡萄糖醛酸4.
80~48.044.81~48.08供试品溶液:取样品粉末（过40目筛）0.5p,精密
称定,置圆底烧瓶中,加去离子水50
mL,加热回流3h
,
Y
二
1.938
8X-0.
572
1精密度试验:精密吸取2.
2项下混合对照品溶液,
按2.
1项下色谱条件连续进样6次,测定。结果海藻糖、
鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、D
-无水葡萄糖、D
-木糖、
减压回收溶剂,残渣用去离子水溶解,转移至50
mL容
量瓶中,加去离子水至刻度,摇匀,采用0
1
22
|xm水系
过滤膜滤过,取续滤液,即得。D
-果糖、D
-核糖、蔗糖、乳糖、D
-半乳糖醛酸、D
-
葡萄糖醛酸峰面积的RSD分别为2.66%
,
2.81%
,2.3
方法学考察专属性试验:不加洋常春藤样品,直接加入去离子
水,按供试品溶液制备方法制备空白溶液,按2
•
1项下
2.
12%
,
2
98%
,
2.
98%
,
2
.
87%
,
2.
58%
,
2.
68%
,
2.61%
,
2
.
86%
,
2
64%
,
2
36%
（o
二
6）,表明仪器精密
度良好。色谱条件进样检测。结果未发现干扰洋常春藤游离糖成
分的色谱峰。离子色谱图见图io线性关系考察:取2.
2项下混合对照品溶液,依次
稀释0,2,2.
5,5,10倍,配制成系列质量浓度梯度的混
重复性试验：取样品（批号JS90731
-
1叶），按
20项下方法制备供试品溶液,按2.
1项下色谱条件分
别进样6次。结果阿拉伯糖、D
-无水葡萄糖、D
-果
合对照品溶液,按2.1项下色谱条件,精密吸取9
mL,
注入离子色谱仪,记录色谱图,以峰面积积分值（Y）为
纵坐标、对照品质量浓度（X,
Mp/mL）为横坐标绘制标糖、蔗糖峰面积的RSD分别为2.
12%
,
2.53%
,
2
.
58%
,
2.
61%
（
o二6）,表明方法重复性良好。加样回收试验:取同一批（批号JS90731
-1叶）样2海藻糖
2.鼠李糖
3.阿拉伯糖
4
.半乳糖
5.
D-葡萄糖
6.
D
-木糖
2.
D
-果糖
0
D-核糖
9.蔗糖9.乳糖
12
D-半乳糖醛酸
9
.
D-葡萄糖醛酸A.混合对照品溶液
B.供试品溶液
C.空白溶液图1
专属性试验离子色谱图0
Uedalosc
2
rdamnosc
3.
araPinosc 4
.
paloctosc 5.
D
- glucose
6
.
D
—
xylose
7.
D
-
factosc
12
.
D
-
gluchrouic
ociP0
.
D
-
ridosc
9
.
sucosc
14
.
loctosc1
2
D
-
palocturouic
ociP
A
.
MixeX
reference
solution B
.
Test
solution
C.
Blanh
solutionFiv.
1
Ion
chromatograms
foa
specificUy
tesS56
2021年3月5日
第30卷第5期Vol.
30,
No
3,
March
3,202)China
Pharmaceuticals表4
11批次洋常春藤药材中4种糖类成分含量测定结果(mg/g,
a
=2)7因荡卫•检验检测•Inspectios
and
TestTab.
4Resslts
oO
content
determination
oO
four
ssgars
in
11
batches
oO
HeUera helix(mg/g,
a
=2,序号1批号JS4073)
-1JS1
60731
-2JS1
60731
-7JS160802JS160824
-
1JS160824
-
2阿拉伯糖茎1
.
26叶D
-
无水葡萄糖D-果糖茎1.
1
4叶蔗糖茎叶茎叶2.
7)3.
335.
078
.
02O.
932).
709
.
096
.
364
.
924
.
331.
474.
274
.
1
212
.
893.
486
.
