2024年6月14日发(作者：始澹)
文件编号:CQJY-JYK-SH-024
成都川蜀血管病医院检验科 生化室作业指导书
版本/修订号：1/0
生效日期：20150101
主题内容 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
第 1 页 共 3 页
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
（速率法）
1. 实验原理：
L-天门冬氨酸+a-酮戊二酸
草酰乙酸+ NADH +H
AST
草酰乙酸+L-谷氨酸
+ MDH苹果酸脱氢酶
L-苹果酸+NAD+H
2
O .
+
上述偶联反应中，还原性辅酶（NADH）的氧化速度与标本的ALT活性成正比。NADH在
340nm有特异吸收，因而科监测NADH吸光度的下降来计算ALT活性。
2. 标本：
2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：不溶血的血清或肝素抗凝血浆。
3. 标本存放：2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存至少可稳定1个月，临用前37℃快速解，
不能反复冻融。。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂 威特曼生物科技有限公司AST测定试剂盒
6.1.1 试剂组成
试剂1（R1）：
LDH（乳酸脱氢酶） ≥6500U/L
苹果酸脱氢酶： ≥3000U/L
试剂2（R2）：
a-酮戊二酸 15mmol/L
还原性辅酶I 0.18mmol/L
注：不同批号间的各组分不可以互换
6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂2～8℃避光保存，可稳定12个月。开盖后2～8℃避光保
存可稳定1个月。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，
表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂不得食用，勿接触皮肤与粘膜，如与皮肤及粘膜接触，请立即用大
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量水冲洗；使用试剂时应采取必要的防护；标本应正确抗凝并储存；试剂应在稳定期内使
用；试剂仅供体外诊断；各实验室应建立自己的正常参考范围。
6.2 校准品：使用朗道校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控
品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7. 仪器：东芝TBA40-FR生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见生化检验东芝TBA40-FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤：参见生化检验东芝TBA40-FR生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
样品中含量超出线性范围，则以0.1ml标本加0.5ml生理盐水稀释后再测定，结果乘
以6.
10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分
析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化
室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以校准品ALT校准值校准仪器后，质控在控且病人结果可报告范围内，仪
器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。计算ALT活力的计算因子见下表：
ΔA/min×因子 = AST活力[U/L]
底物起始的反应（37℃） 样品起始的反应（37℃）
12. 参考值范围 8～40U/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实
验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义
[1,2]
[4
天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它是氨基转移酶类的典型代
表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反应。
ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼
肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测用于鉴别肝损伤和心
肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率可用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤；比率>1
和严重肝病有关，常见慢性肝病。
14. 操作性能
14.1 线性范围： 3～500U/L r≥0.990
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14.2 试剂空白：> 1 OD值
14.3 重复性：批内CV≤5% 批间R≤7%
14.4 准确度：相对偏差应在+10%之内
15. 超出范围结果处理：当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作稀释，
重新测定，结果乘以稀释倍数.
16. 病危报警值的处理 见危急值处理流程。
17. 方法局限性
17.1当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作稀释，重新测定，结果乘
以稀释倍数
17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度小于1704mol/L，胆红素浓度小于684mol/L，
血红蛋白浓度小于5.00g/L，甘油三酯浓度小于22.6mmol/L时没有观察到干扰。
18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
19. 参考文献：
19.1试剂说明书
19.2《全国临床检验操作规程》（第3版）
20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》
执行。
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血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
（速率法）
1. 实验原理：
L-天门冬氨酸+a-酮戊二酸
草酰乙酸+ NADH +H
AST
草酰乙酸+L-谷氨酸
+ MDH苹果酸脱氢酶
L-苹果酸+NAD+H
2
O .
+
上述偶联反应中，还原性辅酶（NADH）的氧化速度与标本的ALT活性成正比。NADH在
340nm有特异吸收，因而科监测NADH吸光度的下降来计算ALT活性。
2. 标本：
2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：不溶血的血清或肝素抗凝血浆。
3. 标本存放：2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存至少可稳定1个月，临用前37℃快速解，
不能反复冻融。。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂 威特曼生物科技有限公司AST测定试剂盒
6.1.1 试剂组成
试剂1（R1）：
LDH（乳酸脱氢酶） ≥6500U/L
苹果酸脱氢酶： ≥3000U/L
试剂2（R2）：
a-酮戊二酸 15mmol/L
还原性辅酶I 0.18mmol/L
注：不同批号间的各组分不可以互换
6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂2～8℃避光保存，可稳定12个月。开盖后2～8℃避光保
存可稳定1个月。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，
表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂不得食用，勿接触皮肤与粘膜，如与皮肤及粘膜接触，请立即用大
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量水冲洗；使用试剂时应采取必要的防护；标本应正确抗凝并储存；试剂应在稳定期内使
用；试剂仅供体外诊断；各实验室应建立自己的正常参考范围。
6.2 校准品：使用朗道校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控
品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7. 仪器：东芝TBA40-FR生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见生化检验东芝TBA40-FR生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤：参见生化检验东芝TBA40-FR生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
样品中含量超出线性范围，则以0.1ml标本加0.5ml生理盐水稀释后再测定，结果乘
以6.
10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分
析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化
室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以校准品ALT校准值校准仪器后，质控在控且病人结果可报告范围内，仪
器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。计算ALT活力的计算因子见下表：
ΔA/min×因子 = AST活力[U/L]
底物起始的反应（37℃） 样品起始的反应（37℃）
12. 参考值范围 8～40U/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实
验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义
[1,2]
[4
天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它是氨基转移酶类的典型代
表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反应。
ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼
肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测用于鉴别肝损伤和心
肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率可用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤；比率>1
和严重肝病有关，常见慢性肝病。
14. 操作性能
14.1 线性范围： 3～500U/L r≥0.990
文件编号:CQJY-JYK-SH-024
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版本/修订号：1/0
生效日期：20150101
主题内容 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
第 3 页 共 3 页
14.2 试剂空白：> 1 OD值
14.3 重复性：批内CV≤5% 批间R≤7%
14.4 准确度：相对偏差应在+10%之内
15. 超出范围结果处理：当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作稀释，
重新测定，结果乘以稀释倍数.
16. 病危报警值的处理 见危急值处理流程。
17. 方法局限性
17.1当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作稀释，重新测定，结果乘
以稀释倍数
17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度小于1704mol/L，胆红素浓度小于684mol/L，
血红蛋白浓度小于5.00g/L，甘油三酯浓度小于22.6mmol/L时没有观察到干扰。
18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
19. 参考文献：
19.1试剂说明书
19.2《全国临床检验操作规程》（第3版）
20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》
执行。