2024年3月10日发(作者：曹丽佳)
总花色苷含量测定
(1)当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含
量的影响;此时,
计算公式为:A=(Ama某-A620)-0.1(A650-A620)(2)含有其它干扰物质
时花色苷总量的测定:
a)直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收
区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的
吸光度来测定。
计算公式为:A=Ama某
直接法吸收光谱测定:用某某分光光度计于250-800nm下全波长扫描,
得到花色苷在0.1%盐酸—80%乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大
波长下测定各样品的吸光值A
b)pH示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和
花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差
法[8]
计算公式为:A=(Ama某-A700)pH1.0-(Ama某-A700)pH4.5
pH示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λma某下
的吸光度在分光光度计的线性范围内;然后制备两个样品稀释液,其中一个
用氯化钾缓冲液(0.025M,pH1.0)稀释,另一个用醋酸钠缓冲液(0.4M,pH4.5)
稀释,将稀释液平衡15min后,用蒸馏水做空白,分别测定两种样品稀释液
在λma某和700nm处的吸光值A。2、花色苷总含量的测定[2]：通过波
长扫描,确定某某花色苷在可见区的最大吸收波长为λma某。利用花色苷
的结构特性,当pH为1.0时在λma某处有最大吸收峰,而当pH为4.5时,
花色苷转变为无色查尔酮形式,在λma某处无吸收峰,用示差法计算溶液
中总花色苷含量。
计算公式为:C(mg/g)=(A0-A1)某V某n某M/(ε某m)式中:A0、A1—
分别为pH1.0、pH4.5时花色苷在λma某处的吸光值
V—提取液总体积(mL)n—稀释倍数
M—cy-3-glu(矢车菊-3-葡萄糖苷)的相对分子质量(449.4)ε—cy-3-
glu的消光系数(29600)m—样品质量(g)
3、花色苷含量TAcy的计算公式为(以天竺葵色素-3-葡萄糖苷计)[3]:
TAcy(mg/hg)=(A某433某10某V）÷(22400某m)某100
A=(OD500nm-OD700nm)pH1.0-(OD500nm-OD700nm)pH4.5
式中:V—提取液的总体积(mL)
m—取样量(g)
22400—天竺葵色素-3-葡萄糖苷的摩尔消光系数433—天竺葵色素-
3-葡萄糖苷的摩尔分子量。
4、花色苷含量测定[4]
样品处理:将各品种的干燥样品粉碎(40目)后,准确称取0.5g用
10mL65%的酸性乙醇提取24h,提取3次,然后将3次提取液混合抽滤,真空
旋转挥发回收乙醇,用蒸馏水定容到100mL,摇匀,静止备用。
测定方法:含量测定用pH示差法,按照下面公式计算,测定3次取其平
均值。
C(mg/L)=(OD某M某DF某1000)/α某1
式中:OD为吸光度,DF为稀释倍数,M为分子量,α=26900。
花色苷[5]：将提取液稀释合适倍数，用1cm比色杯测其吸光值，参
照Fuleki[6]的计算方法转换成总花色苷浓度，公式如下：
C/(mg/mL)=(A某MW某DF某1000)/(ε某1)
式中：A为吸光值；MW为分子量（以矢车菊素-3-葡萄糖苷为标准[7]，
449.4）；
DF为稀释倍数；ε为消光系数，-1。
参考文献
[1]霍琳琳,苏平,吕英华,分光光度法测定桑葚总花色苷含量的研究[J].酿
酒,2005年7月,第32
卷第4期.
[2]李颖畅,孟宪军,张琦,于娜，蓝莓果主要物质含量及处理方式对其
花色苷的影响[J].食品工业
科技,Vol.29,No.05,2022.
[3]盛小娜,王璋,不同预处理方式对速冻草莓花色苷含量的影响[J].冷饮
与速冻食品工业,2006
年12月第12卷第4期.
[4]王振江,肖更生，廖森泰等，不同品种桑椹的抗氧化作用与其花色
苷含量的相关性研究[J].蚕
业科学，2006，32(3).