2321.
841.
900
634.
437023.304.
394.680
728.
984
.
03743.
738
.
046
.
092.
56O.
9)4.
921.
99O.
443.
72367)061.
42.
272.
770.
234
.618.
271.
341.
433.
723.
3330830526
.1127.
6727.
004
.
350D
1608090H
1606130.
553.
832.
074.
223.25893.
841.
38).02/
673.252.
OO.
391.
083.
931.
554
.
1
63.
4612
.
8427.
6728
.
98JS1608023.
887.
224
.698.
9933.
2710GD
1
608
1
1GD
1
608244.
093.
073.
433.
43209O7036.
3723.
03品6份，每份0.
25
g精密称定，置圆底烧瓶中，精密加
2.4
样品含量测定取11批次洋常春藤干燥茎和叶，依法制备供试品
入对照品贮备液(阿拉伯糖、D
-无水葡萄糖、D
-果糖
和蔗糖对照品含量分别为0007
2,0
283
0,0
42
3,溶液，过4.
22
!im水相滤膜，精密吸取4
|1L注入离子
3.
07
4me)适量,依法制备供试品溶液，精密吸取lOpcL
注入离子色谱仪，按2.
1项下色谱条件进样测定，用外
色谱仪，按2.
1项下色谱条件进样测定2次，记录色
谱图,用外标法计算样品含量。含量测定结果见表4,色
标法计算回收率。结果阿拉伯糖、D
-无水葡萄糖、D
-
果糖、蔗糖的平均回收率分别为9901%
,97.
84%
,
谱图见图2o2.5
样品含量分析97. 32%
,
96.
20%
,
RSD
分别为
3.
46%
,
3.
83%
,根据11批次洋常春藤药材中4种游离糖成分含量
测定结果，按不同药用部位和不同产地分类汇总并计算
2.
94%
,3.
23%(a
=
6)o4种游离糖成分含量,详见表5。可见，不同产地和部位
(茎或叶)洋常春藤中的游离糖成分主要为阿拉伯糖、
D
-无水葡萄糖、D
-果糖和蔗糖4种。不同部位比较
显示，茎中D-无水葡萄糖和D-果糖含量均高于叶
中，茎中阿拉伯糖和蔗糖含量均低于叶中;不同产地比
较显示，上海产的阿拉伯糖含量最高，江苏产的D-无
水葡萄糖和D-果糖含量最高，广东产的蔗糖含量最
高;广东产洋常春藤(茎+叶)中4种游离糖成分总含量
Q/pC最高,平均总含量为82.
27
mg/g,蔗糖含量为67.
46%
,
占比最高。表5
不同产地和部位洋常春藤药材游离糖成分含量测定结果
(
mggg)Tab.
5
Content
of free
ssgar
components in
Heuera
helic
fromdiffereat
places
of
origin
and
different
parts(mg/g)分类部位阿拉伯糖4.
770
50D-无水葡萄糖D
-
果糖蔗糖29
.
1
04
.
1
24
.
9722
.
29茎+叶茎14.
97&
936
.
0216.
549
.
464.
881•阿拉伯糖
2.
D-无水葡萄糖
3.
D-果糖
4.蔗糖叶2.
874.
351.
284.
5810.
67A.茎
B叶产地4.
sucrose江苏山东图2
样品含量测定离子色谱图).arabinose
2.
D
-
glucose
7.
7012.
8414.
44
3)40
,
029
.
623.
D
-
fructose
B
.
Leof上海广东7
.
093.
987.
96A.
Stem
4.62Fig.
2
Ion
chromatogroms
for
content
determination
of
somples53.
4757
•检验检测•/nspecths
and
Test2021
年
3
月
5
日
第
30
卷第
5
期China
PharmaceuticalsVol.
30,
No.
