2024年9月20日发(作者:柳香旋)
血清高密度脂蛋白HDL测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果
的准确。
2 实验原理
表面活性剂
HDL ————————→ HDL(可溶)
胆固醇酯化酶
HDL-胆固醇 ————————→ 胆固酮 + H2O2
胆固醇氧化酶
POD
H2O2 + DSBMT + 4-氨基安替比林 —————→ 红紫色色
素
3 标本:
3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.
3.2 类型:血清
3.3 标本存放 留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的
条件下(2~8℃)稳定3天,-20℃保存至少可以稳定3个
月。
3.4 标本运输 室温条件下运输
3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。
4 实验材料
4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司血清高密度脂蛋
白胆固醇(HDL)测定试剂盒(浙械注准2)
4.1.1 试剂组成
试剂1(R1):
哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0
50mmol/L
胆固醇脂酶(CE) 800U/L
胆固醇氧化酶(CO) 400U/L
过氧化氢酶 20KU/L
Triton X-100 2ml/L
试剂2(R2):
哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0
50mmol/L
过氧化物酶(POD) 1000U/L
4-氨基安替比林(4-APP) 1.0mmol/L
N,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺(DSBMT)
0.5mmol/L
4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~8℃,若无污染,
可稳定至失效期。试剂不可冰冻。试剂可避光保存可稳定12
个月;试剂开口稳定1个月。
4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,
或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使
用。
4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。
不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使
用试剂
4.2 校准品:建议使用宁波美康生物科技有限公司提供的脂
类标准品进行全点校准操作。
4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子
ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。
6 操作步骤
6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位
置。
6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积
等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗
氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝
TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏
P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝
TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为
未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘
制质控图,判断是否在控。
8 计算方法
以HDL复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围
内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。
9 参考值范围
成年男子 1.35±0.31 mmol/L 成年女子 1.42±0.32
mmol/L
>1.04mmol/L为合适水平,<0.91mmol/L为偏低。
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值0.9-1.6 g/L
10 临床意义
胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收,是细胞膜的
组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪
和载脂蛋白的复合物,由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式:
高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL),极低密度脂蛋
白(VLDL)和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,
而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状
动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇
(LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与冠心
病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆
固醇在正常范围内,LDL-C浓度的升高也预示了高度危险。
HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它与冠心病的发生呈负相
关。事实上,低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆
固醇的检测只是起过筛作用,如果要对危险作较好的评估,
必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。
近年来,通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或
使用各种药物治疗(特别他汀类药物[HMG CoA还原酶抑制剂])
临床试验,说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少
CHD的危险。
2024年9月20日发(作者:柳香旋)
血清高密度脂蛋白HDL测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果
的准确。
2 实验原理
表面活性剂
HDL ————————→ HDL(可溶)
胆固醇酯化酶
HDL-胆固醇 ————————→ 胆固酮 + H2O2
胆固醇氧化酶
POD
H2O2 + DSBMT + 4-氨基安替比林 —————→ 红紫色色
素
3 标本:
3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.
3.2 类型:血清
3.3 标本存放 留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的
条件下(2~8℃)稳定3天,-20℃保存至少可以稳定3个
月。
3.4 标本运输 室温条件下运输
3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。
4 实验材料
4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司血清高密度脂蛋
白胆固醇(HDL)测定试剂盒(浙械注准2)
4.1.1 试剂组成
试剂1(R1):
哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0
50mmol/L
胆固醇脂酶(CE) 800U/L
胆固醇氧化酶(CO) 400U/L
过氧化氢酶 20KU/L
Triton X-100 2ml/L
试剂2(R2):
哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0
50mmol/L
过氧化物酶(POD) 1000U/L
4-氨基安替比林(4-APP) 1.0mmol/L
N,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺(DSBMT)
0.5mmol/L
4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~8℃,若无污染,
可稳定至失效期。试剂不可冰冻。试剂可避光保存可稳定12
个月;试剂开口稳定1个月。
4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,
或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使
用。
4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。
不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使
用试剂
4.2 校准品:建议使用宁波美康生物科技有限公司提供的脂
类标准品进行全点校准操作。
4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子
ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。
6 操作步骤
6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位
置。
6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积
等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗
氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝
TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏
P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝
TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为
未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘
制质控图,判断是否在控。
8 计算方法
以HDL复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围
内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。
9 参考值范围
成年男子 1.35±0.31 mmol/L 成年女子 1.42±0.32
mmol/L
>1.04mmol/L为合适水平,<0.91mmol/L为偏低。
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值0.9-1.6 g/L
10 临床意义
胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收,是细胞膜的
组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪
和载脂蛋白的复合物,由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式:
高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL),极低密度脂蛋
白(VLDL)和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,
而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状
动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇
(LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与冠心
病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆
固醇在正常范围内,LDL-C浓度的升高也预示了高度危险。
HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它与冠心病的发生呈负相
关。事实上,低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆
固醇的检测只是起过筛作用,如果要对危险作较好的评估,
必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。
近年来,通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或
使用各种药物治疗(特别他汀类药物[HMG CoA还原酶抑制剂])
临床试验,说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少
CHD的危险。