2024年3月13日发(作者:步丰熙)
人淋巴细胞分离液
说明书修订日期:2018.12.10
Cat number:KGA830
Store at 2-8℃ for 12 months
For Research Use Only
一、 试剂盒说明
人淋巴细胞分离液将人血液中的淋巴细胞分离出来,是由于各种机体的血细胞比重不同制备出不同比重
的分离液,它是一种体外应用的生化试剂,本品为带有乳光或微乳光的注射水溶液,主要组成成份是羟乙基
淀粉(6%)与泛影酸钠9%,适用于从血液或组织匀浆中中分离所需细胞。
单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和白细胞等
细胞密度较大,为1.090 g/ml 左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090 g/ml,血小板为1.030~1.035
g/ml。经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。
二、 试剂盒组份
组份
人淋巴细胞分离液
三、 试剂盒以外自备仪器和试剂
注射用生理盐水、离心机
四、 使用注意事项
1.
2.
3.
五、操作方法
本分离液要求血液为新鲜的抗凝血,血液收集时应无菌操作且在储存、处理和运输过程中避免冷冻和冷藏。
1. 取新鲜抗凝血1ml,与注射用生理盐水1:1混匀后,小心加于2ml的细胞分离液之液面上,以400-800
×g离心(半径15cm水平转子)20-30分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层(第一层为血浆层(含
血小板),第二层为环状乳白色淋巴细胞或单核细胞,第三层为透明分离液层,第四层为红细胞层(含
大量中性粒细胞),红细胞层表面有悬起的部分白细胞层,收集此界面上的细胞)
2. 用吸管小心收集第二层淋巴细胞,放入含4-5毫升注射用生理盐水的试管中,充分混匀后,以500×g
离心20分钟,弃上清,沉淀经反复洗2次即得所需细胞。
启封后应置4℃保存,有效期6个月。
细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液温度升至室温时,混匀后使用。
整个分离过程中,温度应控制在18-28℃,否则会影响分离质量。
Cat: KGA830
200ml
保存条件
2-8℃,12months
六、可能存在的问题及解决方法
1. 由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案:
出现的问题 可能原因 建议解决方案
离心后目的细胞存在于血浆层或稀释液层
转速过小或离心时间
过短
适当增减转速
转速过大或离心时间
过长
细胞密度过大
调整细胞密度
细胞密度过小
离心后目的细胞存在于分离液中
离心后白环层弥散
离心后白环层太浅或看不见
2.
本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心,其密度与温度、大气压等密切相关。不同地
区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时,恒定离
心时间,对离心转速进行调整。
本分离液依照国际标准,全部使用药用级原料,性能指标与国产同类产品略有不同,可
能出现红细胞沉降不完全的情况,可以适当加大离心转速。
注:在对离心条件进行调整时,离心转速的加减以 50-100g 为基数,直至达到最佳分离
效果, 离心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。
3.
2024年3月13日发(作者:步丰熙)
人淋巴细胞分离液
说明书修订日期:2018.12.10
Cat number:KGA830
Store at 2-8℃ for 12 months
For Research Use Only
一、 试剂盒说明
人淋巴细胞分离液将人血液中的淋巴细胞分离出来,是由于各种机体的血细胞比重不同制备出不同比重
的分离液,它是一种体外应用的生化试剂,本品为带有乳光或微乳光的注射水溶液,主要组成成份是羟乙基
淀粉(6%)与泛影酸钠9%,适用于从血液或组织匀浆中中分离所需细胞。
单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和白细胞等
细胞密度较大,为1.090 g/ml 左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090 g/ml,血小板为1.030~1.035
g/ml。经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。
二、 试剂盒组份
组份
人淋巴细胞分离液
三、 试剂盒以外自备仪器和试剂
注射用生理盐水、离心机
四、 使用注意事项
1.
2.
3.
五、操作方法
本分离液要求血液为新鲜的抗凝血,血液收集时应无菌操作且在储存、处理和运输过程中避免冷冻和冷藏。
1. 取新鲜抗凝血1ml,与注射用生理盐水1:1混匀后,小心加于2ml的细胞分离液之液面上,以400-800
×g离心(半径15cm水平转子)20-30分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层(第一层为血浆层(含
血小板),第二层为环状乳白色淋巴细胞或单核细胞,第三层为透明分离液层,第四层为红细胞层(含
大量中性粒细胞),红细胞层表面有悬起的部分白细胞层,收集此界面上的细胞)
2. 用吸管小心收集第二层淋巴细胞,放入含4-5毫升注射用生理盐水的试管中,充分混匀后,以500×g
离心20分钟,弃上清,沉淀经反复洗2次即得所需细胞。
启封后应置4℃保存,有效期6个月。
细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液温度升至室温时,混匀后使用。
整个分离过程中,温度应控制在18-28℃,否则会影响分离质量。
Cat: KGA830
200ml
保存条件
2-8℃,12months
六、可能存在的问题及解决方法
1. 由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案:
出现的问题 可能原因 建议解决方案
离心后目的细胞存在于血浆层或稀释液层
转速过小或离心时间
过短
适当增减转速
转速过大或离心时间
过长
细胞密度过大
调整细胞密度
细胞密度过小
离心后目的细胞存在于分离液中
离心后白环层弥散
离心后白环层太浅或看不见
2.
本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心,其密度与温度、大气压等密切相关。不同地
区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时,恒定离
心时间,对离心转速进行调整。
本分离液依照国际标准,全部使用药用级原料,性能指标与国产同类产品略有不同,可
能出现红细胞沉降不完全的情况,可以适当加大离心转速。
注:在对离心条件进行调整时,离心转速的加减以 50-100g 为基数,直至达到最佳分离
效果, 离心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。
3.