5,
March
5, 202(3
讨论糖类的检测方法主要有气相色谱法山-04、高效毛
细管电泳法⑴-1」、高效液相色谱法g等。气相色谱法要
求待测物在分析条件下可气化，且不分解;高效毛细管
电泳法和高效液相色谱法均采用紫外检测器，要求待测
物有紫外吸收。由于糖类大都无足够的挥发性,且无吸
光基团，故上述3种分析方法都需先对其进行衍生化，
操作烦琐，结果重复性差,不利于开展大批量精准检测。
虽然高效液相色谱法也可以采用示差检测器，无需衍生
化，但其灵敏度较低,且受温度和流动相影响较大，稳定
性和重复性都欠佳。本研究中采用梯度洗脱程序，通过梯度淋洗改变流
动相的pH,使各成分有效分离。糖类为pKx在5-1
的弱酸，其中半乳糖、果糖、木糖、葡萄糖的pKx值分别
为5.
35,16.
03,16.
19,16.
28,在高pH淋洗液中均会
部分或全部以阴离子形式存在，可在阴离子交换柱上保
留并得到分离。当100
moI/L
NaOH溶液（流动相C）比
例大于25%时,保留时间缩短，由于半乳糖和葡萄糖属
差相异构体和位置异构体,半乳糖和葡萄糖不能完全分
离；低于5%时，半乳糖和葡萄糖可完全分离；低于
25%时，核糖和蔗糖不能完全分离。试验发现，如果初始
时间段流动相C比例过低，后续提高流动相C比例，核
糖和蔗糖仍不能完全分离。为使各成分达到分离要求，
故设置初始流动相C比例为5%，并梯度提高至
30%
;糖醛酸类物质保留相对较长，醋酸根具有比氢氧
根更强的淋洗能力，故提高醋酸根浓度洗脱出糖醛酸类
物质。最终确定梯度洗脱条件。本研究中比较了洋常春藤药材供试品溶液制备中
不同药材粒径（过1,20,40,66目筛）、不同料液比（1
：50,
1
:
10,1
：200,
m/V）和不同加热回流提取时间（1,2,
3,4
I的提取效果，最终确定最佳提取条件。试验结果显示，洋常春藤茎和叶中均含有4种游
离糖成分（阿拉伯糖、D-无水葡萄糖、D-果糖和蔗
糖）。茎和叶部位的4种游离糖中，蔗糖和D-无水
葡萄糖含量较高，其次为D-果糖，阿拉伯糖含量最
低；不同产地洋常春藤中，各游离糖成分的含量有明
显差异。综上所述，本方法可全面评价洋常春藤中发挥作用
的药效物质及对其中有效提取部位进行质量控制，分离
能力强，灵敏度高，可为后续用药部位和药用成分内控
指标的建立提供参考。参考文献[1:
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and
mild
proPucts
by
high
—
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anion
—
exchanae
chromatograppy
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pulseP
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by
high
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anion
—
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with
pulseP
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RUIC
—
MATUTE
A),
HERNANDEZ
—
HERNANDEZ
O,
RODRIGUEZ
—
SANCHEZ
S,
et ad
Derivatization
of
carboPyPrates
for
GC
and
GC
—
MS
analyses
[J：:
J
Chrematogr
B
Analyt Technot
BiomeP Life
SuR201,879(1 -
13
:
126 -
140.[19：
MICTERMAYR
S,
BONES
J, GUTTMAN
A.
UnravePna
the
gmco
—
puzzle:
GUcan
structure
identiOcation
by
capillary
electropporesis[J：:
AnUyUcal
Chemistry,
201,85(9)：
4223
—
4238.[6：徐桂云，陈汝贤，常理文.用毛细管气相色谱法测定多糖中
单糖的组成[：.分析测试学报,2000,19(3):71
-73.[19：
HROBO
OVA
K,
LEHOTAY
J,
ICmARIA
J,
et
al.
HPLC
demrmiiUUou
of
saccharides
af/p
pre
—
column
derivatization
in
honey
samples [
J ：
.
Cesha
Sloe
Farm
,
2013,60
(
3
,
：
132
—
13.(收稿日期：2020
-04-0(；修回日期：2020
-95
-26)