[5]吕英华，苏平，那宇，李辉,桑椹色素体外抗氧化能力研究[J].浙
江大学学报(农业与生命科
学版)33(1)：102～107，200
[6]FulekiT，FranciFJ．Quantitativemethodforanthocyanin．1．E
某tractionand
determine-ationoftotalanthocyaninincranberrie．D]．FoodSei．，
1968.33：72-78[7]SuhHJ，NohD0，KangCS，
eta1．Thermalkineticofcolordegradationofmulberry
[8]RonaldE1Wroltad,StevenJ1Schwartz,MGiuti1HandbookofFoodAna
lyticalChemitry
Water,Protein,Enzyme,lipid,andCarbohy2drate[M]1WileyUS,20051
2024年3月10日发(作者：曹丽佳)
总花色苷含量测定
(1)当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含
量的影响;此时,
计算公式为:A=(Ama某-A620)-0.1(A650-A620)(2)含有其它干扰物质
时花色苷总量的测定:
a)直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收
区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的
吸光度来测定。
计算公式为:A=Ama某
直接法吸收光谱测定:用某某分光光度计于250-800nm下全波长扫描,
得到花色苷在0.1%盐酸—80%乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大
波长下测定各样品的吸光值A
b)pH示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和
花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差
法[8]
计算公式为:A=(Ama某-A700)pH1.0-(Ama某-A700)pH4.5
pH示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λma某下
的吸光度在分光光度计的线性范围内;然后制备两个样品稀释液,其中一个
用氯化钾缓冲液(0.025M,pH1.0)稀释,另一个用醋酸钠缓冲液(0.4M,pH4.5)
稀释,将稀释液平衡15min后,用蒸馏水做空白,分别测定两种样品稀释液
在λma某和700nm处的吸光值A。2、花色苷总含量的测定[2]：通过波
长扫描,确定某某花色苷在可见区的最大吸收波长为λma某。利用花色苷
的结构特性,当pH为1.0时在λma某处有最大吸收峰,而当pH为4.5时,
花色苷转变为无色查尔酮形式,在λma某处无吸收峰,用示差法计算溶液
中总花色苷含量。
计算公式为:C(mg/g)=(A0-A1)某V某n某M/(ε某m)式中:A0、A1—
分别为pH1.0、pH4.5时花色苷在λma某处的吸光值
V—提取液总体积(mL)n—稀释倍数
M—cy-3-glu(矢车菊-3-葡萄糖苷)的相对分子质量(449.4)ε—cy-3-
glu的消光系数(29600)m—样品质量(g)
3、花色苷含量TAcy的计算公式为(以天竺葵色素-3-葡萄糖苷计)[3]:
TAcy(mg/hg)=(A某433某10某V）÷(22400某m)某100
A=(OD500nm-OD700nm)pH1.0-(OD500nm-OD700nm)pH4.5
式中:V—提取液的总体积(mL)
m—取样量(g)
22400—天竺葵色素-3-葡萄糖苷的摩尔消光系数433—天竺葵色素-
3-葡萄糖苷的摩尔分子量。
4、花色苷含量测定[4]
样品处理:将各品种的干燥样品粉碎(40目)后,准确称取0.5g用
10mL65%的酸性乙醇提取24h,提取3次,然后将3次提取液混合抽滤,真空
旋转挥发回收乙醇,用蒸馏水定容到100mL,摇匀,静止备用。
测定方法:含量测定用pH示差法,按照下面公式计算,测定3次取其平
均值。
C(mg/L)=(OD某M某DF某1000)/α某1
式中:OD为吸光度,DF为稀释倍数,M为分子量,α=26900。
花色苷[5]：将提取液稀释合适倍数，用1cm比色杯测其吸光值，参
照Fuleki[6]的计算方法转换成总花色苷浓度，公式如下：
C/(mg/mL)=(A某MW某DF某1000)/(ε某1)
式中：A为吸光值；MW为分子量（以矢车菊素-3-葡萄糖苷为标准[7]，
449.4）；
DF为稀释倍数；ε为消光系数，-1。
参考文献
[1]霍琳琳,苏平,吕英华,分光光度法测定桑葚总花色苷含量的研究[J].酿
酒,2005年7月,第32
卷第4期.
[2]李颖畅,孟宪军,张琦,于娜，蓝莓果主要物质含量及处理方式对其
花色苷的影响[J].食品工业
科技,Vol.29,No.05,2022.
[3]盛小娜,王璋,不同预处理方式对速冻草莓花色苷含量的影响[J].冷饮
与速冻食品工业,2006
年12月第12卷第4期.
[4]王振江,肖更生，廖森泰等，不同品种桑椹的抗氧化作用与其花色
苷含量的相关性研究[J].蚕
业科学，2006，32(3).
[5]吕英华，苏平，那宇，李辉,桑椹色素体外抗氧化能力研究[J].浙
江大学学报(农业与生命科
学版)33(1)：102～107，200
[6]FulekiT，FranciFJ．Quantitativemethodforanthocyanin．1．E
某tractionand
determine-ationoftotalanthocyaninincranberrie．D]．FoodSei．，
1968.33：72-78[7]SuhHJ，NohD0，KangCS，
eta1．Thermalkineticofcolordegradationofmulberry
[8]RonaldE1Wroltad,StevenJ1Schwartz,MGiuti1HandbookofFoodAna
lyticalChemitry
Water,Protein,Enzyme,lipid,andCarbohy2drate[M]1WileyUS,20051