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血清高密度脂蛋白HDL测定

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2024年9月20日发(作者:柳香旋)

血清高密度脂蛋白HDL测定

1 检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果

的准确。

2 实验原理

表面活性剂

HDL ————————→ HDL(可溶)

胆固醇酯化酶

HDL-胆固醇 ————————→ 胆固酮 + H2O2

胆固醇氧化酶

POD

H2O2 + DSBMT + 4-氨基安替比林 —————→ 红紫色色

3 标本:

3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.

3.2 类型:血清

3.3 标本存放 留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的

条件下(2~8℃)稳定3天,-20℃保存至少可以稳定3个

月。

3.4 标本运输 室温条件下运输

3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。

4 实验材料

4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司血清高密度脂蛋

白胆固醇(HDL)测定试剂盒(浙械注准2)

4.1.1 试剂组成

试剂1(R1):

哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0

50mmol/L

胆固醇脂酶(CE) 800U/L

胆固醇氧化酶(CO) 400U/L

过氧化氢酶 20KU/L

Triton X-100 2ml/L

试剂2(R2):

哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0

50mmol/L

过氧化物酶(POD) 1000U/L

4-氨基安替比林(4-APP) 1.0mmol/L

N,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺(DSBMT)

0.5mmol/L

4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~8℃,若无污染,

可稳定至失效期。试剂不可冰冻。试剂可避光保存可稳定12

个月;试剂开口稳定1个月。

4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,

或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使

用。

4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。

不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使

用试剂

4.2 校准品:建议使用宁波美康生物科技有限公司提供的脂

类标准品进行全点校准操作。

4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器

AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子

ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。

6 操作步骤

6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位

置。

6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积

等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗

氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝

TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏

P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝

TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为

未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘

制质控图,判断是否在控。

8 计算方法

以HDL复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围

内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。

9 参考值范围

成年男子 1.35±0.31 mmol/L 成年女子 1.42±0.32

mmol/L

>1.04mmol/L为合适水平,<0.91mmol/L为偏低。

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值0.9-1.6 g/L

10 临床意义

胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收,是细胞膜的

组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪

和载脂蛋白的复合物,由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式:

高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL),极低密度脂蛋

白(VLDL)和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,

而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状

动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇

(LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与冠心

病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆

固醇在正常范围内,LDL-C浓度的升高也预示了高度危险。

HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它与冠心病的发生呈负相

关。事实上,低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆

固醇的检测只是起过筛作用,如果要对危险作较好的评估,

必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。

近年来,通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或

使用各种药物治疗(特别他汀类药物[HMG CoA还原酶抑制剂])

临床试验,说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少

CHD的危险。

2024年9月20日发(作者:柳香旋)

血清高密度脂蛋白HDL测定

1 检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果

的准确。

2 实验原理

表面活性剂

HDL ————————→ HDL(可溶)

胆固醇酯化酶

HDL-胆固醇 ————————→ 胆固酮 + H2O2

胆固醇氧化酶

POD

H2O2 + DSBMT + 4-氨基安替比林 —————→ 红紫色色

3 标本:

3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.

3.2 类型:血清

3.3 标本存放 留取标本后请尽快分离血清。在冰箱保存的

条件下(2~8℃)稳定3天,-20℃保存至少可以稳定3个

月。

3.4 标本运输 室温条件下运输

3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。

4 实验材料

4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司血清高密度脂蛋

白胆固醇(HDL)测定试剂盒(浙械注准2)

4.1.1 试剂组成

试剂1(R1):

哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0

50mmol/L

胆固醇脂酶(CE) 800U/L

胆固醇氧化酶(CO) 400U/L

过氧化氢酶 20KU/L

Triton X-100 2ml/L

试剂2(R2):

哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸) 缓冲液 pH 7.0

50mmol/L

过氧化物酶(POD) 1000U/L

4-氨基安替比林(4-APP) 1.0mmol/L

N,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺(DSBMT)

0.5mmol/L

4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~8℃,若无污染,

可稳定至失效期。试剂不可冰冻。试剂可避光保存可稳定12

个月;试剂开口稳定1个月。

4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,

或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使

用。

4.1.5 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。

不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使

用试剂

4.2 校准品:建议使用宁波美康生物科技有限公司提供的脂

类标准品进行全点校准操作。

4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器

AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子

ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。

6 操作步骤

6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位

置。

6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积

等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗

氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝

TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏

P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝

TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为

未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘

制质控图,判断是否在控。

8 计算方法

以HDL复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围

内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。

9 参考值范围

成年男子 1.35±0.31 mmol/L 成年女子 1.42±0.32

mmol/L

>1.04mmol/L为合适水平,<0.91mmol/L为偏低。

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值0.9-1.6 g/L

10 临床意义

胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收,是细胞膜的

组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪

和载脂蛋白的复合物,由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式:

高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL),极低密度脂蛋

白(VLDL)和乳糜微粒。LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,

而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状

动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇

(LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与冠心

病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆

固醇在正常范围内,LDL-C浓度的升高也预示了高度危险。

HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它与冠心病的发生呈负相

关。事实上,低HDL-C值是独立的危险因子。进行个体总胆

固醇的检测只是起过筛作用,如果要对危险作较好的评估,

必须另外进行HDL-C和LDL-C检测。

近年来,通过控制饮食、改变生活方式的治疗、和/或

使用各种药物治疗(特别他汀类药物[HMG CoA还原酶抑制剂])

临床试验,说明了降低总胆固醇和LDL-C水平可极大地减少

CHD的危险。

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